酶解法提取食用菌多糖
香菇多糖的提取方法及应用
香菇多糖的提取方法及应用香菇多糖是从香菇中提取的一种多糖类化合物，具有抗肿瘤、抗病毒、降血脂、降血糖等多种药理活性。
提取香菇多糖的方法主要包括水提法、酸提法、碱提法、酶解法等多种方法。
下面将对香菇多糖的提取方法及应用做详细介绍。
1. 水提法水提法是将香菇切碎后用水浸泡，通过水提取的方法获得香菇多糖的一种提取方法。
其优点是提取过程简单，设备要求低，且操作方便。
但缺点是提取率较低，且容易受到微生物污染。
2. 酸提法酸提法是将香菇切碎后用酸性溶液浸泡，通过酸的作用来提取多糖。
酸提取的优点是提取率高，但也会产生废液排放问题，同时酸性溶液容易对蛋白质产生影响。
3. 碱提法碱提法是将香菇切碎后用碱性溶液浸泡，通过碱的作用来提取多糖。
碱提取的优点是提取率高，同时对蛋白质影响较小。
但碱性溶液的使用需要注意对环境的影响，且碱性条件下易使多糖发生降解。
4. 酶解法酶解法是通过加入酶类来促进多糖的提取，能够有效地增加提取率。
但酶类的成本较高，同时酶解条件的控制较为严格。
提取得到的香菇多糖可以通过浓缩、絮凝、沉淀及净化等方法得到纯净的多糖产品。
香菇多糖的应用广泛，主要包括以下几个方面：1. 药品领域香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒的作用，被广泛应用于肿瘤治疗、免疫调节、抗病毒等方面。
临床研究表明，长期服用香菇多糖可以增强人体免疫力，减少感染病毒的风险。
2. 食品工业香菇多糖可作为功能性食品添加剂，提高食品的营养价值，增加食品的功能性。
例如可以将香菇多糖添加到饼干、饮料、果冻等食品中，以增强食品的健康功能。
3. 化妆品领域香菇多糖具有较好的保湿性，被应用于化妆品中具有很好的效果，如护肤乳液、面膜等产品中。
4. 其他领域香菇多糖还可以用于环保领域，例如用于废水处理，其能够起到絮凝剂的作用，帮助去除水中的杂质，达到净化水质的效果。
总而言之，香菇多糖的提取方法多样化，可以根据需要选择适合的提取方法，提取得到的多糖产品应用广泛，涉及药品、食品、化妆品等多个领域，具有很好的开发和利用前景。
真菌多糖的提取工艺
真菌多糖的提取工艺目前真菌多糖提取的方法通常采用热水浸提和酶法浸提。
其中热水浸提工艺简单,抽提的主要是胞外多糖,得率较低。
而酶法浸提常采用纤维素酶、果胶酶和蛋白酶以除去胞壁和膜上的果胶、纤维素及蛋白质等成分,有利于胞壁内多糖的溶出,且多糖提出率高。
研究发现各种食用菌多糖的提取过程基本相同：将材料粉碎,热水抽提3次,温度90～100℃不等；离心收集上清液,减压浓缩至适当体积,加3～5倍乙醇, 收集沉淀物,干燥得粗多糖。
下面以几种常见的山东野生食用菌多糖的提取为例作一下详细的介绍。
金顶侧耳多糖的提取：王晓洁等在金顶侧耳多糖体外抗肿瘤作用的研究中用水提法提取多糖：将烘干的菌丝体用植物粉碎机粉碎，过200目筛，按料水比1：20加入蒸馏水。
100℃恒温水浴提取2h，重复3次，过滤、合并提取液，浓缩至原体积的1/4。
全液用组织捣碎机将菌丝体打碎，同上方法提取，最终将提取液浓缩至原体积的1/4。
过滤液提取后也浓缩至原提及的1/4。
然后按乙醇和浓缩液4：1的比例加入乙醇，置于阴凉处沉淀24h。
将下部沉淀离心，用乙醇和丙酮各洗一次，挥干溶剂，冷冻干燥后得多糖固体粉末，全液、过滤液和菌丝体多糖的得率分别为0.16%、0.13%和8.96%。
姬松茸多糖的提取：辛晓林等在姬松茸发酵全液多糖提取及其抗肿瘤活性的研究中用组织捣碎机将发酵全液中的菌丝体破碎, 沸水煮2h 后进行过滤, 滤液加热浓缩至原体积1/4 ,加入4 倍体积乙醇, 醇沉24h，去上清液, 离心(4000r/min)0、5h , 冷冻干燥得姬松茸粗多糖，得率为1.78g/ 100mL。
而在姬松茸菌丝体多糖提取工艺最优化研究[11]中得到的最优化提取工艺为，在菌丝密度为100～250mg/mL(鲜重)的范围内,超声波的破壁时间12min、提取时间为4h、提取温度为70℃,此工艺多糖提取率可达到2.609%(鲜重)。
杏鲍菇多糖的提取：迟桂荣等在杏鲍菇多糖的纯化取杏鲍菇菌丝体烘干至恒重,粉碎机粉碎,氯仿和甲醇(2∶1)提取,95%乙醇沉淀,活性炭脱色,Sevage法[19]脱蛋白,冷冻干燥即为粗多糖A。
食用菌多糖提取工艺流程
食用菌多糖提取工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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酶法提取真姬菇多糖的工艺研究
酶法提取真姬菇多糖的工艺研究
提取真姬菇多糖的工艺可以采用酶法，具体步骤如下：
1.真姬菇研磨。
将真姬菇干燥后研磨成粉末状；
2.制备酶液。
以淀粉酶和葡萄糖酸酶为主要酶种，配制酶液。
酶液浓度可以按照实际情况进行调节，一般为1%~5%；
3.水浸提。
将真姬菇粉末放入水中浸泡，可以在室温下或低温下进行。
浸泡时间一般为2～4小时，可促使多糖从真姬菇中溶解到水中；
4.酶解。
将浸泡好的真姬菇粉末和酶液混合，根据实际情况，酶解温度可以控制在40℃~60℃之间，酶解时间一般为3~6小时。
酶解过程中，可以适当地调节pH值，使酶解条件最优化；
5.过滤。
将酶解后的混合物过滤，去除残余的真姬菇粉末，留下混合物；
6.浓缩。
将过滤后的混合物进行浓缩，可以采用真空浓缩或喷雾干燥等方法；
7.纯化。
对于需要高纯度真姬菇多糖的情况下，可以进行进一步纯化，例如离子交换色谱、凝胶过滤等方法。
最后，将制备好的真姬菇多糖进行干燥即可。
整个提取过程需要注意卫生和安全，以保证多糖的纯度和品质。
食用菌多糖提取技术简介
食用菌多糖提取技术简介食用菌多糖提取技术简介[ 修改时间：2011-8-20 下午 09:17:51 浏览次数：552]食用菌多糖提取技术简介2010年4月20日来源：中国食用菌商务网【按】食用菌多糖的生物活性、食药用价值及无毒副作用的特性已被认可，其研制成的药品及保健品已成为当前突破食用菌精深加工瓶颈的重大措施。
也是转变食用菌经济发展方式的重要门路，我县是中国食用菌之都。
品种多、产量高，采取提取食用菌多糖，再加工成终端产品有巨大的发展空间，今收集了六种提取多糖办法。
供大家参考：1、水提醇沉法提取食用菌多糖多糖溶于水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂。
用热水进行提取。
主要是借助于热力作用使食用菌细胞发生质壁分离，水作为溶剂渗人细胞壁和细胞质中。
溶解液泡中的物质。
使其穿过细胞壁，扩散到外部溶剂中。
刘祖同、罗信昌归纳了食用菌子实体多糖的提取工艺步骤：即食用菌子实体粉碎一脱脂肪一多糖的浸提一过滤（离心分离）一合并滤液一多糖沉淀一去蛋白质、脱色一多糖组分的分离纯化一多糖组成和结构的分析，其中，热水浸提的温度一般为90℃~100~C。
浸提时间为lh~3h，浸提次数为2次~3次。
说明此方法有较好的准确度。
水提醇沉法的优点为试验设备简单。
操作容易。
准确度高，成本低廉。
一次性投入较小。
适用于大规模的工业生产。
但提取效率低且费时，劳动强度大。
产品纯化困难且括性损失较大，随着工业技术的发展。
一些现代高新技术被应用于食用菌多糖的提取。
2，酸碱浸提法提取食用菌多糖原理是通过酸碱液的充分作用。
使食用菌细胞、细胞壁充分吸水胀膨而破裂，从而使食用菌多糖充分游离出来，提高得率。
田光辉等以灵芝为材料考察了酸碱盐介，酸碱介质能够明显提高多糖的提取率。
但以酸作为介质时对糖苷键具有一定的破坏作用，降低多糖的得率。
还会对容器造成腐蚀，除弱酸外一般不宜采用。
采用稀碱液浸提后既能节省时间，又能减少原材料及试剂的消耗。
且提取的多糖含量高。
但碱提后的溶液浓度增大。
食用菌多糖提取的原理和方法
食用菌多糖的来源与分布
来源
食用菌多糖主要来源于各种食用菌，如香菇、金针菇、黑木耳等，这些食用菌 在自然界中广泛分布，且具有丰富的多糖含量。
分布
食用菌多糖不仅分布于各种食用菌中，还可通过发酵工程等方法在微生物中获 得。
02
食用菌多糖提取的原理
物理原理
物理原理主要包括机械破碎、 超声波破碎、微波辅助等。这 些方法通过物理手段破坏食用 菌细胞壁，使细胞内的多糖成
特性
食用菌多糖具有较高的分子量、 复杂的分子链结构、良好的水溶 性和生物活性，通常具有抗氧化 、抗炎、抗肿瘤等作用。
食用菌多糖的生物活性与医疗价值
生物活性
食用菌多糖能够调节免疫系统、抗肿 瘤、降血糖、降血脂等多种生物活性 ，对预防和辅助治疗多种疾病具有潜 在的应用价值。
医疗价值
在医疗领域，食用菌多糖可用于开发 新型药物、功能性食品和保健品，为 人类健康提供更多选择。
分释放出来。
机械破碎是通过机械力量将食 用菌组织破碎，常用的设备有
破碎机、磨碎机等。
超声波破碎是利用超声波的振 动效应破碎细胞，具有高效、 低能耗的优点。
微波辅助是利用微波的加热效 应使细胞内的水分迅速升温产 生压力，从而使细胞壁破裂。
化学原理
化学原理主要是通过酸、碱、盐等化 学试剂的作用，使食用菌细胞壁溶解 或改变其结构，从而释放出多糖成分。
沉淀分离
利用多糖在水中的溶解度差异 ，通过加入沉淀剂使多糖沉淀 析出。
凝胶色谱分离
利用凝胶色谱技术根据多糖分 子量大小进行分离纯化。
干燥与保存
干燥方法
采用真空干燥、冷冻干燥等方法去除多糖中的水分，便于保存和运输。
保存条件
干燥后的多糖应存放在阴凉、干燥、避光的地方，避免受潮和污染。同时要关注 温度和湿度对多糖稳定性的影响。
一种黑木耳多糖的酶法提取方法
一种黑木耳多糖的酶法提取方法黑木耳是一种以其丰富的多糖成分而闻名的食用菌。
多糖具有多种保健和药理活性，因此，黑木耳多糖的提取方法备受关注。
下面将介绍一种常用的黑木耳多糖酶法提取方法。
提取原料准备：1.黑木耳：购买新鲜的黑木耳，清洗干净，并切碎成小块备用。
酶解步骤：1.预处理黑木耳：将切碎的黑木耳加入适量的温水中浸泡，经过洗涤、漂洗，去除杂质和其他非多糖成分。
2.增加酶解效果：为了增加酶解效果，可以在预处理的黑木耳中加入酶解助剂，如纤维素酶、淀粉酶等。
根据黑木耳的特性以及具体实验要求，选择合适的酶解助剂添加适量到黑木耳中。
3.酶解反应的控制参数：酶解反应中的温度、时间和酶解液的pH值是影响酶解效果的重要因素。
一般来说，合适的温度范围是40-60°C，酶解时间为1-4小时，pH值控制在酶解酶的最适工作pH范围内。
4.酶解反应过程的控制：可以将黑木耳和酶解液一起放入温度恒定的容器中，或使用搅拌罐对反应进行搅拌以提高反应效果。
5.终止酶解反应：一旦达到预设的酶解时间后，酶解反应应立即终止。
终止酶解反应的方法可以是将反应液加热至高温，或者加入酸等将反应液的酶活性彻底破坏。
过滤和浓缩：1.过滤：将酶解反应液进行滤除，去除固体残渣和其他杂质。
常见的过滤方法有纸浆过滤、滤膜过滤等。
2.浓缩：选择合适的浓缩方法，如真空浓缩、喷雾干燥等，将酶解液中的水分蒸发掉，使其成为相对浓缩的液体。
提取和纯化：1.醇沉淀：将浓缩液中加入适量的有机溶剂（如乙醇或异丙醇），使黑木耳多糖沉淀。
通过离心将沉淀与上清分离。
2.溶解和稀释：将沉淀溶解在适量的溶剂中（如水），可以使用热溶法、超声波法等。
稀释黑木耳多糖溶液以达到合适的浓度和纯度要求。
3.脱蛋白：使用酶解助剂（如蛋白酶）或特定的沉淀方法（如超滤法）去除多糖中的蛋白质成分。
4.酸性沉淀：通过调节pH值和温度使多糖在酸性条件下沉淀，从而进一步提高多糖纯度。
5.色谱分离：使用合适的色谱技术（如凝胶过滤、阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱等）纯化黑木耳多糖。
白灵菇多糖酶解产物的分离与分析研究
白灵菇多糖酶解产物的分离与分析研究植物多糖是一类具有多种生物活性和药理学价值的天然产物，其广泛存在于各类植物中，并且被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
其中，白灵菇(Tricholoma matsutake)是一种具有高营养和药用价值的食用菌，被认为是一种重要的植物多糖资源。
白灵菇多糖的酶解产物是研究其结构和功能的关键。
本文旨在研究白灵菇多糖的酶解产物的分离与分析方法，以期深入了解其结构和活性。
首先，为了获得足够量的白灵菇多糖，我们采用了水煮提取的方法。
将鲜白灵菇切碎后，添加适量的水进行煮沸，并连续搅拌。
然后将提取液离心，得到澄清的提取物，经过浓缩和乙醇沉淀后，获得白灵菇多糖的初步提取物。
接下来，我们使用离子交换层析技术对初步提取物进行分离。
选用合适的离子交换树脂，并优化其吸附、洗脱条件，以实现白灵菇多糖的高效分离。
通过逐步改变洗脱液的浓度和组成，我们可以依次获得不同种类和分子量的白灵菇多糖酶解产物。
在分离的基础上，我们采用一系列分析方法对白灵菇多糖酶解产物进行结构和活性的研究。
常用的分析方法包括红外光谱、核磁共振、高效液相色谱、凝胶渗透色谱等。
通过这些方法，我们可以了解白灵菇多糖的组成成分、分子量、空间构象等重要参数，进一步探索其药理学和生物活性。
此外，为了评估白灵菇多糖酶解产物的生物活性，我们可以采用一系列体外和体内实验。
体外实验包括抗氧化能力、免疫调节、抗肿瘤和抗炎等活性的评价，通过测定其对相关指标的影响，可以初步了解白灵菇多糖的生物功能。
而体内实验则可以通过动物模型进行，包括体内抗肿瘤、免疫增强和血糖调节等指标的测定，以深入研究白灵菇多糖酶解产物的药理学活性。
在研究过程中，我们还需要注意一些问题。
首先，分离与分析方法的优化是提高研究效率和准确性的关键，需考虑不同的样品和实验条件。
其次，合适的质量标准和控制方法是确保研究结果可靠的必要条件。
此外，我们还需要与其他研究者进行合作，利用他们的经验和设备，探索更多关于白灵菇多糖的分离、分析和应用。
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酶解法提取食用菌多糖
食用菌多糖是由l0个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物，存在于食用菌的菌丝体、子实体和发酵液中。
食用菌多糖有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和抗感染活性【1，同时还有增强免疫、抗氧化、降低血糖、抗溃疡、抗衰老、抗辐射等方面的生物活性和生理功能
食用菌组成复杂，除多糖外还含有蛋向质、纤维素、半纤维素和果胶等物质，这些物质的存在会影响多糖的浸L叶J．因此在多糖提取过程巾适当加人酶制剂如水解纤维素的纤维素酶、水解果胶质的果胶酶等有利于多糖的浸，在提高溶出效率的同时，为后续捉取液的精制创造有利条件{l0】。
酶解法的一般方法为按一定料液比加入样品干粉和生物酶、蒸馏水，在合适温度和pH值下酶解一定时间，然后升温灭酶，在合适的温度下提取一定时间，离心取上清液，即可测定多糖含量I⋯。
以下分别介绍单一酶法和复合酶法在食用菌多糖提取巾的应用。
1．1 单一酶法提取食用菌多糖单一酶法是指一种酶来辅助提取食用菌多糖，从而提高多糖提取率。
常用的酶有蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等。
蛋白酶可破坏蛋白质的肽键，水解细胞中的游离蛋白质．破坏其空问结构，使其变得松散。
同时蛋白酶还可水解蛋白聚糖和糖蛋白中的蛋向质，降低其对多糖的结合率，使多糖更易浸}H。
刘青娥I⋯彳F推荐的最佳提取条件下分别考察了果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶对袖珍菇多糖提取效率的影响，以直接水提法为对照，结果显示木瓜蛋白酶酶解法有最佳提取效果，多糖提取率提高了95％，试验考察了酶解温度、酶用量、pH和酶解时问对木瓜蛋白酶法多糖得率的影响．得的结果是酶解温度为50℃左右时多糖提取率最高，随着温度的升高，多糖提取率下降；木瓜蛋白酶朋量为2．O％。
冈浓度增加到2．0％以后，再增加酶用量多糖提取率基本不再增加；最佳酶解pH 值为5．2，因酶对pH值较为敏感，适当的pH值可维持酶活性中心的最佳空问构象，促进酶与底物的结合，提高反应速率：多糖得率随着酶解时间的延长而增加，超过100 rain时有所下降，是由于酶解时间太长会引起糖结构变化甚至碳环裂解，致使多糖得率降低。
纤维素酶可使纤维素、半纤维素等物质降解，从而使细胞内的成分更易向提取介质扩散，食用菌多糖存在于子实体的细胞壁内，细胞壁的结构由纤维素维持，使用纤维素酶可水解细胞壁，提高多糖的浸率。
刘晓鹏等I l利用纤维素酶辅助提取茶树菇多糖，比较了酶解法和水提法2种方法，水提法提取茶树菇多糖料液比为1：60，提取时间120 rain．温度为6O℃时提取效果最佳，其多糖平均提取率为1．40％。
纤维素酶酶解辅助提取茶树菇多糖的平均提取率为2．38％，比水提法提高了70．47％。
纤维素酶酶解辅助提取茶树菇子实体多糖的料液比为1：80，酶浓度1．5％，浸提液DH值为6．0，提取温度为50℃，提取时间为60rain．可以发现纤维素酶解法节省原料，缩短了提取时间，反应条件更为温和．提取率更高。
而刘青娥⋯的酶法提取袖珍菇多糖试验中，纤维素酶酶解法较之水提法多糖提取率提高了42％。
李清等llU 以羊肚菌为实验材料研究了酶法提取的T 艺条件．其中纤维素酶加量为15％，温度为
45℃．提取时间为1 h时，其多糖浸提率为2．063％，优于水浸提法，同样条件的热水浸提法羊肚菌多糖得率仅为0．56％。
使用纤维素酶提取食朋菌多糖优于水提法，其条件温和．提取率高且不影响后续提取。
1．2 复合酶法提取食用菌多糖
复合酶法即使用2种以上的酶对多糖进行提取，多采用一定比例的蛋白酶、纤维素酶和果胶酶进行酶解。
复合酶法的提取条件温和，提取率通常比单一酶法高，且杂质较易除去，能源消耗低。
邹东恢等I 】利用木瓜蛋白酶、纤维素酶复合提取香菇多糖，其最佳一[艺条件是：木瓜蛋白酶与纤维素酶质量比为2：1，复合酶质簧分数为0．4％，料液比为】：20，酶解反应的温度55℃，pH值6．5，反应时问3 h．提取率可达16．1％。
马淑凤等l】4j利用二次回归正交旋转组合设计法．探寻复合酶法提取门灵菇菌丝体多糖的最
佳T艺，复合酶系组成为纤维索酶、蜗牛酶、溶壁酶、中性蛋白酶．质量比为3：2：0，5：5。
试验结果表明当酶用量为2．53％、酶解温度39．6 、酶解时问3．2 h、pH值7．2时，多糖得率最高可达8．23％，而水提法多糖得率为6．36％(由该实验室测得)，高出i．87％。
梁敏采，[}j木瓜蛋白酶、纤维素酶提取香菇多糖，加酶比例为2：l(木瓜蛋白酶：纤维素酶)，酶解反应温度55℃，pH 值6．5，反应时间3h，多糖的提取率为16．1％，与传统水提法相比较，提取率提高了8．6％。
可见．复合酶法处理可明显提高糖的提取率。
酶法提取食用菌多糖经大量实验证明，可提高多糖的得率，且反应温度较低，提取时间较短；不足之处是酶的价格较高，又容易失活，实验过程中温度控制要求严格(因酶的最佳温度在很小的范罔内，条件的改变可能导致酶的失活)．且多糖的高级结构可能因酶的作用而改变_】61。