酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究

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银耳多糖的制备及一般鉴定

银耳多糖的制备及一般鉴定【实验目的】1．学习真菌多糖类的分离、纯化原理。

2．学习多糖类物质的一般鉴定方法。

3. 掌握真菌多糖类粗提取的具体步骤及相应原理。

【实验原理】银耳是我国传统的一种珍贵药用真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。

银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。

提取与纯化动植物中存在的多糖或微生物胞内多糖，因其细胞或组织外大多有脂质包围，要使多糖释放出来，第一步就是去除表面脂质, 常用醇或醚回流脱脂。

第二步将脱脂后的残渣以水为主体的溶液提取多糖，这样提取得到的多糖提取液含有许多杂质。

杂质主要是无机盐，低分子量的有机物质及高分子量的蛋白质、木质素等。

第三步则要除去这些杂质，对于无机盐及低分子量的有机物质可用透析法、离子交换树脂或凝胶过滤法除去；对于大分子杂质可用酶消化(如蛋白酶．木质素酶) ，乙醇或丙酮等溶剂沉淀法或金属络合物法。

多糖提取液中除去蛋白质是一个很重要的步骤，常用方法有S e v a g e法、三氯乙酸法、酶解法、三氟三氯乙烷法等。

（1）S e v a g e法是除蛋白的经典方法，主要是利用蛋白质在氯仿中变性的特点，用氯仿:正丁醇=5:1或4:1的二元溶剂体系按1:5加入到多糖提取液中，混合物经剧烈振摇后离心，蛋白质与氯仿-正丁醇生成凝胶物而分离，分去水层和溶剂层交界处的变性蛋白质。

（2）三氯乙酸法利用三氯乙酸，在低温下搅拌加入到多糖提取液中，直到溶液不再继续混浊为止离心弃沉淀，即可达到脱蛋白的目的。

存在于溶液中的三氯乙酸经中和后，通过透析或超滤等方法除去。

（3）酶解法提取是根据植物细胞壁的构成，利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分(纤维素、半纤维素和果胶质)水解或降解，破坏细胞壁结构，使细胞内的成分溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取目的，且有利于提高成分的提取率。

（4）三氟三氯乙烷法将三氯乙烷按1:1的比例加到多糖提取液中，在低温下搅拌约10min，离心得上层水层，水层继续用上述方法处理几次即得，此法效率较高，但因其易挥发，不宜大量应用。

果胶酶提取银耳多糖的研究

目录摘要 (1)关键词 (1)Abstract (1)Key words (1)1 前言 (2)2 仪器、设备和试剂 (2)2.1 材料、与设备 (2)2.2试剂及溶液的配制 (2)3.方法及试验步骤 (2)3.1葡萄糖含量标准曲线的制作 (2)3.2 银耳多糖的提取方法 (3)3.3 银耳多糖含量的测定 (4)4 结果与分析 (4)4.1 银耳多糖含量测定结果 (4)4.2 酶解法提取银耳多糖结果分析 (5)5小结与讨论 (6)参考文献 (7)果胶酶提取银耳多糖的研究摘要：国内常用的银耳多糖提取方法有热水提取法，酸碱提取法和酶解提取法等，其中酶解提取法具有提取时间短，条件温和等优点。

本试验选取了酶解时间和提取时间作为研究对象，探讨了不同条件下银耳多糖的收率，由试验结果表明，解法提取银耳多糖的最适条件为：银耳与水的比例为1g:50ml,加入果胶酶浓度为1%，酶解时间45min,提取时间60min。

关键词：果胶酶；银耳多糖；酶解On Pectinase extract of Tremella polysaccharidesAbstract:Tremella polysaccharide extraction of hot water extraction method, the acid-base extraction and enzymatic extraction, enzymatic extraction with extraction time is short, under mild conditions. This test selected the study of enzymatic hydrolysis time and extraction time to explore the Tremella polysaccharides yield under different conditions, the results showed that the optimal conditions of the solution extract of Tremella polysaccharides: white fungus and water ratio 1g: 50ml join the pectinase concentration of 1%, the hydrolysis time was 45min, extraction time 60min.Key words: Pectinase; the Tremella polysaccharide; enzymatic1 前言银耳俗称白木耳，是一种高等真菌，属于有隔担子菌亚纲银耳科。

银耳多糖提取工艺的研究

银耳多糖提取工艺的研究银耳多糖提取工艺研究摘要：银耳多糖是一种有着良好保健和滋补功效的天然多糖，它由多种多糖成分组成，如葡萄糖、半乳糖、聚糖等，是人体健康的重要来源。

银耳多糖提取工艺是提取和分离银耳中含有银耳多糖的主要过程，经由不同的提取方法可以从银耳中得到高纯粹的银耳多糖粉末。

本文从四个方面详细介绍了银耳多糖提取工艺的理论基础、主要提取方法、技术参数以及优点和缺点，以便为后续银耳多糖提取工艺改进提供参考。

关键词：银耳多糖；提取工艺；提取方法Abstract: Trametes versicolor polysaccharides are natural polysaccharides with good health care and tonic effects, which are composed of various polysaccharides, such as glucose, galactose, polysaccharides, etc., and are an important source of human health. The extraction process of Trametes versicolor polysaccharides is the main process to extract and separate Trametes versicolor polysaccharides from Trametes versicolor. The highly pure Trametes versicolor polysaccharides powder can be obtained from Trametes versicolor by different extraction methods. This paper introduces the theoretical basis, main extraction methods, technical parameters, advantages and disadvantages of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in detail, in order to provide reference for the improvement of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in the future.Keywords: Trametes versicolor polysaccharides; extraction process; extraction methods1、引言银耳多糖是一种良好的滋补和保健品，它是由多种多糖成分构成，其中葡萄糖、半乳糖、聚糖等是主要成分，具有强烈的收敛和胃黏膜防护作用，是常用的护肝、促进新陈代谢等健康保健产品的主要原料，是现在社会受到关注的重要天然产物之一。

实验一银耳多糖的制备及分析

实验一银耳多糖的制备及分析实验目的：1. 学习真菌多糖类的分离、纯化原理。

2. 掌握多糖类物质的提取及一般鉴定方法。

实验原理：银耳（Tremella fuciformis）是我国一种传统的珍贵的真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。

银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。

多糖（polysaccharides）的纯化方法很多，但必须根据目的物质的性质及条件选择合适的纯化方法。

而且往往用一种方法不易得到理想的结果，因此必要时应考虑合用几种方法。

1、乙醇沉淀法：乙醇沉淀法是制备黏多糖的最常用手段。

乙醇的加入，改变了溶液的极性，导致糖溶解度下降。

供乙醇沉淀的多糖溶液，其含多糖的浓度以1%----2%为佳。

加完酒精，搅拌数小时，以保证多糖完全沉淀。

沉淀物可用无水乙醇、丙酮、乙醚脱水，真空干燥即可得疏松粉末状产品。

2、分级沉淀法：不同多糖在不同浓度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不同，因此可用不同浓度的有机溶剂分级沉淀分子大小不同的黏多糖。

3、季铵盐络合法：黏多糖与一些阳离子表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和十六烷基氯化吡啶（CPC）等能形成季铵盐络合物。

这些络合物在低离子强度的水溶液中不溶解，在离子强度大时，这种络合物可以解离，溶解，释放。

本实验采用银耳子实体，经沸水抽提、氯仿—正丁醇法除蛋白质和乙醇沉淀分离可制得银耳多糖粗品，再用CTAB（溴化十六烷基三甲铵）络合法进一步精制可得银耳多糖精品。

然后进行定性和定量测定及杂质含量测定。

实验器材：1、器材（1）布氏漏斗 1 只（2）500ml抽滤瓶 1 只（3）250ml分液漏斗 1 只（4）100ml量筒 2 只（5）10ml量筒 1 只(6) 离心机 1 只（7）烧杯 2 只（8）水浴锅 1 只2、试剂（1）银耳实体：10g（2）2%CTAB:取2gCTAB溶于100ml蒸馏水中，摇匀备用（3）2mol/L 氢氧化钠溶液，6.2mol/L氯化钠溶液（4）氯仿—正丁醇溶液（4：1）（5）95%乙醇（6）甲苯胺（7）乙醚（8）无水乙醇（9）浓硫酸（10）a—萘酚（11）斐林试剂：A液：将34.5g硫酸铜（Cuso4.5H2O）溶于500ml水中B液：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500ml水中，临用时，将A B两液等量混匀。

酶法提取银耳多糖的研究

酶法提取银耳多糖的研究
林宇野;杨虹
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】1995(000)001
【摘要】本文探讨了银耳子实体多糖的多种提取方法。

实验结果表明，利用复合酶法处理结合热水浸提的提方法，能显著提高可溶于热水的银耳多糖浸提率，缩短浸提时间，银耳多糖提取得率达１６．３％（克多糖／１００克银耳干品）。

经纯化、鉴别，从银耳子实体中得到分子量在７８０００、７６０００、７１０００的三种杂多糖ＴＰ－Ａ、ＴＰ－Ｂ及ＴＰ－Ｃ。

【总页数】5页(P13-17)
【作者】林宇野;杨虹
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】TQ464.1
【相关文献】
1.银耳多糖超声波提取工艺优化及抗BV2细胞炎症的作用研究
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5.银耳多糖对淀粉消化酶的抑制作用及其机理研究
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银耳多糖的制备工艺及研究进展

银耳多糖的制备工艺及研究进展刘蔷; 刘磊; 康传利; 杜帅【期刊名称】《《生物产业技术》》【年(卷),期】2019(000)005【总页数】6页(P58-63)【关键词】银耳多糖; 研究现状; 进展趋势; 提取; 降解【作者】刘蔷; 刘磊; 康传利; 杜帅【作者单位】山东焦点生物科技股份有限公司曲阜 273100【正文语种】中文【中图分类】TQ464.1银耳多糖是一种植物多糖，是担子菌亚纲银耳的子实体和细胞发酵孢子中的主要活性成分。

银耳多糖是由多种多糖组成的混合物。

主要包括酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖五种多糖。

主链甘露聚糖是其活性中心，主链的2、4、6位上连接有葡萄糖、木糖、岩藻糖及半乳糖等残基组成的侧链。

银耳多糖的分子量达到130万～175万。

1 银耳多糖的研究现状及国内外发展趋势国外相关研究人员，在20世纪80年代就已经对银耳多糖的生物活性进行了深入的研究。

发现银耳多糖不仅没有生理毒性，反而具有增强免疫力、抗衰老、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射等多种生理功能。

随着医学技术的进步，银耳多糖产品不仅应用在保健食品，也应用在化妆品和医药用品领域。

我国有关银耳多糖的研究起步比较晚，目前主要以化妆品应用为主，未将其药用价值很好地发挥利用。

究其原因是银耳多糖提取得率不高，提取物纯度还不够，还不能满足医学用品的使用标准。

另外，银耳多糖的提取过程复杂，成本较高，因而其价格十分昂贵，还很难满足大部分人的消费水平。

罗浩铭等[1]通过对银耳多糖进行酸水解，并采用凝胶色谱柱进行纯化，得到银耳寡糖部分。

进而利用光谱技术确定银耳多糖中糖醛酸的连接位点和连接方式。

研究表明，纯化得到的寡糖为酸性糖，主要含有银耳二糖和少量三糖，β-D-葡萄糖醛酸残基作为非还原末端以（1-2）-连接方式与甘露糖相连。

银耳多糖是杂多糖，单糖的组成影响着多糖的结构。

张庆等[2]研究了不同栽培方式栽培的银耳中银耳多糖的单糖的差异。

一种酶解法下高压均质制备银耳低聚糖的方法及其应用

一种酶解法下高压均质制备银耳低聚糖的方法及其应用银耳低聚糖是一种具有生物活性和药用价值的功能性食品成分，具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂等多种生理功能。

在现有工艺中，采用高压均质结合酶解法可以有效提高银耳低聚糖的产率和纯度。

本文将详细介绍高压均质酶解制备银耳低聚糖的方法和其应用。

一、方法高压均质酶解法是指在高压条件下，通过使用酶将银耳多糖水解为低聚糖。

该方法主要包括以下步骤：1.资料准备：收集银耳样品，并根据需要决定采用的高压均质设备和酶解酶。

2.样品处理：将收集到的银耳样品进行清洗和破碎处理，以便后续的高压均质操作。

3.高压均质：将经过处理的银耳样品加入高压均质设备，按照指定的高压和时间进行均质处理。

均质操作可以有效破坏银耳多糖的大分子结构，提高酶解效果。

4.酶解反应：将均质后的样品转入含有适量酶解酶的溶液中进行酶解反应。

酶解条件包括温度、pH值、酶解时间等，需要根据具体的酶解酶性质和实验要求进行调节。

5.分离和纯化：经过酶解反应后，通过适当的分离和纯化操作，将银耳低聚糖从反应体系中分离出来，得到纯净的银耳低聚糖产物。

二、应用银耳低聚糖具有多种生理功能和应用价值，可以应用于以下领域：1.药用领域：银耳低聚糖具有抗肿瘤活性，可以作为抗肿瘤药物的辅助治疗剂。

同时，银耳低聚糖还具有抗炎、抗氧化等多种药理活性，可以作为抗炎药物和抗氧化药物的原料。

2.食品领域：银耳低聚糖具有良好的保健功效，可以用于生产功能性食品。

例如，可以将银耳低聚糖添加到饮料、乳制品等食品中，提高其营养价值和功能性。

3.化妆品领域：银耳低聚糖具有保湿和抗皱等美容功效，可以用于生产护肤品和化妆品。

例如，可以将银耳低聚糖添加到面膜、乳液等产品中，改善皮肤干燥和细纹等问题。

4.生物医药领域：银耳低聚糖可以作为细胞培养的添加剂，提高细胞生长和代谢能力。

同时，银耳低聚糖还具有降血脂和调节血糖等生理功能，可以用于生产治疗心血管疾病和糖尿病等疾病的药物。

银耳多糖最适提取工艺条件探析

摘要：为研究用复合酶浸提法提取银耳多糖的最佳工艺条件，以及系统地阐述银耳多糖的提取纯化研究概况，在复合酶添加量为1.5%的情况下，以浸提温度、浸提时间和银耳浸泡的状态为影响因素，用硫酸-蒽酮法测定银耳多糖的含量，对银耳多糖的浸提条件进行优化。

结果表明，复合酶浸提法提取银耳多糖的最适条件为浸泡前呈粉碎状态的银耳，复合酸添加量1.5%，80倍的加水量，浸提温度60℃，浸提时间1h，在该条件下所获到银耳多糖含量最高。

因此，采用复合酶在银耳中提取银耳多糖的最适条件研究，可以为银耳多糖在医药、化妆品等方面的开发应用提供参考依据。

关键词：银耳多糖；提取工艺；酶法浸提中图分类号：TQ929.2文献标志码：A doi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2018.04.036（Taishang Medical University，Taian，Shandong271000，China）To study the optimum technique conditions of polysaccharide from Tremella polysaecharides by complex enzyme ex-traction method.And this paper reviewed the purification of Tremella polysaccharide.When the amount of complex enzyme was1.5%.The extraction temperature，extraction time and the state of Tremella immersion were the influencing factors.The con-tent of polysaccharide from Tremella fuciformis was determined by sulfuric acid-anthrone method，and the extraction condi-tions of Tremella fuciformis polysaccharide were optimized.The optimum conditions for the extraction of polysaccharides fromTremella fuciformis were as follows：1.5%of the amount of enzyme added，80times of adding water，and60℃for1h.Un-der these conditions，the polysaccharide obtained from Tremella fuciformis is the highest.The optimum conditions for the ex-traction of polysaccharides from Tremella fuciformis in the fungus can be used as a reference for the development and applica-tion of Tremella polysaccharide in medicine and cosmetics.Tremella polysaccharides；extraction process；enzymatic extraction银耳多糖（Tremella polysaccharides，TP）是银耳中一种重要的生物活性物质，能够提高机体的免疫能力，并诱导干扰素的产生，经常食用银耳对预防癌症等多种疾病具有非常显著的效果。

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银耳多糖是银耳中的功能性成分，具有活性作
本文对水提法、碱提法、酶解法３种提取多糖的方法进行比较，得出最佳提取方法是酶解法，并对影
Ｈｕａｉ＇ａｎ２２３００３，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｄｅｅｐｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｆｔｒｅｍｅｌｌａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｒｅｍｅｌｌａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄ．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓ１５－３６％，出ｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｏｆ９７．３％，ｔｈｅｐｒｅｃｉｓｉｏｎｏｆ１．２％，小ｅｂｅｓｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒ：ｃｅｌｌｕｌａｓｅ１．５％，０．５％
ｅｘｔｒａｃｔ，ｌａｃｔｉｃａｃｉｄａｎｄｖｉｃｅ．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ．ｉｓａｋｉｎｄｏｆｍｉｌｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆｓａｖｉｎｇ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｐＨｏｎｔｈｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｅｘｔｒａｃｔ，ｅｘｔｒａｃｔｈａｓａｇｏｏｄｓｔａｂｉｌｉｔｙ．Ｓｕｇａｒｈａｓｐｒｏｍｏｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔｔｏｈｅｔ
ＢＡＯＨｕｉ — ｍｅｉ
（ＪｉａｎｇｓｕｆｏｏｄａｎｄｄｒｕｇｏｆＣａｒｅｅｒＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅＣｏＢｅｇｅｏｆｆｏｏｄｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＮｕｔｉｒｔｉｏｎａｌＥｎｇｉｎｅｅｉｎｒｇ
第３６卷第１１期
ｉ７＝
酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究
鲍会梅
（江苏食品药品职业技术学院食品与营养工程学院，江苏淮安２２３００３）
摘要：为了对银耳多糖进行深加工，本文优化了酶解法提取银耳多糖的提取条件。酶解法最高提取率为１５．３６％，
回收率９７．３％，精密度１．２％，最佳条件为：纤维素酶１．５％，纤维素酶０．５％，中性蛋白酶２．０％，温度５０￣Ｃ，ｐＨ４．５，时
间６０ｍｉｎ。通过试验证明温度、ｐＨ对多糖提取液影响极小，提取液具有良好的稳定性。白砂糖对提取液有促进作用，
ｅｎｅｒｇｙｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ，ｈｉｇｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔｒｅｍｅｌｌａ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｉｍｐａｃｔ
乳酸反之。酶解法是一种条件温和、节约能耗、提取率高的提取方法。关键词：银耳；多糖；提取；影响因素
ＳｔｕｄｙｏｎＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＳｔａｂｉｌｉｔｙｏｆＴｒｅｍｅｌｌａＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｂｙＥｎｚｙｍａｔｉｃＨｙｄｒｏｌｙｓｉｓ
ｃｅｌｌｕｌａｓｅａｎｄ２．０％ａｃｉｄｐｒｏｔｅａｓｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ５０℃ ，ｐＨ４．５，ｔｉｍｅｆｏｒ６０ｍｉｎ．Ｔｈｒｏｕｇｈｅｘｐｅｉｒｍｅｎｔｔｈａｔｔｈｅ
食品研究与开发
基础研究
ＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１５．１１．００４
ＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＡｎｄＤｅｖｅｌ５年６月