银耳多糖的制备与分析
银耳多糖的制备及一般鉴定
银耳多糖的制备及一般鉴定【实验目的】1．学习真菌多糖类的分离、纯化原理。
2．学习多糖类物质的一般鉴定方法。
3. 掌握真菌多糖类粗提取的具体步骤及相应原理。
【实验原理】银耳是我国传统的一种珍贵药用真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。
银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。
提取与纯化动植物中存在的多糖或微生物胞内多糖，因其细胞或组织外大多有脂质包围，要使多糖释放出来，第一步就是去除表面脂质, 常用醇或醚回流脱脂。
第二步将脱脂后的残渣以水为主体的溶液提取多糖，这样提取得到的多糖提取液含有许多杂质。
杂质主要是无机盐，低分子量的有机物质及高分子量的蛋白质、木质素等。
第三步则要除去这些杂质，对于无机盐及低分子量的有机物质可用透析法、离子交换树脂或凝胶过滤法除去；对于大分子杂质可用酶消化(如蛋白酶．木质素酶) ，乙醇或丙酮等溶剂沉淀法或金属络合物法。
多糖提取液中除去蛋白质是一个很重要的步骤，常用方法有S e v a g e法、三氯乙酸法、酶解法、三氟三氯乙烷法等。
（1）S e v a g e法是除蛋白的经典方法，主要是利用蛋白质在氯仿中变性的特点，用氯仿:正丁醇=5:1或4:1的二元溶剂体系按1:5加入到多糖提取液中，混合物经剧烈振摇后离心，蛋白质与氯仿-正丁醇生成凝胶物而分离，分去水层和溶剂层交界处的变性蛋白质。
（2）三氯乙酸法利用三氯乙酸，在低温下搅拌加入到多糖提取液中，直到溶液不再继续混浊为止离心弃沉淀，即可达到脱蛋白的目的。
存在于溶液中的三氯乙酸经中和后，通过透析或超滤等方法除去。
（3）酶解法提取是根据植物细胞壁的构成，利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分(纤维素、半纤维素和果胶质)水解或降解，破坏细胞壁结构，使细胞内的成分溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取目的，且有利于提高成分的提取率。
（4）三氟三氯乙烷法将三氯乙烷按1:1的比例加到多糖提取液中，在低温下搅拌约10min，离心得上层水层，水层继续用上述方法处理几次即得，此法效率较高，但因其易挥发，不宜大量应用。
一种非乙醇沉淀的高分子量银耳多糖及其制备方法
一种非乙醇沉淀的高分子量银耳多糖及其制备方法高分子量银耳多糖是一种非乙醇沉淀的多糖，具有多种生物活性和药理作用。
本文将介绍一种制备高分子量银耳多糖的方法。
首先，制备高分子量银耳多糖的原料是银耳菌丝体。
银耳是一种珍稀的食用真菌，其菌丝体富含多糖。
可以通过培养银耳菌丝体来获取菌丝体。
接下来，将获取的银耳菌丝体进行水提取。
将银耳菌丝体研磨成细粉，然后加入适量的水，进行浸泡和搅拌，提取其中的多糖。
水提取可以通过温泉提取法等方式进行。
提取得到的多糖溶液需要进行精制。
首先，可以通过过滤的方式去除杂质和残渣。
然后，可以采用离心分离的方法去除不溶性物质。
离心可以使多糖溶液中的悬浮颗粒沉淀到底部，得到纯净的溶液。
得到的多糖溶液可以进行浓缩。
可以通过真空浓缩法或喷雾干燥法对多糖溶液进行浓缩，得到高浓度的多糖。
浓缩过程中需要注意控制温度和压力，以保证多糖的活性和稳定性。
浓缩得到的多糖溶液可以通过反渗透膜法进行分离纯化。
反渗透膜法可以将溶液中的溶质与溶剂分离开来，得到纯净的多糖溶液。
反渗透膜法需要选择适当的膜材和操作条件，以保证分离效果。
分离纯化得到的多糖溶液可以进行进一步的活性检测和鉴定。
可以使用不同的分析方法，如高效液相色谱法、凝胶渗透色谱法、核磁共振法等，对多糖进行结构分析和质量评估。
最后，可以将高分子量银耳多糖制备成不同形式的制剂。
可以制备成粉剂、胶囊、片剂、注射剂等，以满足不同的应用需求。
制剂的制备需要考虑多糖的稳定性和活性，选择适当的辅料和工艺条件。
综上所述，制备高分子量银耳多糖的方法包括银耳菌丝体的水提取、溶液的精制、浓缩和纯化、多糖的活性检测和鉴定，以及制剂的制备等步骤。
这种非乙醇沉淀的多糖具有广泛的应用前景，可以用于食品、保健品和药品等领域。
银耳提取银耳多糖工艺流程-12
银耳提取银耳多糖工艺流程一、综述1、银耳银耳又名白木耳，是一种高等真菌，性味甘、平、具有滋阴润肺、养胃生津之功效，自古以来被人们看作是延年益寿的佳品，是世界公认的最珍贵的食用菌和重要药材。
银耳子实体中除银耳多糖物质外，还含有一定量的果胶质、蛋白质、粗纤维等成分，这些物质的存在，将不利于多糖物质的提取分离和纯化。
2、多糖多糖又名多聚糖，通常由多个单糖分子通过缩合、失水从而由甘糖键结合而成的一类分子结构复杂的高分子化合物。
根据其脱水缩合的成分不同，可分为均一性多糖、不均一性多糖。
多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗衰老、抗氧化、抗溃疡、降血糖、调节身体免疫力等多种作用。
3、银耳多糖简介银耳多糖(Tremella polysaccharides, TP)是银耳的重要活性成分(约占银耳干重的60%-70% )，是从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的一种活性多糖。
大量研究表明，从银耳中提取分离得到的银耳多糖具有提高机体免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗溃疡、抗血栓形成、抗突变、抗肿瘤等作用，能增强机体耐缺氧能力，清除自由基。
1.1银耳多糖的组成银耳多糖的主链是由a-(1-3)-糖苷键组成的甘露聚糖，主链的2, 4, 6 位上连接有葡萄糖、木糖、岩藻糖及普通糖醛酸等残基组成的侧链，其活性中心是a -(1-3)-甘露聚糖这一共同结构部分。
银耳多糖种类包括酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖五种，不含核酸、蛋白质类物质［3。
］1.1.1酸性杂多糖约占银耳总多糖的70%~75%，为木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸为主的多聚体，中有少量岩藻糖。
1.1.2中性杂多糖约占银耳总多糖的20%左右，为木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的多聚体。
1.1.3胞壁多糖根据文献报道，一种是从胞壁外层产生的酸性多糖，由D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成；另一种为碱性多糖，由D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成。
银耳多糖提取工艺的研究
银耳多糖提取工艺的研究银耳多糖提取工艺研究摘要：银耳多糖是一种有着良好保健和滋补功效的天然多糖，它由多种多糖成分组成，如葡萄糖、半乳糖、聚糖等，是人体健康的重要来源。
银耳多糖提取工艺是提取和分离银耳中含有银耳多糖的主要过程，经由不同的提取方法可以从银耳中得到高纯粹的银耳多糖粉末。
本文从四个方面详细介绍了银耳多糖提取工艺的理论基础、主要提取方法、技术参数以及优点和缺点，以便为后续银耳多糖提取工艺改进提供参考。
关键词：银耳多糖；提取工艺；提取方法Abstract: Trametes versicolor polysaccharides are natural polysaccharides with good health care and tonic effects, which are composed of various polysaccharides, such as glucose, galactose, polysaccharides, etc., and are an important source of human health. The extraction process of Trametes versicolor polysaccharides is the main process to extract and separate Trametes versicolor polysaccharides from Trametes versicolor. The highly pure Trametes versicolor polysaccharides powder can be obtained from Trametes versicolor by different extraction methods. This paper introduces the theoretical basis, main extraction methods, technical parameters, advantages and disadvantages of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in detail, in order to provide reference for the improvement of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in the future.Keywords: Trametes versicolor polysaccharides; extraction process; extraction methods1、引言银耳多糖是一种良好的滋补和保健品，它是由多种多糖成分构成，其中葡萄糖、半乳糖、聚糖等是主要成分，具有强烈的收敛和胃黏膜防护作用，是常用的护肝、促进新陈代谢等健康保健产品的主要原料，是现在社会受到关注的重要天然产物之一。
实验一银耳多糖的制备及分析
实验一银耳多糖的制备及分析实验目的：1. 学习真菌多糖类的分离、纯化原理。
2. 掌握多糖类物质的提取及一般鉴定方法。
实验原理：银耳（Tremella fuciformis）是我国一种传统的珍贵的真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。
银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。
多糖（polysaccharides）的纯化方法很多，但必须根据目的物质的性质及条件选择合适的纯化方法。
而且往往用一种方法不易得到理想的结果，因此必要时应考虑合用几种方法。
1、乙醇沉淀法：乙醇沉淀法是制备黏多糖的最常用手段。
乙醇的加入，改变了溶液的极性，导致糖溶解度下降。
供乙醇沉淀的多糖溶液，其含多糖的浓度以1%----2%为佳。
加完酒精，搅拌数小时，以保证多糖完全沉淀。
沉淀物可用无水乙醇、丙酮、乙醚脱水，真空干燥即可得疏松粉末状产品。
2、分级沉淀法：不同多糖在不同浓度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不同，因此可用不同浓度的有机溶剂分级沉淀分子大小不同的黏多糖。
3、季铵盐络合法：黏多糖与一些阳离子表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和十六烷基氯化吡啶（CPC）等能形成季铵盐络合物。
这些络合物在低离子强度的水溶液中不溶解，在离子强度大时，这种络合物可以解离，溶解，释放。
本实验采用银耳子实体，经沸水抽提、氯仿—正丁醇法除蛋白质和乙醇沉淀分离可制得银耳多糖粗品，再用CTAB（溴化十六烷基三甲铵）络合法进一步精制可得银耳多糖精品。
然后进行定性和定量测定及杂质含量测定。
实验器材：1、器材（1）布氏漏斗 1 只（2）500ml抽滤瓶 1 只（3）250ml分液漏斗 1 只（4）100ml量筒 2 只（5）10ml量筒 1 只(6) 离心机 1 只（7）烧杯 2 只（8）水浴锅 1 只2、试剂（1）银耳实体：10g（2）2%CTAB:取2gCTAB溶于100ml蒸馏水中，摇匀备用（3）2mol/L 氢氧化钠溶液，6.2mol/L氯化钠溶液（4）氯仿—正丁醇溶液（4：1）（5）95%乙醇（6）甲苯胺（7）乙醚（8）无水乙醇（9）浓硫酸（10）a—萘酚（11）斐林试剂：A液：将34.5g硫酸铜（Cuso4.5H2O）溶于500ml水中B液：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500ml水中，临用时，将A B两液等量混匀。
银耳多糖的制备与分析[整理]
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银耳多糖的制备与分析一、实验目的1、了解银耳多糖制备的基本原理。
2、掌握糖类物质提取的基本操作技术。
二、实验原理银耳是真菌的一种，是我国传统的珍贵药材之一，具有滋阴润肺、益胃生津等功效。
常用于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症。
银耳多糖是银耳的主要药效成分，银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能，抗炎症和抗放射等作用。
1、制备（提取）原理：银耳多糖易溶于水，但不溶于乙醇。
因此本实验采用沸水抽提、氯仿-正丁醇法除蛋白和乙醇沉淀分离制得银耳多糖粗品。
然后再进行定性分析。
2、分析（鉴定）原理：Molish反应多糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下，脱水形成糠醛及其衍生物，其与α-萘酚反应，作用生成紫色的化合物。
原理是羰基与酚类进行了缩合，这样，糖与浓酸作用后，再与α-萘酚反应，就能生成紫色的化合物。
因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有无糖的存在。
斐林试剂质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的氢氧化铜沉淀。
氢氧化铜与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。
三、实验试剂和器材1、银耳子实体2、乙醇3、乙醚4、丙酮5、Ssvag试剂：氯仿：正丁醇=6、Molish试剂：取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL，临用前配置，棕色瓶保存。
7、斐林试剂：甲液质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液乙液质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液临用时临时配置，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。
仪器和器材烧杯试管分液漏斗容量瓶电炉石棉网纱布离心机真空干燥箱电子天平四、实验步骤（一）制备步骤1、取银耳子实体10g加水300mL，直火提取1h，提取过程中不断用玻棒搅拌。
银耳多糖的提取工艺
银耳多糖的提取工艺李帅涛摘要：国内常用的银耳多糖提取方法有热水提取法，酸碱提取法和酶解提取法等，其中酶解提取法具有提取时间短，条件温和等优点。
本试验选取了酶解时间和提取时间作为研究对象，探讨了不同条件下银耳多糖的收率，由试验结果表明，解法提取银耳多糖的最适条件为：银耳与水的比例为1g:50ml,加入果胶酶浓度为1%，酶解时间45min,提取时间60min。
关键词：银耳多糖；酶解法；提取工艺引言：我国银耳资源丰富，为开发应用银耳多糖提供了有利条件。
近年来，有关银耳多糖的研究越来越多，但这些研究多为银耳多糖的化学特性和药理作用方面的研究，少有关于银耳中提取银耳多糖的研究。
目前银耳多糖的提取方法多为热水浸提法或酸碱法提取，但热水浸提法耗时过长，且收率较底，费时费力，因此不适合大规模的工业生产，而酸碱法提取虽然提取时间较短，却会破坏银耳多糖立的生物活性，使提取到的银耳多糖药用效果大大下降。
本试验主要研究使用果胶酶酶解银耳，热水提取的技术来提取银耳多糖的方法。
而如今生物工程工艺发展迅速，生物制品价格不断下降，这为用酶解法提取银耳多糖提供了可行性。
用酶解法提取银耳多糖不仅能缩短单纯用热水法提取的时间，还不会像酸碱法那样破坏银耳多糖的生物活性。
材料与设备:①实验材料：银耳;葡萄糖(分析纯):取1g葡萄糖加入1000ml容量瓶中，定容至1000ml;果胶酶：按100ml:1g加入果胶酶;苯酚（分析纯）;精确量取6ml苯酚放入100ml容量瓶中，定容至100ml;浓硫酸(发烟硫酸)②实验设备：101型电热鼓风干燥；YP202N型电子天平；HH系列恒温水浴锅；电子万用炉;TDZ5-WS型台式低俗离心机；722E型可见分光光度计分离与纯化：取市售银耳适量，洗净，70℃烘干后，破碎成粉末状，称取粉末0.5g（2%），果胶酶0.25g（1%），同时加入蒸馏水25mL，迅速置于45℃水浴锅中酶解，3个样品为一组，第一组酶解30min，第二组酶解45min，第三组酶解60min。
银耳多糖提取实验报告
一、实验目的1. 学习银耳多糖的提取方法；2. 掌握银耳多糖的纯化技术；3. 分析银耳多糖的溶液性质。
二、实验原理银耳多糖是一种具有多种生物活性的大分子物质，具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化衰老、降血糖血脂、抗凝血血栓、抗溃疡、促进蛋白质合成、抗病毒、促进神经细胞生长及改善记忆力等多方面的活性。
银耳多糖的提取主要是利用银耳中的多糖类物质，通过物理或化学方法将其从银耳中分离出来。
三、实验材料与仪器1. 材料：椴木银耳、2%的氢氧化钠、1%活性碳、5%的苯酚溶液、标准葡萄糖溶液、硫酸、乙醇、丙酮、乙醚、DEAE-C52、Sevage试剂、0.5mol·L-1盐酸、2mol·L-1 NaCl溶液。
2. 仪器：双重蒸馏水蒸馏器、超级恒温水浴、旋转蒸发仪RE52型、紫外可见分光光度计752N、低速大容量多管离心机LXJ-B型、透析袋、铝锅、搅拌器、天平、精密电子天平、电炉等。
四、实验方法1. 银耳多糖的提取（1）将椴木银耳洗净，浸泡于水中，使其充分吸水膨胀；（2）将膨胀后的银耳煮沸30分钟，以破坏细胞结构，释放出银耳多糖；（3）将煮沸后的银耳过滤，收集滤液；（4）向滤液中加入2%的氢氧化钠，调节pH值至7.0；（5）加入1%活性碳，搅拌30分钟，以去除杂质；（6）过滤，收集滤液；（7）向滤液中加入5%的苯酚溶液，以沉淀银耳多糖；（8）将沉淀物离心，收集沉淀物；（9）将沉淀物用乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂洗涤，去除杂质；（10）将洗涤后的沉淀物在60℃下烘干，得到银耳多糖。
2. 银耳多糖的纯化（1）将银耳多糖溶解于水中，配成一定浓度的溶液；（2）将溶液通过DEAE-C52层析柱，以去除杂质；（3）收集层析柱流出液，加入Sevage试剂，以去除杂质；（4）将流出液离心，收集沉淀物；（5）将沉淀物用乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂洗涤，去除杂质；（6）将洗涤后的沉淀物在60℃下烘干，得到纯化的银耳多糖。
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银耳多糖的制备与分析
一、实验目的
1、了解银耳多糖制备的基本原理。
2、掌握糖类物质提取的基本操作技术。
二、实验原理
银耳是真菌的一种，是我国传统的珍贵药材之一，具有滋阴润肺、益胃生津等功效。
常用于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症。
银耳多糖是银耳的主要药效成分，银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能，抗炎症和抗放射等作用。
1、制备（提取）原理：银耳多糖易溶于水，但不溶于乙醇。
因此本实验采用沸水抽提、氯仿-正丁醇法除蛋白和乙醇沉淀分离制得银耳多糖粗品。
然后再进行定性分析。
2、分析（鉴定）原理：
Molish反应
多糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下，脱水形成糠醛及其衍生物，其与α-萘酚反应，作用生成紫色的化合物。
原理是羰基与酚类进行了缩合，这样，糖与浓酸作用后，再与α-萘酚反应，就能生成紫色的化合物。
因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有无糖的存在。
斐林试剂
质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的氢氧化铜沉淀。
氢氧化铜与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。
三、实验试剂和器材
1、银耳子实体
2、乙醇
3、乙醚
4、丙酮
5、Ssvag试剂：氯仿：正丁醇=
6、Molish试剂：取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL，临用前配置，棕色瓶保存。
7、斐林试剂：甲液质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液
乙液质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液
临用时临时配置，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。
仪器和器材
烧杯试管分液漏斗容量瓶电炉石棉网纱布离心机真空干燥箱电子天平
四、实验步骤
（一）制备步骤
1、取银耳子实体10g加水300mL，直火提取1h，提取过程中不断用玻棒搅拌。
双层纱布过滤，提取液浓缩至100mL左右。
2、浓缩液加入等体积的Sevag试剂去蛋白，3000rpm离心10min。
3、上清液加入3倍95%乙醇，搅拌均匀后，3000rpm离心10min（或静止1h）。
4、沉淀用无水乙醇洗涤2次，乙醚洗涤1次，真空干燥，得因而多糖粗品。
（二）分析步骤
1、称取银耳多糖粗品20mg，加水溶解并定容至100mL，作为样品制备溶液供试。
2、Molish反应
取试管，加入多糖溶液1mL，然后加入两滴Molish试剂，摇匀。
倾斜试管，沿管壁小心加入约1mL浓硫酸，切勿摇动，小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。
用水代替糖溶液，重复一遍，观察结果。
3、斐林试剂
取试管，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中。
摇匀后，分别加入4滴待测糖溶液，置于沸水浴中加热2～3min，取出冷却，观察沉淀和颜色变化。