实验一 银耳多糖的制备

共同特性
1．分子量一般很大，在几万以上。在水中不能形成 真溶液，有的根本不溶于水，如纤维素。 2．物理性质：有旋光性，但无变旋现象。无甜味。 3．化学性质：无还原性，不能成脎。
• 银耳：别名白木耳、白耳、桑鹅、五鼎芝、白耳子等。 银耳： • 拉丁名：Tremella fuciformis Berk. 拉丁名： • 形态 形态：子实体纯白色，胶质，半透明，宽5-10 cm 5-10 cm，由多 数宽而薄的瓣片组成，新鲜时软，干后收缩。 • 生态环境：生于栎及其他阔叶树腐本上。 生态环境： • 资源分布：分布于西南及陕西、江苏、安徽、浙江、江西、 资源分布： 福建、台湾、湖北、湖南、广东、海南、广西等地。
实验一 银耳多糖的制备
指导老师：杨莉
一、简介
• 常见的生物大分子： • 糖类、脂类、蛋白质、核酸、酶、激素和 维生素, etc. , • 糖的定义：是多羟醛或多羟酮及其缩聚物 和某些衍生物的总称。
糖类的主要生物学作用
• 是生物体主要的能量来源。 • 可转变为生命所必需的其它物质，如脂类、蛋白 质等。 • 可作为生物体的结构物质，如纤维素。 • 可作为细胞识别的信息分子。 • 其它功能。
银耳的作用
1. 银耳能提高肝脏解毒能力，起保肝作用；银耳对老年慢性 支气管炎、肺原性心脏病有一定疗效； 2. 银耳富含维生素D，能防止钙的流失，对生长发育十分有 益；因富含硒等微量元素，它可以增强机体抗肿瘤的免疫 力； 3. 银耳富有天然植物性胶质，加上它的滋阴作用，长期服用 可以润肤，并有祛除脸部黄褐斑、雀斑的功效； 4. 银耳中的有效成分酸性多糖类物质，能增强人体的免疫力， 调动淋巴细胞，加强白细胞的吞噬能力，兴奋骨髓造血功 能；银耳多糖具有抗肿瘤作用； 5. 银耳中的膳食纤维可助胃肠蠕动，减少脂肪吸收，从而达 到减肥的效果； 6. 银耳还能增强肿瘤患者对放疗、化疗的耐受力。
• 注意： • 1、用Sevag法除蛋白要除尽蛋白，一般要35 5次，至无乳化。
• 其他可以提取多糖的材料： 其他可以提取多糖的材料：
• 香菇、黄芪、银杏叶、当归、灵芝 、甘草等
思考
• （1）是否有其他方法可以提高多糖得率？ • （2）在本实验中使用了有机溶剂（氯仿） 纯化多糖，有其他替代的试剂或方法吗？ • （3）怎样将提取好的多糖产品进行深度开 发？
• 化学成份：含银耳子实体多糖(TP)，银耳孢子多糖 化学成份：
(TSP)，多糖TP-1，糖蛋白TP，细胞壁多糖，葡萄糖醛酸 木糖甘露聚糖，中性多糖，酸性杂多聚糖AC、BC。 • 所含脂质成分：甾醇部分 甾醇部分含有16.8%麦角甾醇，28.5%麦角 甾醇部分 甾-5，7-二烯-3β-醇，54.7%麦角甾-7-烯3β-醇；脂肪酸部 脂肪酸部 分含有1.32%十一烷酸，2.37%十二烷酸，1.28%十三烷酸， 0.09%十四烷酸，5.43%十五烷酸，17.20%十六烷酸， 3.11%十八烷酸，2.37%十六碳-(9)-烯酸，38.83%十八碳(9)-烯酸，27.98%十八碳-(9，12)-二烯酸；磷脂部分 磷脂部分含有 磷脂部分 磷脂酞甘油，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰丝氨酸，磷脂酰胆碱 和磷脂酰肌醇。此外，葡菌丝中含萨尼丹宁A、B、C、D。
二、实验原理
• 银耳多糖溶于热水，不溶于冷水、不溶于 60%以上乙醇 ，也不溶于氯仿正丁醇 。 • 银耳子实体经沸水抽提，Sevag法除蛋白 （氯仿-正丁醇 1/5，1/25），乙醇沉淀分离 即可制得银耳多糖粗品。
三、实验步骤
• 1、银耳3g，洗净（若较为干净，省略该步），剪碎，加400 ml蒸馏 水，加少量NaHCO3 (0.5 g 加速溶化)，直火加热至 沸，搅拌提取1 h，双层纱布过滤，得提取液（约70-80 ml， 在煮沸过程中防止糊锅，影响提取质量）。 • 2、提取液中加（提取液的）1/5～1/3V氯仿、（提取液的） 1/25 V正丁醇振摇5min，分层，离心（8500 rpm, 7 min）， 吸取上清，重复2-3次左右，得到去蛋白的多糖液（约10-20 ml）。 • 3、去蛋白的多糖液加2V乙醇，离心得沉淀，真空干燥，获 得银耳多糖粗品，下次实验备用。
• 评分标准： • 到勤情况、实验态度、实验操作、实验报 告撰写。
• 注意事项：
• 实验过程中须穿白大褂； • 做完实验后须将操作台面和用过的材料清洗干净后再离开； • 值日的同学须经过实验老师的检查后才能离开，包括门、窗、 水、电、实验台面、地面、天平等的清理；
• 实验报告的撰写：
• 姓名、时间、日期、同组成员； • 实验名称、目的、原理、操作步骤、注意事项、实验结果、 结果分析及存在的问题。
生物化学实验室规则
• 1 每个同学都应该自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩 序，不迟到，不早退，不大声谈笑。
• 2 实验前必须熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤，懂 得每一操作步骤的意义和了解所用仪器的使用方法，否则 不能开始实验。 • 3 实验过程中要听从老师的指导，严肃认真地按操作规程 进行实验，并把实验结果和数据及时、如实记录在实验记 录本上，文字要简练、准确。完成实验后经教员检查同意， 方可离开实验室。 • 4 实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用 试剂用毕，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实 验台面和地上。实验完毕，仪器洗净放好，将实验台面抹 拭干净，才能离开实验室。
• 性状鉴别：子实体由数片至10余片薄而多皱褶的瓣片 性状鉴别：
组成，呈菊花形、牡丹花形或绣球形，直径3-15cm，白色 或类黄色，表面光滑，有光泽，基蒂黄褐色。角质，硬而 脆。浸泡水中膨胀，有胶质。气微，味淡。
• 功效 ：具有润肺止咳、补肾健脑、健身嫩肤的功效，
擅长补益肺气，可以提高肺组织的防御功能，提高机体的 免疫能力，从而增强体质，达到抗衰老的作用。
• 5 使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约。洗涤和 使用仪器时，应小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪 器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告老师，不 得擅自动手检修。 • 6 实验室内严禁吸烟！注意水电安全，离开实验室前，必须 关好水龙头，拉下电闸，严防发生事故！ • 7 废液倒入专门的废液桶，固体废物和带残渣的废物不得倒 入水槽或到处乱扔。 • 8 仪器损坏时，应如实向老师报告。 • 9 实验室内一切物品，未经本室负责老师批准，严禁携出室 外，借物必须办理登记手续。 • 10 每次实验课由班长负责安排值日生。值日生的职责是负责 当天实验室的安全、卫生和一切服务性的工作。