高免卵黄抗体应用研究现状及发展趋势
卵黄抗体在疾病防治中应用的研究进展
卵黄抗体在疾病防治中应用的研究进展安芳兰;李菁;张荣;武发菊;武永淑;董文教;马全英;王凡;刘学荣【摘要】卵黄抗体是一种多克隆抗体,由禽类经特异性抗原刺激后通过B淋巴细胞产生并运行至卵黄中所形成,具有强大的免疫功能.对卵黄抗体的结构特点、理化性质、作用机理及其在各类动物疾病治疗预防方面的应用进行了综述,并指出了目前存在的问题.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(000)005【总页数】4页(P68-71)【关键词】卵黄抗体;免疫;疾病治疗;应用【作者】安芳兰;李菁;张荣;武发菊;武永淑;董文教;马全英;王凡;刘学荣【作者单位】中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046【正文语种】中文【中图分类】S855.3Abstract Egg yolk antibody is a kind of polyclonalantibody by specific antigen stimulation of poultry, which is produced by B lymphocyte and migrated to the yolk of polyclonal antibody, with a strong immune function. In this research, we reviewed the application of structural characteristics, physicochemical property and action mechanism of egg yolk antibody in prevention treatment of animal disease. The existing problems were pointed at present.Key words Egg yolk antibody; Immunity; Disease treatment; Application卵黄抗体(IgY)又称为卵黄免疫球蛋白(Egg yolk immunoglobulin)，是禽类经特异性抗原刺激，由B淋巴细胞产生并移行至卵黄中的多克隆抗体，大多数为IgG，具有强大的免疫功能。
鸭坦布苏病毒高免卵黄抗体的研制
对 母羊泌 乳不 足的 调理方 法有 很 多 ，主 要有 通过饲 养管
理 、乳 房 的按 摩刺激 、激 素控 制 、中药 调理 等 ，其 中利
用 中药 调理母 畜泌 乳不足 的研 究有 很 多， 中药成 份种类
参考 文献 【 ｌ 】侯海 锋， 任 文 社．中草 药添 加 荆在 畜 禽生 产 中的作 用 及研 发【 Ｊ ］ ．保
［ ７ 】赵 旭．中草 药饲 料 添 加 剂研 究进 展 及其 在 动 物生 产 中的 应 用【 Ａ】 ． ２ ０ １ ０ ｌ ｆ ｌ 东饲 料科 学技 术交 流大 会论 文集 【 Ｃ 】 ． ２ ０ １ ０ ．
龄Ｓ Ｐ Ｆ 鸡胚 ，０ ． Ｉ ｍｌ ／ 枚 ，各５ 枚 ，接种后７ ｄ ｇ Ｊ 观察鸡胚死亡 情 况 ，并用Ｒ ｅ ｅ ｄ － Ｍｕ ｅ ｎ ｃ ｈ 法计算 其Ｅ Ｌ Ｄ５ ｏ 。用灭菌生理盐 水将 鸭坦 布苏病毒 分别做 １ ０ ～、ｌ ０ 一 、ｌ ０ 一、ｌ ０ ～ 、ｌ ０ 一 、
多，笔者选用 民间常用２ 种配方 ，研究 其对母羊 泌乳 的影
［ ３ 】陈 小 银 ．中药 饲 料 添 加 剂 在 动 物 保 健 上 的研 究 进 展 【 Ｊ 】 ． 畜禽业．
２ ０ ０ ８ ． ０ ２ ．
响，结 果两种 中药配 方均 能很 好 的促进 母羊 泌乳 ，提 高 母 乳喂养 率 。很多 中药都 有下 乳 的作用 ，如 木通 、王不 留行、 穿山 甲、通草 等 。养 殖 场 ，可结 合本场 情况 ，选
抗体 中和效价为 １ ： １ ０ 一 ，雏鸭攻毒保 护试验 结果表明 ，预防组和治疗组的保护率分别达到９ ０ ％和７ ８ ％，说 明本试验制备 的
抗猪流行性腹泻病毒高免卵黄抗体的制备及临床应用研究
抗猪流行性腹泻病毒高免卵黄抗体的制备及临床应用研究作者：贺娟娟来源：《当代畜禽养殖业》 2018年第3期摘要：猪流行性腹泻具有发病急、传播快、发病率与死亡率高、波及面广等特点。
近年来，在全国范围内爆发频繁。
本试验主要制备一种高免卵黄抗体，并研究其在预防和治疗上的效果。
研究结果表明，制备抗PEDV的特异性高免卵黄抗体对未吃初乳的仔猪保护率达90%，对仔猪流行性腹泻有很好的预防效果，对10日龄以上的仔猪有显著的治疗效果，可应用于临床实践。
关键词：猪流行性腹泻病毒(PEDV)；高免卵黄抗体：临床效果2010年以来，仔猪流行性腹泻在全国范围内爆发，给生猪养殖户造成巨大的经济损失。
调查研究显示，猪流行性腹泻(PED)具有发病急、传播快、发病率与死亡率高、波及面广等特点。
对其的治疗也处于摸索阶段。
因此，制定一种切实可行的预防治疗措施迫在眉睫。
本试验主要制备一种高免卵黄抗体，并研究其在预防和治疗上的效果。
现报告如下。
1 材料、仪器及试验对象(1)试验材料。
发病仔猪的肠道病料，琼脂粉，PED阳性血清。
(2)试验仪器。
高速匀浆机，江苏天翎仪器有限公司；干烤箱，上海和呈仪器制造有限公司；高压锅，长沙明杰仪器有限公司：温箱，深圳市广迈仪器设备有限公司；玻璃瓶、离心机、梅花打孑L器、移液器等。
(3)试验试剂．甲醛等。
(4)试验对象。
昆明鼠，120日龄待开产蛋鸡，仔猪。
2 试验方法(1)高免卵黄抗体的制备。
抗猪流行性腹泻病毒高免卵黄抗体按照如下方法进行制备[2-3]。
制备免疫抗原。
选择2-3日龄感染发病的产房仔猪，无菌采集其肠道并进行处理。
处理后留取一部分未灭活组织液，冷冻保存，供攻毒试验使用。
制备卵黄抗体。
给鸡胸肌注射制备的PEDV组织灭火苗，并按规定进行首免、二免、三免及四免，首免后每周收集鸡蛋，分离卵黄。
制备治疗用卵黄抗体。
取抗体效价>64的高免蛋，无菌去除蛋清、分离蛋黄，并加入生理盐水，搅拌分装。
(2)仔猪的攻毒试验。
卵黄抗体的特性及在兔病防治上的应用
６ ７ ～ ７ ０ ｋ Ｄ ， 轻链分子量为 ２ ２ — ３ Ｏ ｋ Ｄ 。Ｉ ｇ Ｙ与 Ｉ ｇ Ｇ 相 比没
有铰链结构 ， 结构更为稳定 ， 与Ｉ ｇ Ｇ ￣ Ｅ Ｉ 比Ｉ ｇ Ｙ疏水性更
强， 这与 Ｉ ｇ Ｙ存在于脂类含量较高 的卵黄 内的环境 中
黄抗体对 胃蛋 白酶抵抗力较强 ， 能抵抗幼龄动物肠道 中胰 蛋 白酶 和 胰凝 乳 蛋 白酶 的消化 。这些 特 性 使 Ｉ ｇ Ｙ 的生产 、 加工 、 贮存 、 摄取及 消化过程 中维持其结构的 稳定和发挥生物学作用具有重要意义。 １ ． ２ ． ３ 治疗效果好 ， 无副作 用 用卵黄抗体治疗畜禽
１ 多 Ｉ ９ 黄 抗体 的特 性
甚至可保存 ５ ～ １ Ｏ 年， 其抗体活性无显著损失 ， 在室温 条件下 ， 可保持抗体活性半年不变 ， ３ ７ ℃条件下 ， 也可 保 持活性 １ 个 月 。６ ５ ℃时 可 以 保 持 ２ ４ ｈ以上 ， 在７ ０ ℃ 时， 当加热 ９ ０ ｍ ｉ ｎ 后， 卵黄抗体的活性才会发生明显地 下 降 。Ｉ ｇ Ｙ在 ｐ Ｈ值 ４ ～ １ １ 时Ｉ ｇ Ｙ能 保 持稳 定 ， 活性 几 乎 不变 ］ ， 低于ｐ Ｈ ３ ． ０ 时活性迅速下降。Ｉ ｇ Ｙ 耐高渗 、 耐高 压， ６ ０ ％浓 度 的蔗糖 溶 液 中仍 有 活性 ， ４ ０ ０ ０ ｋ ￣ｃ ｍ 高 压
Ｉ ｇ Ｙ， 此后 ， 各 国学者 就 卵黄抗 体 不断 进行 深入 研究 ， 卵 黄 中Ｉ ｇ Ｙ的浓 度 很 高 ， 而其 他 免 疫 球 蛋 白在 卵 黄 里 的
Байду номын сангаас
及价格便宜等优点 ， 卵黄中没有其他 的免疫球蛋 白， 纯度相对较高 ， 提取抗体的技术 已经成熟 ， 可 以进行大 规模生产 、 提纯方便 ， 并在制备卵黄抗体时 ， 不需要采 集动物血液 ， 不会对动物造成任何损伤 ， 符合动物保护
猪流行性腹泻病毒高免卵黄抗体制备及应用
将 ３０头 １日龄未 吃初乳仔猪 随机分 ３组 （对 照组 、低 剂 量 组 、高 剂 量 组 ）， 每 组 １０头 ， 各 组 仔 猪 均 肌 肉 注 射 ＰＥＤＶ病 毒液 １．０ｍｌ，当仔猪 出现腹泻症状 后 ，低剂量组 口服 卵黄抗 体治疗 ，每 次 Ｏ．５ｍｌ，连续服 用 ３ｄ。 高剂量组 口服卵 黄抗体治疗 ，每次 ２．０ｍｌ，连续服用 ３ｄ。对照组不进行治疗
猪 流 行性 腹泻 （Ｐｏｒｃｉｎｅ Ｅｐｉｄｅｍｉｃ Ｄｉａｒｒｈｅａ，ＰＥＤ）是 由 猪流行性腹泻病毒 （Ｐｏｒｃｉｎｅ Ｅｐｉｄｅｍｉｃ Ｄｉａｒｒｈｅａ Ｖｉｒｕｓ．ＰＥＤＶ） 引起 的主要 危害仔猪的一种急性 、高度接触性 、病 毒性 传染 病 ｜ｌｌ。初生仔猪通常在 出生后获得母 源抗 体保护 ，但 随着时 问增 长 ，母 源抗 体逐渐消失 ，卵 黄抗 体与母源抗体都是 通过 被动免 疫使 仔猪 获得对疾病 的抵抗力 。近年来 ，高免 卵黄抗 体在仔 猪疾病防控 中发挥越来 越重要 的作用 ．现将 ＰＥＤＶ高 免卵黄抗体 的制备及应用过程介绍如下 。
１ 材料 与方 法 １．１ 毒株与试验动 物 ＰＥＤＶ 由本实验 室分离并保 存 ；健康小 鼠购 自山东省 实 验 动 物 中 心 ；１日龄 仔 猪 由泸 县 云 龙镇 星 月猪 场 提 供 。 １．２ 动 物 免 疫 将 ＰＥＤＶ病 毒 液 灭 活 后 ， 常 规 方 法 配 置 油 乳 剂 灭 活 疫 苗。以 ＰＥＤＶ灭活疫苗免疫健康 产蛋鸡 ，分 ３次免 疫 ，第一 次免疫 １．０ｍｌ，第二次免疫 １．５ｍｌ，第三次免疫 ２．Ｏｍｌ，免疫问 隔期 为 ２周 ，３次免疫后 ，收集高免蛋 。 １．３ 卵黄 抗 体 纯 化 及 效价 测 定 无菌收集高免蛋 的卵黄 ，按 ｌ：２比例加入灭菌生理盐水 ． 再加入 １／２体 积的氯仿 ，混合均匀 ．８０００ｒ／ｍｉｎ离心 １０ｍｉ 后 收 集 上 清 ，加 入 饱 和 硫 酸 铵 溶 液 ，使 其 浓 度 达 到 ３３％ 。 ５０００ｒ／ｍｉｎ离心 １ ５ｒ ａｉｎ后 ，沉淀用生理盐水溶解 ，透析法 除去 盐和杂质。通过琼脂 扩散试验测定纯化后的卵黄抗体效 价 １．４ 安 全性 试验 取 健 康 小 鼠 ２０只 ，随 机 分 为 试 验 组 和 对 照 组 ．试 验 组 灌服卵 黄抗体 １．０ｍｌ／只 ，对照 组灌 服生理 盐水 １．０ｍｌ／只 ．观 察 ７ｄ后 剖 检 小 鼠 ，观察 脏 器 病 变 １．５ 人 工感 染治 疗 试 验
鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体研制与应用
鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体研制与应用摘要:用鸭肝炎病毒(DHV)地方分离毒株HB98株经鸡胚连续传53~62代适应鸡胚的鸭肝炎病毒作为种毒,制备成弱毒疫苗和灭活疫苗分别免疫伊莎产蛋鸡,经3次免疫后,收获卵黄,测定病毒中和效价可达103以上,经30万只雏鸭临床应用,对未发病的雏鸭预防保护率达90%以上,发病鸭群治疗保护率达80%以上｡关键词:鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis, DVH);高免卵黄抗体;研制Development and Application of Egg Yolk Antibody for DHVAbstract: A master seed was prepared by 53~62 serial passage of duck hepatitis virus (DHV) strain HB98 in chick embryo and used to develop attenuated vaccine and inactivated vaccine of DHV. The egg yolk was collected after 3 immunizations of Isa chick. The virus neutralizing titer tested was above 103. According to the clinical application on 300 000 ducklings, the prevention rate of egg yolk antibody for healthy duckling was above 90%; and the cure rate of diseased ducking was above 80%.Key words: duck viral hepatitis(DVH); egg yolk antibody; development鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis,DVH)是引起小鸭高度致死性､传播迅速的病毒性疾病,主要感染5周龄以内的雏鸭,以2周龄内雏鸭最易感,对新生鸭可导致90%以上死亡率｡病鸭常在出现角弓反张症状后迅速死亡,病理剖检特点为肝脏肿胀与出血｡该病是危害养鸭业最严重的疾病之一[1-3]｡本试验通过采用分离的鸭肝炎病毒(DHV)地方毒株HB98株免疫产蛋鸡制备抗鸭肝炎病毒高免卵黄抗体,用于预防和治疗雏鸭的病毒性肝炎,获得了理想效果｡1 材料与方法1.1 试验材料鸭肝炎病毒HB98株:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所禽病室分离保存｡鸭肝炎疫苗:鸭肝炎病毒HB98株经鸡胚传53~62代,制备活疫苗和灭活疫苗｡鸡胚:武汉市新洲种鸡场伊莎种蛋,实验室孵化器孵化8~9日龄用于试验｡蛋鸡:武汉市新洲种鸡场90日龄伊莎商品蛋鸡,用于免疫鸭病毒性肝炎疫苗,制备高免卵黄抗体｡雏鸭:武汉市春江种鸭场种蛋孵化雏鸭2周龄｡1.2 高免卵黄抗体的制备与检验1.2.1 产蛋鸡的免疫90日龄伊莎蛋鸡用3~5倍量鸭病毒性肝炎活疫苗肌肉注射进行首次免疫,间隔2周再用其灭活疫苗免疫2次(间隔时间为2周),120日龄时开始收获鸡蛋,测定卵黄中的病毒中和抗体效价｡1.2.2 卵黄抗体的制备收集高免鸡产的蛋,4 ℃保存,分离卵黄,混合后置组织捣碎缸中捣碎,混合物用缓冲盐水(内含不超过0.2%的福尔马林作防腐剂)稀释,分装后置4 ℃保存,有效期为1年｡产品按常规方法作无菌检验和效力检验｡1.2.3 卵黄抗体效价检测(病毒中和试验) 用固定卵黄抗体稀释病毒方法测定鸡胚中的病毒中和指数｡将卵黄抗体用灭菌生理盐水作1∶4(V/V)稀释,DHVⅠ型强毒分别作10-2､10-3､10-4倍稀释,将卵黄抗体和病毒液按1∶1混合,25 ℃中和1 h,同时设不中和的病毒液作对照,对照组和中和组的病毒液每个稀释度分别接种6枚8~10日龄SPF鸡胚,37 ℃培养,观察96 h｡以10-3稀释度病毒中和组鸡胚全部存活､对照组鸡胚80%死亡为合格｡1.2.4 产品效力检验参照文献[4]的方法进行｡选择2周龄无母源抗体的雏鸭10只,肌肉注射高免卵黄抗体1.0 mL,另一组不接种卵黄抗体作对照,24 h后用103 LD50 DHVⅠ型强毒攻击每组雏鸭｡如果试验组80%雏鸭存活､对照组80%雏鸭发病死亡,则判定产品合格｡1.2.5 临床应用效果检验在不同地区､不同日龄的发病雏鸭群紧急注射高免卵黄抗体,2周龄以内雏鸭注射0.5 mL,2周龄以上雏鸭注射1.0 mL,注射后1周内观察记录发病死亡情况,同时设不注射卵黄抗体雏鸭作为对照｡2 结果与分析2.1 卵黄抗体的制备与检验结果2006~2007年共制备5批卵黄抗体共42.4万mL,免疫产蛋鸡100只,收集高免蛋10 600枚,经卵黄抗体效价检测和产品攻毒保护效力检测,全部合格(表1)｡2.2 临床应用效果观察由表2可见,用5批鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体对15群发病雏鸭进行紧急预防,共预防雏鸭38 400只,死亡2 634只,保护率达93.1%｡2.3 推广应用情况2006~2008年在潜江､云梦､仙桃､监利､武汉､大冶等市县推广应用30万羽份,未发病的雏鸭预防保护率达90%以上,发病鸭群治疗保护率达80%以上｡注射卵黄抗体后48~72 h控制死亡,发病鸭群越早注射卵黄抗体效果越好｡3 小结与讨论1)鸭肝炎(DH)是雏鸭的一种高度致死性､传播迅速的病毒性疾病,以肝炎为其主要特征｡该病可由3种不同类型的病毒引起,称为Ⅰ型､Ⅱ型和Ⅲ型鸭肝炎病毒｡相关资料报道和流行病学调查及病原分离鉴定证明,湖北省范围内的雏鸭主要是由Ⅰ型鸭肝炎病毒感染[3-5]｡本试验通过分离的鸭肝炎病毒地方毒株范围内的HB98株制备的活疫苗和灭活疫苗,免疫产蛋鸡制备抗鸭肝炎病毒高免卵黄抗体,通过定点观察和实地应用,预防治疗雏鸭的病毒性肝炎获得理想效果｡2)有关鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的制备国家目前没有质量标准,本试验参照文献[4]的方法结合本实验室实际,制定了产品的制备､检验规程(方法),通过对5批42.4万mL高免卵黄抗体检测,全部符合国际兽医局(OIE)推荐的技术标准｡证明鸭肝炎病毒HB98株是1株免疫原性较好的毒株｡3)雏鸭的病毒性肝炎流行病学调查表明,该病一年四季均可发生[3],湖北省以初夏至秋末多发,这可能与湖北省雏鸭孵化习惯有关｡在防控中应用高免卵黄抗体时应注意以下几点:①早发现､早诊断､早治疗;②活疫苗免疫失败后可用高免卵黄抗体控制或减轻死亡;③注射高免卵黄抗体时为防止局部感染,可同时投喂2~3 d 的广谱抗生素效果更好｡参考文献:[1] [美]卡尔尼克B W.禽病学[M].第十版.高福,刘文军,译.北京:中国农业出版社,1999.840-850.[2] 王明俊.兽医生物制品学[M].北京:中国农业出版社,1997.677-680.[3] 白文彬,于康震.动物传染病诊断学[M].北京:中国农业出版社,2002.289-291.[4] 殷震,刘景华. 动物病毒学[M].北京:科学出版社,1985.426-428.[5] 杨峻,刘泽文,甘伏生,等.免疫雏鸭暴发鸭传染性肝炎的诊断与防制[J].中国兽医科技,2001(6):36-37.。
卵黄抗体可行性研究报告
卵黄抗体可行性研究报告一、研究背景卵黄抗体是动物免疫学中的一种重要抗体，它可以被用来检测特定的抗原，也可以用来治疗一些疾病。
随着科学技术的进步，人们对卵黄抗体的研究也越来越深入，目前已经在一些医学领域得到了广泛应用。
在这种背景下，对卵黄抗体的可行性进行深入研究，将有助于促进其在临床应用中的进一步发展。
二、研究目的本次研究旨在探讨卵黄抗体在临床应用中的可行性，包括其在治疗和诊断领域的应用潜力，以及相关技术和生产工艺的研究现状。
通过该研究，将为卵黄抗体的进一步应用提供可靠的科学依据。
三、研究内容1. 卵黄抗体的生物学特性和应用潜力通过文献调研，归纳总结卵黄抗体的生物学特性，包括其来源、结构、功能等方面的信息。
同时，分析卵黄抗体在治疗和诊断领域的应用潜力，探讨其在不同疾病治疗和疫苗生产中的优势和局限性。
2. 卵黄抗体生产技术的研究现状对卵黄抗体的生产技术进行详细的调研和整理，包括克隆技术、重组技术、基因工程技术等方面的研究进展。
重点关注新技术在提高卵黄抗体生产效率、降低生产成本等方面的应用情况。
3. 卵黄抗体在临床应用中的案例分析通过查阅相关文献和临床报道，总结和分析卵黄抗体在临床应用中的成功案例，包括其在治疗癌症、传染病和疫苗生产中的应用情况。
通过案例分析，评估卵黄抗体在临床应用中的可行性和前景。
四、研究方法1. 文献调研法通过检索相关数据库和文献，收集和整理卵黄抗体的生物学特性、生产技术和临床应用方面的资料，并进行系统综合分析。
2. 实验研究法在对卵黄抗体的生物学特性和生产技术进行综合分析的基础上，开展相关实验研究，验证其在临床应用中的可行性。
3. 案例分析法通过查阅临床案例和相关文献，对卵黄抗体在临床应用中的效果进行案例分析，以验证其在临床应用中的可行性。
五、预期成果通过本次研究，预期取得以下成果：1. 归纳总结卵黄抗体的生物学特性和应用潜力，为其在临床应用中的进一步开发提供科学依据；2. 分析卵黄抗体生产技术的研究现状，为技术改进和提升生产效率提供参考；3. 总结并分析卵黄抗体在临床应用中的成功案例，评估其在不同领域的可行性和前景。
基于动物疾病防治中卵黄抗体的应用研究
X u m u s h o u y i通常情况下，对于卵黄抗体性能来说，呈现出良好的稳定性特征，可以在受到病毒、细菌影响导致的疾病防治过程中发挥出很大的作用，具有的优势十分明显。
得益于现阶段医学技术、治疗方案的快速进步影响，使卵黄抗体得到了很大的关注与重视，有利于增强动物疾病防治工作的实际效果。
实际上，生产卵黄抗体的经济成本较低，能够达到更多的产量。
通过合理运用卵黄抗体，能够获得更多的经济收益，提升了动物疾病防治工作的效率。
一、卵黄抗体获取的说明对于卵黄抗体而言，存在于很多两栖动物、爬行动物以及鸟类等动物的卵黄中，其中包含了免疫球蛋白。
由于被抗原所干扰，使动物体中的免疫细胞得以被激活，让免疫球蛋白开始分泌，产生相应的抗体。
鉴于抗体的特异性特征十分明显，在动物体中容易被抗原、抗体之间的融合所干扰，形成了一定的免疫功能。
如果动物机体受到异物伤害的时候，将使免疫功能日渐消失，让动物机体的情况处于被监控的状态。
比如，存在微生物、寄生虫，在异物中形成的毒素能够实现中和，保证动物机体的健康，并形成相应的卵黄抗体。
例如，对于母鸡来说，抗原得到刺激作用影响之后，使母鸡的体中产生了抗体，将免疫球蛋白的特异性存储并转移至卵黄当中，产生相应的卵黄抗体。
由此可见，卵黄抗体的效果非常明显，不但耐热性与活性良好，而且拥有较强的抵抗力与温度适应能力，而酸碱值也非常稳定。
并且，卵黄抗体获得的经济成本是较低的，母鸡在饲养的时候十分简单，处于很短的生长周期中，通过得到卵黄抗体能够规避采集血液的情况，有助于控制卵黄抗体的成本，提高对相关资源的利用率，不再受到空间、时间方面因素的束缚，完成了抗体采集的任务。
二、动物疾病防治中卵黄抗体的具体应用1、注重卵黄抗体在细菌感染方面的防治运用将卵黄抗体运用到细菌感染防治过程中，以病原菌的细胞壁作为主要的位置，实现和卵黄抗体有效粘附结合，让病原细胞缺失一定的完整性，并且妨碍到病原菌的生长情况。
与此同时，细菌菌毛上同样包含了卵黄抗体，如此可以使细菌带给肠道黏膜上皮细胞的伤害减小。
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高免卵黄抗体应用研究现状及发展趋势李文学,青学刚,刘刚 (四川省农业科学院蚕业研究所,四川南充637000)摘要 介绍了近年来卵黄抗体在家禽、家畜、水产、蚕桑等养殖业方面的应用研究进展,提出了卵黄抗体在动物疫病防控方面的可行性和发展方向。
关键词 卵黄抗体;免疫;应用研究中图分类号 S852.4+3 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)24-12981-02Advances i n Applica tion Studies and D evelopm en t Trend of H igh T iter Egg 2yolk I mm unoglobuli n sL IW en 2xue et a l (Sericultural Research I nstitute,Sichuan Academy of Agricultural Sciences,Nanchong,Sichuan 637000)Abstract The advances in app lication studies of egg 2yolk i mmunoglobulins in the field of poultry,ivest ock,aquatic and silkwor m were intro 2duced.A t the same ti m e,the feasibility of using egg 2yolk i m munoglobulins in the field of ani mal disease p reventi on was put f or ward,and the de 2velopment trend of the egg 2yolk i m munoglobulins in silkwor m was p rospected .Key words Egg 2yolk i m munoglobulin;I mmunology;App licati on study基金项目 四川省财政育种工程2009年度青年基金项目(2009QNJJ 2028)。
作者简介 李文学(1981-),男,四川成都人,硕士,助理研究员,从事蚕桑生物技术研究。
收稿日期 2010205204 家蚕作为鳞翅目昆虫的模式生物,目前不仅在遗传学、生理病理学等基础理论研究方面对其有深入的研究,而且作为一种重要的经济类绢丝昆虫、吐丝结茧,为人们提供了环保、舒适的丝绸面料。
然而在广大农村,各种病虫害严重危害了家蚕的健康,蚕病引起的经济损失相当严重。
在现阶段,蚕病防治仍采取“预防为主、综合防治”的基本方针,对病毒(核型多角体病毒、质型多角体病毒、浓核病毒等)、细菌、真菌等病原微生物引起的病害缺乏针对性以及强效性药物治疗。
作为种养产业的家禽、家畜、水产业,在由病原微生物引起的重大传染病预防、防治方面却成功取得了实质性的药物治疗成绩,如卵黄抗体(Egg Y olk I m munogl obulins,I gY )是当今生物科学研究中的重大发现之一[1]。
自1893年Kle m 2perer 首次报道鸡蛋中存在抗体以来,人们便对I gY 进行不断深入地研究,作为被动免疫方式使用的I gY,在家禽、家畜、水产等养殖业的重大传染病控制和治疗方面均取得了成功,发挥了重要作用。
家蚕不同于高等动物的免疫体系,有其独特的免疫系统和免疫机制。
家蚕无T 和B 淋巴细胞,无免疫球蛋白及完整的补体系统,缺乏特异的抗原-抗体反应。
在家蚕病害防治方面,通过被动免疫方式,添食或注射高免I gY 研究能否取得成功值得探索。
1 I g Y 的特性与作用机理 运用I gY 对发育成熟的母鸡进行免疫学注射试验,15d 左右即可产生特异性卵黄免疫球蛋白,且较快达到效价最高值,产生的免疫应答效价可维持数月或1年。
鸡的I gY 类似于哺乳动物的免疫球蛋白G ,分子量约180k D 。
I gY 含氮量为14.8%,其氨基酸组成、含糖量与人和兔的免疫球蛋白存在显著差异。
I gY 在常温下可保持6个月左右的活性,性能比较稳定;在4℃条件下可保存6～7年,活性下降不超过5%。
I gY 可耐热、耐酸碱,在pH 值4.0～11.0时稳定,在pH值低于3.0和高于12.0时,其活性迅速降低;在65℃高温时,I gY 的活性亦可保持24h 以上,70℃加热90m in 后,其活性迅速下降。
而且,I gY 溶液在39.2×107Pa 时仍保持活性,这表明I gY 有较强的抗高压能力。
此外,I gY 可抵御来自幼龄动物的胃酸屏障以及肠道环境中胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等的消化降解作用。
I gY 是动物机体内免疫应答系统所产生的特异性抗体,它能抵御相应的病原微生物,保护生物机体健康安全,通过以下几方面机理发挥作用[2]:①特异性I gY 蛋白能直接粘附于其病原菌的细胞壁上,改变病原菌细胞的完整性,直接抑制病原菌的生长。
②I gY 蛋白可粘附于细菌菌毛上,使病原菌不能粘附于肠道粘膜上。
而诸如大肠杆菌、沙门氏菌等病原微生物首先需要粘附于动物肠道粘膜细胞上,才能进行增殖病原、毒素产生及感染动物的过程。
③一部分特异性I gY 蛋白在动物肠道内环境被消化酶消化降解为小结合片段(B inding frag ment ),这些片段含有抗体的末端高度可变的小肽,即Fab 部分。
这些小肽先是很容易地被肠道所吸收,进入血液后与特定病原菌的粘附因子结合,使得该病原菌不能粘附于动物体内的易感细胞,而失去病原菌致病性,从而对非肠道病原菌起到抑菌效果。
同时,这些Fab 部分还能与被感染动物机体内血液中的球蛋白末端相结合,使机体免被破坏,而特异性I gY 蛋白的稳定区或Fc 部分则被留在肠道内。
2 I g Y 的应用2.1 I g Y 在禽病防治中的应用 目前国内应用较广泛的I gY 有:抗鸡脑脊髓炎病、抗鸡病毒性关节炎、抗鸡传染性喉气管炎高免I gY 、抗传染性法氏囊病、抗鸡新城疫、抗鸡减蛋综合征I gY 、抗鸭疫里氏杆菌病、抗鸭病毒性肝炎、抗番鸭细小病毒、抗小鹅瘟等I gY 。
I gY 还应用于一些疑似病、新病的预防、治疗研究中。
范玉芳等[3]选择临床无白痢的鸡场,用从11个发病鸡场收集分离的法氏囊病强毒制备的灭活苗,采用皮下注射接种方式,剂量为2.5m l/只,每10d 注射接种1次,直至抗体效价达1∶128以上时,收集制备卵黄液,经无菌及安全检测合格后供试验备用。
结果表明,注射鸡体12h 后开始有抗体产生,体内可维持5～7d,至第8天时抗体全部转阴。
对缺乏母源抗体的雏鸡,应用该抗体进行早期预防,可提高被动免疫水平。
早期仅使用0.5ml/只即可起到紧急预防作用,治愈有效率高达91%以上,这与王泽霖等[4]的研究结果吻合。
I B D和ND是养鸡业的两大重要传染性疫病,其混合感染率高达70%～80%,混合感染后可导致鸡群发病死亡率高达80%以上。
抗I B D和ND的二联抗体能起到同时预防治疗这2种疫病的作用[5]。
2.2 I g Y在家畜养殖中的应用 在仔猪饲养环节中,由肠毒素型大肠杆菌引起的仔猪腹泻是一种高发病率疾病,生产上采取防治方法主要是加强综合性预防措施,以及使用大肠埃希氏菌多价苗或基因工程苗免疫接种妊娠母猪和给仔猪口服高免血清,以保护仔猪免受大肠埃希氏菌的危害。
但问题是通过母乳自身体内的抗体常不能起到有效保护仔猪的效果,服用高免血清成本过高,且易导致过敏反应。
特异性高免I gY的应用则能有效规避这些弊端。
肖驰等[6]通过给初生仔猪投服抗猪大肠埃希氏菌I gY,7日龄的仔猪腹泻发病率由47.7%下降至9.4%和18.6%,8～12日龄仔猪腹泻率也比对照下降了9.5%和12.1%。
试验结果显示,鸡抗猪大肠埃希氏菌K88、987P、K99和F41I gY在防治仔猪大肠埃希氏菌性腹泻病方面成绩显著。
通过被动免疫方式产生的特异I gY亦可预防牛轮状病毒对小鼠的感染。
Yokoya ma H 等制备的抗都柏林沙门氏菌I gY和抗鼠沙门氏菌I gY效价分别为1∶5000和1∶1000。
用该抗体添食给犊牛使用,试验结果表明,效价为1∶250或小于1∶250的抗鼠沙门氏菌抗体犊牛死亡率为100%,效价为1∶1000和1∶500的抗鼠沙门氏菌抗体的犊牛死亡率为33%;效价为1∶2500和1∶5000的抗都柏林沙门氏菌抗体的死亡率仅为40%和0,试验中设置的对照组死亡率均为100%。
该试验结果显示,随着I gY效价的提高,犊牛出现腹泻和高热发病症状的时间延迟,且病症越轻,排泄物中的致病细菌数越少,发病率与抗体效价的高低呈现吻合的量效关系。
同时,还表明该I gY虽不能完全治疗该病,但可以有效降低由该病导致的死亡率。
2.3 I g Y在水产、家蚕和其他方面的应用 在水产和植物学领域,I gY也有相应的研究报道。
毛宁等[7]利用自制的抗CH2108、PC2007[温和气单胞菌(A.sobrio)],SG2001[嗜水气单胞菌(A.hydrophila)],FC2007[豚鼠气单胞菌(A.caviae)]四联免疫I gY,给试验病鳖注射,注射抗体后2、3d仍有死亡,7d 后仍存活的病鳖病情好转,治愈率36.6%,虽然治疗效果不够显著,有待进一步提高,但其方法简单,成本低廉,值得深入研究。
在水稻白叶枯Z J2173菌病防治研究方面,制备的水稻白叶枯菌的I gY起到了显著的防治效果[8]。
家蚕浓核病是家蚕病毒病的一种,而家蚕病毒病是家蚕的主要病害,截至目前,对家蚕病毒病的防治仍以常规的消毒防病的单一预防措施为主,缺乏有效地针对某种特定病原微生物的药物治疗。
杨琼等[9]用家蚕浓核病病原(Bo mbyx mori dens onucleo2 sis virus,BmDNV)免疫蛋鸡收集的卵黄,通过体外中和与体内中和生物试验,测定鸡免疫卵黄对DNV的防治效果。
结果表明,免疫的鸡卵黄能特异性地阻断DNV感染家蚕,达到预防的目的,而非免疫卵黄未表现有阻断作用。
何丽华等[10]制备的抗家蚕I gY与毒对饲养比较,发病率降低30%左右,表明I gY对家蚕血液型脓病有预防作用。
3 高免I g Y在家蚕中的应用前景与发展趋势 畜禽、水产包括家蚕等动物在内,每种动物都易受许多种属、类别的病原微生物感染、寄生。
家蚕易受病毒、细菌、真菌、微粒子等病原感染,寄生时,仅病毒病就可分为中肠性脓病、血液性脓病、脓核病毒病、疫病种类繁多,混合感染日趋严重。
因此,多联高免I gY是被动免疫及疫病防治发展的趋势。
杨琼等和何丽华[9-10]分别对家蚕脓核病毒,家蚕核型多角体病毒进行了I gY制备工作,并取得了显著的预防效果。