鸡IBD和ND高免蛋卵黄抗体的测定
鸡卵黄抗IBD免疫球蛋白的提取与应用研究
鸡卵黄抗IBD免疫球蛋白的提取与应用研究
刘旭光;蒋长苗;丁建平
【期刊名称】《中国家禽》
【年(卷),期】1998(20)9
【摘要】对商品代蛋鸡进行强化免疫，获得抗鸡传染性法氏囊病琼扩效价为１∶
１２８～２５６的高免卵黄原液。
将免疫球蛋白海藻酸钠提取法与蛋白质中性盐盐析分离法合并起来，用于上述卵黄原液中免疫球蛋白Ｇ的提取。
先后对三批各１０００ｍＬ卵黄原液进行了提取，分别获得９．８５，１１．８４和１１．９５ｇ冻干ＩｇＧ，平均为１０．８８ｇ。
将提取的冻干ＩｇＧ用生理盐水按１∶１００比例（Ｗ／Ｖ）稀释配制成治疗用ＩｇＧ液，经测定其抗ＩＢＤ琼扩效价为１∶１２８。
按０．２ｍＬ／只的剂量肌注治疗人工发病ＩＢＤ病鸡，治愈率为９３．３％，自然发病鸡的治愈率为９６．８％。
【总页数】3页(P12-13)
【关键词】鸡;卵黄;传染性法氏囊病;免疫球蛋白
【作者】刘旭光;蒋长苗;丁建平
【作者单位】安徽农业大学畜牧水产学院
【正文语种】中文
【中图分类】S858.315.3;S852.4
【相关文献】
1.鸡卵黄免疫球蛋白的提取及体外抑菌活性研究 [J], 陈希文;郭晓萍;房春林;何念;王雄清;赵利红;钟兴莲
2.鸡卵黄免疫球蛋白Y的提取及防治感染性疾病的研究进展 [J], 张文元;杨亚冬;何浙生
3.自制抗IBD高免卵黄液防治IBD效果 [J], 张德龄;贾俊元
4.对鸡卵黄免疫球蛋白两种提取方法的比较 [J], 皮晋魁;张焕容
5.抗鸡IBD高免蛋黄液治疗鸡IBD的临床推广应用研究报告 [J], 张次位;冯文霞;郑二欣;兰国俊;张和平;马桂变;赵齐鹏;石奎林
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IBD的防治
鸡传染性法氏囊病的防治[/M]一、鸡传染性法氏囊病（IBD）概述是IBDV引起幼鸡的一种急性、高度接触性传染病。
发病率高、病程短。
主要症状：腹泻，极度沉郁，法氏囊和肾脏发生病变，腿肌、胸肌出血，腺胃和肌胃交界处条状出血为特征性病变。
本病的影响不仅在于强毒对鸡的攻击，引起的高发病率和死亡率，还在于感染鸡的日龄大小，日龄越小，免疫抑制发生越严重。
二、IBD病原鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)属于双股双节RNA病毒科，由于它的双节结构特点，决定了本病毒较易变异。
IBDV有两个血清型，I型和II型，对鸡造成威胁的是I型，所以IBD法氏囊疫苗也是用I型的标准毒株制备的，过去一致认为法氏囊病毒不存在抗原性的差异，这两年法氏囊病毒的变异株和超强株的出现，用传统的疫苗根本防不住。
这种变异株与制备疫苗所选用的标准毒株核苷酸的同源性为70%左右，一旦鸡场中存在这种毒株并被其感染的话，仍然会发病。
IBDV很稳定，不易被杀死，耐酸性消毒药，耐反复冻融，耐热，耐阳光及紫外线照射，56℃加热5小时仍存活，60℃可存活0.5小时，70℃则迅速灭活。
病鸡舍中的病毒可存活100d以上。
病毒不耐碱，pH12时病毒受抑制。
常用消毒药有复合碘制剂、0.05%氢氯化钠能灭活。
三、IBD发生的诱因1、IBD一般多在在春秋发生由于春秋两季易发球虫、鸡住白细胞原虫病，这两种病都严重影响IBD疫苗的免疫效果，易发球虫病的鸡群易发IBD。
另外，这个季节饲料中曲霉菌比较多，也影响鸡了IBD的免疫效果。
2、饮水免疫的鸡群易发IBD主要受进入鸡体的有效疫苗量的影响，饮入的有效量多，则免疫效果确实，饮入的有效量少，则免疫效果不好，易发生IBD。
3、母源抗体对IBD的影响鸡IBD的母源抗体水平要求要比其他的病更重要。
一般种鸡场为了后代鸡苗能有很高的母源抗体水平，在鸡开产前和开产后200d左右分两次注射IBD油苗，以确保鸡苗的母源抗体水平能维持到15d左右，而肉鸡的抗体水平估计超不过12d。
蛋鸡免疫和抗体检测不容忽视
蛋鸡免疫和抗体检测不容忽视摘要从2005年底到2006年初，受禽流感的影响，国内蛋鸡行业一直处于低迷状态；而一些主要蛋鸡养殖区“低致病性禽流感H9亚型”或“非典型性新城疫”的发生，也成为困扰蛋鸡行业健康发展的主要障碍。
针对这种情况，北京市华都峪口禽业有限责任公司通过电话了解、区域调查、以及兽医专家现场诊断等方式，对北京、天津、河北、山东、宁夏等14个省、市、自治区的1000多家养殖户进行调查，发现了一些禽病的新特点。
流行特点和病理变化所调查地区以上两种病均有不同程度的散发，以180~300日龄的产蛋高峰鸡为主。
传播较快，病程40天左右，产蛋下降严重，康复后产蛋量能恢复到原来的90%，死亡率在5%~30%之间。
气管黏膜充血、出血；皮下、腹腔、心冠脂肪有出血点；腺胃出血不常见，共性病变主要集中在生殖系统:卵泡充血、出血、变形或变性，破裂形成卵黄性腹膜炎，输卵管内有白色胶冻样或干酪样物。
采血检测发病前后鸡群的抗体水平，发现刚发病时新城疫或禽流感H9亚型抗体水平低，大部分鸡只抗体水平在保护值以下，抗体滴度分散，离散度在5个以上。
病情恢复时的抗体上升3~5个滴度以上，且高于免疫所产生的抗体。
原因分析从上述流行特点、临床症状和病理变化分析，所发生的疾病可能为“低致病性禽流感H9亚型”或“非典型性新城疫”。
其原因如下：造成“低致病性禽流感H9亚型”的原因是，忽视H9的免疫。
有的养殖户只免H5亚型禽流感，不免H9亚型，以为免了H5N1，也就免了H9；或者H9亚型免疫次数少，只在产蛋前免疫1~2次，而产蛋后怕影响产量就不再免疫，造成抗体水平低，保护力不够。
国家对高致病性禽流感（H5N1）高度重视并大力宣传，造成部分养殖户产生误解，认为H9的免疫不重要。
此外，有些地区买不到禽流感H9单苗。
造成非典型性新城疫的原因是：认识不足，不知道新城疫保护需要体液免疫+局部免疫。
很多养殖户不进行抗体监测或者抗体监测不及时。
免疫方法不得当，只饮水、点眼、或注射免疫。
鸡抗猪瘟高免卵黄抗体的研制
鸡抗猪瘟高免卵黄抗体的研制3边传周 邢 钊 李 明 于新和 藏金灿 任 敏 (郑州牧业工程高等专科学校基础部,河南450008)宋庆华 侯艳让 (河南省郑州市畜牧兽医工作站,450002) 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病。
近年来,尽管普遍对猪群用猪瘟兔化弱毒苗进行免疫接种,但免疫失败的现象时常发生,给养猪业造成了很大的经济损失。
为了找到一个治疗猪瘟的经济有效方法,我们开展了鸡抗猪瘟高免卵黄的研制。
1 材料与方法111 试验动物:186日龄罗曼商品蛋鸡,杜洛克仔猪均由郑州牧业工程高等专科学校微生物学教研室饲养。
112 疫苗及毒株 猪瘟兔化弱毒苗由农业部郑州生物药品厂生产;石门系猪瘟强毒购自中国兽药监察所。
113 免疫方法11311 基础免疫 进行二次,第一次每羽肌注猪瘟兔化弱毒苗5头份,7天后,第二次每羽肌注猪瘟兔化弱毒苗10头份。
11312 加强免疫 基础免疫后10天,进行加强免疫,每次间隔10天,共进行3次。
第一次每羽肌注猪瘟血毒2m l,第二次注215m l,第三次注3m l。
114 猪瘟高免血清 由郑州牧业工程高等专科学校微生物学教研室研制,用正向间接血凝试验检测猪瘟抗体效价在1∶32以上。
115 高免卵黄抗体监测 在最后一次免疫后15天,随机取5枚高免蛋,无菌抽取蛋黄各3m l,分别用等量pH712PB S混匀,然后各加入6m l的氯仿,室温下感作30m in, 3000r m in离心20m in,分成三层取上清液分别作猪瘟正向间接血凝实验,检测猪瘟抗体效价。
收集效价在1∶32以上的蛋作高免蛋。
116 高免卵黄抗体制备 用1%新洁尔灭消毒蛋壳,在无菌条件下收集卵黄,置组织捣碎机中用3000r m in匀浆1m in,加等量灭菌生理盐水搅匀后分装于灭菌玻璃瓶中,加青霉 3河南省教委自然科学基金资助研究项目,编号:97230018 收稿日期:1998210211素、链霉素各2000I U(Λg) m l进行常规安全性和无菌检验。
宁夏地区部分蛋鸡场新城疫卵黄抗体效价的检测与分析
宁夏地区部分蛋鸡场新城疫卵黄抗体效价的检测与分析张东涛;孟凡伟;周学章【摘要】本研究旨在检测宁夏地区部分蛋鸡场新城疫卵黄抗体效价的水平及差异,通过血凝试验检测本实验室制备的新城疫病毒抗原的效价并校正血凝单位,血凝抑制试验检测宁夏地区14个蛋鸡场140枚鸡蛋卵黄抗体的效价.试验结果显示,新城疫病毒的血凝效价为8log2,卵黄抗体效价平均在10log2～13log2.因此,宁夏地区蛋鸡场新城疫卵黄抗体效价较高,研究结果为了解宁夏地区新城疫防治的效果提供了试验数据.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2016(000)003【总页数】4页(P39-42)【关键词】宁夏;新城疫;卵黄抗体;血凝试验;血凝抑制试验【作者】张东涛;孟凡伟;周学章【作者单位】宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川750021;宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川750021;宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川750021【正文语种】中文【中图分类】S858.31鸡新城疫（Newcastle Disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV）引起的一种急性、高度接触性传染病,被世界动物卫生组织（O IE）列为A类传染病，是危害我国养禽业的重要疫病[1-2]。
自20世纪80年代以来，我国对新城疫采取了全面免疫的防控策略，但不能忽视的是，新城疫仍然是危害我国养禽业的重要疫病，在某些地区仍然持续存在，个别地区呈地方性流行，在临床上还出现了宿主范围扩大、免疫带毒现象普遍等新的流行特征[3]。
范文颖等[4]的研究表明，新城疫或禽流感疫苗二免21 d后（在有基础免疫的情况下）卵黄抗体水平与血清抗体水平接近，卵黄抗体水平直接反映了血清抗体水平的高低。
在蛋禽疾病防治中，为了及时掌握禽流感、新城疫、产蛋下降综合征等疫苗的免疫效果，了解产蛋家禽抗体水平的高低，以便制定正确的免疫程序，临床上需要对免疫家禽的卵黄抗体水平进行多次监测。
卵黄替代血清检测蛋鸡H_(5)、H_(7)免疫抗体试验
与 禽业技术|资源育繁卵黄替代血清检测蛋鸡出、H7免疫抗体试验厉磊 秦燕刘维红王冠东邵春雷王雷之(山东省临沂市畜牧发展促进中心276000)摘要：用卵黄和血清样本监测巴、H 7亚型禽流感抗体，对两种结果进行相关性试验。
对180-190日龄蛋鸡免疫重组禽流感(H 5+H 7)三价灭活疫苗，免疫后对固定鸡群采样(血清和鸡蛋)，进行免疫抗体监测。
结果表明，免疫28d 后，卵黄和血清HI 抗体效价呈正相关性，差异不显著。
表明用卵黄替代血清检测蛋鸡高致病性禽流感免疫抗体是一种简单、有效的方法。
关键词：卵黄；血清；H s 、H 7亚型禽流感；免疫抗体临沂市是畜牧业大市，其中蛋鸡养殖是部分农民发家致富 的重要手段。
禽流感是由A 型禽流感病毒引起的一种高度接触 性、急性传染病。
H s 、H 7亚型高致病性禽流感给养禽业造成的经济损失巨大，被我国列为一类动物疫病。
2004年，我国开始 对H 5亚型高致病性禽流感实施强制免疫政策，2017年又对H 7 亚型实行强制免疫。
如何评价疫苗免疫效果尤为重要。
每年本市根据省兽医主管部门(省畜牧兽医局)动物疫病监测计划下 达本行政区域的动物疫病监测计划。
鸡高致病性禽流感免疫效果的监测，需要按一定比例采样，抽取鸡血析岀血清后，做血凝和血凝抑制试验来判定结果。
采取鸡血需要专业技术人员操作，并且需要采取必要的防护隔离措施，消耗大量的人力、物 力。
并且捉鸡、采血使鸡产生较大的应激反应，对蛋鸡产蛋有一定的影响。
母鸡以特定抗原免疫后，能产生相对应的特应性 抗体，抗体除存在于血清中外，还可以储存于卵黄中，称为卵黄抗体。
因此，卵黄抗体与血清抗体应存在一定的相关性，若 能收集蛋样检测卵黄抗体，则可以减少鸡群采血应激|1],而且操作更为方便。
鉴于此，本中心于2019年10-12月，选择了 部分蛋鸡场进行高致病性禽流感免疫注射和抗体水平检测， 并对血清抗体效价和卵黄抗体效价进行了比较分析，为生产实践中产蛋鸡卵黄抗体检测H s 、H 7亚型禽流感免疫抗体提供依据。
蛋鸡抗体检测流程
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简述鸡病毒性免疫抑制疾病的诊断与防治
简述鸡病毒性免疫抑制疾病的诊断与防治
鸡病毒性免疫抑制疾病（简称IBD）是一种由病毒引起的疾病，主要影响鸡的免疫系统，导致机体免疫力下降。
IBD病毒具有高度的传染性和致病性，极易在养鸡场内传播，
造成严重的经济损失。
本文将介绍IBD的诊断和防治措施。
1. 诊断
（1）症状：IBD病毒主要攻击鸡的淋巴组织和细胞，导致机体免疫功能受损，病鸡出现体重下降、腹泻、羽毛脱落、发育迟缓等症状，严重时会出现群体死亡现象。
（2）实验室检测：通过检测病鸡的血清学、病理学和病毒学特征来确定IBD的诊断。
常用的检测方法有ELISA、PCR、病理学检查等。
2. 防治措施
（1）生物安全：加强养殖环境卫生，保持养鸡场清洁卫生，避免交叉感染。
对新进
鸡群应检疫后入场。
（2）疫苗接种：目前可用的IBD疫苗包括生活疫苗和灭活疫苗。
疫苗接种可以有效
预防IBD的发生和传播。
但是疫苗接种前需要注意疫苗品种的选择和接种时间，选择合适
的免疫方案，加强疫苗免疫监测等。
（3）营养调理：IBD病毒可以导致鸡的消化功能受损，影响饲料的吸收利用，因此需要对其饲料进行适当的营养调整和补充营养元素。
（4）药物治疗：对已经感染的鸡可以进行药物治疗，以减轻症状和抑制病毒复制。
一般采用抗生素、解热镇痛等药物治疗。
总之，IBD病毒性免疫抑制疾病的防治需要多种措施的综合应用，包括生物安全措施、疫苗接种、营养调理和药物治疗等。
为了减少疫情的发生和传播，需要加强养殖管理，提
高养鸡场的基本卫生条件，增强全员的防疫意识。
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鸡IBD和ND高免蛋卵黄抗体的测定
田 冰
(郑州牧业工程高等专科学校,郑州450008)
鸡传染性法氏囊病(IBD)和新城疫(ND)是养鸡业两大烈性传染病。
特别是IBD,自1989年以来在我国各地呈持续性暴发流行,给养鸡业造成巨大损失,而利用高滴度的卵黄抗体对易感鸡进行被动免疫或对发病鸡进行特异性治疗,是防制本病的重要措施。
为提高IBD、ND的母源抗体水平,掌握卵黄抗体消长规律,并为保护雏鸡和制备双价高免卵黄抗体提供数据,进行了此项试验。
1 材料和方法
1.1 实验鸡
成年商品罗斯蛋鸡200只,曾按常规进行MD、ND免疫。
ND血凝抑制(HI)抗体滴度为7log2,IBD琼扩抗体阴性。
1.2 疫苗
IBD弱毒疫苗分别为吉林生物制药厂和郑州生物制药厂生产。
IBD-ND油乳剂灭活二联疫苗由河南省农科院畜牧兽医研究所提供。
1.3 免疫方法
首次免疫用IBD弱毒疫苗4羽份饮水,同时用IBD-ND灭活二联疫苗皮下注射1ml。
首免后1周进行二免,即用IBD弱毒疫苗10羽份饮水,同时用灭活二联疫苗皮下注射1.5ml。
1.4 抗体测定
首次免疫前和免疫后1,2,3,4,5周及2个月、4个月分别收集试验鸡所产的蛋,测定其IBD 和ND卵黄抗体。
IBD卵黄抗体的测定用琼扩法,琼脂板采用含有8%氯化钠的磷酸盐缓冲液100ml加入1g优质琼脂粉煮沸溶制而成的,卵黄用生理盐水倍比稀释,操作和判定按常规方法进行。
ND卵黄抗体的测定用β-微量血凝抑制(HI)试验。
IBD抗原和阳性血清由哈尔滨兽医研究所提供,ND浓缩抗原及阳性血清由河南农业大学传染病组提供。
每次试验随机抽取鸡蛋12枚。
2 结果
2.1 IBD抗体测定结果
免疫前所有实验鸡的卵黄IBD琼扩抗体均为阴性。
首免后1周个别鸡(2/12)出现低滴度抗体(1∶2)。
首免后2周除4只鸡蛋仍无可测性卵黄抗体外,其余8只均已出现卵黄琼扩抗体,且已达1∶128以上。
首免后4～5周卵黄抗体达最高峰,半数以上的卵黄抗体滴度在1∶512以上,并维持2个月以上。
免疫后4个月仍维持在1∶256～512。
2.2 新城疫HI抗体测定结果
免疫前鸡群的新城疫卵黄HI抗体滴度在7 log2左右。
油乳剂灭活二联苗免疫后1周,抗体水平无明显变化,免疫后2周HI抗体明显上升(9 log2),免疫后3周达11log2以上,并维持2个月。
免疫后4个月略有下降,但仍维持在10log2左右。
3 小结和讨论
产蛋鸡IBD弱毒疫苗饮水同时用油乳剂灭活苗免疫后1
周,几乎没有可测性IBD卵黄琼扩抗
体出现。
再次免疫后(首免后2周)有66.6%的鸡
出现1∶16以下的卵黄琼扩抗体。
免疫后3周均
达1∶128以上,免疫后4个月仍维持在1∶256以
上。
因此,为了获得高滴度的IBD卵黄抗体应对
产蛋鸡同时用IBD弱毒疫苗和油乳剂灭活疫苗分
别进行两次免疫,间隔1周。
同时,根据卵黄抗体
消长规律,最好在免疫后4周,至少也要到免疫后
3周再开始收集鸡蛋,这样才能保证用于孵化或
制备高免卵黄抗体的鸡蛋含有足够高的抗体。
经过新城疫Ⅱ系和Ⅰ系疫苗免疫过的成年产
蛋鸡,再用IBD-ND油乳剂二联苗免疫后,1周
内ND的HI抗体滴度无明显变化;免疫后2周
(二免后1周)则明显上升,由免疫前的7log2上
升至9log2;免疫后3周上升至11log2,并维持2
个月以上;至4个月时仍维持在10log2左右。
这
种具有高抗体的种蛋所孵出的雏鸡,其新城疫的
首免时间应适当推迟为宜。
另外,由于条件所限,本项试验未能对高免鸡
所产的蛋进行孵化,进而测定雏鸡的母源抗体消
长规律,还有待进一步研究。
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2
3
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河南农业科学。