酶工程七到十章问答

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第一章1.简述酶与一般催化剂的共性以及作为生物催化剂的特点共同点:只能催化热力学所允许的的化学反应,缩短达到化学平衡的时间,而不改变平衡点:反应前后酶本身没有质和量的改变:很少量就能发挥较大的催化作用:其作用机理都在于降低了反应的活化能。

酶作为生物催化剂的特点:1.极高的催化率;2.高度专一性;3.酶活的可调节性;酶的不稳定性。

5.酶失活的因素和机理。

酶失活的因素主要包括物理因素,化学因素和生物因素物理因素1热失活:热失活是由于热伸展作用使酶的反应基团和疏水区域暴露,促使蛋白质聚合。

2冷冻和脱水:很多变构酶在温度降低是会产生构象变化。

在冷冻过程中,溶质(酶和盐)随着水分子的结晶而被浓缩,引起酶微环境中的pH和离子强度的剧烈改变,很容易引起蛋白质的酸变性。

3.辐射作用:电离辐射和非电离辐射都会导致多肽链的断裂和酶活性丧失。

4.机械力作用:化学因素1.极端pH:极端pH远离蛋白质的等电点,酶蛋白相同电荷间的静电斥力会导致蛋白肽链伸展,埋藏在酶蛋白内部非电离残基发生电离,启动改变。

交联或破坏氨基酸的化学反应,结果引起不可逆失活。

极端pH也容易导致蛋白质水解。

2.氧化作用:酶分子中所含的带芳香族侧链的氨基酸以及Met, Cys等,与活性氧有极高的反应性,极易受到氧化攻击。

3.聚合作用:加热或高浓度电介质课破坏蛋白质胶体溶液的稳定性,促使蛋白质结构发生改变,分子间聚合并沉淀。

4.表面活性剂和变性剂:表面活性剂主要改变酶分子正常的折叠,暴露酶分子疏水内核的疏水基团,使之变性;变性剂与酶分子结合,改变其稳定性,使之发生变性。

生物因素微生物或蛋白水解酶的作用使酶分子被水解。

6.简述酶活力测定方法的原理直接测定法:有些酶促反应进行一段时间后,酶底物或产物的变量可直接检测。

间接测定法:有些酶促反应的底物或产物不易直接检测,一次必须与特定的化学试剂反应,形成稳定的可检测物。

酶偶联测定法:与间接测定法相类似,只是使用一指示酶,使第一酶的产物在指示酶的作用下转变成可测定的新产物。

酶工程问答题

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酶工程习题集第一章绪论1、发展史:1903年Henri中间络合物学说;1913年Leonor Michaelis和Maud Menten 米氏方程;Daniel E. Koshland提出了诱导契合学说。

1926年,萨母纳(Sumner)提出酶的本质是蛋白质的观点。

1960年.雅各(Jacob)和莫若德(Monod)提出操纵子学说,1982年,切克(Cech)等人发现四膜虫(Tetrahynena)细胞的26s rRNA前体具有自我剪接功能(self-splicing)。

核酶(Ribozyme,也称核糖核酸酶,以区别于蛋白质酶);1983年阿尔彻曼(Sidney. Altman)发现核糖核酸酶P (RNAase P)2、核酸类酶(ribozyme):具有生物催化剂所有特性,是一类由RNA组成的酶。

底物有哪些?3、酶的新概念?分类?4、人工酶、模拟酶、化学修饰酶、克隆酶、突变酶、新酶、抗体酶第二章酶学基础1、酶促反应的特点?优缺点?2、按酶促反应性质将生物体所有的酶分为哪六大类?如何编号?3、终止一个酶促反应的方法有哪些?4、全酶的组成?按酶蛋白结构不同分类?5、别构酶、别构效应、配体6、活性部位(结合部位与催化部位),必需基团,活性中心的亲核性基团:酸碱性基团:7、参与蛋白类酶活性中心频率最高的氨基酸7 种?8、酶活力单位(U);比活力;同族酶;丝氨酸蛋白酶与巯基蛋白酶各有哪些?9、酶活性中心基团的检测方法有哪三种?10、酶的pH稳定性与温度稳定性如何测定?第三章酶的催化机制1、酶高效率催化的五种机制2、何谓邻近与定向效应?何谓构象变化效应?何谓共价催化?何谓酸碱催化?何谓微环境效应?如何理解?第四章酶的催化动力学1、绘制底物浓度对酶促反应速度影响的双曲线(标明各参数),并简述其影响。

2、米-曼氏方程(Michaelis-Menten equation);中间产物学说3、稳态的含义,中心内容。

3、绘制酶反应过程中各物质浓度变化曲线图4、如何利用双倒数作图法(又称林-贝氏作图法)求K m值与V max值测定5、通过酶促动力学方法鉴别一个抑制剂对酶的抑制是可逆还是不可逆抑制作用?6、从线性动力学模型表示式、动力学方程、米氏方程图、双倒数方程作图区别竞争性抑制、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制作用?7、竞争性抑制、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制的特点是什么?8、各举一例说明何谓Ks型不可逆抑制剂和Kcat型不可逆抑制剂(自杀性底物)?9、酶活力、比活力、纯化倍数、得率概念,计算。

酶工程(山东联盟)知到章节答案智慧树2023年滨州医学院

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酶工程(山东联盟)知到章节测试答案智慧树2023年最新滨州医学院第一章测试1.酶工程的研究内容主要包括()。

参考答案:酶的生产;酶的应用;酶的改造2.对于结合酶来说,与酶蛋白结合较为松散的是()。

参考答案:辅酶3.以下关于酶的可逆抑制剂说法正确的一项是参考答案:非竞争性抑制剂与酶作用时,通常会引起酶催化反应的最大反应速率减小4.酶活力单位1kat是指特定条件下参考答案:每秒催化1mol底物转化为产物的酶量5.下列关于酶活性部位的描述,()项是错误的。

参考答案:不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位6.对于结合酶来说,决定反应特异性的是参考答案:酶蛋白7.竞争性抑制的特点是酶催化反应的最大反应速度Vm不变,而米氏常数Km减小。

参考答案:错8.非竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm减少,而米氏常数Km不变。

参考答案:对9.反竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm和米氏常数Km同时减小。

参考答案:对10.酶的改性研究内容主要包括()。

参考答案:酶分子修饰;酶定向进化;酶的非水相催化;酶与细胞的固定化第二章测试1.培养基中常用的无机氮源主要有参考答案:硝酸铵2.酶生产中最理想的合成模式是参考答案:延续合成型3.下列不属于常用的物理诱变剂的是参考答案:8-AG4.属于微生物培养常用的微量元素是参考答案:铜5.细菌和放线菌生长的最适pH值为参考答案:pH 6.5~86.酶的合成与细胞生长同步进行,生长进入平衡期后,酶又延续合成一段时间,该产酶模式称为滞后合成型参考答案:错7.滞后合成型模式的特点是酶的合成不受分解代谢物或产物的阻遏;酶所对应的mRNA相当稳定。

参考答案:对8.表面活性剂可以与细胞膜相互作用,增加膜通透性,利于胞外酶分泌。

参考答案:对9.保藏的菌种用于发酵生产之前,需经过细胞活化,恢复生命活性。

参考答案:对10.影响酶生物合成模式的一般规律为参考答案:mRNA稳定性差,酶的合成随着细胞停止生长而终止;受某些物质阻遏的,需在细胞生长一段时间或在平衡期后(解除阻遏),开始合成酶。

酶工程习题(含参考答案)

酶工程习题(含参考答案)

酶工程习题(含参考答案)一、单选题(共47题,每题1分,共47分)1.酶的提取是()的技术过程。

A、从含酶物料中分离获得所需酶B、使胞内酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中C、从含酶溶液中分离获得所需酶D、使酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中正确答案:D2.有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间,这是由于()。

A、该酶所对应的mRNA稳定性好B、该酶所对应的DNA稳定性好C、细胞自溶后使酶分泌出来D、培养基中还有充足的营养成分正确答案:A3.对酶的空间结构和催化机理有充分了解的基础上,对酶的结构进行精确的调控,从而获得具有所需催化活性的新酶的方法称为()。

A、酶的人工改造B、酶的理性设计C、酶的定向进化D、酶的理性进化正确答案:B4.DNA重排操作中,由亲本基因通过DNase I剪切获得的随机片段()。

A、具有同样长度、无序列倾向性B、具有同样长度、有序列倾向性C、具有不同长度、无序列倾向性D、具有不同长度、有序列倾向性正确答案:D5.天苯肽是由()缩合而成。

A、L-天冬氨酸的a-羧基与D-苯丙氨酸甲酯的a-羧基B、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的氨基C、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸的氨基D、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的a-羧基正确答案:B6.以下以代号表示的试剂中哪种能用于组氨酸咪唑基的化学修饰的()。

A、DNFBB、DNSC、DPCD、DTNB正确答案:C7.搅拌罐反应器中进行某酶催化反应,反应液体积为5立方米,反应液温度从20℃升至40℃,热利用率为80%,反应过程中实际所需热量为()kcal。

A、125000B、125C、80D、80000正确答案:A8.以下不是用于酶分子修饰的大分子修饰剂的是()。

A、戊二醛B、右旋糖苷C、肼D、聚乙二醇E、肝素正确答案:A9.动物细胞的营养要求较复杂,必须供给各种氨基酸、维生素、激素和生长因子等,一般加入()就可以满足要求。

酶工程题

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第一章绪论重点并提问的内容•1、解释酶工程、酶转换数、酶的改性?答:酶工程:酶的生产、改性与应用的技术过程。

•2、根据起催化作用的主要组分不同,酶的分类如何?•3、酶工程主要研究内容?酶工程的主要内容包括:微生物细胞发酵产酶,动植物细胞培养产酶,酶的提取与分离纯化,酶分子修饰,酶、细胞、原生质体固定化、酶的非水相催化、酶定向进化、酶反应器和酶的应用等。

•4、简述影响酶催化作用的主要因素?•5、酶催化作用的特点?6、酶的专一性包括哪些?1、酶活力、酶比活力、酶转换数是什么量度指标?2、可逆性抑制作用中动力学参数都如何变化?3、蛋白类酶和核酸类酶可继续如何分类?4、酶活力单位如何定义?5、试述酶活力测定的基本过程?6、试述木瓜蛋白酶的生产方法?答:木瓜蛋白酶可以采用提取分离法、基因工程菌发酵法、植物细胞培养法等多种方法进行生产。

(1)提取分离法:从木瓜的果皮中获得木瓜乳汁,通过各种分离纯化技术获得木瓜蛋白酶。

(2)发酵法:通过DNA重组技术将木瓜蛋白酶的基因克隆到大肠杆菌等微生物中,获得基因工程菌,在通过基因工程菌发酵获得木瓜蛋白酶。

(3)植物细胞培养法:通过愈伤组织诱导获得木瓜细胞,在通过植物细胞培养获得木瓜蛋白酶。

•答:1、提取分离法2、生物合成法:(1)微生物发酵产酶(2)植物细胞培养产酶(3)动物细胞培养产酶3、化学合成法第二章微生物发酵产酶1、解释酶的发酵生产、酶的诱导、酶的反馈阻遏(产物阻遏)、分解代谢物阻遏。

诱导物的种类?2、微生物产酶模式几种?特点?最理想的合成模式是什么?(1)同步合成型特点:1、发酵开始,细胞生长,酶也开始合成,说明不受分解代谢物和终产物阻遏。

2、生长至平衡期后,酶浓度不再增长,说明mRNA很不稳定。

(2)延续合成型特点:1、该类酶不受分解代谢产物阻遏和终产物阻遏。

2、该酶对应的mRNA是相当稳定的。

(3)中期合成型特点:1、该类酶的合成受分解代谢物阻遏和终产物阻遏。

酶工程课后问答题

酶工程课后问答题

酶⼯程课后问答题第⼀章绪论1.什么叫酶⼯程?酶⼯程的主要任务是什么?答:(1)酶的⽣产与应⽤技术过程称为酶⼯程。

(2)酶⼯程的主要任务是经过预先设计,通过⼈⼯操作,获得⼈们所需的酶,并通过各种⽅法使酶充分发挥其催化功能。

2.常⽤酶的活⼒单位及其定义是什么?答:常⽤酶的活⼒单位:IU和卡特(kat)IU:表⽰每分钟催化1umol的底物转化为产物的酶量为⼀个酶活⼒单位。

卡特(kat):表⽰每1s催化1mol底物转化为产物的酶量定义为 1卡特3.液体酶的酶活⼒测定⼀般要经历哪些步骤?举例说明。

答:㈠液体酶的酶活⼒测定⼀般哟啊经过四个步骤:①根据酶催化的专⼀性,选择适宜的底物,并配制成⼀定浓度的底物溶液。

②根据酶的动⼒学性质,确定催化反应的温度、PH值、底物浓度、激活剂浓度等反应条件。

③在⼀定的条件下,将⼀定量的酶液和底物溶液混合均匀,适时记下反应开始的时间。

④反应到⼀定的时间,取出适量的反应液,运⽤各种⽣化检测技术,测定产物的⽣成量或底物的减少量。

㈡举例说明:如测定蛋⽩酶的活⼒时,选择蛋⽩作为底物,并配制成⼀定浓度的溶液;根据蛋⽩酶的动⼒学性质,确定溶液的温度为28℃,PH值为8.5;将底物蛋⽩液蛋⽩酶混合均匀,取出适量的反应液,测出产物的⽣成量或底物的减少量。

4、酶的⽣产⽅法有⼏种?各有何优缺点?答:酶的⽣产⽅法有三种。

㈠提取分离法:采⽤各种提取、分离、纯化技术从动物和植物的组织、器官、细胞或微⽣物中将酶提取出来,再进⾏分离纯化的技术过程。

优点:设备较简单,操作⽅便。

缺点:受⽣物资源、地理环境、⽓候条件影响,或者使⼯艺路线变得繁杂。

㈡⽣物合成法:利⽤微⽣物细胞、植物细胞或动物细胞的⽣命活动⽽获得⼈们所需酶的技术过程。

优点:⽣产周期短,酶产率较⾼,不受⽣物资源、地理环境和⽓候条件影响。

缺点:对发酵设备和⼯艺条件要求⾼㈢化学合成法:采⽤化学技术合成⼈们所需酶的技术。

优点:对认识和阐明⽣物体的⾏为和规律、设计和合成⾼效率具有重要理论意义。

酶工程重点背!!!

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1、问答:为什么说酶活性部位的柔性是其充分表现活性所必需的?答:1)、诱导契合:满足底物结合诱导的构象改变,以使酶活性部位的活性基团形成一定的空间取向,从而保持一个适应催化反应的空间微环境;2)、残基侧链活性基团的运动更加有利于酶催化的高效性;3)、很多酶的催化效率和底物专一性都受其他因素调节,这就要求酶的活性部位保持一定的柔性,使其局部环境受调节因素影响后能发生细微构象变化,从而调节酶的活性和底物专一性。

2、问答:辩证谈“酶的柔性和刚性是局部的,也是相对的”。

答:1)、对于局部柔性部位必须要由其刚性部分来支持;2)、酶分子既要有相对稳定的整体结构,又要有相对柔性的微环境状态。

正是这种刚柔相济的独特酶分子结构,构成了酶催化反应高效性和可调节性的结构基础。

3、问答:如何理解“Km可了解酶的底物在体内具有的浓度水平”?答:由Km的式子(列出),一般来说作为酶的最适底物,其在体内的浓度水平应接近于它的Km值。

1)、若体内[S0] « Km,则V « Vmax,说明大部分的酶在体内是不起作用的,处于一种浪费的状态;2)、若体内[S0] » Km,则V≈Vmax,这种底物浓度会失去生理意义,也不符合实际。

4、区别可逆抑制和不可逆抑制作用的动力学方法:1)、方案一:取一定量I+E,预保温一段时间——取不同量混合液,测在固定体积反应体系中的初V。

1-未加抑制剂2-加入不可逆抑制剂3-加入可逆抑制剂当混合液加入底物时,对3而言,相当于将酶和抑制剂均稀释了,取出的混合液体积越小其被稀释的倍数也就越大,体系中抑制剂的浓度也就越小,相应的抑制作用就越弱。

(2-不可逆抑制剂仅降低酶浓度)2)、方案二:固定反应体系体积,加入一定量抑制剂——加不同浓度的酶——测酶活。

1-未加抑制剂2-加入不可逆抑制剂3-加入可逆抑制剂初速度对酶浓度作图,对2而言,当加入的是一定量不可逆抑制剂,那么一定量酶失活,只有加入的酶量大于不可逆抑制剂的量时才能表现出酶活力;对3而言,加入可逆抑制剂只是降低了反应速率,得斜率降低的直线。

酶工程章节重点(含答案)

酶工程章节重点(含答案)

离子的亲和力不同而达到分离目的
凝胶层析,以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的 相对分子质量不同而达到物质分离
层析柱中装有多孔凝胶,大分子物质分子直径大,不能进入凝胶的微
孔,以较快的速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶的微孔内,这 就使小分子物质向下移动的速度比大分子的速度慢,从而使混合溶液
盐溶液提取
ห้องสมุดไป่ตู้
0.02~0.5mol/L的盐溶 用于提取在低浓度盐溶液中溶解 液 度较大的酶 PH2~6的水溶液 用于提取在稀酸溶液中溶解度大, 且稳定性较好的酶
用于提取在稀碱溶液中溶解度大 且稳定性较好的酶
酸溶液提取
碱溶液提取
PH8~12的水溶液
有机溶剂提 取
可与水混溶的有机溶剂 用于提取那些与脂质结合牢固或 含有较多非极性基团的酶
添加表面活性剂 表面活性剂可以与细胞膜相互作用,增加细胞的透过性, 有利于胞外酶的分泌,从而提高酶的产量。 将适量的非离子型表面活性剂,如吐温(Tween)、特里顿 (Triton)等添加到培养基中,可以加速胞外酶的分泌,而使 酶的产量增加。 添加产酶促进剂 可以促进产酶、但是作用机理未阐明清楚的物质。 例如,添加一定量的植酸钙镁,可使霉菌蛋白酶或者桔青 霉磷酸二酯酶的产量提高1~20倍;添加聚乙烯醇 (Polyvinyl alcohol)可以提高糖化酶的产量。 产酶促进剂对不同细胞、不同酶的作用效果各不相同,现 在还没有规律可循,要通过试验确定所添加的产酶促进剂的 种类和浓度。
中各组分按照相对分子质量由大到小的顺序先后流出层析柱,而达到
分离的目的。
接上页:依操作形式(固定相基质的形式)分:纸层析、
薄层层析、柱层析。依流动相分:液相层析、气相层析。
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通入高压喷射蒸汽,实现酶与底 物的混合,进行高温短时催化反 应,适用于某些耐高温酶的反应
1简述酶非水相催化的概念与特点 酶在非水介质中的催化作用称为酶的非水相催化。它是通过改变反应介 质,影响酶的表面结构和活性中心,从而改进酶的催化特性。主要内容 包括有机介质中的酶催化,气象介质中的酶催化,超临界流体介质中的 酶催化和离子液介质中的酶催化等。由于在非水相介质中酶分子受到非 水介质的影响,起催化特性与在水相中的有较大的不同。酶在有机溶液 中的热稳定性比在水溶液中有显著地提高,而且催化时,酶的底物特异 性、立体选择性、区域选择性、健的选择性和热稳定性都有所改变,同 时酶在离子液中的催化作用具有良好的稳定性和区域选择性、立体选择 性健的选择性等特点。 2酶在有机介质中与在水溶液中的特点有何改变? 底物专一性:酶在水溶液中进行催化反应时,具有高度的专一性或底物 特异性。在有机介质中,由于酶分子活性中心的结合部位与底物之间的 结合状态发生了变化,使酶的底物特异性发生改变。(2)对映体选择 性:酶在有机介质中催化,由于介质的特异性改变引起酶的对映体选择 性发生改变,酶在水溶液中催化的立体选择性强,而在疏水性强的有机 介质中,酶的立体选择性差。(3)区域选择性:酶能够选择底物分子 中某一区域的基因优先进行反应。(4)健的选择性:在有机介质中, 当同一底物分子中有两种以上的化学键都可以与酶反应时,酶对其中一 种化学键优先进行反应。(5)热稳定性:在有机介质中热稳定性比在 水溶液中好,因为含水量低的有机介质缺少引起酶分子。(6)PH特性 在水溶液中,缓冲液的PH决定了酶分子活性中心基因和底物的解离状 态,从而影响反应。在有机介质中,酶所处的PH环境与酶在冻干或吸附 到载体上之前所使用的缓冲液PH相同。 3什么是必须水?水对非水相中酶的特性有何影响? (1水对酶的空间构象的影响:酶分子只有在空间构想完整的状态下才 具有催化功能,在无水的条件下,酶的空间构象被破坏,酶将变性,所 以酶分子需要一层水化层来维持空间构象。(2)水对酶催化反应的速 度的影响:有机介质中水的含量对此有显著影响,在催化反应速度达到 最大是的含水量称为最适含水量,有些酶在水含量较低的条件下,没的 催化速度水水含量升高而升高。(3)在有机介质体系中,酶的催化活 性随着结合水量的增加而提高,在结合水不变时,体系中含水量的变化 对酶的催化活性影响大。 4有机溶剂对酶催化有何影响? 1、对酶结构和功能的影响:酶分子表面结构发生变化,对酶活性中心结 合位点也有影响。主要是通过有机溶剂与底物竞争活性中心的结合位点 或降低活性中心的的极性来影响与底物结合能力。2、对酶活性的影
5如何控制有机介质中酶催化反应的条件? 1、对酶的选择不仅要看催化反应速度大小,还要注意没的稳定性,底 物专一性,对映体选择性,区域选择性,键选择性等。2、对底物的选 择和浓度控制:必须考虑底物在有机溶剂和必须水层中的分配情况。 3、选择适宜的有机溶剂:它的极性不能过强或过弱。4、控制好水的含 量:使反应体系保持在最适水含量。5、温度的选择最好在最适温度。 6、PH:保持在最适PH,通过调节缓冲液的PH和离子强度来实现对有 机介质中的酶催化的PH和离子强度的调节。 6举例说明酶非水相催化的应用? 1手性药物的拆分2手性高分子聚合物的制备3酚树脂的合成4导电有机聚 合物的合成5发光有机聚合物的合成6食品添加剂的生产7生物柴油的生 产8多肽的合成9甾体转化 1何谓酶定向进化?有何特点? 酶分子定向进化简称酶定向进化,是模拟自然界进化过程(随即突变和 自然选择),在体得到具有优良催化特性的酶的 突变体的技术过程。 特点:(1).适应面广:可广泛应用各种蛋白质酶和核算类酶的改性, 因为不需要事先了解酶的结构,催化作用机制等。(2).目的性强:因 为进化方向明确。3.效果显著:可以在几年几个月完成几万年几十万年 完成的进化历程。 2简述易错PCR技术进行体外突变的主要过程? (1)双链DNA的变性:将待扩增的模板DNA升温至85-95度,使DNA 双链之间氢键断开,解离为单链RNA。(2)引物与单链RNA退火结 合,单练RNA在温度逐步降低至50-70度时,会与其碱基互补的引物结 合生成双链。(3)引物延伸:引物结合后,将温度升至70-75度,在 DNA聚合酶作用下,以引物为起点,以四种脱氧核苷三磷酸为底物,以
密度大,可以提高酶催化反应的 速度。在工业生产中普遍使用。
流化床反应器具有混合均匀,传 质和传热效果好,温度和pH值 的调节控制比较容易,不易堵 塞,对粘度较大反应液也可进行 催化反应。
鼓泡式反应器的结构简单,操作 容易,剪切力小,混合效果好, 传质、传热效率高,适合于有气 体参与的反应。
清洗比较困难
反应器类型 搅拌罐式反应器
填充床式反应器
适用的操作方式
分批式, 流加分批式 连续式,
连续式
流化床反应器
鼓泡式反应器
膜反应器 喷射式反应器 适用的酶 游离酶 固定化酶 固定化酶 固定化酶
游离酶 固定化酶
游离酶 固定化酶 游离酶
分批式 流加分批式 连续式
分批式 流加分批式比较完全,反应条件容易调 节控制。
响:极性较强的有机溶剂会影响酶分子微环境的水化层从而降低催化活 性,甚至引起变性失活。3、对底物和产物分配有影响:有机溶剂极性 过大或多小都会影响底物的浓度从而影响酶的催化速度。 1举例说明酶在疾病诊断、治疗和药物制造方面的应用 诊断方面:淀粉酶在胰脏疾病、肾脏疾病时活性升高,在肝脏疾病时活 性下降,葡萄糖氧化酶测定血糖含量,诊断糖尿病;在疾病治疗方面: 胰脏、麦芽和微生物中的麦芽酶治疗消化不良、食欲不振,蛋清、细菌 中的溶菌酶治疗各种细菌性和病毒性疾病;在药物制造方面:青霉素酰 化酶制造半合成青霉素和头孢菌素
4举例说明酶在环保方面的应用:利用胆碱酯酶检测有机农药,乳酸脱 氢酶的同工酶检测重金属污染,用固定化硝酸还原酶处理含硝酸盐亚硝 酸盐的废水……意义:保护环境 5酶在生物技术领域的用途:用酶除去细胞壁,如用溶菌酶除去细菌细 胞壁;酶在大分子切割方面应用,如限制性内切核酸酶、DNA外切核酸 酶;酶在分子拼接方面的应用,如DNA连接酶、DNA聚合酶 1常见反应器的类型和特点
目标DNA为模板,按碱基配对原则,由5‘到3‘端方向延伸,而进行DNA 复制。 以上3个步骤,经30 次循环,即可使目的基因扩增几百万倍。在以上 PCR技术的基础上,通过改变反应条件,例如提高镁离子浓度,添加一 定浓度的猛离子,改变四种底物浓度比等反应条件,增加碱基配对错误 的出现频率,就成为易错PCR技术。 2选择反应器的依据:酶的形式(游离/固定化..)、固定化酶的形状、底物 的物理性质、酶反应动力学性质、酶的稳定性、操作要求、反应器制 造、控制成本 3酶反应器设计的主要内容:确定酶反应器的类型、确定反应器的制造 材料、进行热量衡算、进行物料衡算 4酶反应器使用中应注意的问题:控制好温度、PH、底物浓度、酶浓 度、拌速率率, 搅保持酶反应器的稳定性,防止酶的变性失活,防止微生物污染 2酶在食品保鲜和食品生产方面的应用:葡萄糖氧化酶用于食品除氧保 鲜和蛋类制品脱糖保鲜,溶菌酶可以对食品灭菌保鲜,蛋白酶、乳糖酶 用于蛋白质类食品生产方面应用,柚柑酶、果胶酶应用果蔬类食品生产 方面 3酶在轻工、化工方面的应用:在原料处理,如蛋白酶对皮革的脱毛处 理,在轻工、化工产品方面,腈水和酶催化腈类化合物与水合成丙烯酰 胺等,加酶增强产品的使用效果,如护肤品中加超氧化物岐化酶
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