医院常规空气细菌培养
医院空气细菌培养常规知识讲解
六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。 2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。 3、采样方法，用5 x5cm2的标准灭菌规格板；
放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的 棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随 之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手 接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送 检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体 的方法采样。
Байду номын сангаас 6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记 清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行 采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸 有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面 从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积 30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部 位，将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米（cm ²）计算。
(6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
(7）暴露5分钟；
(8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
(9）看表、5分钟；
（10）收取平皿；
（11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
空气培养的采样方法
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
二、采样高度与地面垂直高度80-150厘米。
三、布点方法1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1）2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。
五、结果分析I类区域：<10 cfu/m3II类区域：<200 cfu/m3III类区域：<500 cfu/m3六、附录Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。
Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。
采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。
采样布置点示意图：四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。
五、要求：1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方；2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟；3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时；4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。
浅谈医院空气微生物检测的方法
浅谈医院空气微生物检测的方法
医院空气中的微生物检测是保证医院环境卫生的重要手段之一。
随着医院感染控制的不断提升，对医院空气中微生物的监测和检测越来越受到重视。
医院空气中微生物的检测方法包括了常规培养法、膜过滤法、PCR法等多种方法。
本文将从这几种方法进行介绍，并分析它们各自的特点和适用场景。
一、常规培养法
常规培养法是一种比较传统的微生物检测方法，它的原理是将空气中的微生物通过采样器采集到培养基中，然后在适宜的温度条件下培养一段时间，观察形成的菌落数量和种类。
这种方法的优点是操作简单、成本低廉，但是也存在着一些缺点，比如需要长时间的培养周期、容易发生细菌相互之间的干扰等。
二、膜过滤法
三、 PCR法
PCR法是一种利用聚合酶链式反应技术来检测微生物的方法。
它的原理是通过采样器采集空气中的微生物DNA/RNA样本，然后利用PCR技术快速扩增微生物的DNA/RNA片段，最后通过凝胶电泳或实时荧光标记的方法来检测目标微生物的数量和种类。
这种方法的优点是高度敏感、高度特异性和快速性，但是也存在着一些局限性，比如价格昂贵、对操作人员的技术要求高等。
医院空气微生物检测的方法有多种多样，每种方法都有其自身的优缺点。
在实际应用中，需要结合医院的实际情况和监测需求来选择合适的检测方法。
还需要重视检测过程中的质量控制，确保检测结果的准确性和可靠性。
希望通过本文的介绍，能够帮助大家更加深入地了解医院空气微生物检测的方法，为医院环境卫生的管理工作提供一些参考。
空气培养的采样方法
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法欧阳学文一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
二、采样高度与地面垂直高度80150厘米。
三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1）2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。
五、结果分析I类区域：<10 cfu/m3II类区域：<200 cfu/m3III类区域：<500 cfu/m3六、附录Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。
Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。
采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。
采样布置点示意图：四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。
五、要求： 1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方；2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟；3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时；4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。
空气培养的采样方法
医院常规空气细菌培养（自然沉降法)采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
二、采样高度与地面垂直高度80—150厘米。
三、布点方法1。
面积≤30 m2，设一条对角线取三点,即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1)2．室内面积〉30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西,南，北距墙均1米（图2)四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿,打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后,送检培养。
五、结果分析I类区域:<10 cfu/m3II类区域：<200 cfu/m3III类区域：〈500 cfu/m3六、附录Ⅰ类区域:层流洁净手术室、层流洁净病房(参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房.Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。
Ⅳ类区域:传染病科及病房.洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级:共放9个培养皿,其中手术区域3点,周边区6点。
采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级:共放7个培养皿，其中手术区域3点,周边区域4点。
采样布置点示意图：四、三十万级:面积〉30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。
五、要求： 1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时,全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方；2.采样点可布置在地面上或不高于地面0。
8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m,培养皿放置30分钟；3。
采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时；4.然后计数生长的菌落数,菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。
医院常规空气细菌培养PPT课件
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
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• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院常规空气细菌培养
2
• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
医院常规细菌培养
手术室
编辑版ppt
1
空气培养方法及标准
程序要求：在做空气培养前1小时，关闭室 内门窗，打开层流，减少室内人员走动，使 空气静止。从检验科取培养皿，途中应用包 布包裹，做培养者戴好口罩帽子，将培养皿 放于需做培养的房间内，打开5分钟。在采 样时禁止有人走动，采样结束后，盖好玻璃 培养皿，填写培养单，贴好标记，用包布包 裹后送细菌室培养。培养结果报告，由专人 保存，除霉雨季节每月做两次空气培养，其 余时间每月做一次
布点方法：如图
编辑版ppt
2
①面积≤30平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点 (手术室层流手术室面积27平米）
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3
②室内面积>30平米，设两条对角线，东，
西，南，北，中取五点，其中东，西， 南北距墙均1米（飞秒手术室面积为32平 米）
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4
采样方法：用9cm直径普通培养皿放在 采样点暴露5 分钟后送检培养
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10
医护人员手采样 采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。 结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
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11
采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管 盖严试管 嘱被检人五指并拢 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指 曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采 样棉试子,五指分开,涂擦指缝、指尖
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6
看表、5分钟；
取平皿
注意事项:放平皿时先放最里边（内边 ），收取时先收最外边点上的平皿
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7
医院科室空气培养操作流程
医院科室空气培养操作流程一、准备工作。
咱做空气培养之前呢，得把东西都准备好呀。
这就像是出门旅行得先收拾好行李一样。
得有专门的空气培养皿，这个可不能马虎，它就像是捕捉空气里小秘密的小盒子呢。
然后就是要准备好记录用的小本子和笔，毕竟咱得把整个过程里的各种小细节都记下来呀。
还有哦，得看看要做空气培养的科室环境是不是合适，周围别有太多的障碍物或者是干扰源，就像咱要找个安静又宽敞的地方做实验似的。
二、采样时间的选择。
这个采样时间可是有讲究的呢。
咱不能随便挑个时间就开始，那可不行。
一般呢，是选择在消毒处理后，科室还没有开始正常工作的时候。
为啥呢？就好比咱们打扫完房间，想看看这时候房间里最干净的状态一样。
要是科室里人来人往，各种设备都在运转，那采出来的样可就不准啦。
比如说早上医护人员还没开始忙碌，或者是晚上科室经过彻底清洁消毒之后，这个时候来采样就比较合适。
三、采样地点。
那采样地点要怎么选呢？这就像是寻宝一样，得找对地方。
在科室里，不同的区域都得照顾到。
像病房里，要在病床之间，离墙壁还有病床都要有一定的距离，大概1米左右吧。
这就像是给每个病床周围的空气都做个小检查。
还有治疗室，那得在操作台面附近采样，毕竟这里是进行各种医疗操作的地方，空气干净不干净可太重要了。
还有走廊，也要选几个点，因为走廊也是人员走动比较频繁的地方呢。
四、采样操作。
开始采样的时候，可有趣啦。
拿着空气培养皿，轻轻打开盖子，就像轻轻揭开一个神秘宝盒的盖子一样。
然后把培养皿放在选定的位置，让空气能够自由地进入到培养皿里。
这个时候呀，可不能乱动，就静静地等一会儿，大概15 - 30分钟吧，就像是在和空气进行一场小小的约会。
时间到了之后，再小心翼翼地把盖子盖上，就像把小秘密重新封存起来一样。
五、培养。
采完样之后，就要把培养皿送到实验室去培养啦。
这个过程就像是把种子送到温室里等待发芽一样。
实验室的工作人员会把培养皿放在合适的温度和环境下，让里面可能存在的细菌或者微生物慢慢地生长起来。
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（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； （12）连续采样4个规格板面积； （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉 拭子放人装l0ml采样液的试管中； （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等） 采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样； （16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
浸取灭菌采样液； (7）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （8)嘱被检人五指并拢； (9)将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支
在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30 cm² )，并随之转动采样棉 试子；
(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； (11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭 子投人装l0ml采样液的试管中； (12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （13)将酒精灯盖严，整理用物； (14）纪录采样时间、对象、采样人； (15)立即将标本送验、培养。
(6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
(7）暴露5分钟；
(8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
(9）看表、5分钟；
（10）收取平皿；
（11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
物体表面采样
2．室内面积>30m2，设两条对角线，东， 西，南，北，中取五点，其中东，西，南 北距墙均1米（图2）
五、结果分析
I类区域：<10 cfu/m3
II类区域：<200 cfu/m3
III类区域：<500 cfu/m3
六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
5、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚 明
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医院感染管理操作规范
环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
急诊 班丽萍 2014-8-15
空气培养
1，采样及检查原则，采样后必须尽快对样品进行相应指 标的检测；送检时间不得超过6h,样品保存于0一4℃条件 时。送样时间不得超过24h。
2、采样时间，选择消毒处理后与进行医疗活动之前期 间采样。
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记 清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行 采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸 有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面 从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积 30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部 位，将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米（cm ²）计算。
(3)剪指甲、洗手；
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期 间采集空气样本；
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点， 即中心一点，两端各距离墙1 m。取出3个培养皿， 将培养皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、 西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中 5点，其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m， 取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放 相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂 直高度80一150cm;
3、采样高度，与地面垂直高度80一150cm. 4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
7、操作步骤与质量标
1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分 别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东 南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、 试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。 2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。 3、采样方法，用5 x5cm2的标准灭菌规格板；
放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的 棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随 之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手 接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送 检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体 的方法采样。
3、结果计算 手细菌菌落总数（cfu/cm² )=平皿上菌落的 平均数×采样液稀释倍数
30×2
4、操作步骤与质量标准
(1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖 口鼻；
(2）备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 灭菌棉拭子、试管、试管架、笔、纪录单、湿度、 温度计；
(3)剪指甲、洗手；
(4）在接触病人、从事医疗活动前进行采样； (5）取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管； (6）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞，
4、细菌菌落总数检查， 物体表面细菌菌落总数（cfu / c㎡）=
平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍数
采样面积（c㎡)
5、操作步骤与质量标准 面≥100cm²，取100cm²；
(5)将5 cm² x 5 cm (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面” 的试管，打开试管塞； (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （10）用棉拭子在规格板空心处