花粉生活力萌发试验
花粉活力测定的3种办法

精心整理实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】???显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
???【试剂】-KI300ml。
???I2~3张片??基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲??)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】0.5%TTC溶液:称取0.5gTTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
实验一 花粉生活力的测定

2 染色观察法 (1)碘-碘化钾染色法 先称取0.3g碘和1.3g碘化钾溶于100mL的蒸馏水 中,即成碘-碘化钾溶液。取少量花粉振播到用棉 球擦净的普通载玻片上,然后加水一滴,使花粉 散开,再加一滴碘-碘化钾溶液,盖上盖玻片,置 于显微镜下观察不同的三个视野,凡花粉粒被染 成蓝色的表示具有生活力,呈黄褐色为缺少生活 力的花粉(淀粉遇碘变蓝是淀粉的特性)。 (2)氯化三苯基四氮唑(TTC)法 凡具有生活力的花粉,在其呼吸作用过程中都有 氧化还原作用,而无生活力的花粉则无此反应, 因此当TTC渗入有生活力的花粉时,其脱氢酶在 催化去氢过程中与TTC结合,使无色的TTC变成 TTF而成红色。
通常花粉的形态、花粉中酶的活性以及积 累淀粉(淀粉质花粉)的多少与花粉生活 力密切相关,因此可以利用花粉的形态观 察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低、淀 扮的含量以及在人工培养基上花粉管萌发 的情况作为确定花粉生活力高低的标准。
【实验材料、主要仪器及试剂】 1 实验材料 各种园林植物的花粉。如百合、牡丹、凤仙花、 柳树、菊花、月季、凤仙花、紫茉莉等植物的花 粉。 2 主要仪器 载玻片、凹玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、棉球、 显微镜、恒温温箱、瓷盘、镊子、培养皿、玻璃 棒、玻璃铅笔、凡士林、标签、冰箱。 3主要试剂 碘-碘化钾、氯化三苯基四氮唑、 Na2HPO4· 2H2O、KH2PO4、蔗糖或葡萄糖溶液、 H3BO3,Ca(NO3)2,MgSO掌握用形态法、染色法、发芽 法测定花粉生活力的具体技术和方法。 2 观察花粉在人工配制的培养基上的萌 发情况,认识花粉萌发形成花粉管的 外形和伸长过程,为理解植物的生殖 过程奠定基础。
【实验原理】 花粉的生活力因植物种类不同而差异很大。在自 然条件下,大多数植物的花粉从花药散出后只能 存活几小时,几天或几个星期。一般木本植物花 粉的寿命比草本植物的长,如在干燥、凉爽的条 件下,柑桔花粉能存活40~50天,椴树45天,苹 果10~70天,樱桃30~100天,麻栎一年。而在 草本植物中,如棉属花粉采下后24小时存活只有 65%,超过24小时很少存活;多数禾本科植物的 存活时间不超过一天,如玉米1~2天,水稻花粉 在田间条件下经3分钟就有50%丧失生活力,5分 钟后几乎全部死亡,是寿命最短的例子。花粉粒 的类型和生活力也表现了相关性,通常三胞花粉 的寿命较二胞花粉短,如水稻等禾本科植物为三 胞花粉,寿命都是比较短的。
花粉的体外萌发实验2

三、花粉的体外萌发实验一、实验目的:1.学习花粉粒的培养方法2.探究不同植物在不同培养基上花粉萌发率3.了解花粉萌发的影响因素及不同植物花粉的活力4.学习单玻片悬滴培养法二、实验原理:正常的成熟花粉粒具有较强的活力,在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率硼能够促进花粉粒的萌发和花粉管的伸长,蔗糖提供萌发时所需营养三、材料与用品1.实验材料:不同植物的花粉2.实验用品:蔗糖,0.01%硼酸,1%碘-碘化钾溶液,蒸馏水,恒温培养箱,大培养皿,棉球,盖玻片若干,凹载玻片若干,凹载玻片支架四、实验步骤:1.前期准备:2%蔗糖:取2g蔗糖,加水溶解,移至100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
5%蔗糖:取5g蔗糖,加水溶解,移至100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
10%蔗糖:取10g蔗糖,加水溶解,移至100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
15%蔗糖:取15g蔗糖,加水溶解,移至100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
20%蔗糖:取20g蔗糖,加水溶解,移至100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
25%蔗糖:取25g蔗糖,加水溶解,移至100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
0.01%硼酸:根据实验室具体情况,进行稀释2.培养液:取培养液a=蒸馏水、b=0.01%硼酸、c=2%蔗糖+0.01%硼酸、d=5%蔗糖+0.01%硼酸、e=10%蔗糖+0.01%硼酸、f=15%蔗糖+0.01%硼酸、g=20%蔗糖+0.01%硼酸、h=25%蔗糖+0.01%硼酸,各1滴3.单玻片悬滴培养法:将培养液滴于盖玻片上并铺展开,将花粉粒均匀散在培养液上,每种培养液上的花粉量应保持大致相同,将盖玻片翻转放于凹载玻片上,将载玻片放在支架上,周围放几个浸透清水的湿棉球,加盖密封,至于恒温培养箱中,在25℃条件下培养1~2h(视具体情况而定)4.镜检和统计:取出盖玻片,在每处培养液上加1滴1%碘-碘化钾溶液,扣置于载玻片上,显微镜观察。
花粉生活力鉴定.pptx

六、计算
花粉生活力 (%)= 有活力的花粉数量/花粉总数 100%
➢ 计算结果取均值,即为样品花粉的活力值。
判断该批花粉的使用价值
一、准备
花粉
化学试剂
生化培养箱
生物显微镜
二、配制培养基
• 固体培养基:蔗糖、硼酸、琼脂、蒸馏水
三、花粉播种
将培养基点在载玻片 凹面处
播种花粉
(分散均匀-多做几次)
难点
置于 培养皿
四、培养
• 设置培养温度:20~25℃
五、镜检与计数
重点
➢ 达到培养时间时,在显微镜下观察花粉萌发情况。 ➢ 选有代表性、便于统计的5个视野,分别计数。
探秘花粉
——花粉生活力鉴定
∆ 导入:为什么进行花粉活力鉴定?
➢ 花粉——有性繁殖的基础 ➢ 能否孕育生命?
活力
鉴定方法 形态 染色
萌发试验
人工授粉
花粉萌发试验——原理
➢ 有活力的花粉在适宜的培养条件下,能萌发出花 粉管。
花粉萌发试验——步骤
准备材料配制 培养基难点播种计算
重点
镜检 计数
培养
花粉萌发试验方法

花粉萌发试验方法1.花粉萌发率和花粉管长度的测定:花粉培养采用固体培养基。
培养基组分为:1%琼脂、10%蔗糖、0.01%硼酸、0.03%硝酸钙,pH为6.5。
将花粉播种到培养基上后,在25℃、100%空气湿度、避光条件下培养6 h后,在显微镜下观察花粉的萌发和生长情况。
100ml:1 g琼脂,10 g蔗糖,0.01g硼酸,0.03g硝酸钙。
2.培养基的制备:在烧杯中加入100 mL蒸馏水,再加入1%琼脂,在酒精灯上加热,使之完全熔解,然后加入15%蔗糖,制成15%的糖液。
本实验加入了100 mg/L硼酸,以促进花粉的萌发。
2.测定花粉萌发率的培养基按蔗糖15%、硼酸15mg/L、琼脂0.5%制备,经高压灭菌后置冰箱内保存,使用时加热熔化为液体培养基待用。
花粉培养与萌发率测定时,用无菌滴管吸两滴液体培养基于载玻片的两处,用毛笔蘸花粉撒播于培养基上,将载玻片放人垫有湿滤纸的培养皿中,于室温下培养和镜检。
花粉播种后4小时镜检萌发情况,在10×10倍视野下计取3—5个视野的花粉萌发数和花粉总数,计算花粉萌发百分率[3‘5】。
以花粉管长度大于花粉粒直径的1/2为花粉萌发的标准,花粉数以3—5个视野的花粉粒总数超过100个为宜[3。
7】。
3.参照程中平等的方法,采用含10%蔗糖和0.8%琼脂的培养基。
注意:在熬制时要用玻璃棒不断搅拌,使其融化均匀,还可加入微量柱头渗出液、维生素等以形成花粉粒发芽的最适环境条件。
然后集中放在一个大的瓷盘中,用纱布覆盖后加盖,放于25℃的温箱内培养。
实验表明:花粉在播8 h后,发芽数不再有明硅增加。
在播后12 h在低倍显微镜下检查发芽情况,直至花粉粒发芽数不再增加为止,记载花粉发芽数,以明确不同仡粉的发芽速度和发芽进程。
花粉生活力测定方法

花粉生活力测定方法
花粉是植物生殖的重要组成部分,其生活力的测定对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
本文将介绍几种常用的花粉生活力测定方法,希望能够对相关领域的研究者和生产者有所帮助。
首先,最常见的花粉生活力测定方法是离体培养法。
这种方法首先需要收集新鲜的花药,然后在适当的培养基上进行培养,观察花粉的萌发情况来判断其生活力。
离体培养法的优点是操作简单,结果可靠,因此被广泛应用于植物育种和种子生产中。
其次,荧光显微镜法也是一种常用的花粉生活力测定方法。
这种方法利用荧光显微镜观察花粉颗粒的形态和结构,通过判断其内部结构的完整性来评估花粉的生活力。
荧光显微镜法对花粉的观察更加直观,能够提供更多的信息,但需要专业的设备和操作技能。
另外,还有一种叫做染色法的花粉生活力测定方法。
这种方法通过在花粉颗粒上涂抹特定的染料,然后观察染色情况来判断花粉的生活力。
染色法简单易行,可以快速得到结果,但对染料的选择和浓度有一定要求。
除了上述方法,还有一些新兴的花粉生活力测定方法,比如电子显微镜法、流式细胞仪法等。
这些方法在技术上更加先进,能够提供更为精细的数据,但也需要更高的成本和专业的操作技能。
综上所述,花粉生活力的测定对于植物育种和种子生产具有重要意义,而不同的方法各有优劣。
在选择具体的测定方法时,需要根据实际情况和研究目的进行综合考虑,以便选择最适合的方法。
希望本文介绍的内容能够对相关领域的研究者和生产者有所启发,推动相关领域的科研工作和生产实践取得更好的成果。
实验:园艺植物花粉生活力测定

天竺葵柱头上的花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
蒂氏荚蒾花粉(灰色) 其中一个已开始萌发
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
勿忘草的花粉 最小的花粉粒之一,直径只有0.005毫米
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花锦葵属植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
桦树的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
柳树花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
染色者为发育不良、生活力弱的花粉。观察3~4个视野,
五、方法步骤:
(三)花粉生活力试验
3.取另一载玻片,加少量同种待测花粉,然后在花
粉上滴试剂Ⅰ和试剂Ⅱ各一滴,仔细搅匀,盖上盖
玻片,用镊子轻轻压实。经3~4分钟后,放在显微
镜下检查。
有生活力的花粉呈红色或玫瑰色,无生活力的 花粉为黄色或无色,连续观察3~4个视野,分别记 录有生活力及无生活力的花粉数。
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
凤梨科植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花粉生活力测定方法

花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒的活力和生长能力,是衡量植物繁殖成功的重要指标。
花粉生活力测定方法是一种用来评估花粉质量和活力的技术手段,对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
传统的花粉生活力测定方法主要包括花粉染色观察法、花粉萌发率测定法和花
粉活力染色法。
花粉染色观察法是将花粉染色后在显微镜下观察其形态和数量,从而评估花粉的活力和质量。
花粉萌发率测定法则是将花粉培养在适宜的培养基上,观察其萌发情况以评估花粉的活力。
花粉活力染色法则是利用染色技术来观察花粉内部的活力指标,如线粒体和细胞核的活跃程度。
随着科学技术的发展,现代的花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
比如,利用生物技术手段对花粉进行基因测序和分析,可以更准确地评估花粉的生活力和遗传信息。
同时,利用先进的显微镜和成像技术,可以对花粉的微观结构和形态进行更精细的观察和分析。
花粉生活力测定方法的发展不仅有助于科学家和植物育种者更好地了解植物的
繁殖机制和生长规律,也为农业生产和生态保护提供了重要的技术支持。
通过准确评估花粉的生活力,可以选择出高质量的花粉进行人工授粉或者种子生产,从而提高植物的繁殖成功率和产量。
此外,对花粉生活力的准确测定也有助于保护植物遗传资源,促进植物多样性的保护和利用。
总之,花粉生活力测定方法是一项重要的植物科学技术,它为我们深入了解植
物繁殖机制和提高农业生产效率提供了重要的技术手段和支持。
随着科学技术的不断进步,相信花粉生活力测定方法将会在未来发挥更加重要的作用。
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实验二花粉生活力的测定―――悬滴培养法
一、实验目的:掌握了解花粉生活力测定的意义和方法。
二、实验材料:二月兰花粉
三、实验仪器及药品:凹玻片、盖玻片、解剖针、镊子、纱布、标签、铅笔、显微镜、恒温
箱、蔗糖、蒸馏水、硼酸、凡士林。
四、实验原理:花粉是植物自然授粉和人工杂交的主要物质基础,花粉生活力的大小是保证
杂交成功的关键。
在有性杂交育种中,常因父母本花期的不同,作为父本的花粉必须经过贮藏直到母本植株开花时再用于授粉(花粉在低温0-2℃、干燥、黑暗等条件下代强度降低。
花粉贮藏的原理就是创造代强度低的环境,以延长花粉的寿命);或者双亲不在同一个地方,必须由外地邮寄花粉供应。
经过贮藏或外地邮寄的花粉是否已经丧失生活力,必须经过测定才能确定。
鉴定花粉生活力的方法主要有四种:一是将待测花粉直接授粉,然后统计结实率和结子数。
此法的缺点是需要的时间较长,且实验的结果易受气候条件的影响。
二是将待测花粉授到柱头上,隔一定时间切下柱头,在显微镜下检查花粉的萌发情况。
根据萌发率的高低来鉴定花粉的生活力。
三是在培养基上进行花粉的人工萌发,检查待测花粉萌发率的高低。
后两种方法都是根据花粉的萌发率来反映生活力的高低,有一定的参考价值。
但是萌发的不一定都能受精,特别是人工萌发还受许多条件的限制,所以也只有相对的可靠性。
四是用染色方法来鉴定花粉的生活力。
其原理是在活的花粉有过氧化氢酶的存在,它可以促进过氧化物(如H2O2)放氧分解。
这些刚被放出的活性氧很容易使还原剂氧化,常用无色联苯胺、α-萘酚等还原剂做指示剂,这些还原剂被氧化后表现红色或玫瑰红色。
如果花粉是活的,那么会很快被染成红色或玫瑰红色,如果花粉是死的,则这一反应迟迟不能进行,花粉保持原色。
此法优点是比较快捷,但是比较间接。
本试验采用悬滴培养法鉴定花粉生活力。
五、实验步骤:
1.配培养液:用蒸馏水和蔗糖分别配成5%、10%、15%的蔗糖溶液,并在各培养液
中加少量硼酸。
2.取盛开的正在散粉的二月兰花朵。
3.播花粉:在凹玻片的凹点滴一滴清水。
在盖玻片中央滴一滴培养液,用镊子轻轻夹
取二月兰的花药,在培养液中央轻轻蘸一下,使花粉均匀的分散在培养液的球面上。
在盖玻片的四角涂抹少量的凡士林,用镊子夹住盖玻片在上提的过程中迅速把它翻
转过来,小心放在凹玻片上,使培养液处在盖玻片和凹点形成的小密室中。
每个凹
玻片分别做蔗糖溶液的三个浓度,并用蒸馏水做对照。
4.培养:做好的凹玻片上贴好标签,注明花粉种类、培养液的浓度以及时间,然后小
心放到铺有湿润滤纸的培养皿中,放到22-24℃的恒温箱中培养5h。
5.观察:从恒温箱中取出凹玻片,在低倍镜下随机观察三个视野,计算花粉的萌发率。
以花粉管长度达到花粉粒径的2倍及以上视为萌发。
六、结果分析
1.分析花粉萌发率高或低的原因。
2.本实验关键性步骤总结及实验中所存在问题的讨论。
七、作业
1.绘制一幅花粉粒萌发形态图。
2.花粉生活力测定在杂交育种中的重要意义?测定花粉生活力的方法有哪些?
一般2核花粉粒较3核花粉粒高,对不适宜环境
(温度、湿度、辐射化学处理)抵抗力强。
原因:1、营养消耗2、代旺盛3、外壁薄等
花粉生活力的研究对于农业、林业来说,具有很重要的理论及生产实践意义。
它为植物的育种、培育、栽培,为进行人工授粉和杂交授粉,提供理论依据。
一般来讲,花粉生活力的长短,即决定于植物的遗传性,又受环境因素的影响。
一般情况下,花粉生活力的长短依种而异,大多数植物的花粉只能活几个小时、几天或几个星期。
一般来看:木本植物>草本植物
2胞花粉>3胞花粉
影响花粉生活力的主要环境因素有:温度、湿度及空气。
现在延长花粉生活力的措施主要有:超低温(-192℃的液态空气,-196℃的液态氮)、真空、降低氧分压、快速冷冻干燥等方法贮存。
影响花粉粒生活的因素主要
一般低温(1—50c),低湿(相对湿度20/100--50/100)低氧。
正常情况,液态氮进行超低温保存,如:水稻100C,85/100的湿度24小时;玉米50C90/100的湿度8—9天。
但禾本科要求高湿。
研究花粉储藏对解决花期不遇问题相当重要。
:(1)植物盛花期采集发育良好的花粉;(2)将花粉干燥至适宜贮藏的含水量,封装在耐低温容器;(3)经预冷处理或直接置于低温、超低温条件下贮藏;(4)根据需要,随时取出封存花粉的容器进行缓慢或快速升温解冻,使花粉复;(5)采用花粉染色法、萌发法、授粉结实法鉴定花粉生活力;(6)具有生活力的花粉用于育种。
实验十七花粉活力的测定
在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法
【原理】
正常的成熟花粉具有较强的活力,在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率,以确定其活力。
【器材与用具】
载玻片;显微镜;玻棒;恒温箱;培养皿;滤纸。
【试剂】
培养基(10%蔗糖,10Mg/L硼酸,05%的琼脂):称10g蔗糖、1Mg硼酸、05g 琼脂与90Ml水放入烧杯中,在100℃水浴中溶化,冷却后加水至100Ml备用。
【方法】
1.将培养基熔化后,用玻棒蘸少许,涂布在载玻片上,放入垫有湿润试纸的培养皿中,保湿备用。
2.采集丝瓜、南瓜或其他葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵,将花粉洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,在25℃左右的恒温箱(或室温20℃条件下)中孵育,5~10Min后在显微镜下检查5个视野,统计其萌发率。
【注意事项】
1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度、离体时间、环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘—碘化钾染色测定法
【原理】
多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】
显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】
I2-KI溶液:取2gKI溶于5~10Ml蒸馏水中,加入1g I2,待完全溶解后,再加蒸馏水300Ml。
贮于棕色瓶中备用。
【方法】
采集水稻、小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药,取一花药于载玻片上,加1滴蒸馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,在显微镜下观察。
凡是被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。
观察2~3片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性。
【注意事项】
此法不能准确表示花粉的活力,也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。
因为三核期退化的花粉已有淀粉积累,遇碘呈蓝色反应。
另外,含有淀粉而被杀死的花粉粒遇I2-KI 也呈蓝色。
三、氯化三苯基四氮唑(TTC)法
【原理】
具有活力的花粉呼吸作用较强,其产生的NADH2或NADPH2可将无色的TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】
显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】
05%TTC溶液:称05g TTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100Ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
【方法】
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴05%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15Min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
【思考题】
1.上述每一种方法是否适合于所有植物花粉活力的测定
2.哪一种方法更能准确反映花粉的活力。