场发射透射电镜操作规程共52页文档
谢谢！
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26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
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27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
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28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
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29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
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30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
场发射透射电镜操作规程
1、 舟 遥 遥 以 轻飏， 风飘飘 而吹衣 。 2、 秋 菊 有 佳 色，裛 露掇其 英。 3、 日 月 掷 人 去，有 志不获 骋。 4、 未 言 心 相 醉，不 再接杯 酒。 5、 黄 发 垂 髫 ，并怡
投射电镜TEM 2200FS操作规程-修改版
JEM-2200FS透射电镜操作规程全程视频监控，不明白处请多问，坚决禁止盲目操作。
1.换样品：插入和取出样品杆示意图，插入和取出样品杆的过程，一定不要蛮力拧样品杆，防止样品杆损坏。
放入样品杆方法：插入样品杆（注意：插入样品杆时严禁旋转样品杆），打开真空开关（提拔式开关，switch to pump），对样品预抽室抽真空(手先轻抵样品杆底部，等抽真空开始后即可松手，等待)，直至高真空指示灯亮（绿灯），再等待5分钟，切记。
将样品杆顺时针分两次共计90度旋入侧角台。
旋进时，需加水平方向力拉住样品杆以防样品杆快速吸入测角台，引起测角台损坏。
取出样品杆方法：往外轻拉样品杆，拉不动时逆时针旋转较大角度（约85度左右）至转不动；转不动时再轻拉样品杆一小段距离，逆时针旋转小角度（约5度左右）到转不动，再缓缓轻拉样品杆到绿灯亮（切记不要用力过猛全部拔出，会导致真空度下降主机保护）；打开放气开关（提拔开关，switch to air），等待，样品杆会自动松动（有氮气轻推样品杆，不要用力拽样品杆），取出样品杆。
可更换需要观察的样品，一定要轻拧螺丝，不要过力，因为压舌有一定的弧度，轻拧即可达到固定载网的目的。
但也不要松垮，防止载网滑落。
观察：（check真空，方法：1.软件界面montor value status 观察specimen/PIG电流：33-34微安2..到隔间看真空度，拧4档后，真空度<1.5即可）打开BeamValve，插入1#聚光镜光阑和2#物镜光阑（操纵板上的按钮CLA-1#-OLA-2#），利用BRIGHT NESS、SHIFT X、SHIFT Y、IMAGE X、IMAGE Y、放大倍数、焦距等旋钮调整TEM的图象，直至满意。
(Brightness 需不断调节，逆方向欠焦，欠焦为亮边，顺方向过焦，过焦为黑边，调Z可达到高分辨，3D重构，不宜调Z)2.采集图像：启动Gatan Digital Micrograph软件，（按TV键进行切换，按start view 采集图像——不是照相，是转换CCD）须注意，在Gatan CCD （右侧电脑）上观察的图像大约为Hamamazu CCD（左侧电脑）中观察图像的9倍。
日本电子透射电镜操作和使用要点
内容： 1、由TEM构造到TEM操作 2、由平行电子束到会聚电子束 3、由TEM模式到STEM模式 4、总结
总结： 1、HT重要性，常规合轴三步曲 2、会聚束模式使用 3、HRSTEM与STEM EDS analysis
光阑部分：光阑合轴 聚光镜光阑：光阑孔选择， ＃1常规图像与选区衍射 ＃2高分辨观察， ＃3纳米束分析 ＃4纳米电子束衍射 物镜光阑作用-提高图像衬度，选择合适衍射信息成像 TEM-BF/DF TILT/SHIFT 中间镜光阑作用：选区尺寸大约2um-100nm 选区衍射：SAMG模式
小结： 常规合轴 （模式改变调节） 1. 电子束中心（beam shift） 2. CL 光阑校正 3. HT 中心调整 亚常规合轴 1. 电子枪合轴 （一周一次） 2. Tilt 联动比调节（很少） 3. Shift联动比调节（很少） 合轴数据存储 TEM模式 照明角 (Alpha selector) 1. Alpha 3 ≤ 40KX 2. Alpha 2 介于40kx 与 100kx之间 3. Alpha 1 ＞ 100kx Spot size 选择 1 或者2 Alpha转变时需要合轴三步曲
入射电子束
试样
入射电子束
试样
物镜 后焦面
像原理
STEM成像原理
电子源
第一聚光镜
第二聚光镜 扫描线圈
ASID提前准备工作： 1、物镜标准电流值 2、试样高度 3、TEM常规合轴
物镜前场 试样
ASID-STEM合轴 1、合光斑位置 2、合束斑-最佳束斑
STEM模式示意图
相机常数选择
Camera length 12cm 10cm 8cm HAADF1(11.26cm) HAADF2(9.8cm) HAADF3(7.8cm) HAADF4(5.6cm) HAADF5(4.2cm) Inner(mrad) 52 61 73 56 67 92 120 167
透射电子显微镜简易操作指南设计
Tecnai G² 20 S-TWIN透射电子显微镜简易操作指南说明：●本文件的目的在于帮助用户记忆培训的内容，不能代替培训。
有意自己操作透射电镜的用户请到现场参加培训。
●为了把此文件的篇幅限制在一个合理程度，文件内容难于面面俱到。
●欢迎各位对本文件的内容提出宝贵意见！简介：一．Tecnai G² 20 ST透射电镜二．Tecnai G² 20 ST透射电镜操作注意事项三．检查实验室安全及仪器运行状况四．Tecnai G² 20 ST透射电镜基本操作步骤1.登陆计算机2.打开操作软件3.检查电镜状态4.装液氮5.装载样品6.插入样品杆7.加灯丝电流8.开始操作9.结束操作10.取出样品杆11.卸载样品12.真空低温（Cryo Cycle）13.数据刻录、转化和输出14.关闭操作软件15.退出计算机16.实验记录（注意：其中4,5,6,10,11等操作是必须由TEM室的高老师进行操作。
遇到任何异常的情况都应停止操作，并询问高老师。
）一.Tecnai G² 20 ST透射电镜●生产厂家：美国FEI公司●主要附件：美国Gatan公司1k×1k CCD相机美国EDAX公司X射线能谱仪主要规格及技术指标最高加速电压200KV或W灯丝电子枪LaB6点分辨率0.24nm晶格分辨率0.14nm最小束斑尺寸 1.5nm放大倍数25×-1030K×样品台最大倾转角A:±40°，B：±40°X射线能谱分辨率136ev分析范围Be-U主要功能及应用范围观察各种材料的微观结构并对样品进行纳米尺度的微区分析，如：形貌观察；高分辨电子显微像；电子衍射；会聚束电子衍射；衍射衬度成像；X射线能谱分析等仪器工作条件工作温度：15℃~25℃工作湿度: ＜80%电力供应：220v(±10%), 50Hz主要测试项目：明场像（BF）、暗场像（DF）高分辨像（HRTEM）能谱分析（EDX）选区电子衍射（SAED）二.Tecnai G² 20 ST透射电镜操作注意事项1.透射电镜及其附属设备中有高压电、低温、高压气流、电离辐射等危险因素，因此不正确的使用有可能造成仪器损坏，甚至人身伤亡。
透射电镜的使用PPT课件
1
1
27 A
1
g
约100倍
②不十分满足Bragg条件，因为晶体很薄，小 于100埃，而Bragg公式是由无限厚晶体导出的。
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＃爱瓦尔德作图法：
反射球近乎是平面
所以，当晶体很薄时， 为满足爱氏作图法原理，
显然，倒易点 (hkl)*应该
是具有一条倒易杆，
爱氏球(平)面才能与倒
易杆相交发生衍射。
衬度光栏
使之等于Md。
显微形貌观察
AA´
c: 调节I中,使f中,
至 f中前焦=f物后焦
选区光栏 Md
缩小衬度光栏至0级衍射
B A
A B 观察ED花样
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三. 成像衬度 TEM衬度像：
①散射衬度：透过试样不同部位时，
散射与透射强度组成比例不同引起的
反差 。
透过试样eB
束散透射射部部分分
入射电子束
②等倾干涉条纹：
试样弯曲(受热或其他，薄片翘曲） 强
度
弯曲各部晶面与入射电子束θ不同，
符合Bragg条件不同，
衍射情况不同所出现的干涉条纹。
AlN陶瓷的TEM显微像
等倾干涉条纹
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四. 电子衍射
爱瓦尔德作图法 当晶体无限厚
N ghkl
O kg (hkl) k0 2
O ghkl
M Mob Mm MP 调节透镜的激磁电流
0
Mob通 常 等 于100，Mobmax 300, Smax 1 A
物镜光栏：ob极靴进口表面， 缩小孔径角用。
衬度光栏：ob后焦面上,可变。 选区光栏：ob像平面上，可变 。 4. 图象记录装置：荧光屏 照像装置
电镜资料：电镜操作---透射电子显微镜、扫描电子显微镜
④ 抽真空(Air→Pump),查看真空状态
⑤ 旋转样品杆,在真空吸力的作用下
送入
⑥ 样品杆坐标清零(Stage neatral)
铜网 样品台 样品槽
样品杆
3. 电镜合轴
>100k
减少像差, 提高分辨率 操作方便 操作需要
① 开灯丝(Filament ON或BEAM按钮)
② 调物镜(样品)共心高度(STD FOCUS
注：在图象整个观察过程中，若对图象的对比度和亮度不满意，用鼠标点击
也可通过
进行手动调节。
3. 样品观察与拍照
h. 将所要放大的区域移到图象中心,同时顺时针旋转Magnification旋钮,把图象放大
到自己需要的倍数,调节Focus中的Fine旋钮
继续聚焦,调节到图象没有形变。
i. 调节Stigma x和y旋钮，进行象散校正，需对x和y进行单独校正，可反复多次校正，
电镜操作
---透射电子显微镜、扫描电子显微镜
一、透射电子显微镜
目录
1 实验前准备
2 装入样品杆
3 电镜合轴
4 电镜实验
5 拔出样品杆
1. 实验前准备
01
选择样品 （制样）
UV-vis
02
了解仪器
03
检查仪器
空调、除湿机开启正常 冷肼液氮已添加 循环水供应正常 软件界面各项参数正常
JEOL JEM-2100
4. 电镜实验
③ 高分辨透射(HRTEM)
选定样品中感兴趣的区域(若是单晶样品,需倾转至正晶带轴); 取出物镜光阑;调整至合适放大倍数(SA),仔细调节共心高度; 仔细进行电镜合轴,尤其是Rotation Center ; 放大至350K或400K;CCD观察,用FFT判断象散及聚焦情况; 曝光时间设置为1s,拍摄图像并保存
Tecnai F30 场发射透射电镜操作规程-2020版
Tecnai F30 场发射透射电镜操作规程一、操作前准备◼刷卡打开电镜主机显示器，检查Tecnai User Interface控制软件是否正常运行；◼检查电镜状态：Vacuum, High Tension (HT)--on, FEG --operate；◼检查Column Valve是关闭状态（黄色表示关闭）；◼检查测角台X, Y, Z, α, β 的值在“0”附近；◼填满液氮杜瓦瓶（确认投影室观察窗是用黑色挡盖挡住）。
每3-4小时需要填充一次，否则真空会变差污染样品。
建议午饭和晚饭前各填充一次。
◼注意事项：在填充液氮或者有事临时离开电镜时，务必把Column Valve关上。
二、插入样品杆◼将样品装入样品杆（仔细检查样品是否固定牢靠）；1)上下旋转样品杆确保没有样品等掉下来；如果你的样品由分散的碎片组成如粉末样品，务必把铜网的样品面朝下（面向样品杆）；2)禁止用手去接触到样品杆前端部分（手上的油会污染样品杆）。
◼检查样品杆和样品杆上的O-ring橡胶圈；1)用镊子或者洗耳球除掉橡胶圈上的粉尘、丝状物等；2)若发现O-ring橡胶圈受损，请立刻告知电镜管理员。
◼检查光阑（Obj/SA）处于retract状态；对准样品杆，确保样品杆上的顶针和测角台的槽是对应上的（5点钟方向）；◼插入样品杆，同时托住样品杆避免往逆时针方向旋转；测角台上的红灯会亮起；◼在软件上选择“proper holder type”，点击Enter。
如果是双倾杆，需要先连接线缆，再点击Enter；◼等预抽真空大概4min（软件上会有3min倒计时）。
当测角台上的红灯灭掉，顺时针旋转样品杆（约120°）然后托住样品杆缓缓插入（整个过程一定要保持顺畅，绝对不能用蛮力）。
三、观察拍照◼当Column/IGP1 Vacuum低于15log（低于12log更佳），打开Column Valve；◼降低放大倍数找到样品感兴趣的区域；◼按压操作面板上的“Eucentric Height”，使用“Z” height 来聚焦样品；◼使用Digital Micrograph软件进行拍照。
场发射透射电镜(TEM)测试制样说明
场发射透射电镜（TEM)测试制样说明测试样品范围：各种材料内部微结构进行观察；粉末、纳米颗粒形貌和粒径观察选区电子衍射和晶体结构分析；金属、陶瓷、半导体、塑料、农作物、细胞等显微结构；配合EDS能谱仪可以对各种元素进行定性和半定量微区分析，元素检测范围：B～U元素。
透射电镜（TEM)测试制样要求：1. 透射电镜能够观察200nm以下的样品；2. 对于粉末和液体样品，要求样品均匀分散在支持膜上并且干燥；3. 块体样品，要求样品大小为直径3mm的圆，厚度为200nm以下；高分辨样品要求厚度在10nm以下；4. 含磁样品需要在委托测试单中重点标识，需要特殊处理，否则不予测试；5. 需要离子减薄的金属、陶瓷样品，需要已预减到150微米以下，否则不予制样和测试。
透射电镜生物样品制备步骤：1．取材：组织块小于1立方毫米2．固定：2.5%戊二醛，磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。
用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次1%锇酸固定液固定2-3小时用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次3．脱水：50%乙醇15-20分70%乙醇15-20分90%乙醇15-20分90%乙醇90%丙酮（1：1）15-20分90%丙酮15-20分以上在4度冰箱内进行100%丙酮室温15-20分三次4．包埋：纯丙酮+包埋液（2：1）室温3-4小时纯丙酮+包埋液（1：2）室温过夜纯包埋液37度2-3小时5．固化：37度烘箱内过夜45度烘箱内12小时60度烘箱内24小时6．超薄切片机切片70 nm7．醋酸铀-柠檬酸铅双染色负染色的操作方法用一根细滴吸管吸一滴样品悬液滴在有膜的铜网上，滴样时要防止铜网被液体吸到管上来或翻转而被污染。
如果用Formvar膜时，在制好膜后，可以直接在粘于滤纸上的铜网进行负染色操作。
如果用碳膜时，要用镊子夹着铜网，滴液后静置数分钟，然后用滤纸从铜网边缘吸去多余的液体，滴上负染色液，染色1～2分钟用滤纸吸去负染色液，再用蒸馏水滴在铜网上洗1～2次，用滤纸吸去水，待干后可用于电镜观察。
透射电镜使用流程
透射电镜使用流程样品准备：首先，需要准备符合透射电镜观察要求的样品。
对于动物组织标本，应在取样后的短时间内（如1-3分钟内）立即投入电镜固定液中以固定组织，然后切成适当大小的块状。
固定液的渗透能力有限，超出特定尺寸后组织可能无法完全固定，因此务必注意控制取样组织的体积。
取样后，组织应在室温下避光固定一段时间，然后转移至低温保存，以待后续处理。
抽真空与加高压：打开透射电镜前，需要先接通总电源，打开冷却水，并接通抽真空开关进行抽真空。
待真空度达到指定值后，可以开始上机工作。
接着，接通镜筒内的电源，给电子枪和透镜供电，并给电子枪加高压至所需值。
观察与调整：在荧光屏状态下，通过操作工具选择观察区域，并调整画面亮度。
选定观察区域后，需要调弱光强，确保光强度在适当的范围内，然后切换到CCD模式进行进一步调整。
通过调节旋钮可以增大或减小放大倍数，选定拍照区域后，再次调整光强使图像清晰。
完成这些步骤后，点击面板上的聚焦键进行自动聚焦，并使用聚焦旋钮将图像调整至最清晰。
拍照与记录：在图像清晰并调整到最佳状态后，可以进行拍照操作。
务必注意，在拍照前点击保存按钮，否则图像不会自动保存。
卸载样品与清理：观察完成后，需要按照特定的步骤卸载样品，包括拔出样品杆、取出样品等。
然后，进行真空低温处理，以确保设备处于良好的工作状态。
请注意，透射电镜是一种高精密度的科研仪器，使用时必须严格遵循操作规程，以确保设备的安全和实验的准确性。
同时，由于透射电镜的使用涉及复杂的物理和化学原理，操作人员应具备一定的专业知识和技能。
在进行透射电镜操作时，建议由经验丰富的专业人员或在专业人员的指导下进行。
TECNAI_F30场发射透射电镜操作规程 PPT
大家学习辛苦了，还是要坚持
继续保持安静
2. 检查空调、冷却水机、空气压缩机、不间断 电源及其他相关设备仪表的工作状况，确保 其正常运行。
3. 检查实验器材（样品杆、镊子、杜瓦瓶、投 影室视窗）是否有损坏。
4. 检查仪器使用日志。
注意事项
1. 如果发现仪器或者实验记录有异常情况，须 立即向仪器管理人员汇报，不得擅自处理。
2. 如果出现红色，数值为99，说明仪器真空破坏，不 得进行实验。
3. High Tention必须为黄色，数值为300kV。 4. 无报警符号 出现。 5. 若样品位置X，Y，Z，A，B不为0，需要进行归零，
如果样品位置偏移较多，立即汇报。 6. 凡出现非正常状况，应立即停止实验，联系管理员，
并做相关记录。
三、装液氮
1. 将投影室视窗用挡板挡住。 2. 戴上手套，将液氮小心地倒入
杜瓦瓶中（不要装满），慢慢 将铜辫伸入杜瓦瓶中，并将杜 瓦瓶安置在支架上。 3. 将瓶中的液氮装满，并盖上盖 子。 4. 往能谱罐中加满液氮（一般不 用此操作）。
注意事项
1. 操作前应将投影室视窗用挡板挡住，以确保 液氮不会溅落到上面。如果液氮溅落到视窗 上，可能引起玻璃破裂，将会对实验者造成 巨大的危害。
4. 装好样品一定要确定样品在凹槽处，并且不 会掉落。
五、进样（单倾样品杆）
1. 再次确认样品的x，y，z，A，B五个坐标近似为零。如 果不为零，点击Holder进行归零。
2. 确认样品台的红灯熄灭（如果红灯是亮的，应点击 Holder，这时红灯就会熄灭）。
3. 手拿样品杆，将限位突针对准Close标线，沿轴线平行将 样品杆小心插入，向内滑动样品杆直到遇到阻挡。样品 预抽室开始预抽，样品台的红灯亮，预抽开始。
场发射扫描电镜操作规程
21．按样品室操作面板上的“EVAC” 指示灯，使样品交换室保持真空状态。
22．选择菜单栏中的“File” 菜单下的“Exit”选项，退出扫描程序。
23．关闭电脑。
二、注意事项：
1．做完“Flash”30秒后，才可以进行扫描操作；先做“Normal Flash” 再做“Strong Flash” 且两次Flash 之间要间隔30秒以上。
点击工具栏中的tool按钮弹出maintenance窗口打开gunpmtvac标签查看真空室和过渡室的真空度是否在指定范围枪室真空度不能小于5108过渡室真空度不能小于5106打开instrumentflash标签点击normalflash选项清除枪表面吸附的气体等杂质
场发射扫描电镜操作规程
一、操作流程
13．调节操作面板上的放大倍数，焦距，亮度，对比度，像散等旋钮，获得清晰的图像。
14．按操作面板上的“Freeze”按钮，锁住图像。
15．点击“File”菜单下的“Image File Handling”选项，打开“Load/Save/Print Image”窗口。
16．点击“Export”或“Save”按钮，输入文件名及有关信息后，点击“Save”按钮，则样品的图像被存储在文件中。
4．确认工具栏中的加速电压按钮“HT”为兰色，选择“Stage”菜单下的“Exchange” （或点击工具栏中的“Speciman Exchange”按钮），打开“Sample Exchange”窗口，选择要使用的样品夹，点击“Exchange 1”。
5．旋转工作距离旋钮使WD为8mm，倾斜角为0o，当屏幕左下角指示的样品台的位置显示为“X=35.0, Y=25.0, R=0”且样品室操作面板上的“EVAC”和“EXCH POSN”指示灯亮时，按“VENT”指示灯，该灯闪烁，氮气进入样品交换室。