(推荐)环境微生物学》和《大气污染控制工程》实验教案
环境工程微生物学一流课程教案模板范文

环境工程微生物学一流课程教案模板范文环境工程微生物学一流课程教案模板范文一、引言在当今社会,环境工程微生物学已经成为一个备受关注的学科领域。
随着环境问题的日益加剧,微生物学在环境管理和保护方面发挥着越来越重要的作用。
针对环境工程微生物学课程的教学模板,需要注重深度和广度的结合,以培养学生丰富的专业知识和创新能力,使其能够应对复杂的环境问题和挑战。
二、课程目标环境工程微生物学一流课程的教学目标主要包括:1. 掌握环境微生物学的基本概念和理论知识;2. 熟悉微生物在环境中的作用和应用;3. 了解环境问题与微生物的关联,以及微生物在环境修复和治理方面的应用前景;4. 培养学生的实践能力和创新思维,提高解决环境问题的能力。
三、教学内容1. 环境微生物学基本概念ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY BASIC CONCEPTS在此部分,需要介绍环境微生物学的基本概念,包括微生物的分类、结构和功能等内容。
通过对基础知识的讲解,使学生对微生物学有一个全面的认识,并为后续学习做好铺垫。
2. 微生物在环境中的作用THE ROLE OF MICROBES IN THE ENVIRONMENT该部分需要重点讲解微生物在环境中的作用,包括分解有机物、生物地球化学循环、环境修复等。
学生需要理解微生物在环境中的重要性,以及其在环境管理中所起到的作用。
3. 环境问题与微生物的关联ENVIRONMENTAL ISSUES AND THE LINK TO MICROBES这一部分应该深入探讨环境问题与微生物之间的关系,包括污染物降解、环境污染的防治等内容。
通过具体案例分析,让学生了解环境问题与微生物之间的联系,引导他们思考如何利用微生物来解决环境问题。
4. 微生物在环境修复和治理中的应用前景APPLICATION PROSPECTS OF MICROBES IN ENVIRONMENTAL REMEDIATION AND MANAGEMENT在这一部分,需要展示微生物在环境修复和治理中的应用前景,包括土壤污染的生物修复、水体污染的生物治理等。
《大气污染控制工程》教案-第一章

第一章概论第一节大气与大气污染一、大气的组成1。
大气与空气大气(atmosphere):指环绕地球的全部空气的总和(The entire mass of air which surrounds the Earth)环境空气(ambient air):指人类、植物、动物和建筑物暴露于其中的室外空气(Outdoor air to which people,plants,animals and structures are exposed)。
从自然科学角度来看,两者并没有实质性的差别。
但在环境科学中,为了便于说明问题,有时两个名词分别使用,一般对于室内和特指某个地方(车间,厂区等),供给植物生存的气体,习惯上称为空气,对这类场所的空气污染用空气污染一词,并规定相应的质量标准和评价方法。
而对大区域或全球性的气流,常用大气以词,同时对区域性的空气污染称为大气污染,并有相应的质量标准和评价方法。
大气污染控制工程的研究内容和范围,基本上都是环境空气的污染与防治,而且更侧重于和人类关系最密切的近地层空气。
据研究,成年人平均每天需1公斤粮食和2公斤水,而对空气的需求则大的多,每天约13。
6公斤(合10m3),不仅如此,如果三者同时断绝供给,则引起死亡的首先是空气。
2。
大气的组成大气是由多种气混合组成、按其成分可以概括为三部分:干燥清洁的空气,水蒸汽和各种杂质。
干洁空气的主要成分是氮、氧、氩和二氧化碳气体,其含量占全部干洁空气的99。
996%(体积);氖、氦、氪、甲烷等次要成分只占0.004%左右,如表1-1所示(2)。
由于空气的垂直运动、水平运动以及分子扩散,使不同高度、不同地区的大气得以交换和混合。
因而大气的组成比例直到90一100km的高度还基本保持不变.也就是说,在人类经常活动的范围内,任何地方干洁空气的物理性质是基本相同的.大气中的水蒸气含量平均不到0。
5%,而且随着时间、地点、气象条件等不同而有较大变化.其变化范围可达0.01%~4%。
大气污染控制工程教案【范本模板】

第一章绪论(1学时)教学重点:大气的结构和组成,大气污染物及其来源,环境空气质量标准,空气污染指数。
教学难点:大气污染物及其来源。
教学要求:掌握大气的结构和组成,大气污染发生和发展过程,大气污染物及其来源,空气污染指数;了解环境空气质量标准,国内外大气污染控制现状。
教学内容:人是完全靠空气生存的,成年人平均每天约需1Kg粮食和2Kg水,但对空气的需求就大得多,每天约13。
6Kg(合10m3)。
若三者都断绝供应,引起死亡的首先是空气,要是空气中混进有毒害的物质,则毒物随空气不断地被吸入肺部,通过血液遍布全身,对人体健康直接产生危害。
大气污染对人的影响不同于土壤和水的污染,它不仅时间长且范围广 (较多是地域性的,也有全球性的)。
地球上发生的八大“公害事件",其中五起是因大气污染造成的。
当然,空气污染的原因不只是人类的活动,还有像森林、火灾和火山爆发一类的天然事件.不过后者通常在空气污染中起次要作用。
§1.1 大气与大气污染一、大气的结构和组成1、大气圈随地球引力而转的大气层叫大气圈。
大气圈的最外层的界限是很难确切划分的,但大气也不能认为是无限的。
在地球场内受引力而旋转的气层高度可达10¸000Km。
有的学者就以10¸000Km作为大气圈的最外层。
一般情况下认为,从地球表面到1¸000~1¸400Km的气层作为大气圈的厚度,超出1¸400Km以外气体非常稀薄,就是宇宙空间了。
大气圈中的空气分布是不均匀的,海平面上的空气最稠密。
在近地层的大气层里,气体的密度随高度的上升而迅速的变稀.但是在400~1¸400Km大气层里空气是渐渐变稀薄的。
大气圈的总质量约为6000万亿吨,约为地球质量的百万分之一。
大气的构造:根据大气圈中大气组成状况及大气在垂直高度上的温度变化,划分大气圈层的结构如下图:从地球表面向上,大约到90Km高度,大气的主要成分氧和氮的组成比例几乎无什么变化,具有这样特性的大气层叫均质大气层(简称均质层)。
大气污染过程控制工程教案

大气污染过程控制工程教案第一章:大气污染概述教学目标:1. 理解大气污染的定义和分类。
2. 掌握大气污染的主要来源和影响。
3. 了解我国大气污染现状及治理政策。
教学内容:1. 大气污染的定义和分类2. 大气污染的主要来源和影响3. 我国大气污染现状及治理政策教学方法:1. 讲授法:讲解大气污染的基本概念、来源和影响。
2. 案例分析法:分析我国大气污染实例,了解治理政策及效果。
教学活动:1. 引入大气污染的话题,让学生了解大气污染的基本概念。
2. 通过PPT展示大气污染的分类及主要来源。
3. 分析我国大气污染现状,了解治理政策及实施效果。
作业与评估:2. 课堂讨论:学生汇报自己的作业成果,进行课堂讨论。
第二章:大气污染物的迁移和转化教学目标:1. 理解大气污染物的迁移和转化过程。
2. 掌握大气污染物的输送、扩散和衰减规律。
3. 了解大气污染物的转化机制及影响因素。
教学内容:1. 大气污染物的迁移和转化过程2. 大气污染物的输送、扩散和衰减规律3. 大气污染物的转化机制及影响因素教学方法:1. 讲授法:讲解大气污染物的迁移和转化过程。
2. 模拟实验法:通过模拟实验让学生了解大气污染物的输送、扩散和衰减规律。
3. 案例分析法:分析实际案例,了解大气污染物的转化机制及影响因素。
教学活动:1. 引入大气污染物迁移和转化的话题。
2. 通过PPT讲解大气污染物的输送、扩散和衰减规律。
3. 进行模拟实验,让学生直观了解大气污染物的迁移和转化过程。
4. 分析实际案例,了解大气污染物的转化机制及影响因素。
作业与评估:2. 课堂讨论:学生汇报自己的作业成果,进行课堂讨论。
第六章:大气污染监测技术教学目标:1. 理解大气污染监测的重要性。
2. 掌握大气污染物监测的基本方法和技术。
3. 了解大气污染监测设备的应用及数据处理。
教学内容:1. 大气污染监测的重要性2. 大气污染物监测的基本方法和技术3. 大气污染监测设备的应用及数据处理教学方法:1. 讲授法:讲解大气污染监测的基本概念和技术。
《大气污染控制工程》教案第一章

《大气污染控制工程》教案第一章1.课程概述本课程主要介绍大气污染控制工程的基本知识,包括大气污染物的来源、环境效应以及污染控制技术等方面。
通过本课程的学习,学生将了解大气污染控制领域的最新研究进展,掌握大气污染控制技术的基本原理和实验技能。
2.教学目标本章的教学目标包括:2.1了解大气污染的基本概念和特征,掌握大气污染的来源和影响因素;2.2了解大气污染的治理方法和技术,掌握大气污染控制技术的基本原理;2.3了解大气污染的监测方法和标准,掌握大气污染监测技术的基本原理。
3.教学内容3.1大气污染的基本概念和特征3.1.1大气污染的定义和分类3.1.2大气污染的特征和危害3.2大气污染的来源和影响因素3.2.1自然因素和人为因素对大气污染的影响3.2.2城市化和工业化对大气污染的影响3.3大气污染的治理方法和技术3.3.1物理方法、化学方法和生物方法控制大气污染的原理和应用3.3.2传统技术和新技术在大气污染治理中的应用3.4大气污染的监测方法和标准3.4.1大气污染物的监测方法和技术3.4.2大气污染物的排放标准和环境质量标准4.教学重点和难点4.1教学重点:4.1.1大气污染的特征和污染物的分类4.1.2大气污染的治理方法和技术4.1.3大气污染的监测方法和标准4.2教学难点:4.2.1大气污染治理技术原理的讲解和实验操作4.2.2大气污染环境标准的解释和应用5.教学方法5.1讲授法:讲授大气污染的基本概念和特征,介绍大气污染的来源和影响因素、治理方法和技术、监测方法和标准。
5.2实验法:实验操作大气污染治理技术,掌握大气污染监测技术。
5.3案例分析法:通过案例,让学生更好地理解大气污染治理技术和标准。
6.教学评估6.1考试:课程结束后,进行闭卷考试,检测学生对于大气污染控制工程的掌握程度。
6.2实验报告:实验结束后,要求学生提交实验报告,评估学生对于大气污染监测技术的掌握情况。
6.3论文作业:给予学生一定时间,要求写一篇关于大气污染控制的论文,评估学生的综合能力。
大气污染控制工程教案-05-06(一)

《大气污染控制工程》教案学院、系:环境科学与工程学院任课教师:任爱玲赵文霞授课专业:环境工程课程学分:4学分课程总学时:60学时课程周学时:4学时2005年8月《大气污染控制工程》教学进程第 1 次课 2 学时课程简介:⏹1。
使用教材郝吉明,马广大等编著. 大气污染控制工程. 北京:高等教育出版社,2003。
赵文霞,任爱玲.环境工程实验指导书. 河北科技大学,1999。
2.主要参考书蒲恩奇,任爱玲等编.大气污染治理工程. 北京:高等教育出版社,1999。
林肇信主编.大气污染控制工程. 北京:高等教育出版社,2002。
Noel de Nevers主编. 大气污染控制工程(影印版)(第2版). 北京:清华大学出版社,2000。
郭静,阮宜纶主编. 大气污染控制工程. 北京:化工出版社,2001。
罗辉主编. 环保设备设计与应用. 北京:高等教育出版社,1997.课程在培养计划中的作用:《大气污染控制工程》是高等院校环境工程专业的主干学科,本科生专业必修课之一。
本课程系统地讨论大气污染控制工程的基本知识,大气污染气象学基础知识,大气污染防治技术的基本理论、基本概念、基本原理、主要设备和典型工艺等。
培养学生分析和解决大气污染控制工程问题的基本能力,结合课程实验和毕业设计等教学环节,为学生毕业后从事大气污染控制工程设计,技术管理等工作奠定必要的基础。
课程内容的先进性、实用性和特色本课程内容深度和广度适中,适时增加本学科最新成果和发展趋势,并结合实际问题有重点的引导学生理论联系实际,体现学科的前瞻性和实用性。
力争使学习者形成惯性思维、产生创造性构思,其特点是面向二十一世纪社会对环保技术人才的需要,满足国家教委环境工程专业教学指导委员会《大气污染控制工程》课程的要求。
基本要求:⏹1.了解大气污染物及其主要污染源,大气环境标准及综合防治措施。
⏹2.了解大气污染与燃烧的关系。
⏹3.了解大气污染与气象的关系,初步学会大气污染物浓度分布和烟囱设计的估算方法。
高中生物大气污染教案

高中生物大气污染教案
课程名称:高中生物
教师:XXX
教学目标:
1. 了解大气污染的概念和影响;
2. 掌握大气污染的主要来源和种类;
3. 了解大气污染对人类和环境的危害;
4. 提高学生的环保意识,激发对环境保护的责任感。
教学内容:
1. 大气污染的概念和影响;
2. 大气污染的主要来源和种类;
3. 大气污染对人类和环境的危害;
4. 环境保护的重要性和方法。
教学过程:
一、导入(5分钟)
教师简要介绍大气污染的概念和影响,引发学生对环境保护的思考和探索。
二、学习(20分钟)
1. 学生阅读相关资料,了解大气污染的主要来源和种类;
2. 学生讨论大气污染对人类和环境的危害。
三、实践(15分钟)
1. 学生分组,开展大气污染实验,观察大气污染的影响;
2. 学生撰写实验报告,总结实验结果。
四、讨论(10分钟)
教师组织学生讨论环境保护的重要性和方法,鼓励学生提出自己的见解和建议。
五、总结(5分钟)
教师总结本节课的重点内容,强调环境保护对人类和地球的重要性,激发学生对环境保护的责任感。
教学反思:
本节课设计了多种教学方法,旨在提高学生的环保意识和环境保护的能力。
教师在课堂上应引导学生积极参与,激发他们思考和探索的热情,帮助他们树立正确的环境保护观念,为构建美丽家园贡献自己的力量。
大气污染控制工程教案

大气污染控制工程教案
一、教学目的
本教学计划旨在了解大气污染的种类和控制方法,实现环境保护和可持续发展
的目标。
二、教学内容
1. 大气污染的种类及其危害
•大气污染种类:颗粒物、二氧化硫、氮氧化物、臭氧、挥发性有机物等;
•大气污染危害:影响健康、破坏环境、引发气候变化等。
2. 大气污染控制工程及其方法
•控制工程:烟囱高度、烟气的净化、氮氧化物还原、脱硝、脱硫、废气回收等;
•控制方法:政策法规、技术手段和行业管理等。
3. 大气污染控制案例分析
•美国的大气污染防治:空气质量管理法、清洁空气法等;
•中国的大气污染防治:大气污染治理十条、VOCs技术指南等。
三、教学方法
•理论授课:通过教学PPT、视频等材料讲授大气污染的基本知识和控制方法;
•手动实验:利用实验室设备模拟大气污染控制的过程,学生亲手体验并掌握污染物减排的技术;
•讨论交流:引导学生就案例进行探讨、分享实践心得,加深对大气污染防治工作的理解和认识。
四、教学评估
•课堂测试:出题方式包括单项选择题、填空题、简答题等,考察学生对大气污染的掌握情况;
•学生报告:由学生围绕控制案例进行课堂报告,考察其研究掌握案例的能力和表达能力;
•课程作业:以小组形式完成大气污染防治的调研报告或现场观察报告,考察其孔亟性和综合应用能力。
五、参考资料
1.《大气污染防治法》;
2.《VOCs技术指南》;
3.《空气质量管理法》;
4.《机动车污染物排放限值和测量方法》;
5.《清洁空气法》。
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三、《环境微生物学》和《大气污染控制工程》部分实验一水中细菌总数的测定一、目的要求l.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。
2.了解水源水的平板菌落计数的原则。
二、基本原理本实验应用平板菌落计数技术测定水中细菌总数。
由于水中细菌种类繁多,它们对营养和其他生长条件的要求差别很大,不可能找到一种培养基在一种条件下,使水中所有的细菌均能生长繁殖,因此,以一定的培养基平板上生长出来的菌落,计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。
目前一般是采用普通肉膏蛋白胨琼脂培养基。
三、器材l.培养基:肉膏蛋白胨琼脂培养基,无菌水。
2.仪器或其他用具:灭菌三角烧瓶,灭菌的带玻璃塞瓶,灭菌培养皿,灭菌吸管,灭菌试管等。
3.玻璃器皿的洗涤和灭菌3.1玻璃器皿的洗涤①新购置的玻璃器皿,因含游离碱,应先在此2%盐酸中浸泡数小时,用自来水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗1-2次并沥干。
②培养细菌的玻璃器皿,应先经高压蒸汽灭菌,趁热倒出培养基,用热肥皂水或洗涤剂洗刷残渍,再用清水冲洗干净,最后用蒸馏水冲洗1-2次,沥干。
③洗涤剂吸管量,可先置3%来苏液内浸30min或高压政策蒸汽灭菌,再用洗涤剂洗涤,用清水及蒸馏水冲洗干净。
④洗涤染色瓶时,可在5%漂白粉中浸泡24h后,再用常规方法洗涤干净。
⑤含油脂的玻璃器皿,应单独高压灭菌洗涤,趁热倒出污物,置100℃干燥箱内烘0.5h,再放入5%碳酸氢钠水中煮沸,先去脂再行常规洗涤。
3.2玻璃器皿的灭菌(1)高压蒸汽灭菌这是应用研究最广泛的灭菌方法,灭菌是用高压蒸汽灭菌锅进行。
手提式高压蒸汽灭菌器,使用方便,其操作方法主注意事项如下:①打开锅盖或从加入口处向锅内加入适量的水。
②加水后,将待灭菌器皿放入锅内,不要塞得过紧,以使锅内温度均匀,再将锅盖盖好,拧紧螺旋,使其密封。
③打开放气阀,打开热源加热至水沸腾,让锅内冷空气充分逸出。
否则锅内温度达不到压力表所指示的对应温度,灭菌不彻底。
当冷空气由排气孔排尽后,再关紧放气活塞。
等锅内蒸汽压上升至所需压力时,控制热源,维持所需时间,一般为0.10343MPa(121℃)表压,保持20min。
④灭菌完毕,关闭热源,必须待压力自然降至“0”时,方可启盖取出灭菌物品,否则易发生危险。
(2)干热灭菌实验室中常用的还有热空气灭菌的方法,即将洗干净的待灭菌器皿均匀放入恒温干燥箱内,便不得与内层底板直接接触。
关闭箱门,开户电源开关,用恒温调节器,使温度上升至160-170℃,维持2h,即可达到灭菌目的。
灭菌完毕后,需关闭电源开关,待温度降至50℃以下时,方可开门取物,否则玻璃器皿可因骤冷而爆裂。
4.培养基的制备配制一般培养基的主要程序可分为:调配、溶化、调节Ph、澄清过滤、分装、灭菌、鉴定等步骤。
①调配:按培养基配方准确称取各成分,用少量水溶解。
对于肉膏之类粘、胶状物,可盛在小烧杯或表面皿中称量,然后加水移入培养基中。
此外,也可放在称量纸上称量后直接放入水中,这时如稍微加热,肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨等极易吸潮物质,在称取时动作要迅速。
此外,维生素、氨基酸、无机盐等微量成分,可预先配制高深度的贮备液,在配制培养基过程中再按配方比例取一定量加入培养液中即可。
②融化:将各成分混匀于水中,最好以流通蒸汽融化0.5h,如在电炉上融化应随时搅拌,如有琼脂成分时,应注意防止外溢。
融化后,应注意补充失去的水分,补足至原体积。
制备大量培养基时,除玻璃器皿外,还可用搪瓷桶、铝锅等容器加热融化,但不可用锅或铁锅,以免金属离子进入培养基中影响细菌生长。
③调节pH值:一般细菌用的培养pH调整在6.8-7.2之间,但也有需要酸性或碱性的培养基。
培养基高压灭菌后,pH值约降低0.1-0.2,故调节时应比实际需要的pH值高0.1-0.2。
但有时也可降低0.4,因所使用的灭菌器不同而不同。
调节pH值,用盐酸和氢氧化钠,因为在相同pH值下,有机酸比无机更易抑制微生物生长,因此,除非特殊情况,最好不要用乙酸等有机酸来调节pH值。
一般用精密pH试纸调节(精确到0.1pH单位),必要时也可酸度计。
调节时需注意逐步滴加,勿使过酸或过碱而破坏培养基中某些组分。
④过滤澄清:培养基配成后,一般都有沉渣或混浊,需过滤,使其清晰透明方可使用。
液态培养基常用滤纸过滤;固态培养基如琼脂培养基,加热后需趁热用脱脂棉或多层纱布过滤。
⑤分装:将调节pH值后的培养基按需要趁热分装于三角瓶或试管内,以免琼脂冷凝。
分装量不宜超过容器的2/3,以免灭菌时外溢。
分装时应注意勿使培养基粘附于管口与瓶口部位,以免沾染棉塞而滋生杂菌。
基础培养基一般常分装于三角瓶内,分装的量应根据使用目的和要求决定,但必须定量分装,以便灭菌后使用。
琼脂斜面分装量为试管容量的1/5,灭菌后须趁热放置成斜面,斜面长度约为试管长度的2/3。
半固体培养基分装量约占试管长度的 1/3,灭菌后趁热直立,待冷却凝固。
高层琼脂分装量约为试管长度的1/3,灭菌后直立凝固待用。
琼脂平板是将灭菌后的培养基,冷却至50℃左右,在无菌条件下倾入灭菌平皿内。
内径9cm的平皿倾注培养基约15ml左右,使培养基平铺于皿底部,凝固后即成。
倾注培养基时,切勿将皿盖全部启开,以免空气中尘埃及细菌落入。
新制成的培养平板,表面水分较多,不利于细菌的分离,通常应将平皿倒扣置于37℃培养箱内约30min,待平板干燥后使用。
⑥灭菌:加热配制培养基后,在2h内进行了灭菌处理。
不要把未灭菌的培养基冷藏或存放。
绝大多数培养基都应放在高压灭菌器内于121℃灭菌,并应在达到这一温度后持续15min。
糖类液态培养基或含有其他特殊成分的培养基,高压蒸汽灭菌会使其分解,一用滤膜过滤灭菌。
或者将不耐热物质用其他方法灭菌(如流通蒸汽灭菌)后,再加入已灭菌的培养基中。
⑦保存:配制好的培养基,不宜保存过久,以少量勤配制为宜。
每批应注明制作日期。
已灭菌的培养基可在4-10℃存放1个月。
存放时应避免阳光直射,并且要避免杂菌浸入和液体蒸发。
当发酵管中的液体培养基存放在冰箱或者适中的低温时,可能有空气溶解进去,以致在37℃培养时,会在管内形成空气泡。
因此,凡存放在低温的发酵管,使用前应先予以培养过夜,弃去有气泡的管子。
液态培养基在室温下存放超过一周,可能有水分蒸发,如果管内液体损失10%,应弃去不用。
5.各种培养基的成分与制备为减少配制中的误差,尽量选用市售已配好的综合培养基。
(1)营养琼脂培养基蛋白胨10g牛肉浸膏3g氯化钠5g琼脂15-20g蒸馏水1000ml将上述成分混匀后,调节pH为7.4-7.6,过滤去除沉淀,分装于玻璃容器中,经121℃高压蒸汽灭菌15min,贮存于暗处备用。
(2)乳糖蛋白胨培养液蛋白胨10g牛肉浸膏3g氯化钠5g乳糖5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml蒸馏水1000ml将蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氧化钠加热溶解于1000 ml蒸馏水中,调节pH为7.2-7.4,再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml,充分混匀,分装于含有倒置的小玻璃管的试管中,于高压蒸汽灭菌器中,在115℃高压蒸汽灭菌20min,贮于暗处备用。
此培养基适用于检验大肠菌群时作发酵试验用。
根据实际需要,也可按上述配方比例(除蒸馏水外)配成二倍、三倍或五倍浓缩的乳糖蛋白胨培养液,制法同上。
(3)品红亚硫酸钠培养基(多管发酵用)蛋白胨10g乳糖10g琼脂20-30g磷酸氢二钾 3.5g无水亚硫酸钠5ml 蒸馏水1000ml5%碱性品红乙醇溶液20 ml①贮备培养基:先将琼脂加至900 ml蒸馏水中,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨,渴匀使其溶解,再以蒸馏水补足至1000 ml,调节pH为7.2-7.4。
趁热用脱脂棉或多层纱布过滤,再加入乳糖,混匀后定量分装于烧瓶内,置高压蒸汽器中,在115℃高压蒸汽灭菌20min。
贮于暗处备用。
②平板培养基:将上述贮备培养基加热融化。
以无菌操作,根据瓶内培养基的容量,用灭菌吸管按1:50的比例吸取一定量的5%碱性品红乙醇溶液置于灭菌空试管中;再按1:200的比例称取所需的无水亚硫酸钠置于另一灭菌空试管内,加灭菌水少许使其溶解,再置于沸水浴中煮沸10min灭菌。
用灭菌吸管吸取已灭菌的亚硫酸钠溶液,滴加于碱性品红乙醇溶液内至深红色褪成淡红色为止(不宜多加)。
将此混合液全部加入已融化的贮备培养基内,并充分混匀(防止产生气泡)。
立即将此种培养基适量(约15 ml)倾入已灭菌的空平皿内,待其冷却凝固后,倒置冰箱内备用。
此种已制成的培养基于冰箱内保存不宜超过两周,如培养基已由淡红色变成深红色,则不能再用。
(4)伊红美蓝培养基(ERB培养基)蛋白胨10g乳糖10g琼脂20g磷酸氢二钾 2.0g蒸馏水1000ml 2%伊红(曙红)水溶液20ml0.5%美蓝(亚甲基蓝)水溶液13 ml①贮备培养基:先将琼脂加至900 ml蒸馏水中,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨,渴匀使其溶解,再以蒸馏水补足至1000 ml,调节pH为7.2-7.4。
趁热用脱脂棉或多层纱布过滤,再加入乳糖,混匀后定量分装于烧瓶内,置高压蒸汽器中,在115℃高压蒸汽灭菌20min。
贮于暗处备用。
②平板培养基:将上述贮备培养基加热融化。
以无菌操作,根据瓶内培养基的容量,用灭菌吸管按比例吸取一定量的2%伊红水溶液及0.5%美蓝水溶液加入已融化的培养基内,并充分混匀(防止产生气泡)。
当混合好的培养基冷却至45℃,便立即将此种培养基适量(约15 ml)倾入已灭菌的空平皿内,待其冷却凝固后,倒置冰箱内备用。
四、操作步骤l.水样的采取(1)自来水:先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌,再开放水龙头使水流5min后,以灭菌三角烧瓶接取水样,以待分析。
(2)池水、河水或湖水:应取距水面l0~15cm的深层水样,先将灭菌的带玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,最好立即检查,否则需放入冰箱中保存2.细菌总数测定(1)自来水①用灭菌吸管吸取lml水样,注入灭菌培养皿中。
共做两个平皿。
②分别倾注约15mL己溶化并冷却到45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基,并立即在桌上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀。
③另取一空的灭菌培养皿,倾注肉膏蛋白胨琼脂培养基15mL作空自对照。
④培养基凝固后,倒置于37℃温箱中,培养24h,进行菌落计数。
⑤两个平板的平均菌落数即为lml水样的细菌总数。
(2)池水、河水或湖水等①稀释水样:取3个灭菌空试管,分别加入9ml灭菌水。
取lml水样注入第一管9ml灭菌水内、摇匀,再自第一管取1ml至下一管灭菌水内,如此稀释到第三管,稀释度分别为10-1、10-2与10-3。
稀释倍数看水样污浊程度而定,以培养后平板的菌落数在30~300个之间的稀释度最为合适,若三个稀释度的菌数均多到无法计数或少到无法计数,则需继续稀释或减小稀释倍数。