食品过敏原的常见检测技术
食物过敏原的检测

食物过敏原的检测北京市养分源讨论所科威华公司王珂温凯李东 100054食物过敏原可以定义为包含在食物中引发或激起过敏反应的物质,在Ⅰ型IgE应激的过敏反应中,过敏原通常是在特定食品中含有的含量丰富、自然存在的蛋白质。
随着全球经济一体化和食品贸易国际化,食品过敏问题具有更大的潜在危急性,因此建立牢靠、定量的过敏原检测方法对于确保食品标签的全都性和消费者的平安非常必要。
然而由于食物过敏原在食品中的含量少以及可能被食品基质包裹等缘由,食物过敏原的生物活性的检测非常困难,另一个检测问题是检测方法的灵敏度,一般来说,不同食物中检测极限要求在1100ppm(每kg食物中含mg量级过敏性蛋白)。
几乎全部的过敏原(抗原)都是蛋白质或多肽类物质,多肽分子量一般在5-70KDa之间,也有一些过敏原分子量超过200KDa以上。
某种食物或食物制品是否存在致敏性,通常是依据确诊敏感个体血清中键合的IgE来推断,一旦过敏原可以确认和纯化,就可以在兔子、老鼠、山羊、绵羊或鸡这些动物中猎取抗体,为常规食品分析供应免疫检测方法。
现在,检测食物成品中潜在过敏原有几种技术上的可能性,采纳的方法包括直接检测过敏原(蛋白质)自身或检测引起食物过敏可能的标志物,假如抱负的标志物就是过敏原蛋白,其化学特性不能很好表达或检测极限达不到要求,则检测过敏原不行行。
另外,很多致敏食物中包括多种过敏原蛋白,含量也有所不同。
作为潜在过敏食物制品或成分的标记物,特定的蛋白质或DNA片段可以作为靶记进行检测。
以检测蛋白为基础的方法通常包括免疫化学检测方法,例如RAST(radio-allergosorbent test)、EAST(enzyme allergosorbent test)、RIE(rocket immuno-electrophoresis)、免疫印迹(immunoblotting)和ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)。
食品过敏原的常见检测技术和安全管理措施研究进展

食品过敏原的常见检测技术和安全管理措施研究进展概述食品过敏反应是由特定食品中的复合物质引起的体内异常反应,是一种常见的免疫性疾病。
不断增长的食品过敏病例已成为全球性问题,给人们的健康和生活带来巨大的影响。
因此,食品过敏的检测与管理至关重要。
本文将介绍食品过敏原的常见检测技术和安全管理措施的研究进展。
食品过敏原的检测技术ELISAELISA(酶联免疫吸附试验)是一种基于免疫学原理的检测食品过敏原的常用技术。
它的优点在于检测结果准确,灵敏度较高,同时具有高通量和自动化处理的特点。
然而,该技术需要使用多个特异性抗体,因此设定阈值和确定准确结果可能会出现困难。
此外,ELISA方法也有可能受到交叉反应的影响,因为存在非特异性抗体。
PCRPCR(聚合酶链反应)是目前一种相对较新的检测食品过敏原的技术,主要是利用特异性引物扩增目标DNA序列。
PCR技术具有高灵敏度和特异性,能够检测非常低水平的过敏原,避免了其他检测方法中的假阳性结果。
但是,PCR的检测处理要求较高,操作时间比较长,同时也容易受到PCR抑制因素的影响而产生假阴性结果。
扫描电镜扫描电镜是一种用于观察分析食品中的过敏原的显微技术。
这种技术的主要优点在于它能够直接观察样品里的蛋白质粒子,避免了其他检测技术中产生的假阳性结果。
然而扫描电镜技术的操作难度较高,需要高技能的操作员,且操作时间极长,因此适用范围有所限制。
质谱法质谱法被广泛应用于检测食品中的过敏原。
该技术主要涉及到使用质谱仪(如:MALDI-TOF等)分析大分子化合物,如蛋白质。
质谱法的主要优点在于它能够提供高度准确的分析结果,同时也能够同时分析多个样品。
但是,与其他检测技术相比,质谱法的易用性较差,因为需要复杂的分析过程和较高的操作水平。
食品过敏管理措施食品标签法规在大多数国家和地区,针对食品过敏问题制订了特别的标志法规。
食品标签法规通常包括以下几个方面:•这种食品是否含有可能引起过敏反应的成分。
食品中的过敏原及其识别与控制

食品中的过敏原及其识别与控制随着食品供应链的不断延伸和食品多样化的发展,食物过敏已经成为一个全球性的公共卫生问题。
对于过敏食品过敏源的准确定位和控制,能够帮助消费者和食品生产企业更好地保障食品安全。
本文将探讨食品中过敏原的识别和控制手段,并提出了一些建议。
一、食品过敏原的识别1. 蛋类鸡蛋是引发食物过敏的常见原因之一。
通过严格检测食品中的鸡蛋蛋白和卵黄,可以准确识别食品中的蛋类过敏原。
基于这种识别结果,生产商可以选择添加鸡蛋替代品或调整产品配方,以满足过敏人群的需求。
2. 坚果坚果过敏是常见的过敏反应之一。
对于食品中的坚果过敏原的准确识别,可以通过DNA检测、蛋白质测定和酶联免疫吸附测定等技术手段进行。
通过这些方法,食品生产企业可以合理选择原料,避免使用含有坚果成分的食材,从而减少过敏风险。
3. 小麦小麦过敏是一种常见的食品过敏反应,尤其对于过敏性鼻炎和哮喘患者来说。
识别食品中的小麦过敏原,可以通过面粉中麦麸蛋白的测定和小麦酰胺的分析等方法。
通过这些检测手段,食品生产企业可以提供无小麦配方的食品,以满足过敏人群的需求。
二、食品过敏原的控制1. 优化生产流程食品生产企业可以通过优化生产流程,减少过敏原污染的风险。
例如,对于生产食品的设备和工具进行彻底清洁,使用抗过敏原的原料代替过敏原成分,严格控制交叉污染等。
2. 标签标识食品标签是消费者购买的重要参考依据。
为了保护过敏人群的权益,食品生产企业应该在产品标签上清楚地标注是否含有常见过敏原成分。
同时,还可以使用易读的字体和色彩,以便消费者快速识别。
3. 加强消费者教育消费者教育是预防过敏食品过敏反应的重要环节。
食品生产企业可以通过宣传资料、社交媒体和健康教育活动等渠道,向消费者传达过敏原的相关信息,提醒他们在购买和食用食品时注意过敏原的存在。
三、结语食品中的过敏原识别和控制对于保障过敏人群的健康至关重要。
通过准确识别食物中的过敏原,制定相应的控制措施,将有助于减少过敏风险,提高食品安全水平。
食品中致敏物质的检测与控制技术分析

食品中致敏物质的检测与控制技术分析随着生活水平的提高,人们对食品安全的关注度也越来越高。
在食品安全领域,致敏物质的检测与控制成为一个重要的研究方向。
本文将介绍食品中致敏物质的检测与控制技术,包括常见的致敏物质、检测方法及控制措施。
一、致敏物质的种类食品中常见的致敏物质包括过敏原和过敏诱导因子。
过敏原是指导致过敏反应的物质,如花生、鸡蛋、牛奶、海鲜等。
过敏诱导因子是指导致过敏反应的因素,如温度、光照、酸碱度等。
二、致敏物质的检测方法1. 生物学方法生物学方法是常见的食品致敏物质检测方法之一。
该方法利用生物学分析技术,通过检测生物体对致敏物质的反应来判断食品中是否存在致敏物质。
例如,针对花生过敏原,可以采用酶联免疫吸附法(ELISA)来检测食品中的花生过敏原含量。
2. 化学方法化学方法是一种常用的食品致敏物质检测方法。
这种方法利用化学分析技术,通过检测食品中致敏物质的化学特性来判断其含量。
例如,针对鸡蛋过敏原,可以采用高效液相色谱法(HPLC)来检测食品中的鸡蛋过敏原含量。
3. 毛细管电泳法毛细管电泳法是一种新兴的食品致敏物质检测方法。
该方法利用毛细管电泳技术,快速、高效地分离和检测食品中的致敏物质。
例如,针对牛奶过敏原,可以采用毛细管电泳法来检测食品中的牛奶过敏原含量。
三、致敏物质的控制措施1. 加强生产管理生产环节是控制食品中致敏物质的重要环节。
生产者应加强质量管理,遵守食品安全法规,禁止使用有致敏性的添加剂和原料。
同时,应建立健全的标准化生产流程,确保食品中致敏物质的含量控制在安全范围内。
2. 合理选择原料合理选择原料是控制食品中致敏物质的重要措施之一。
生产者应选择优质、无添加剂的原料,尽量避免使用致敏物质含量高的原料。
此外,对于已知的致敏物质,应及时通报给消费者,以便其做出明智的选择。
3. 提高加工工艺加工工艺是控制食品中致敏物质的关键环节。
生产者应采用科学、规范的加工工艺,确保致敏物质在加工过程中得到充分降解和去除。
食品中的过敏原检测与控制技术研究

食品中的过敏原检测与控制技术研究导言:食品过敏是一种常见的免疫反应,会导致不适甚至危及生命。
因此,对于食品中的过敏原进行检测与控制显得尤为重要。
本文将介绍目前常用的食品中的过敏原检测技术以及控制技术,并评估其优缺点。
一、食品中的过敏原检测技术1. 基于免疫学原理的检测方法随着生物技术的发展,基于免疫学原理的检测方法成为了主要手段之一。
例如,酶联免疫吸附试验(ELISA)能够通过检测特定过敏原抗体与食品中的过敏原结合的程度来判断食品的过敏原含量。
这种方法具有高灵敏度和特异性,但也存在着检测时间较长、成本高等问题。
2. 分子生物学检测方法分子生物学检测方法通过对食品中的DNA或RNA进行分析,可以快速准确地检测出过敏原的存在。
例如,聚合酶链反应(PCR)技术可以检测食品中微量的过敏原基因,具有高灵敏度和高特异性的特点。
不过,该方法对样本的纯度要求较高,且在实际应用中还存在一定的局限性。
3. 色谱分析技术色谱分析技术是一种有效的食品中过敏原检测方法,如气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)。
该方法通过分离和鉴定样品中的化合物,能够准确地检测到食品中的过敏原。
然而,该方法需要专业设备和操作技术,并且对样品的处理和前期准备较为繁琐。
二、食品中的过敏原控制技术1. 过敏原替代过敏原替代是一种常见的过敏原控制技术,旨在通过替代原料中的过敏原来减少过敏原的风险。
例如,在烘焙制品中,可以使用豆浆或其他纯植物性材料替代牛奶,从而避免乳糖过敏。
然而,过敏原替代有时会对产品的质感和口感产生影响,并且寻找合适的替代品也是一个挑战。
2. 过敏原标识过敏原标识是通过在食品包装上明确标注过敏原的存在来提醒过敏人士及时避免,以减少过敏反应的发生。
这在许多国家已经成为法律规定。
然而,过敏原标识要求制造商严格执行并确保准确性,以避免因失误导致误导或危险的情况发生。
3. 过敏原去除/去除技术过敏原去除是一种通过物理或化学方法将过敏原从食品中去除的技术。
食品过敏原检测方法的研究与应用

食品过敏原检测方法的研究与应用食品过敏源检测方法的研究与应用引言:食物过敏是一种常见的健康问题,它会导致轻微的不适,甚至危及生命。
随着人们对健康的关注程度的增加,食物过敏源检测方法的研究和应用成为食品科学领域的一个热点。
本文将介绍几种常见的食品过敏源检测方法以及它们的应用。
一、免疫学方法免疫学方法是一种常见的食物过敏源检测方法。
其中,免疫原性和免疫力决定了食物过敏的发生。
常用的免疫学方法包括皮肤刺激试验、血清免疫学检测和细胞免疫学检测。
1. 皮肤刺激试验皮肤刺激试验是一种食物过敏源检测的常见方法。
该方法通过将含有潜在过敏原的物质直接刺激到皮肤上,观察是否出现异常反应。
虽然皮肤刺激试验简单易行,但对检测不同过敏原的敏感性各不相同。
2. 血清免疫学检测血清免疫学检测是一种通过检测患者血液中的特定抗体(IgE)来诊断食品过敏的方法。
通过检测食品特异性IgE的水平,可以确定患者对特定食物过敏原的过敏反应。
这种方法具有较高的敏感性和特异性,但需要专业的实验室设备和技术的支持。
3. 细胞免疫学检测细胞免疫学检测是一种检测食品过敏源的T细胞反应的方法。
该方法基于T细胞对特定过敏原的敏感性,通过体外实验检测患者的T细胞反应。
它可以检测多种食品过敏原,但需要专业的设备和技术支持。
二、分子生物学方法分子生物学方法是食品过敏源检测的新兴技术。
该方法通过检测食品中特定基因或蛋白质的存在和表达,来确定食品中是否含有潜在过敏源。
1. PCR技术PCR(聚合酶链反应)技术是一种分子生物学方法,可以通过扩增食品中潜在过敏原的基因序列,从而快速检测食品中的过敏原。
这种方法具有高度的敏感性和特异性,但需要基因序列的先验信息。
2. 蛋白质分析技术蛋白质分析技术是一种通过检测食品中过敏原蛋白的存在和含量来确认食物中的过敏原的方法。
常用的蛋白质分析技术包括SDS-PAGE、Western blot和质谱分析等。
这种方法可以定量检测食品中过敏原的蛋白质含量,但需要复杂的实验操作和设备的支持。
食品中过敏原成分检测与控制技术
食品中过敏原成分检测与控制技术食品过敏是一种常见的食品安全问题,其表现为人体对某些食物成分产生过敏反应。
对于过敏患者来说,食品中的过敏原成分可能会导致严重的健康问题,甚至危及生命。
因此,食品中过敏原成分检测与控制技术的研究与应用显得尤为重要。
一、食品中过敏原成分的检测技术食品中的过敏原成分往往以微量存在,因此需要先进的检测技术来进行准确的检测。
目前,常用的食品过敏原成分检测技术主要包括以下几种:1.酶联免疫吸附测定法(ELISA)ELISA技术是目前最常用的食品过敏原检测方法之一。
该方法通过特异性抗体与目标过敏原成分结合,形成免疫复合物,并通过酶的作用使底物产生显色反应,从而达到检测的目的。
ELISA技术具有灵敏度高、准确度高的特点,适用于各种食品中过敏原成分的检测。
2.聚合酶链式反应(PCR)PCR技术是一种基于DNA分子的检测技术,可以通过扩增目标DNA序列的方法来检测食品中的过敏原成分。
PCR技术的优势在于其高度特异性、高度敏感性以及扩增速度快的特点,能够在短时间内获取大量的目标DNA序列,从而实现过敏原成分的快速检测。
3.质谱分析法质谱分析法是一种基于物质的质量-电荷比进行分析的技术,可以对食品中的过敏原成分进行快速、准确的检测。
质谱分析法不仅可以定性检测目标物质的存在与否,还可以定量检测目标物质的含量,具有高度敏感性和高分辨率的特点。
二、食品中过敏原成分的控制技术除了检测技术的应用,食品中过敏原成分的控制也是保证食品安全的重要环节。
以下介绍几种常用的食品过敏原成分控制技术:1.原料筛查食品生产企业可以通过对供应的原料进行过敏原成分的筛查,确保原料本身不含过敏原成分或过敏原成分的含量低于安全限量。
这样可以从源头上控制食品中的过敏原成分含量,减少食品过敏引起的食品安全问题。
2.制程控制在食品生产过程中,通过控制温度、时间、pH值等制程参数,可以减少过敏原成分的活性或分解,从而降低过敏原成分的含量。
食品过敏原水平的检测及限量标准制定
食品过敏原水平的检测及限量标准制定食品过敏是一种常见的健康问题,随着人们对健康的关注日益增长,对食品过敏原水平的检测和限量标准的制定也变得愈发重要。
本文将探讨食品过敏原水平的检测技术以及限量标准的制定过程和影响。
首先,食品过敏是由人体免疫系统对某些特定蛋白质产生的异常反应所引起的。
这些蛋白质被称为过敏原,常见的包括鸡蛋、牛奶、大豆、鱼类、坚果等。
为了确保食品的安全,对食品中过敏原的检测成为必要的措施。
目前,食品过敏原的检测技术主要分为两类:传统方法和现代方法。
传统方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫测定法。
这些方法的优点是成熟可靠,能够准确地检测出食品中的过敏原。
然而,这些方法需要耗费大量的时间和人力,并且只能检测出少数几种过敏原。
相比之下,现代方法如基因测定法和质谱法具有更高的灵敏度和特异性。
基因测定法通过检测食品中的过敏原基因序列来确定过敏原的存在与否,具有快速、准确的优点。
质谱法则基于过敏原所产生的特异性肽段质量的测定,可以对多种食品进行同时检测,但设备和专业人员的要求较高。
食品过敏原的限量标准的制定是确保消费者安全的重要手段。
制定限量标准需要综合考虑食品过敏原的潜在危害和实际消耗情况,并进行科学的风险评估。
过敏源的致敏剂量、过敏原的普遍分布情况、群体的易感性等都是制定限量标准的重要因素。
各国在制定食品过敏原限量标准方面存在一定的差异。
一些国家如美国和欧盟已经制定了具体的限量标准,并对食品过敏原的标签声明做出明确规定。
而在中国,尚未出台专门的食品过敏原限量标准,仅有的标准是由相关部门发布的一些指导性文件。
相关研究认为,我国在食品过敏源的标签声明和限量标准方面还有较大的改进空间。
食品过敏源的水平检测和限量标准制定对食品企业和消费者都有重要意义。
对于食品企业来说,合理控制过敏原水平可以确保产品质量,减少食品事故的发生,树立品牌形象。
对于消费者来说,了解食物中过敏原的水平可以更好地选择食品,避免过敏反应的发生。
食品过敏原的常见检测技术和安全管理措施研究进展
食品过敏原的常见检测技术和安全管理措施研究进展摘要食品过敏原导致特定体质的消费人群发生过敏反应属于相对安全性事件,而过敏反应的前提是机体与食品致敏成分的预先接触和前接触。
因此,切断具有过敏体质的消费者与食品过敏原的接触是防止因食物过敏引起食品安全问题的关键手段之一。
本文主要综述了近年来针对食品过敏原的常见检测技术和安全管理措施研究进展,并展望了这两方面未来的发展趋势,为今后的深入研究提供了一定的参考依据。
关键词:食品过敏原、常见检测技术、安全管理措施、食品安全。
随着科学发展观以人为本思想的提出,近年来越来越多的食品安全问题得到了广大人民的关注,其中包括三鹿奶粉和苏丹红等重大食品安全事件。
食品安全主要分为绝对安全性和相对安全性两方面,一种食品是否安全,不仅取决于原料来源、加工方式和环境、食用数量和方式等与食品绝对安全性有关的因素,还取决于影响相对安全性的因素如消费者的身体状况[1]。
根据划分范畴,自然而然,食品因含有一些致敏性成分而导致某些特定的消费人群产生过敏反应则属于食品相对安全性问题[2]。
据相关资料统计,国外大约有1~2%的成年人和5~7%的儿童对食品有过敏症状[3],食物过敏是指人体对摄入食物中抗原物质产生的由免疫介导的一种不良反应,导致机体生理生理功能紊乱和组织损伤[4],局部反应主要体现在引发消化系统病症、呼吸病症、循环系统病症和皮肤病症,严重的话会出现过敏性休克,甚至危及生命[5-6]。
一般来说,95%的食品过敏原的本质是蛋白质或糖蛋白,相对分子质量在10000~70000,引起90%过敏反应则有八大类食物,其中包括牛奶、鸡蛋、花生、小麦、甲壳类、豆类、坚果类和鱼类食品[7]。
由于食物过敏反应的前提则是机体与食品过敏原的预先接触及前接触,只有当再次接触同种过敏原时,才可诱导已经处于致敏状态的机体产生变态反应[8]。
因此,切断具有过敏体质的消费者与食品过敏原的接触是防止因食物过敏引起食品安全问题的关键手段之一。
食品中致敏成分的检测及分析
食品中致敏成分的检测及分析在日常生活中,越来越多的人开始关注食品安全和食品过敏的问题。
食品过敏是一种免疫系统异常反应,当人体接触到特定食物中的致敏成分时,会引发过敏反应,表现为皮肤瘙痒、呼吸困难、消化不良等症状。
因此,对食品中的致敏成分进行检测和分析显得尤为重要。
食品过敏原简介食品过敏原是指能够引起机体产生过敏反应的特定蛋白质或多糖类物质。
常见的食品过敏原包括鸡蛋、牛奶、花生、大豆、鱼类、贝类、坚果等。
对于过敏体质的人群来说,摄入含有过敏原的食物可能导致严重的过敏反应,甚至危及生命。
食品中致敏成分的检测方法1. 免疫学方法免疫学方法是目前常用的食品过敏原检测方法之一。
通过检测血清中特定IgE抗体水平或皮肤刺激试验,可以确定个体对某种食物过敏原的敏感性。
然而,这种方法需要专业实验室设备和技术支持,且结果可能受到多种因素影响。
2. 分子生物学方法分子生物学方法是一种高灵敏度和高特异性的检测手段。
通过PCR技术或基因芯片技术,可以准确地检测食品中微量的致敏成分,并且可以鉴定不同种类的致敏原。
这种方法适用于复杂混合食品中致敏成分的检测。
3. 生化分析方法生化分析方法主要是通过化学手段对食品样品进行处理,提取其中的蛋白质或多糖类物质,并通过色谱、质谱等技术进行定量和鉴定。
这种方法操作简便,适用于大批量样品的快速检测。
食品中致敏成分的分析技术1. 色谱技术色谱技术是一种常用的分离和鉴定方法,包括气相色谱(GC)、液相色谱(LC)等。
通过色谱技术可以对复杂混合样品进行分离,并确定其中的致敏成分种类和含量。
2. 质谱技术质谱技术是一种高灵敏度和高分辨率的分析手段,包括质谱联用技术(LC-MS/MS)、气相质谱(GC-MS)等。
通过质谱技术可以对致敏成分进行准确鉴定和定量分析。
3. 核磁共振技术核磁共振技术可以提供样品中各种成分的结构信息,包括蛋白质、多糖类物质等。
通过核磁共振技术可以进一步确认食品样品中的致敏成分。
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食品过敏原的常见检测技术
1、免疫学检测技术
之前提到95%的食品过敏原属于蛋白质,因此专门针对蛋白检测的免疫学相关技术是检测食品中蛋白类过敏原的重要手段。
其中免疫学检测包括免疫吸附技术、免疫层析技术、免疫传感器技术、免疫扩散技术以及免疫印迹等技术。
免疫吸附技术主要包括酶联免疫吸附技术和放射/酶联吸附抑制实验。
酶联免疫技术是将抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化反应有机结合起来的一种检测技术,其原理是被酶标记的抗体与食品过敏原发生反应作用于底物后,其显色深浅能够反映待测样品中过敏原的含量。
该技术特异性强,灵敏度高,操作简单,易于推广,但也存在制备抗体困难,不适用于低分子量和不稳定的过敏原检测,存在结构类似物的交叉反应和对试剂选择性高导致无法进行多残留检测等不足。
而放射/酶联吸附抑制实验则是使待测食品中的过敏原与固相载体上的抗原竞争结合特定人群血清中的IgE,之后再加入一种抗IgE的同位素或酶标记抗体,反应完成后通过添加可改变颜色或者能发光的底物用于检测结合IgE的抗体,最终推测出食品中过敏原的浓度。
尽管它是科研人员使用最广泛和最灵敏的方法,在生海鲜、大豆、花生油和坚果类食物过敏原检测中已有应用,然而由于检测过程中的人血清难以标准化以及商业化的食品过敏原在固相载体上与IgE的结合
能力不尽相同,限制了该方法的推广。
免疫层析技术检测食品中的过敏原的原理是将特异的抗体固定在硝酸纤维素膜的某一取代,当样品浸入干燥膜一端,通过毛细管作用沿膜向前移动到有抗体的区域时,过敏原能与其发生特异性结合,之后若使用免疫胶体金或免疫酶染色则可使该区域呈色实现免疫诊断。
目前该技术在花生蛋白类过敏原和榛子过敏原上具有一定应用,具有检测阈值低和高特异性的优点,但作为定性或半定量技术来说,还有待进一步发展。
免疫传感器技术则是将传感技术和特异性免疫反应相结合对食品中的过敏原进行检测,具体是通过对识别原件表面的特异性抗原抗体反应实时监测,将检测结果通过传感器转换为精密数字输出,不仅具有快速简便,便于收集和整理数据的优点,而且损伤和污染样品的可能性小,推广性强。
免疫扩散技术是免疫学中最常用的检测手段,一般来说,单向琼脂扩散可用于定量分析,双向琼脂扩散用于定性分析。
目前为了提高扩散速度和灵敏度,通常结合电泳共同检测食品过敏原,基本原理是以半固体的琼脂凝胶作为介质,将食品中可溶性的过敏原溶于凝胶中,在通电条件下进行琼脂扩散后与特定抗体结合后发生沉淀。
具体包括对流免疫电泳和火箭电泳等技术,其中后者的灵敏度较高,在鸡蛋、牛奶、意大利面食和荞麦等食品中均有应用。
对于免疫印迹来说,也被称为酶联免疫电转移印斑法,是将高分辨率的凝胶电泳和免疫化学分析相结合的一种杂交技术,经过凝胶电泳分离的蛋白类食品过敏原被转移到固相载体上(通常是硝酸纤维素膜),先与对应抗体发生免疫反应,反应产物再与酶或同位素标记的第二抗体结合,经过底物显色或放射自显影后即可对样品中的过敏原进行检测,具有经济性和灵敏度高的特点。
2、聚合链式反应检测技术
当复杂的食品体系中不存在过敏原相关蛋白或含量极低时,可以通过聚合链式反应(PCR)来检测相对热稳定性和耐压性高的致敏成分基因含量从而推断出是否存在食品过敏原。
PCR是以少量DNA分子为模板,经过变性-退火-延伸多次循环,接近指数扩增产生大量目标DNA分子的体外模拟体内DNA复制的一种核酸扩增技术。
近年来对于食品过敏原检测的一个新靶标则是特殊蛋白的cDNA,,扩增产物可在琼脂糖电泳上因分子量大小不同而实现分离。
该技术操作简单,稳定性好,检测迅速,已经在小麦,烤榛实、转基因玉米和转基因大豆等食品的过敏原检测工作中有一定应用,不足之处则是观察结果时需要借助多种仪器,容易造成污染和出现假阳性结果。
而基于PCR技术上发展起来的实时荧光定量PCR 则可通过向反应体系中添加荧光染料或荧光标记物与扩增产物结合发光,观察荧光信号的累积从而可实现实时监测的目的。
该技术在羽扇豆、荞麦和甲壳类食品过敏原的检测已有相关报道,与一般PCR技术相比不仅重复性好,定量准确,实现了由定性到定量检测的飞跃,而且大大退款了食品过敏原DNA检测方法的应用范畴。
3、质谱技术
由于免疫学技术通常属于半定量检测且PCR技术检测的对象是DNA,因此对于食品过敏原的抗原决定簇通常研究不深入,因而质谱技术可以作为两者的有益补充。
质谱技术主要针对分子间的非共价键反应,不仅可以定量测定食品致敏成分,而且还能对抗原表位进行定位。
最常用的分析方法有两种,分别是bottom-up和top-down,前者是将提纯后的食品过敏原蛋白酶解为多肽,利用液相色谱-质谱联用技术和生物信息检索分析多肽序列和修饰位点;后者则是直接将过敏原蛋白引入质谱后通过碎片裂解技术和生物信息检索推断多肽序列和修饰位点。
尽管质谱分析样品前处理复杂,但样品用量少,分离和鉴定同时进行,依然在牛奶、大豆、巧克力、玉米片、果仁和米制脆皮等食品中具有广泛应用。
4、生物共振技术
利用生物共振技术对食品中的过敏原进行检测的理论基础是物质波理论,具体来说就是生物系统中存在极其微弱的共振信号,这些特定信号是由物质极微细共振表现出来的,可用于疾病的诊断和治疗。
过敏作为一种生物物理信息现象,会在体内产生过敏印痕,而每种过敏印痕信号是此种过敏原唯一的生物共振模式,因此利用外在物质波形与体内物质波形相互共振可实现过敏印痕的准确探测。
该方法由德国发明,近年来在临床检测上应用较多,不仅克服了点刺、抽血等检测方法费时和低准确性的缺点,还能实现安全无创伤检测,特别适用于儿童患者。
(曾祥权)。