大鼠闭合性脑损伤后5-LOX、c-fos蛋白、NSE的表达及表达时相的研究

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脑损伤早期神经细胞c-fos基因表达变化与脑水肿

脑损伤早期神经细胞c-fos基因表达变化与脑水肿

脑损伤早期神经细胞c-fos基因表达变化与脑水肿Xu Ruxiang;Chen Changcai;Yuan Guanqian;(Zhujiang Hospital, First Military Medical University ,Guangzhou 510282)【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】1995(20)2【摘要】采用免疫细胞化学方法(ABC)研究大鼠脑损伤早期神经细胞c-fos基因表达变化,探讨脑损伤时神经细胞c-fos基因表达变化与脑水肿的关系。

结果发现,脑损伤后仅0.5h,脑损伤区周围神经细胞中c-fos基因表达已明显,伤后3~6h更为显著。

同时伴有相应部位脑灰质及脑白质水含量增加。

初步研究结果提示,脑损伤早期神经细胞c-fos基因表达变化与脑水肿的发生有密切关系。

【总页数】3页(P83-85)【关键词】脑损伤;c-fos基因;脑水肿;大鼠【作者】Xu Ruxiang;Chen Changcai;Yuan Guanqian;(Zhujiang Hospital, First Military Medical University ,Guangzhou 510282)【作者单位】第一军医大学珠江医院【正文语种】中文【中图分类】R651.150.2【相关文献】1.脑损伤早期神经细胞C—fos基因表达与钙通道变化的关系 [J], 徐如祥;袁冠前2.新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时c-fos、c-jun基因表达和神经细胞凋亡的关系 [J], 曾珍;张晓;高礼3.脑损伤早期神经细胞c-fos基因表达变化与脑水肿 [J], 徐如祥4.大鼠脑损伤时神经细胞c-fos 、c-jun和c-myc基因表达变化 [J], 王清华;徐如祥;钟世镇5.脑损伤后神经细胞C-fos基因表达 [J], 史志东;苏祖兰;胡裕全;石德金;唐录英;郭少忠;杨李轩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

培养大鼠脑皮层神经元损伤后c-fos蛋白表达

培养大鼠脑皮层神经元损伤后c-fos蛋白表达
1.c-fos蛋白免疫组化染色。固定后的盖玻片用0.01mol/L PBS洗涤,然后加0.3%Triton X-100PBS作用15分钟,再用2%正常兔血清孵育20分钟,加兔抗c-fos蛋白抗体(1∶800),4℃过夜。采用链霉亲和素-生物素(SP)法进行免疫组化反应(c-fos抗体和SPKit均购自北京中山生物技术公司)。用一抗孵育的细胞洗涤后,分别经IgG/Biotin室温2小时,HRP/SP室温2小时,最后用GDN法[4]呈色,c-fos蛋白在细胞核内呈紫黑色的圆形颗粒。
二、损伤方法
1.谷氨酸导致的神经元损伤。根据文献[2]所述方法并稍加改良。培养10~12天的皮层神经细胞,用含1mmol/L谷氨酸(Victor公司)的培养液作用20分钟,然后去除含谷氨酸的培养液,用无谷氨酸的培养液洗涤后继续培养,分别于1,2,4,6小时用4℃、4%多聚甲醛固定30分钟。
【Abstract】 Aim To observe the expression of c-fos protein in cultured cortical neurons subject to either glutamate or mechanical injury in rats, and to study the effect of c-fos protein on brain injury. Methods Mixed cultured cortical neurons from SD rats were injured by either glutamate or mechanical force, then the expression of c-fos protein was studied with double-labeled immunohistochemistry. Results Two hours after glutamate injury, the expression of c-fos protein began in the nuclei and 4 hours later it reached peak, and c-fos protein only expressed in the direct injured area at the edge of traumatic tracts after 2 hours and began to express till 4 hours in the indirect injured area far from traumatic tracts. The positive immunoreaction of c-fos protein granule remained. Conclusion The c-fos protein expression can be induced by glutamate. Neurotoxic substances were produced in cultured medium after traumatic injury, and c-fos expression may be associated with neuron apoptosis.

观察大鼠脑神经元c-Fos蛋白表达的方法

观察大鼠脑神经元c-Fos蛋白表达的方法

观察大鼠脑神经元c-Fos蛋白表达的方法实验46 观察大鼠脑神经元c-Fos蛋白表达的方法【目的要求】1. 学会用免疫组织化学技术显示脑神经元中c-Fos蛋白表达的方法。

2. 了解脑内神经元c-Fos蛋白表达的特点。

【基本原理】c-Fos蛋白是即刻早期基因c-fos转录翻译的产物,是一种核内磷酸化蛋白。

基础状态下,c-Fos蛋白在中枢神经系统的水平非常低,然而各种应激状态下,c-Fos蛋白的表达能够被瞬时快速地诱导。

中枢神经系统内c-Fos蛋白的表达依赖于应激源的内在特性、强度和持续时间。

由于c-Fos蛋白的诱导表达能在很大程度上反映应激诱导的神经元活动情况,故其常被作为神经元激活的标志,并广泛用于示踪特定条件下的神经功能通路。

实验中应用免疫学抗体与抗原特异性结合的原理识别c-Fos蛋白,并通过与抗体相联接的酶催化底物改变颜色使之显示出来,从而对其进行定位和半定量研究。

大鼠不同脑区c-Fos蛋白的表达程度反映了神经元激活的空间模式。

【材料与器械】大白鼠、常用手术器械、冰冻切片机、显微镜、24孔或48孔培养板或称量瓶(25×30)、移液器(10 μL、100 μL、200 μL、1000 μL)、移液器枪头(10μL、200 μL、1000 μL)、滴管、粘片剂处理的载玻片、盖玻片、小毛笔、染色缸、2%戊巴比妥钠、0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(PB,pH7.4)、0.01 mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS,pH7.4)、4,多聚甲醛(0.1 mol/L PB配制)、20%蔗糖(0.1 mol/L PB配制)、防冻液(丙三醇:乙二醇:PBS = 2:3:5)、OCT包埋剂、3%过氧化氢/甲醇溶液、10%正常羊血清或牛血清白蛋白、30%Triton X-100、兔抗大鼠c-Fos抗体、生物素化羊抗兔IgG、链亲和素辣根过氧化物酶复合物、DAB显色液、Mayer’s苏木精染液、梯度酒精(75%、95%、100%)、二甲苯、中性树胶。

大鼠脑液压冲击伤后细胞色素C表达的实验研究

大鼠脑液压冲击伤后细胞色素C表达的实验研究

大鼠脑液压冲击伤后细胞色素C表达的实验研究【摘要】目的为法医学上闭合性颅脑损伤的早期诊断和损伤时间推断提供依据。

方法建立大鼠脑液压冲击模型。

用免疫组化与图像分析技术分别检测伤后不同时间大鼠脑皮质、海马等部位细胞色素c(cytochrome c,cyt c)的表达。

结果对照组大鼠脑内cyt c有微量表达,伤后15分钟表达开始增强,伤后3小时达高峰,1天后开始减弱,7天后基本恢复正常。

结论cyt c表达的规律性可望为闭合性颅脑损伤的早期诊断及损伤时间推断提供依据。

【关键词】闭合性颅脑损伤;cyt c;免疫组织化学【中图分类号】d919.4;r361 .2【文献标识码】a【文章编号】1007—9297(20XX)03—0219—03a study of the expression of cyt c after fluid percussion brain injury in rats.chen wei—jie,zhang kui—ming,duxian—gang,xing yu,chen shi—wen,liao zhi—gang.west china school ofbasic medicine and forensic sciencesof sichuan university,chengdu,610041,china;people’sprocuratorateof ningde,fu jian 352100,china 【abstract】objective to search the objective evidence for the diagnosis on early brain injury and for estimating the timesince brain injury.methods some rats were hurt by fluid percussion,then sacrifice at different time after i~ury.the ex—pression of cyt c was detected by immunohistochemistry,and the results were asesed by image analysis system .resultsthere was a slight expression of cyt c in control group.in treat—group,he expresion of cyt c increased in 15 minutes afteri~ury,and it reached at peaks in 3 hours after injury,andit began to decrease in 1 day,but remain above control levels t.11 7days.conclusion the regularity of cyt c expression might be a useful target for diagnosis of early brain injury,and it alsocan be used in estimating the time since brain injury.【key words】closed brain injury;cyt c;lmmunohistochemistry颅脑损伤在法医病理学鉴定中十分常见。

大鼠闭合性脑损伤后COX-2、BDNF、PDGF-B表达变化的研究

大鼠闭合性脑损伤后COX-2、BDNF、PDGF-B表达变化的研究
t 1gr u ( 一 45 . The e a o p n ) xpr s i n o e so fCOX- 2。BDNF n a d PDGF— wa e t d by i B s t s e mmuo soc m it hit he s y SP
meh d t o .Reut Afe ls d ta ma i b an ij r o ~ 2 h.t ee p e so fCOX一 n b ants u s s ls t rco e r u tc r i n u yf r1 h x r s ino 2 i r i is e
( p rm e t J Pa h lg ,X ija g M e ia i e st ,Ur mu i8 0 1 ,Ch n ) De a t n to o y o n i n d c lUn v r i y u q 3 0 1 ia Ab ta t Ob etv Tosu yt et — e e d n x r s in fau e n h inf a c so src : j cie t d h i d p n e t p e so e t r sa dt esg i c n e f me e i COX一 2,B D—
损 伤模 型将 其 随 机 分 为 正 常 对 照组 ( 一5 , 损 伤 组 ( 一5 和 损 伤 组 ( 一4 ) )假 ) 5 。用 免疫 组 化 S P法 检 测 C X 2 O 一、
B N P G - D F、 D F B在 脑 组 织 中 的 表 达情 况 。 结 果 C - OX 2免疫 阳性 表 达 在 脑 损 伤 后 1 3 h升 高 , 2h达 高 峰 , ~ 1 5d
E p es no OX 2 B F P G - f rc sdta mai b ani uyi a x rsi f o C - , DN , D F B at l e u t ri j r r t e o r c n n s

c-fos、c-jun基因在SD大鼠创伤性脑损伤中的表达及意义

c-fos、c-jun基因在SD大鼠创伤性脑损伤中的表达及意义
维普资讯
实用医院临床杂志 2 0 0 8年 7月第 5卷第 4期
3 7
论 著
clsCjB基 因在 S — 、— o H D大 鼠创 伤 性 脑 损 伤 中 的表 达 及 意义 ’
廖 晓灵 游 , 潮 , 黄光富
( .四川省人 民 医院神 经外科 , 1 四川 成都 6 0 7 ; 四川大 学华 西医院神 经外科 , 10 2 2 四川 成都 6 0 4 ) 10 1
c u d b e e t d a 0 mi f rDAI n a c d a o l e d t ce t3 n at e ,e h n e t1 h,p a e t2 h,a d b g n t e r a e a f rDAI Co cu i n e k d a n e a o d c e s t h at 6 e . n l so
M eh d T iy D rt w r id di onr l ru n xe met op 3 n 1h 2h 6hg u s i t i to s h t S s eedv e t oma g pa depr na g u s(0mi, , , r p )wt 6r sn r a i n o i lr o h a ec r p ae ntert oe o d ueaoa i uy( A ) tecfs n - np si e rn e be e ee— ahg u .B sdo a m dl f i s xn jr D I , h — dcj oiv nuos r o sr di t o h f l n oa u te w e v nh x
【 关键词 】 弥漫性轴 索损伤 ; f 基 因 ;jn 因; c0 —s cu 基 - 动物 实 验 【 中图分 类号 】R 1 0 ;6 11 5 38 8R 5. 【 文献标识码 】A

大鼠液压颅脑伤后脑内Fos蛋白的表达

大鼠液压颅脑伤后脑内Fos蛋白的表达吉健勇;周晓平;王文仲;向正华【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】1998(19)2【摘要】目的:研究颅脑损伤后脑内Fos蛋白表达情况。

方法:采用大鼠液压颅脑伤模型,应用免疫组织化学PAP法和计算机图像分析技术,观测不同程度颅脑损伤后不同时间脑内Fos蛋白的表达情况。

结果:伤后15min脑内开始出现Fos蛋白表达,伤后1h达高峰,此后逐渐消退,伤后6h基本恢复至正常水平。

Fos阳性神经元主要分布在损伤灶周围皮质、同侧梨状皮质和双侧海马齿状回,同侧海马较对侧显著。

轻、中和重度脑损伤,Fos蛋白表达水平有显著差异,损伤越重,表达越强烈。

结论:颅脑损伤引起脑内特定区域c-fos基因迅速和一过性表达增加,其表达水平与脑损伤程度有关。

【总页数】3页(P143-145)【关键词】颅脑损伤;基因表达;c-fos基因;液压;大鼠【作者】吉健勇;周晓平;王文仲;向正华【作者单位】第二军医大学长海医院神经外科;第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室【正文语种】中文【中图分类】R651.150.2【相关文献】1.氯化锂-匹罗卡品诱发大鼠癫痫持续状态后脑内c-fos蛋白表达的动态观察 [J], 薛国芳;郑辑英;李光来;王荔;刘勇2.白蛋白减轻大鼠液压颅脑损伤伤后脑水肿和神经功能障碍的剂量效应 [J], 刘斌;江基尧3.大鼠脑缺血预处理后脑内c-fos基因FOS表达及意义 [J], 马建荣;高洪波4.大鼠内脏伤害性刺激后脑内70kDa热休克蛋白和c—Fos表达 [J], 朱粹青;王光辉5.惊厥易感大鼠听源性惊厥后脑内c-fos蛋白表达 [J], 姜玉武;张国荣;吴希如因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

大鼠闭合性脑损伤后COX-2、BDNF、PDGF-B表达变化的研究

大鼠闭合性脑损伤后COX-2、BDNF、PDGF-B表达变化的研究陈含笑;金茂强;吴晓【摘要】目的研究大鼠闭合性脑损伤后环氧化酶-2(COX-2)、脑源性神经营养因子(BDNF)和血小板源性生长因子(PDGF-B)的表达时序性特点及其意义.方法健康Wistar大鼠55只,雌雄不分,按照改良的Marmarou损伤模型将其随机分为正常对照组(n=5),假损伤组(n=5)和损伤组(n=45).用免疫组化SP法检测COX-2、BDNF、PDGF-B在脑组织中的表达情况.结果 COX-2免疫阳性表达在脑损伤后1~3 h升高,12 h达高峰,5 d后基本恢复正常水平;BDNF脑损伤后1 h明显增高,于3 h达高峰,后逐渐下降,3 d基本降至正常;PDGF-B脑损伤后1 h增加,3~5 d达高峰,14 d时仍高于正常.结论大鼠闭合性颅脑损伤后COX-2、BDNF、PDGF-B表达均上调,且各自呈一定的时序性变化规律,可望为法医学颅脑损伤时间的推断提供参考.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2010(033)012【总页数】4页(P1412-1415)【关键词】闭合性脑损伤;COX-2;BDNF;PDGF-B;免疫组化【作者】陈含笑;金茂强;吴晓【作者单位】新疆医科大学基础医学院病理学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学基础医学院病理学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学基础医学院病理学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R651.5法医学实践显示,颅脑损伤的发生率较高,尤其是伤残率处于更高水平。

颅脑损伤后机体发生一系列的变化,并由多种细胞因子、生长因子等参与其中。

其中环氧合酶(cyclooxygenase,COX),也称前列腺素合成酶,其能将花生四烯酸氧化成前列腺素,是前列腺素合成过程中的一个重要的限速酶。

近年来研究结果表明,环氧化酶-2(COX-2)在脑损伤后的表达有明显改变,并在损伤后发展过程中起重要作用。

大鼠弥漫性轴索损伤后Fos蛋白表达的研究

大鼠弥漫性轴索损伤后Fos蛋白表达的研究易林华;傅相平;李安民;闫润民【期刊名称】《临床军医杂志》【年(卷),期】2009(37)2【摘要】目的观察大鼠弥漫性轴索损伤(DAI)后不同时间Fos蛋白在脑皮质、脑干的表达,进一步阐明脑损伤后弥漫轴索损伤的发生机制。

方法45只大鼠随机分为两组,正常对照组(5只)和损伤组(40只)。

损伤组复制Marmarou DAI模型,通过免疫组织化学方法,观察伤后不同时间脑皮质、脑干神经元Fos蛋白表达。

结果外伤后0.5 h Fos蛋白表达开始增加,1d达到高峰,以后逐渐下降,12 d后基本消失。

与正常对照组相比,损伤组伤后0.5、1、4、12 h、1、4 d Fos阳性神经元数明显增多(P<0.01)。

结论DAI的形成和发展与伤后的时间存在明显相关关系。

【总页数】4页(P188-190)【关键词】弥漫性轴索损伤;Fos蛋白;损伤时间【作者】易林华;傅相平;李安民;闫润民【作者单位】解放军总医院第一附属医院神经外科【正文语种】中文【中图分类】R742【相关文献】1.大鼠弥漫性轴索损伤后H om er1蛋白表达的研究 [J], 陈仁辉;何松国2.神经生长因子在大鼠弥漫性轴索损伤后对NgR蛋白表达的影响 [J], 李威;杨立坚;谭龙;黄俊强;熊元元;李曾仕3.FK506对大鼠弥漫性轴索损伤后神经元凋亡及轴突再生相关蛋白表达的影响 [J], 黄廷钦;宋锦宁;李宇;胡明军;赵雅慧;刘晓斌;郭小叶;郑锋伟4.大鼠弥漫性轴索损伤后高迁移率族蛋白1的动态表达及其对神经细胞凋亡的影响[J], 庞宏刚;宋锦宁;李丹东;孙鹏;赵永林;黄廷钦;翟海程;安吉洋5.神经生长因子在大鼠弥漫性轴索损伤后对NgR蛋白表达的影响 [J], 李威;杨立坚;谭龙;黄俊强;熊元元;李曾仕;因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

大鼠闭合性脑损伤扫描电镜观察

大鼠闭合性脑损伤扫描电镜观察
于晓军;彭雪梅;肖飞
【期刊名称】《法医学杂志》
【年(卷),期】1999(000)001
【摘要】用扫描电镜观察大鼠闭合性脑损伤后直接致死及伤后15分钟至伤后5天处死的大鼠脑组织形态学改变,发现大鼠脑震荡性损伤后病变主要为;全脑弥漫性神经纤维排列紊乱,扭曲,波浪状变形和断裂;髓鞘脱落或套袖样剥离;轴索肿胀;轴索断端收缩球形成;神经纤维表面颗粒状隆起;神经细胞球形肿胀;神经细胞膜穿孔状破裂,神经细胞膜表面突触脱失或减少;脑实质血管壁破裂穿孔。

【总页数】2页(P3-4)
【作者】于晓军;彭雪梅;肖飞
【作者单位】吉林医学院法医学教研室;华西医科大学法医学系
【正文语种】中文
【中图分类】D919.1
【相关文献】
1.实验大鼠轻中型闭合性脑损伤昏迷指标与分级标准 [J], 于建云;李俊祥;郭泽云;赵小林;赵旭东
2.大鼠闭合性脑损伤后星形胶质细胞的形态及GAP-43、ET-1 mRNA表达的变化[J], 臧卫东;张雁儒;李鸣;谢继辉;郭彰生;张华;高晓群
3.大鼠闭合性脑损伤后脑组织星形胶质细胞结构及NO、内皮素水平的变化 [J], 张雁儒;臧卫东;李鸣;张华;谢继辉;李寄云;高晓群
4.大鼠闭合性脑损伤后5-LOX、c-fos蛋白、NSE的表达及表达时相的研究 [J], 王升博;胡雪峰;金茂强
5.大鼠闭合性脑损伤后COX-2、BDNF、PDGF-B表达变化的研究 [J], 陈含笑;金茂强;吴晓
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Ab ta t sr c :Ob etv To s u y t e t — e e d n x r s in f au e n h in f a c so - OX,C j cie t d h i d p n e te p e so e t r sa d t e sg i c n e f5 L me i —
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中图 分 类 号 : 7 2 R 4 文 献标 识码 : A 文章 编 号 :0 9 5 5 ( 0 2 0 — 4 20 1 0 — 5 1 2 1 ) 40 6 — 5
S u y o x e so nd is s qu nc f5 LOX ,C f s a b m e t d n e pr s i n a t e e e o - -o l u n,a nd
Fit it r r t e e r nd m l i d e n o c ntolg ou fy W s a a s w r a o y d vi id i t o r r p,s m o nd 9 tm e d p n nte pe i e ha gr up a i — e e de x rm n—
f xab me o l u n,n u o —p cf n ls NS e r n s e i ce o a e( E)i a swi ls d ta mai r i n u y( i n r t t co e r u t b an ij r TBI .Meh d h c ) to s
h组 、 4 h组 、 h组 、 2 h组 、 4 h组 、 8 h组 、 2h组 。用 免 疫 组 化 ( P 法 检 测 5L X、 ~ s蛋 白 和 E I A 检 测 8 1 2 4 7 S ) - O cf o LS
NS E在 闭合 性 脑 损 伤 后 不 同时 间点 的表 达 情 况 。 结 杲 5L X 免 疫 阳 性 细 胞 在 损 伤 后 8h明 显 增 高 ,4h达 到 -O 2 高 峰 , 后 逐 渐 降 低 , 伤 7 然 损 2h后 仍 高 于 正 常 值 fs 白于损 伤 0 5h后 表 达 明 显增 高 , o蛋 . 8h达 到 高 峰 ,4h降 至 2 正 常 值 ; 清 中 的 N E于 损 伤 2h 表 达增 高 ,4小 时 达 到 高 峰 , 伤 7 血 S 候 2 损 2h后 仍 高 于 正 常值 。 结 论 大 鼠闭 合 性
脑 损 伤 后 5L - OX、— s 白及 血 清 中 的 NS cf 蛋 o E表 达 均 上 调 , 各 自具 有 时 间 规 律 , 希 望 为 法 医学 中 的 颅 脑 损 伤 时 且 有
间的推断提供参考 。
关 键 词 :NS

N E的表 达 及表 达 时 相 的研 究 S
王 升博 ,胡 雪 峰。 ,金 茂 强
(新 疆 医 科 大学 基 础 医学 院 病 理 学教 研 室 ; 新 疆 乌 鲁 木 齐 公安 局 新 市 区分 局 刑 警 大 队 ,乌 鲁 木 齐 8 0 1) 3 0 1
摘 要 : 目 的 探 讨 5脂 氧合 酶 (- O 、— s 白及 神经 元 特 异 性 烯 醇 化 酶 ( E 在 闭 合 性 脑 损 伤 后 不 同时 一 5L X)cf 蛋 o NS ) 间点 的表 达 情 况 及 其 意 义 。 方 法 Wi a 大 鼠 5 sr t 5只 随机 分 成 正 常 对 照 组 、 损 伤 组 及 损 伤 后 0 5h组 、 假 . 1h组 、 2
第3 5卷 第 4期
21 O 2年 4 月
新 疆 医 科 大 学 学 报
J u n lo nin e ia Unv riy o r a fXij gM dc l ie st a
Vo . 5 N0. 13 4
A p . 01 r2 2
大 鼠 闭合性 脑 损 伤 后 - O cfs 白 5L X、- 蛋 o
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