试剂盒原理
elisa试剂盒原理
elisa试剂盒原理Elisa试剂盒是一种用于检测特定蛋白质、抗体或其他分子的实验工具，其原理主要基于酶联免疫吸附法（ELISA，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）。
这种方法通过将待检测物与特定抗体结合，再利用酶的催化作用来检测分子的存在和浓度。
下面我们将详细介绍Elisa试剂盒的原理。
首先，Elisa试剂盒的基本原理是基于抗体与抗原的特异性结合。
在Elisa试剂盒中，通常会将待检测的分子（如蛋白质）吸附在微孔板上，然后加入特异性抗体与待检测分子结合。
接着，用酶标记的二抗结合在抗体上，形成“夹心式”免疫复合物。
最后，通过加入底物，酶催化产生的产物与底物反应产生显色反应，从而可以通过光密度或颜色的变化来检测待检测分子的存在和浓度。
其次，Elisa试剂盒的原理还涉及到酶的催化作用。
在Elisa 试剂盒中，常用的酶包括辣根过氧化酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）等。
这些酶在特定底物的作用下可以产生显色反应，从而实现对待检测分子的定量检测。
而且，由于酶的高效催化作用，Elisa试剂盒具有高灵敏度和高特异性，能够检测到极低浓度的待检测分子。
此外，Elisa试剂盒还可以分为间接法、直接法、竞争法和夹心法等不同的类型。
在间接法中，待检测分子首先与固相抗原结合，然后再加入酶标记的二抗；在直接法中，待检测分子直接与固相抗体结合；在竞争法中，待检测分子与酶标记的抗原竞争结合；在夹心法中，待检测分子被两个抗体夹在中间。
这些不同类型的Elisa试剂盒可以根据实验需要来选择，以实现不同类型的检测要求。
总的来说，Elisa试剂盒的原理是基于酶的催化作用和抗体与抗原的特异性结合，通过特定的实验步骤和方法来实现对待检测分子的定量检测。
通过Elisa试剂盒可以快速、准确地检测各种生物分子，广泛应用于医学诊断、生物学研究、药物开发等领域。
希望本文介绍的Elisa试剂盒原理能够帮助大家更好地理解和应用这一实验技术。
试剂盒的原理
试剂盒的原理
试剂盒是一种用于快速检测特定化学物质或生物分子的工具。
它通常由多个试剂组分组成，每个组分都具有特定的反应特性。
试剂盒的原理通常基于化学反应或生物学反应。
化学反应通常涉及试剂和待检测物之间的化学反应，这一反应会产生可观察的颜色变化或某种物质的生成。
生物学反应通常基于酶或抗体的特异性识别功能，通过与待检测物结合或催化特定反应来实现检测。
试剂盒的使用通常很简单，用户只需按照说明书中的步骤操作即可完成检测。
试剂盒通常包含所有必需的试剂和材料，以及检测结果的可视化方法，例如试纸、比色皿、吸光度计等。
试剂盒的应用范围广泛，涵盖了许多领域，如医学诊断、食品安全监测、环境污染检测等。
其优点包括操作简便、快速获得结果、对样品要求低等。
由于其快速、可靠和方便的特点，试剂盒已成为许多实验室和诊断中心常用的工具。
甲醛试剂盒的原理
甲醛试剂盒的原理
甲醛试剂盒的原理是基于甲醛与某一特定试剂之间的化学反应。
常见的甲醛试剂盒内含有某种反应试剂（如二苯基胺），该试剂与甲醛在一定条件下发生反应，生成可定量测量的可见物质（如有色产物）。
其原理主要包括以下几个步骤：
1. 反应试剂与甲醛反应生成可见物质：反应试剂与甲醛发生反应，形成物质A。
这个反应通常是在酸性、中性或碱性条件下进行。
2. 反应物质的测量：产生的可见物质A可以经过一定的处理后，如光谱分析、比色等测量手段，测定其吸光度或颜色，与甲醛浓度之间建立相关性。
3. 校正和定量测量：由于反应试剂可能对其他物质也有反应，因此在测量之前需要进行校正，以排除其他物质对结果的干扰。
通过与已知浓度的标准品进行比较，可以得出甲醛浓度的定量结果。
需要注意的是，在进行甲醛浓度测量时，要确保实验条件的稳定性和准确性，以获得可靠的测量结果。
同时，使用甲醛试剂盒时要按照说明书的操作方法进行，以确保测量的准确性和重复性。
基因检测试剂盒原理
基因检测试剂盒原理
基因检测试剂盒原理简介：
基因检测试剂盒是一种用于检测个体基因组中特定基因的工具。
其原理主要包括以下几个方面：
1. 样本采集：收集测试对象的组织、血液、唾液等样本，以获取目标基因组织。
2. DNA提取：将样本中的DNA分离提取出来，以便进一步进行基因检测。
3. 基因扩增：利用聚合酶链式反应（PCR）等方法，扩增目标基因的特定片段。
其中，PCR是通过反复循环三个步骤（变性、退火、延伸），在体外复制DNA序列，以扩增大量目标DNA。
4. 杂交或杂交捕获：将扩增的基因序列与合成的DNA探针或
基因芯片进行杂交，通过互补配对的方式，使目标基因与探针结合。
5. 检测信号产生与读取：通过荧光标记、酶标记等方法，对目标基因与探针的结合进行标记，并使用相应的仪器或设备进行信号读取。
6. 数据分析：通过比对已知基因组数据库或参考样本，对读取到的信号进行分析与解读，以获得目标基因的信息。
基因检测试剂盒的原理实际上是将以上步骤进行简化和集成，使其能够在更快、更准确、更便捷的情况下完成基因检测工作，用以辅助医学、生物学等领域研究和临床诊断。
试剂盒原理
试剂盒原理
试剂盒是一种用于检测特定物质的化学试剂的组合，通常包括了反应物、辅助试剂和指示剂等。
试剂盒广泛应用于医学、生物学、环境监测等领域，其原理和使用方法对于准确、快速地检测目标物质具有重要意义。
首先，试剂盒的原理是基于特定的化学反应。
在试剂盒中，各种试剂按照一定的比例混合，当目标物质存在时，会引发特定的化学反应。
这种反应通常会导致试剂盒中的某种物质发生颜色变化或产生特定的光谱信号，从而可以通过观察颜色变化或使用光谱仪器等手段来判断目标物质的存在与否。
其次，试剂盒的原理还与生物学检测有关。
在生物学领域，试剂盒可以用于检测特定的蛋白质、核酸或其他生物分子。
这种检测通常基于抗体与抗原、亲和力等生物学原理，当目标生物分子存在时，会与试剂盒中的特定生物分子发生特定的结合反应，从而可以通过观察结合后的产物或信号来判断目标生物分子的存在与否。
此外，试剂盒的原理还涉及到化学分析和光谱分析等技术。
在化学分析中，试剂盒可以用于测定各种化学物质的浓度或纯度，通过测定化学反应的终点或终点前的某些特定参数来实现。
而在光谱分析中，试剂盒可以用于检测样品中特定波长的吸光度或荧光强度，从而实现对目标物质的定量或定性分析。
综上所述，试剂盒的原理是基于化学、生物学和分析化学等多种学科的知识，通过合理设计试剂盒的组分和反应条件，可以实现对特定物质的快速、准确检测。
随着科学技术的不断进步，试剂盒的原理和应用也在不断发展和完善，为各个领域的检测工作提供了更加便捷、高效的手段。
鉴定试剂盒工作原理是什么
鉴定试剂盒工作原理是什么
鉴定试剂盒是一种常用于科学实验室中的化学试剂，用于鉴别、检测和分析物质的特定性质和组成。
其工作原理通常包括以下几个步骤：
1. 制备：鉴定试剂盒一般由多种试剂和材料组成，制备过程会对这些试剂和材料进行混合、标记和包装等操作。
2. 反应：在鉴定试剂盒的使用过程中，待测样品与试剂发生特定的化学反应，产生可观察的结果。
这些试剂可以与特定的化合物、元素或分子结构发生特异性反应。
3. 结果观察：经过反应后，鉴定试剂盒会产生特定的颜色变化、沉淀形成、气体释放等显性或隐性的结果变化。
这些变化能够被熟练的实验人员观察和识别。
4. 结果解读：根据不同试剂盒和所鉴定的物质的特定性质，实验人员可以通过对结果的解读，确定样品中特定物质的存在与否、浓度、纯度或其他特征。
鉴定试剂盒的工作原理基于化学反应或物理特性的差异，通过与待测样品发生特异性的反应或相互作用，对物质的性质和组成进行分析和鉴定。
不同种类的鉴定试剂盒具有不同的工作原理，但整体目的都是通过试剂与样品的反应来实现对样品特性的鉴定。
bca试剂盒原理
bca试剂盒原理BCA试剂盒原理引言：BCA（Bicinchoninic Acid）试剂盒是一种常用于蛋白质浓度测定的试剂盒，基于BCA法原理。
BCA试剂盒通过与蛋白质中的还原性氮原子中的铜离子结合，形成紫色络合物，进而通过光度计测定溶液的吸光度来计算蛋白质的浓度。
一、BCA法原理概述BCA法是一种基于铜离子与还原性氮原子之间的配位结合反应的蛋白质浓度测定方法。
BCA试剂盒中的主要成分包括BCA试剂、蛋白质标准品和碱式溶液。
二、BCA法原理详解BCA法原理是基于蛋白质中的还原性氮原子（主要是蛋白质中的组氨酸和半胱氨酸）与BCA试剂中的铜离子（Cu2+）发生配位反应，形成紫色络合物。
这个反应是一个比较敏感的反应，可以测定低至2μg/ml的蛋白质浓度。
具体步骤如下：1. 将待测样品与BCA试剂按照一定比例混合，加热反应。
2. 在高温下，蛋白质中的还原性氮原子与BCA试剂中的铜离子发生配位反应，生成紫色络合物。
3. 冷却后，使用光度计测定反应液的吸光度，即可得到蛋白质的浓度。
三、BCA法的优点1. 灵敏度高：BCA试剂盒可以测定低至2μg/ml的蛋白质浓度，对于浓度较低的样品测定非常有优势。
2. 反应稳定：BCA法反应生成的紫色络合物相对稳定，可以在室温下保存一段时间。
3. 操作简便：BCA试剂盒操作简便，只需按照说明书中的步骤进行操作即可。
4. 适用性广：BCA法适用于多种样品类型，包括细胞裂解液、血清、培养上清液等。
四、使用BCA法测定蛋白质浓度的注意事项1. 使用前需充分混匀BCA试剂盒中的各种试剂，避免试剂沉淀。
2. 样品需完全溶解，避免未溶解的颗粒影响测定结果。
3. 反应时间不宜过长，一般15-30分钟即可，过长时间可能会出现颜色变淡的情况。
4. 测定前需进行空白对照，以消除其他物质对测定结果的干扰。
结论：BCA试剂盒是一种常用的蛋白质浓度测定试剂盒，基于BCA法原理。
该方法具有灵敏度高、操作简便等优点，适用于多种样品类型。
核酸试剂盒的作用原理
核酸试剂盒的作用原理
核酸试剂盒的作用原理主要有以下几个方面：
1. DNA/RNA的提取和纯化：核酸试剂盒中含有特定的试剂和缓冲液，可以帮助将样品中的DNA/RNA从其他细胞组成部分中分离出来，并去除额外的污染物，使得后续的实验可以更准确地进行。
2. DNA/RNA的扩增：核酸试剂盒中通常包含DNA/RNA聚合酶和引物等物质，可以通过PCR或RT-PCR等方法对目标DNA/RNA进行扩增，使得样品中的DNA/RNA数量增加，以便后续实验的需要。
3. DNA/RNA的检测和定量：核酸试剂盒中通常包含荧光探针、引物和染料等物质，可以通过荧光信号的检测来确定样品中特定的DNA/RNA序列的有无，或者用于定量目标DNA/RNA的浓度。
4. DNA/RNA的酶切和修饰：核酸试剂盒中有时也包含特定的酶和缓冲液，可以用于DNA/RNA的酶切和修饰实验，对目标DNA/RNA进行特定的切割和修饰，以满足不同实验的需要。
总的来说，核酸试剂盒的作用原理是通过特定的试剂和缓冲液，以及不同的实验方法和技术来实现对DNA/RNA的提取、扩增、检测、定量、酶切和修饰等操
作，以满足科研实验和临床诊断等领域对DNA/RNA的不同需求。
提质粒试剂盒原理
提质粒试剂盒原理
提质粒试剂盒是一种用于提取质粒（DNA）的实验方法。
其原理是利用特定的试剂和步骤将细胞中的质粒提取出来，并且纯化至足够纯净的程度。
下面是提质粒试剂盒的工作原理：
1. 细胞破裂：首先，将含有目标质粒的细胞进行破裂，使质粒释放到溶液中。
破裂可以使用不同方法，例如高热、化学物质或机械方法，具体方法会根据实验需求和试剂盒的推荐进行选择。
2. 蛋白质降解：将蛋白酶加入细胞裂解物中，使其降解细胞中的蛋白质。
蛋白酶通过断裂蛋白链上的特定键，将蛋白质分解成更小的肽段，从而使质粒与蛋白质分离。
3. 分离DNA：利用碱性条件或乙酸盐的缓冲溶液，将DNA
与其他组分如RNA、蛋白质和杂质分离开。
DNA在碱性条件下带有负电荷，而其他组分不带电或带有正电荷，因此可以利用电荷的差异进行分离。
4. 纯化质粒：通过离心将沉淀得到的DNA沉淀物洗涤，去除掉残留的污染物和试剂残留。
然后使用适当的缓冲溶液来溶解沉淀，使得质粒在溶液中溶解。
5. 最后，通过进一步离心和洗涤步骤，去除溶液中的残留污染物和盐离子，得到纯净的质粒DNA溶液。
通过这些步骤，提质粒试剂盒可以快速、高效地提取质粒，并得到质粒DNA的纯化产物，以供后续的实验分析和应用。
pcr检测试剂盒原理
pcr检测试剂盒原理PCR检测试剂盒原理是一种用于检测特定DNA序列的分子生物学方法。
它利用PCR技术的三个步骤：变性、退火和延伸来扩增目标DNA序列。
在PCR检测试剂盒中，通常包含以下组分：1. DNA模板：待扩增的目标DNA序列。
2. 引物：一对特异性引物，它们与目标DNA序列的两端互补配对，使得PCR反应仅扩增特定的DNA片段。
3. dNTPs：四种脱氧核苷酸，即dATP、dCTP、dGTP和dTTP，它们作为PCR反应的原始材料。
4. 酶：通常使用热稳定的DNA聚合酶（如Taq DNA聚合酶），它能够耐受PCR反应的高温条件。
5. 缓冲液：用于维持PCR反应环境的pH值，保持酶的活性和稳定性。
PCR检测试剂盒的反应过程如下：1. 变性（Denaturation）：将PCR反应混合物加热至94-98°C，使DNA双链解开，生成两条单链模板。
2. 退火（Annealing）：将反应温度降至50-65°C，使两条单链模板与引物互补配对，形成DNA复性。
3. 延伸（Extension）：将温度升至72°C，此时DNA聚合酶通过在引物的引导下，从引物的3'端开始合成新的DNA链。
该DNA聚合酶能够在高温下保持稳定，从而使PCR反应得以进行。
通过不断循环上述三个步骤，PCR反应每个循环都会在每条单链DNA上产生一个新的互补链。
这使得目标DNA序列得以指数级扩增，最终产生大量的特定DNA片段。
PCR检测试剂盒的原理利用了DNA的特性，能够精准而有效地扩增目标DNA序列。
它被广泛应用于基因分型、疾病诊断、基因工程等领域，为生命科学研究和临床实践提供了重要的工具和技术支持。
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玉米赤霉烯酮（ZEN）
配合饲料、玉米
T-2毒素
猪配合饲料、禽配合饲料 谷物及其制品；豆类及其制品
1000 5
赭曲霉毒素（OTA）
配合饲料、玉米
100ห้องสมุดไป่ตู้
第六部分 试剂盒结果分析
灵敏度:应用该方法能检测待测抗原的最低量。 准确度:指测定值(平均值)与真实值的接近程度,表示 分析结果的正确性，由于无法知道样本的真实浓度， 故通常采用添加回收率来表示。 回收率=(测定值-空白值)/添加量 精密度:指用某种方法重复测定同一均质样品所得测 定值的彼此接近程度,表示分析结果的重复性，用变 异系数表示。
3
双抗体夹心法测抗原
此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如乳铁蛋白。 只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体 和制备酶结合物而建立此法。（曲线正相关）
第三部分 分析软件使用及结果分析
第四部分
ELISA试剂盒可能出现的问题及解决方法
第五部分 常见的霉菌毒素及其危害、限量标准
霉菌毒素的残留限量
GB 2761-2011 食品安全国家标准—黄曲霉毒素限量标准
毒素 样品类型 玉米及玉米产品，花生及花生产品，花生油、玉米油 稻谷、大米、其他食用油 黄曲霉毒素 B1 小麦、大麦及其加工制品，大豆及其发酵制品、调味品、坚 5 限量 (µ g/kg) 20 10
果、其他谷物
婴儿配方食品：大豆类、米类、米粉 黄曲霉毒素 M1 乳及乳制品 婴幼儿配方食品 0.5 0.5 0.5
2
直接竞争法测抗原
（1）直接竞争酶标抗原法测抗原 样本中的待测药物和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合，经底物显 色后检测，样本中药物含量愈高，结合在固相上的酶标抗原量愈少， 最后的显色也愈浅。 （2）直接竞争酶标抗体法测抗原 样本中的待测药物和固相抗原竞争结合一定量的酶标记抗体，经底物显 色后检测，样本中药物含量愈高，结合在固相上的酶标抗体愈少，最 后显色也愈浅。 直接竞争法具体操作步骤如下： 1）加入标准品/样本，再加入酶标抗体（或酶标抗原），保温反应。 样本中药物与固相抗原（或酶标抗原）同时竞争与特异性抗体（或固 相抗体）结合，形成固相抗原-酶标抗体复合物（或抗体-酶标抗原复 合物）。洗涤除去游离物质及吸附在固相载体上结合不紧密的物质。 2）加底物显色，固相上的酶催化底物成为有色产物。通过仪器检测 分析，测知样本中抗原的量。 国外大部分ELISA试剂盒均采用此类型。
嘧啶核苷(T)。
单克隆抗体制备流程
1.免疫动物 （使小鼠产生致敏B淋巴细胞）
2.细胞融合（加入PEG）
3.选择性培养（HAT选择性培养基） 4.杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化
（ELISA方法进行筛选，特异性，亲和 力，效价及交叉反应的评价）
5.单克隆抗体的大量制备 （体内诱生：腹水） （体外培养：细胞培养液）
黄曲霉毒素（Alfatoxins）：包括B1、B2、G1、G2、M1、M2等17种，其
中B1毒性最强。黄曲霉毒素中毒可降低畜禽对疾病的抵抗力；
玉米赤霉烯酮（Zearalenone）：雌激素样作用，繁殖机能障碍； 呕吐毒素（Vomitoxin）：采食量下降、增重下降，皮肤炎症； T-2毒素(T-2 Toxin)：口腔溃疡，食欲不振，皮肤炎症，消化道紊乱； 伏马毒素(Fumonisin)：神经错乱，肝脏受损； 赭曲霉毒素(Ochratoxins)：产生肾毒素，痛风症。
霉菌毒素的残留限量
GB 13078-2001 饲料卫生标准—黄曲霉毒素限量标准
毒素
肉牛精料补充料
豆粕 生长肥育猪、种猪配合料及浓缩料 肉用仔鸡后期、生长鸡、产蛋鸡配合饲料及浓缩料 20
样品种类
玉米、花生饼（粕）、棉籽饼（粕）、菜籽饼（粕）
限量 (µg/kg)
50 30
黄曲霉毒素 B1
鹌鹑配合饲料及浓缩料 肉用仔鸭后期、生长鸭、产蛋鸭配合饲料及浓缩料 15
第六部分 试剂盒结果分析
第一抑制率（B1/B0）：75-85%。 变异系数（CV）：CV =（ 标准偏差 SD / 平均值 Mean ）× 100% 。要求CV≤10%。 特别注意： 精密度与准确度没有必然联系。 以上所有参数均需综合考量，缺一不可。
市场上各种进口酶标仪线性范围
设备型号 Bio-Rad-550（美国伯乐） Ultramark （美国伯乐） MK-3 （热电，同FC） 吸光度范围 0.0~2.5 0.0~4.5 0.0~4.0 0.0~6.0 0.0~4.0 0.0~3.2 0.0~3.3 紫外检测 检测类型 紫外检测 紫外检测 紫外检测 紫外检测 紫外检测
第六部分 试剂盒结果分析
残留检测限（MRL）：规定的样本中药物最高不得 超过的浓度。很多情况下各国规定的ＭＲＬ值之间 有一定的差异，多数情况下我国规定的ＭＲＬ值较 日本、欧盟、美国的高一些。 阴性和阳性 阴性：即样本中不含被检测物质 阳性：样本中含有被检测物质 假阴性与假阳性 假阴性：因为某些因素的影响，原本含有被检测物的 样本检测的结果为阴性 假阳性：与假阴性的情况相反
二、抗原的两种基本特性 1. 免疫原性（immunogenecity），是指抗原分子能够刺激机体 产生免疫应答（产生特异性抗体及免疫效应细胞）的性质。
致敏T细胞
T
Ag
B 浆细胞
抗体
免疫原性示意图
2. 抗原性（antigenicity），又称免疫反应性，是指抗原分子与 免疫应答产物（抗体或免疫效应细胞）发生特异性结合的性 质。
T 致敏T细胞
Ag
B 浆细胞
抗体
抗原性（免疫反应性）示意图
三、完全抗原与半抗原
1. 完全抗原（complete antigen)具有免疫原性和抗 原性的物质。 2. 半抗原（incomplete antigen ）无免疫原性，只有 抗原性的物质。 3. 载体（carrier）赋予半抗原以免疫原性的蛋白质。 4. 半抗原 + 蛋白质（载体） ＝ 完全抗原。 5. 抗原决定簇（antigenic determinant）, 又 称表位（epitope）。抗原分子存在的能与TCR/BCR 或抗体Fab片段特异性结合的特殊化学基团，是免疫 应答特异性的物质基础。
Multiskan Ascent （热电，自带孵育器）
Bio-tek ELX800（美国宝特） CliniBio Anthos 2010（英国安图斯）
Infinite F50（瑞士帝肯）
0.0~4.0
荧光/紫外检测
芬兰BIOHT mLine移液器优势和劣势
1.可整支高压灭菌消毒（121℃，20min，1个大气 压） 2.具备专利的安全锁定装置（BRAND也具有此项） 3.专利的吸头圆锥滤器和独特的滤器排出功能（特 有的） 4.最小量程0.5ul（市场上有很多移液器最小量程 0.1ul）
第六部分 试剂盒结果分析
零标OD值：1.4-2.3，表示产品的稳定性，过高的 OD值可能是由于操作失误引起的。（酶标仪的选择） IC50：半数抑制浓度。是控制曲线整体形状的关键。 （是结果稳定程度的代表参数） 线性（R2值）：代表现有数据和方程式趋势线的拟 合度，R2越接近1说明拟合度越好，方程式更符合 现有数据的存在规律。（不能仅仅以此为依据判断 结果准确性）
第六部分 试剂盒结果分析
检测限（LOD ）：指分析方法能够从样品背景信号 中检测出待测物质存在时所需最低浓度。LOD反映 了分析方法整体的灵敏度效能指标。LOD=B+2SD 或B+3SD。（试剂盒中检测限=灵敏度*样本稀释倍 数） 定量限（LOQ ）：指分析方法能够对样品中待测物 进行定量测定的最低浓度。用于定量方法的验证。 一般要求其CV＜10%,回收率≧80%， LOQ=B+10SD。
四、 抗体概论
1. 抗体（antibody, Ab） 是由抗原刺激而产生并能与刺激其产生的抗原发 生特异性结合的、具有免疫功能的糖蛋白。抗体 主要存在血清中，也存在于如呼吸道粘膜液、小 肠粘膜液、唾液以及乳汁等其它体液中。 2. 免疫球蛋白（immunoglobulin, Ig）
具有抗体活性或化学结构与抗体分子相似的球蛋 白。
谈原理，看ELISA究竟为何物 讲方法，瞧试剂盒到底怎么使
第一部分
抗原抗体基本概念
一、概念 抗原（Antigen, Ag）是刺激机体产生免疫应 （应是指抗原刺激机体产生免疫应答产物-抗体或免疫效应细胞）答（答是指相应抗 原与免疫应答产物结合并将其排除体外） 的物质。 抗原主要指病原微生物及其代谢产物以及抗 毒素血清和药物等。根据来源可分为外来 抗原和自身抗原。
五、单克隆抗体和多克隆抗体
1.多克隆抗体（polyclonal antibody） 抗原分子通常具有多个抗原决定簇，动物免 疫后可刺激多种具有相应抗原受体的B细胞发 生免疫应答，因而可产生多种针对不同抗原决 定簇的抗体。这些由不同B细胞克隆产生的抗 体称为多克隆抗体（polycolonal antibody, PcAb）。
2.单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb）
A.定义：由单一克隆B细胞杂交瘤产生的、只识别抗原 分子某一特定抗原决定簇的、具有高度特异性的抗体。 B.特点 具有高度均一性。
C.杂交瘤细胞
骨髓瘤细胞 — 无限增殖； 免疫B细胞 — 合成、分泌特异性抗体。 D.杂交瘤技术 HAT培养基：次黄嘌(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺
单克隆抗体与多克隆抗体的比较
第二部分 ELISA试剂盒的组成及原理
酶标板
• 已包被抗原或抗体
• 标准品、抗体、酶标
试剂
物 • 显色液、终止液 • 样品处理液、洗涤液
说明书
·操作流程 ·注意事项
1
间接竞争法测抗原
样本中的待测药物和固相化的抗原共同竞争一定量的抗体，加入酶标 记抗抗体（酶标二抗）后能与固相化的抗原抗体复合物特异性结合， 经底物显色后检测，样本中药物含量愈高，竞争结合的抗体量愈多， 从而结合在固相上的酶标记抗抗体（酶标二抗）量愈少，最后的显色 也愈浅。本公司及国内产品多用此法。具体操作步骤如下： 1）加入标准品/样本，再加入抗体，保温反应。样本中药物与固相抗 原同时竞争与特异性抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去 游离物质及吸附在固相载体上结合不紧密的物质。 2）加酶标抗抗体，固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合， 从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与样本中受检药物 的量负相关。 3）加底物显色，固相上的酶催化底物成为有色产物。通过仪器检测 分析，测知样本中抗原的量。