人糖胺聚糖(GAG)Elisa试剂盒说明书
人糖基化终末产物(AGE)ELISA试剂盒说明书
人糖基化终末产物 (AGE)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中糖基化终末产物(AGE)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人糖基化终末产物(AGE)水平。
用纯化的人糖基化终末产物(AGE)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入糖基化终末产物(AGE)，再与HRP标记的糖基化终末产物(AGE)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的糖基化终末产物(AGE)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人糖基化终末产物(AGE)浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫试剂盒使用说明书
氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫试剂盒【试剂配制】洗液工作液：洗液需提前配制，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制。
取出洗液浓缩液，浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
浓洗涤液按1:20倍进行稀释。
例如用量筒量取285ml去离子水，倒入烧杯或其他洁净容器中，再量取15ml浓洗涤液，均匀加入，搅拌混匀。
【注意事项】1.实验开始前，请提前配置好所有试剂。
试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
2.用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
3.如样品浓度过高时，用合适的溶液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
【操作步骤】1.将各种试剂移至室温（18-25℃）平衡至少30分钟，按前述方法配制试剂，备用。
2.将酶标板取出，设一个空白对照孔、不加任何液体；每个标准点依次各设两孔，每孔加入相应标准品50μl；其余每个检测孔直接加待测标本50μl。
3.每孔加入酶结合物50μl（空白对照孔除外），充分混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育1小时。
4.手工洗板，弃去孔内液体。
洗涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复三次后拍干；洗板机洗板，选择洗涤三次程序，洗板后拍干。
5.每孔加显色剂A液50μl，显色剂B液50μl，振荡混匀后，37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50μl。
6.用酶标仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
在反应终止后10分钟内进行检测。
【操作要点】1.为保证检测结果的准确性，建议标准品及样品均设双孔测定。
每次检测均需做标准曲线。
2.如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时再乘以相应的稀释倍数。
3.加样时，请使用一次性的洁净吸头，避免交叉污染。
加样时应尽量轻缓，避免起泡，将样品加于酶标板孔底部，切勿沿孔壁加样。
4.为防止样品蒸发，温育过程中酶标板必须覆上板贴，任何时候都应避免酶标板处于干燥的状态。
5.洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性，在每次洗涤过程中，需要将孔内液体完全甩干，并在吸水纸上拍干，切勿将吸水纸直接放入反应孔中吸水，或用枪在孔中吸取液体。
人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书
人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书上海樊克生物有限公司专业的提供elisa试剂盒，进口/国产elisa试剂盒，elisa试剂盒价格，elisa试剂盒说明书，专业elisa试剂盒说明书生产商,老品牌ELISA试剂盒,ELISA试剂盒报价,elisa试剂盒品牌,生化试剂，血清，标准品|对照品、培养基等科研生化试剂，品质保证，技术严格，无效果退款退货，欢迎来电咨询及订购。
Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）供应商：上海樊克生物有限公司仓鼠甲状腺结合球蛋白，TBGELISA试剂盒 Prospective application: ELISA method for quantitative determination of related substances in human serum, plasma, cell culture supernatant or other related biological fluids.1 Kit preservation: -20 C (a longer time to use); 2-8 C (frequent use).2 washing liquid preserved at low temperature there will be precipitation, heating the water to help dissolve when diluted.3 Chinese and English instructions may be inconsistent, please refer to the specification in english.4 just open the enzyme linked plate hole may contain a little water samples, this isa normal phenomenon, will not have any effect on the results of the experiment.7 could not detect the NaN3 containing samples, because NaN3 inhibited the activity of horseradish peroxidase (HRP).人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书Elisa试剂盒操作步骤：3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
糖胺聚糖代谢
糖胺聚糖代谢一、糖胺聚糖简介糖胺聚糖（Glycosaminoglycan，GAG）是一类天然存在的线性多糖，由重复的二糖单位构成，是构成细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的主要成分之一。
糖胺聚糖由己糖胺和糖醛酸组成，常见的糖胺聚糖包括透明质酸（hyaluronic acid）、硫酸软骨素（chondroitin sulfate）、硫酸角质素（keratan sulfate）等。
二、糖胺聚糖代谢过程1.合成途径：糖胺聚糖的合成在细胞内进行，需要一系列酶的参与。
合成过程中涉及到的基本物质包括单糖、二糖和多糖。
合成步骤包括单糖的活化、单糖之间的连接以及多糖链的延伸和修饰。
其中，糖胺聚糖的单糖单位通常在核苷二磷酸激酶的催化下，由特定的核苷二磷酸供体合成。
2.修饰过程：在合成过程中，糖胺聚糖需要进行一系列的修饰，包括硫酸化、乙酰化、磷酸化等。
这些修饰可以影响糖胺聚糖的物理性质和生物活性，从而调节其在生物体内的功能。
3.分解途径：糖胺聚糖在生物体内可以被分解为更小的分子，如单糖和二糖。
这个过程主要发生在细胞内，需要特定的酶进行催化。
分解后的产物可以进一步被细胞利用或排出体外。
三、糖胺聚糖代谢与疾病1.癌症：研究表明，一些肿瘤细胞能够异常表达糖胺聚糖，这可能与其恶性转化和转移有关。
同时，异常的糖胺聚糖代谢也可能影响肿瘤细胞的免疫识别和抗肿瘤免疫反应。
例如，一些肿瘤细胞可以过度表达透明质酸酶等酶类，促进透明质酸的分解代谢，从而影响肿瘤的生长和扩散。
此外，异常的糖胺聚糖代谢还可能影响肿瘤细胞的粘附、迁移和扩散等行为。
因此，研究糖胺聚糖代谢与肿瘤的关系可以为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路和方法。
2.炎症性疾病：炎症过程中，异常的糖胺聚糖代谢可能导致组织损伤和疾病进展。
例如，一些慢性炎症性疾病可能与过量表达或异常修饰的糖胺聚糖有关。
此外，异常的糖胺聚糖代谢还可能影响炎症细胞的迁移、活化和功能，从而影响炎症的发展和消退。
糖蛋白与蛋白聚糖
第一篇
蛋白质
第二章 糖蛋白与蛋白聚糖
glycoprotein and proteoglycan
蛋白质的结构和功能 脂蛋白 细胞外基质蛋白质(自学) 蛋白质的转运、加工与修饰(自学)
单糖
糖类
多糖
糖蛋白(glycoprotein) 蛋白聚糖(proteoglycan) 糖脂(glycolipids)
分子中的糖链通过与多肽链中 Asnγ位酰胺N原子形成N-糖苷 键而共价相连。
N-连接型糖蛋白
N-连接分类:
(1) N-GlcNAc连接:
糖基化位点: Asn-X-Ser/Thr 序列子
(sequon） (2) N-GalNAc连接和N-Glc连接 (罕见)
糖蛋白中糖链的组成与结构
糖蛋白中的糖链变化较大，含有丰富的结构信息。寡糖链往 往是受体、酶类的识别位点。
糖蛋白的分子结构
蛋白质部分 组成糖蛋白分子糖链的单糖: D-葡萄糖 (Glc); D-半乳糖 (Gal); D-甘露糖 (Man); L-岩藻糖 (Fuc); 2-N-乙酰氨基葡萄糖 (GlcNAc); 2-N-乙酰氨基半乳糖 (GalNAc); D-木糖 (Xyl); L-阿拉伯糖 (Ara) ; 唾液酸 (Sia)
透明质酸ELISA试剂盒说明书
透明质酸ELISA试剂盒产品编号：SEKH-0509该试剂盒用于定量检测血清、血浆或细胞上清等样本中Hyaluronan的浓度仅供研究，不用于临床诊断订购热线:400-968-6088﹡技术支持邮箱:公司官网:目录背景介绍 (1)检测原理 (1)检测原理图 (2)注意事项 (2)技术要点 (3)试剂盒组成及储存 (4)自备实验器材（不提供，可代购） (4)样本收集及储存 (5)试剂准备 (6)检测步骤 (8)操作流程图 (10)结果计算 (11)典型数据 (11)常见问题及解决方法 (14)相关产品 (15)发表优秀文献 (15)透明质酸，又称透明质酸(HA)或透明质酸钠，是一种天然存在的线性聚合物。
透明质酸是一种糖胺聚糖(GAG)，广泛存在于所有脊椎动物的细胞外基质中，也存在于链球菌的某些菌株的囊中。
哺乳动物透明质酸是由三种不同的透明质酸合成酶(HAS1、2和3)之一合成的，它们产生不同链长和不同合成速率的HA聚合物。
高分子量HA(>；500kDa)具有抗血管生成、抗炎和免疫抑制作用，低分子量HA(10-500kDa)具有高血管生成和促炎作用。
HA寡聚体具有抗凋亡和上调热休克蛋白表达的作用。
在功能上，透明质酸分子对于维持组织中高度水化的细胞外基质很重要，它参与细胞粘附，支持细胞迁移。
检测原理Solarbio（Solarbio®）ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。
将抗Hyaluronan单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的Hyaluronan 会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗Hyaluronan 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的Hyaluronan 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的Hyaluronan，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的Hyaluronan浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中Hyaluronan的浓度。
组织糖胺多糖（gag）总含量阿尔新蓝（alcianblue）比色法
组织糖胺多糖（GAG）总含量阿尔新蓝（alcian blue）比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途组织糖胺多糖（GAG）总含量阿尔新蓝（alcian blue）比色法定量检测试剂是一种旨在通过高盐萃取可溶性糖胺多糖，与阿尔新蓝染料结合，在丙醇解离溶液中，释放蓝色染料，由分光光度仪比色分析，定量检测组织样品中糖胺多糖含量的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
适用于各种人体或动物组织（皮肤、肌肉等）、软骨、结缔组织、肿瘤组织等样品糖胺多糖水平检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测准确。
技术背景糖胺多糖（glycosaminoglycan；GAG），又称为粘多糖（mucopolysaccharide），是体内最为丰富的异源多聚糖。
糖胺多糖是一种未分叉的负电荷性长链多聚糖，由重复的二糖单位，包括六碳糖（hexose）或己糖醛酸（hexuronic acid），链接到己糖胺（hexoamine）上而成。
糖胺多糖与核心蛋白（core protein）共价相联，构成蛋白多糖（proteoglycan；PG），成为细胞膜和细胞外基质（extracellular matrix；ECM）的主要成分。
蛋白多糖的糖胺多糖在合成过程中发生硫酸酯化（sulfated group），其部位在O或N位上，有利于发挥各种不同的作用，包括酶的调节、细胞黏附、生长、迁移、分化，以及组织损伤反应。
基于糖胺多糖的高度负电荷的特点，使用异染性（metachromatic）四价（tetravalent）阳离子蓝色染料阿尔新蓝（alcian blue），在酸性条件下，特异性的结合产生不溶性蓝色糖胺多糖染料复合物（Dye-GAG complex），在丙醇解离溶液中，释放出染料，通过分光光度仪（600nm波长）测定，来定量分析糖胺多糖的总含量。
产品内容萃取液（Reagent A）12毫升高盐液（Reagent B） 1.5毫升酸性液（Reagent C）10毫升染色液（Reagent D） 1.5毫升清理液（Reagent E）25毫升解离液（Reagent F）25毫升标准液（Reagent G）100微升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent D）避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证3月用户自备无离子水：用于配制工作液1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于样品操作比色皿或96孔板：用于比色分析的容器分光光度仪或酶标仪：用于比色分析实验步骤一、样品预处理1．手术取出动物组织，并秤重以确定200毫克组织重量2．移入到一个液氮冻存管3．即刻放进液氮罐过夜4．次日从液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）5．放进一个1.5毫升离心管6．加入500微升萃取液（Reagent A）7．强力涡旋震荡1分钟，充分混匀8．放进4℃冰箱里孵育16小时，期间涡旋震荡1分钟五次9．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）10．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管11．置于冰槽里备用二、标准样品配制1．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管2．分别加入50微升萃取液（Reagent A）到1至5号管3．移取50微升标准液（Reagent G）到1号管，混匀4．小心移取50微升1号管稀释的标准液（Reagent G）到2号管，混匀5．小心移取50微升2号管稀释的标准液（Reagent G）到3号管，混匀6．小心移取50微升3号管稀释的标准液（Reagent G）到4号管，混匀7．将1至5号管放进冰槽里备用；标准管浓度见下表三、标准曲线测定检测开始前，移取1.25毫升酸性液（Reagent C）到15毫升锥形离心管，加入2.25毫升用户自备的无离子水，混匀，然后加入0.25毫升染色液（Reagent D），混匀后，标记为染色工作液（共5次检测），置于暗室里备用。
人糖化白蛋白(GA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人糖化白蛋白（GA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中糖化白蛋白（GA）含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗GA抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗GA抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的GA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1,000ng/ml，做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释为1,000ng/ml，500ng/ml，250ng/ml，125ng/ml，62.5ng/ml，31.2ng/ml，15.6ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制500ng/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）1,000ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml。
4.检测稀释液A：1×10ml。
5.检测稀释液B：1×10ml。
6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。
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人糖胺聚糖(GAG)Elisa试剂盒说明书
最近更新时间：2011-07-15
详细介绍：
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人糖胺聚糖(GAG)Elisa试剂盒说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
0.5μg/L -16μg/L
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中糖胺聚糖(GAG)含量。
实验原理
人糖胺聚糖(GAG)Elisa试剂盒说明书
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人糖胺聚糖(GAG)水平。
用纯化的人糖胺聚
糖(GAG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入糖胺聚糖(GAG)，
再与HRP 标记的糖胺聚糖(GAG)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底
洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最
终的黄色。
颜色的深浅和样品中的糖胺聚糖(GAG)呈正相关。
用酶标仪
在450nm 波长下
测定吸光度(OD 值)，通过标准曲线计算样品中人糖胺聚糖(GAG)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(32μg/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
16μg/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液8μg/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液4μg/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2μg/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液1μg/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。
测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月人糖胺聚糖(GAG)Elisa试剂盒说明书。