生物化学实验“蛋白质沉淀反应与盐析作用”解析
蛋白质
实验题目：蛋白质的沉淀反应------蛋白质的盐析
目的：通过观察实验，掌握蛋白质的沉淀反应原理，验证不同蛋白质沉淀中所需中性盐的浓度，且盐析作用是可逆过程。
原理：当蛋白质溶于高浓度中性盐溶液时，则蛋白质沉淀析出，称为盐析作用。
盐析作用
包括两种过程：1.大量电解质破坏了蛋白质的水化膜，从而析出沉淀；2.电解质中
和了蛋白质分子所带的电荷而沉淀。
由盐析获得的蛋白质沉淀，当降低其盐类浓度时，可以再溶解，故蛋白质的盐析作用是可逆过程。
材料：鸡蛋白溶液，饱和硫酸铵溶液，固体硫酸铵，蒸馏水
试管
方法：1.加鸡蛋白溶液2ml于试管中，加入等量饱和硫酸铵溶液，混匀，静置20min后，
观察记录实验结果。
2.过滤，收集透明滤液。
若滤液混浊，过滤至澄清。
3.取1ml滤液加固体硫酸铵使达饱和，观察实验结果。
此时析出的沉淀为清蛋白，再
向浑浊液加1.5-2.0 ml 水，观察结果。
结果：步骤1后滤液变混浊，有蛋白质析出。
步骤2中加固体硫酸铵至饱和后，溶液变更混浊，有蛋白质析出。
加水后，析出物溶解，溶液变澄清。
讨论：球蛋白在半饱和的硫酸铵溶液中即可析出，所以加入等量饱和硫酸铵溶液后，球蛋
白沉淀，而清蛋白在饱和的硫酸铵溶液中析出，所以加入固体硫酸铵至饱和时，清
蛋白发生沉淀。
因为颗粒大者比小者更容易沉淀，故球蛋白的颗粒比清蛋白大。
加
水后，溶液浓度下降，溶解物消失，故盐析作用是可逆的，蛋白质不变性。
结论：蛋白质在中性盐中的沉淀与中性盐浓度、蛋白质种类有关。
蛋白质的盐析作用是可逆过程。
蛋白质的沉淀反应(实验)
（2）不可逆沉淀反应 此时蛋白质分子内 部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉 淀，不再溶于原来溶剂中。加热、重金属 盐、过酸、过碱、震荡、超声波或某些有 机酸都能使蛋白质发生不可逆沉淀反应。
蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的 条件仍然存在（如电荷），并不析出。因 此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而 沉淀的蛋白质也未必都已变性
3 生物碱试剂沉淀蛋白质
取2支试管，各加2ml蛋白质溶液，加1%的醋 酸4~5滴，分别滴加鞣酸和苦味酸溶液数滴， 观察结果。
4.加热沉淀蛋白质
注意事项
实验要求各种试剂的浓度和加入量必须相当 准确。
作业 列表说明各实验的颜色变化，说明原因。
思考题:
1.为什么蛋清可作为重金属中毒的解毒剂
（三）设备
水浴锅 滤纸，漏斗 吸管 试管及试管架 玻棒
四、实验步骤：
（一）蛋白质的可逆沉淀 蛋白质的盐析
2ml蛋白质 浓溶液
等体积饱和 浓硫酸溶液
过滤 沉淀
清夜
硫酸铵粉末
加水
沉淀
观察现象
（二）蛋白质的不可逆沉淀
1.重金属离子沉淀蛋白质 重金属离子与蛋 白质结合成不溶于水的复合物。
2、在等电点时，蛋白质溶液为什么容易发生 沉淀？
3.在蛋白质的可逆沉淀反应中，为何要用蛋 白质氯化钠溶液？
蛋白质的沉淀反应(实验)
蛋白质的沉淀反应(实验)
一、目的要求：
了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义
二、实验原理：
在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化 层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒，在 一定的理化因素影响下，蛋白质颗粒可因失 去电荷和脱水，甚至变性，则以固体形式从 溶液中析出，这个过程称为蛋白质的沉淀反 应。
生化实验理论
实验1蛋白质的沉淀反应蛋白质的水溶液是稳定性的胶体溶液稳定的原因有两个 1 水膜2 电荷蛋白质沉淀物理化学因素影响下，蛋白质稳定性遭到破坏，以固体的形式从溶液中析出的作用。
包括可逆沉淀和不可逆沉淀可逆沉淀:盐溶（salting in）纯水或低盐溶液中溶解度较低的蛋白质，通过增加无机盐使溶解度增加盐析（salting out）高浓度的中性盐类可以脱去蛋白质分子表面的水膜，并中和蛋白质分子的电荷，从而使蛋白质从溶液中沉淀下来的过程常用的中性盐：硫酸铵，氯化钠，硫酸钠等不可逆沉淀有机溶剂沉淀：如乙醇、丙酮、生物碱试剂沉淀:如苦味酸、三氯醋酸（TCA) 、钨酸等.在pH值小于蛋白质pI时，其酸根负离子能与蛋白质分子上的正离子相结合重金属盐沉淀：金属正离子与蛋白质分子中负电荷结合加热或改变pH等实验2 蛋白质的透析脱盐透析法（dialysis）蛋白质是生物大分子，分子的直径在1-100nm之间，不能通过半透膜（有微孔的膜）；而无机盐等小分子化合物能自由通过半透膜。
利用这一特性，将蛋白质与小分子化合物分离开来。
这就是透析本实验利用透析的方法把实验一盐析中所用硫酸铵去掉，达到分离纯化的目的实验所用半透膜：玻璃纸实验3 蛋白质的两性实验——酪蛋白的pI测定蛋白质与氨基酸类似，是两性电解质蛋白质分子在等电点时不带电荷，溶解度最低，容易聚集沉淀本实验利用溴甲酚绿做指示剂，根据颜色的变化和等电沉淀的原理，确定待测蛋白酪蛋白的pI注意事项：用干滤纸硫酸铵缓慢加入玻璃纸用橡皮筋扎紧实验二蛋白质的定量测定-----双缩脲法测定蛋白质浓度实验目的：学习双缩脲法测定蛋白质含量的原理和方法掌握分光光度仪的使用方法掌握Excel软件制作标准曲线蛋白质含量：蛋白质混合物中蛋白质的含量或总蛋白质含量目前常用的方法1）凯氏定氮法①紫外吸收法2）分光光度法②染料结合法③比色法：双缩脲法Folin-酚法根据测定时所用的光源波长的不同，分光光度法可分为可见分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法等几种。
盐析法沉淀蛋白质的原理
盐析法沉淀蛋白质的原理盐析法是一种常用的蛋白质沉淀方法，其原理是利用盐对蛋白质的溶解度的影响，使蛋白质发生沉淀。
盐析法可以用于蛋白质的提纯和分离，是生物化学实验中常用的重要技术手段。
在盐析法中，盐对蛋白质的溶解度有着重要的影响。
一般来说，蛋白质在高盐浓度下会发生沉淀，而在低盐浓度下则会溶解。
这是因为盐的存在会改变水分子的结构，使得水分子更倾向于与盐结合，从而减少了与蛋白质结合的水分子数量，导致蛋白质发生沉淀。
因此，通过逐渐增加盐的浓度，可以使蛋白质逐渐沉淀下来。
在实际操作中，盐析法通常是在蛋白质溶液中逐渐加入盐，并在每次加盐后进行充分的搅拌混合，直至达到所需的盐浓度。
随着盐浓度的增加，蛋白质会逐渐发生沉淀，形成白色或乳白色的沉淀物。
此时，可以通过离心将沉淀物沉淀下来，获得相对纯净的蛋白质。
盐析法的原理简单清晰，操作也相对容易。
但在实际应用中，需要注意一些细节问题。
首先，选择合适的盐对蛋白质的沉淀效果有着重要的影响。
一般来说，硫酸铵是一种常用的盐析剂，但对于不同的蛋白质可能需要选择不同的盐。
其次，盐析法需要在较低的温度下进行，一般在4摄氏度以下，以减少蛋白质的降解和变性。
最后，盐析法得到的蛋白质溶液可能还需要经过进一步的纯化步骤，以获得更纯净的蛋白质。
总之，盐析法是一种简单有效的蛋白质沉淀方法，其原理是利用盐对蛋白质溶解度的影响。
通过逐渐增加盐的浓度，可以使蛋白质发生沉淀，从而实现蛋白质的提纯和分离。
在实际操作中，需要注意选择合适的盐、控制温度，并可能需要进行进一步的纯化步骤。
盐析法在生物化学实验中有着广泛的应用，是研究蛋白质功能和结构的重要手段之一。
蛋白质沉淀反应实验报告
一、实验目的1. 理解蛋白质沉淀反应的基本原理。
2. 掌握常用的蛋白质沉淀方法。
3. 分析蛋白质沉淀反应的影响因素。
4. 学习蛋白质沉淀反应在生物科学中的应用。
二、实验原理蛋白质沉淀反应是指在一定条件下，蛋白质从溶液中析出的现象。
蛋白质沉淀反应的原因主要有两种：一是破坏蛋白质的水化膜，二是中和蛋白质所带的电荷。
当蛋白质的水化膜被破坏或电荷被中和时，蛋白质颗粒之间的相互排斥力减弱，导致蛋白质颗粒聚集形成沉淀。
蛋白质沉淀反应在生物科学中具有广泛的应用，如蛋白质的分离、纯化、定量分析等。
三、实验材料1. 蛋白质溶液：鸡蛋清溶液、牛奶蛋白质溶液等。
2. 沉淀剂：硫酸铵、硫酸钠、氯化钠、乙醇、甲醇、氯仿等。
3. 实验仪器：试管、移液管、滴管、pH计、离心机等。
四、实验方法1. 盐析法：向蛋白质溶液中加入适量的硫酸铵，观察蛋白质沉淀现象。
2. 低温沉淀法：将蛋白质溶液置于低温条件下，观察蛋白质沉淀现象。
3. 有机溶剂沉淀法：向蛋白质溶液中加入适量的乙醇或甲醇，观察蛋白质沉淀现象。
4. 重金属盐沉淀法：向蛋白质溶液中加入适量的重金属盐（如氯化汞），观察蛋白质沉淀现象。
五、实验步骤1. 准备蛋白质溶液：取鸡蛋清溶液或牛奶蛋白质溶液，用蒸馏水稀释至一定浓度。
2. 盐析法：向蛋白质溶液中加入适量的硫酸铵，观察蛋白质沉淀现象。
3. 低温沉淀法：将蛋白质溶液置于4℃低温条件下，观察蛋白质沉淀现象。
4. 有机溶剂沉淀法：向蛋白质溶液中加入适量的乙醇或甲醇，观察蛋白质沉淀现象。
5. 重金属盐沉淀法：向蛋白质溶液中加入适量的重金属盐（如氯化汞），观察蛋白质沉淀现象。
6. 记录实验结果，分析沉淀现象。
六、实验结果与分析1. 盐析法：向蛋白质溶液中加入硫酸铵后，观察到蛋白质沉淀现象。
这是因为硫酸铵破坏了蛋白质的水化膜，同时中和了蛋白质所带的电荷，导致蛋白质颗粒聚集形成沉淀。
2. 低温沉淀法：将蛋白质溶液置于4℃低温条件下，观察到蛋白质沉淀现象。
蛋白质的沉淀反应实验报告
蛋白质的沉淀反应实验报告一、实验目的1、掌握几种常用的使蛋白质沉淀的方法。
2、理解蛋白质沉淀的原理和应用。
二、实验原理蛋白质是由氨基酸通过肽键连接而成的大分子化合物。
在一定条件下，蛋白质分子会发生沉淀现象。
蛋白质沉淀的原因主要有以下几种：1、盐析：在蛋白质溶液中加入中性盐，如硫酸铵、氯化钠等，随着盐浓度的增加，蛋白质的溶解度逐渐降低而沉淀析出。
这是因为中性盐会破坏蛋白质分子表面的水化膜，并中和蛋白质分子所带的电荷，从而使其沉淀。
盐析沉淀的蛋白质一般不变性，经透析或超滤等方法除去盐后，蛋白质仍能恢复其原有的溶解性和生物活性。
2、有机溶剂沉淀：向蛋白质溶液中加入一定量的有机溶剂，如乙醇、丙酮等，可使蛋白质沉淀。
这是因为有机溶剂能降低溶液的介电常数，增加蛋白质分子之间的静电引力，同时还能破坏蛋白质分子的水化膜，导致蛋白质沉淀。
有机溶剂沉淀的蛋白质往往会发生变性，失去其原有的生物活性。
3、重金属盐沉淀：蛋白质在碱性溶液中可与重金属离子，如汞离子、铅离子等结合形成不溶性的盐而沉淀。
这种沉淀反应是由于重金属离子与蛋白质分子中的巯基、羧基等基团结合，从而破坏了蛋白质的结构，导致其沉淀。
重金属盐沉淀的蛋白质通常会发生变性。
4、生物碱试剂沉淀：生物碱试剂，如苦味酸、鞣酸等，能与蛋白质分子中的碱性基团结合而沉淀。
这种沉淀反应常用于定性和定量分析蛋白质。
三、实验材料与仪器1、实验材料蛋白质溶液（鸡蛋清稀释液）饱和硫酸铵溶液乙醇氯化汞溶液苦味酸溶液氢氧化钠溶液醋酸溶液2、实验仪器试管试管架滴管离心机四、实验步骤1、盐析沉淀取 2 支试管，分别加入 2mL 蛋白质溶液。
向其中一支试管中逐滴加入饱和硫酸铵溶液，边加边振荡，直至出现沉淀为止。
将另一支试管作为对照，观察现象。
2、有机溶剂沉淀取 2 支试管，分别加入 2mL 蛋白质溶液。
向其中一支试管中逐滴加入乙醇，边加边振荡，直至出现沉淀为止。
将另一支试管作为对照，观察现象。
实验四蛋白质的盐析作用和透析
THANKS
五、思考题 鸡蛋清为什么可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？
添加副标题
三．材料与试剂
四．实验材料：鸡蛋
五．实验试剂
○ 蛋白质氯化钠溶液：取20ml蛋清，加蒸馏水200ml和饱和氯化钠溶液 100ml，充分搅匀后，以纱布滤去不溶物（加氯化钠的目的是溶解球蛋白）。
○ 其他试剂：①硫酸铵粉末 ②饱和硫酸铵溶液
三．实验器材 试管及试管架、滤纸、研钵、烧杯、玻璃棒、漏斗
操作方法
实验三 蛋白质的盐析 作用
一、目的要求
了解蛋白质的 的沉淀反应
学习盐析操作 技术
二、实验原理
用大量中性盐使蛋白质从溶液中沉淀析出的 过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水 胶体，蛋白质溶液在高浓度中性盐的影响下， 蛋白质分子被中性盐脱去水化层，
PART ONE
同时所带电荷被中和，结果蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而 沉淀析出。析出的蛋白质仍保持其天然性质，当降低盐的浓 度时，还能溶解。因此，蛋白质的盐析作用是可逆过程。
实验器材 试管及试管架、透析袋、玻璃棒、线绳、烧杯
操作方法
一．取1支试管，加入约1ml蛋白质溶液，加入1%硫酸铜溶 液3-4滴，观察沉淀的生成。
二．在蛋白质可逆沉淀反应中，将用硫酸铵盐析所得的清蛋 白沉淀倒入透析袋内，用线绳或透析袋夹江透析袋口扎 紧，把透析袋浸入盛有蒸馏水的烧杯中进行透析，并经 常用玻璃棒搅拌，每隔15分钟换水一次，仔细观察透析 袋中的蛋白质沉淀变化情况。
但是，在一定的物理化学因素影响下，由于蛋白质胶体颗 粒的稳定条件被破坏，如失去电荷、脱水、甚至变性，而 以固体形式从溶液中析出，这个过程称为蛋白质的沉淀反 应。这种反应可分为可逆沉淀反应和不可逆沉淀反应。
可逆沉淀反应—蛋白质虽已沉淀析出，但它 的分子内部结构并未发生显著变化，如果把 引起沉淀的因素去除后，沉淀的蛋白质能重 新溶于原来的溶剂中，并保持其原有的天然 结构和性质。利用蛋白质的盐析作用和等电 点作用，以及在低温下乙醇、丙酮短时间对 蛋白质的作用等所产生的蛋白质沉淀都属于 这类沉淀反应。
盐析沉淀蛋白实验报告
一、实验目的1. 了解盐析沉淀蛋白质的原理和方法。
2. 掌握盐析沉淀蛋白质的实验操作步骤。
3. 分析盐析沉淀蛋白质的影响因素。
二、实验原理盐析沉淀蛋白质是一种利用中性盐溶液降低蛋白质溶解度的方法。
在蛋白质溶液中加入中性盐，随着盐浓度的增加，蛋白质溶解度降低，最终从溶液中沉淀析出。
盐析沉淀蛋白质的原理如下：1. 中性盐与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质表面的水化膜，降低蛋白质溶解度。
2. 中性盐中和蛋白质表面的电荷，降低蛋白质之间的静电斥力，使蛋白质分子聚集，从而沉淀。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蛋白质溶液（如鸡蛋清、牛奶等）- 中性盐（如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等）- 双缩脲试剂- 滤纸- 离心机- 移液管- 试管- 恒温水浴锅2. 实验仪器：- 电子天平- 移液器- 烧杯- 酒精灯- 烧杯夹- 铁架台四、实验步骤1. 准备蛋白质溶液：取一定量的蛋白质溶液，加入适量的中性盐，充分搅拌，使中性盐溶解。
2. 盐析沉淀：将蛋白质溶液置于恒温水浴锅中，加热至一定温度（如60℃），保温一段时间（如30分钟），使蛋白质充分沉淀。
3. 过滤：将保温后的蛋白质溶液用滤纸过滤，收集沉淀。
4. 洗涤：用蒸馏水冲洗沉淀，去除未沉淀的杂质。
5. 干燥：将沉淀置于干燥器中，干燥至恒重。
6. 检测：取一定量的沉淀，加入双缩脲试剂，观察颜色变化，判断蛋白质的存在。
五、实验结果与分析1. 实验结果：在实验过程中，蛋白质溶液逐渐出现沉淀，沉淀物呈白色或乳白色。
通过双缩脲试剂检测，沉淀物中存在蛋白质。
2. 实验分析：- 盐析沉淀效果与中性盐的种类、浓度、温度等因素有关。
实验结果表明，硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等中性盐均能有效沉淀蛋白质。
- 盐析沉淀效果与蛋白质溶液的浓度有关。
蛋白质溶液浓度越高，盐析沉淀效果越好。
- 盐析沉淀效果与保温时间有关。
保温时间越长，蛋白质沉淀效果越好。
六、实验结论本实验成功实现了蛋白质的盐析沉淀，验证了盐析沉淀蛋白质的原理和方法。
蛋清的沉淀实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解蛋清中蛋白质的性质和特点；2. 掌握蛋白质沉淀的方法和原理；3. 通过实验观察蛋白质沉淀现象，加深对蛋白质性质的认识。
二、实验原理蛋白质是一种高分子化合物，具有多种性质。
在一定的条件下，蛋白质会发生沉淀现象。
蛋白质沉淀的原因主要有以下几种：1. pH值的影响：当溶液的pH值达到蛋白质的等电点时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时蛋白质容易沉淀。
2. 盐浓度的影响：在一定范围内，随着盐浓度的增加，蛋白质的溶解度会降低，从而导致蛋白质沉淀。
3. 温度的影响：温度的升高会使蛋白质的溶解度降低，导致蛋白质沉淀。
本实验采用盐析法沉淀蛋清中的蛋白质，通过观察蛋白质沉淀现象，分析影响蛋白质沉淀的因素。
三、实验仪器与试剂1. 实验仪器：试管、烧杯、量筒、滴管、玻璃棒、磁力搅拌器、pH计、电子天平、电炉、水浴锅。
2. 实验试剂：鸡蛋清、氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、苯酚、Millon试剂。
四、实验步骤1. 准备实验材料：取新鲜鸡蛋，将蛋清和蛋黄分离，备用。
2. 盐析实验：a. 取一定量的鸡蛋清，加入适量的氯化钠，充分搅拌，观察蛋白质沉淀现象；b. 重复上述步骤，逐渐增加氯化钠的浓度，观察蛋白质沉淀现象；c. 记录不同氯化钠浓度下蛋白质沉淀情况。
3. pH值影响实验：a. 取一定量的鸡蛋清，加入适量的氢氧化钠，调整溶液pH值至7.0，观察蛋白质沉淀现象；b. 逐渐降低溶液pH值，观察蛋白质沉淀现象；c. 记录不同pH值下蛋白质沉淀情况。
4. 温度影响实验：a. 取一定量的鸡蛋清，置于室温下，观察蛋白质沉淀现象；b. 将鸡蛋清置于水浴锅中，加热至50℃，观察蛋白质沉淀现象；c. 继续加热，观察蛋白质沉淀现象；d. 记录不同温度下蛋白质沉淀情况。
5. 其他实验：a. 取一定量的鸡蛋清，加入苯酚，观察蛋白质沉淀现象；b. 取一定量的鸡蛋清，加入Millon试剂，观察蛋白质沉淀现象。
盐析法沉淀蛋白质的原理是
盐析法沉淀蛋白质的原理是盐析法沉淀蛋白质的原理。
盐析法是一种常用的蛋白质纯化方法，通过调节盐浓度使蛋白质发生沉淀，从而实现蛋白质的纯化目的。
盐析法的原理是基于蛋白质在不同盐浓度下的溶解度变化，利用蛋白质与盐之间的相互作用来实现蛋白质的分离和纯化。
首先，我们需要了解一下蛋白质在水溶液中的溶解度与盐浓度的关系。
一般来说，蛋白质在低盐浓度下容易溶解，而在高盐浓度下则容易发生沉淀。
这是因为盐离子与蛋白质分子之间会发生相互作用，导致蛋白质的溶解度发生改变。
在低盐浓度下，盐离子与蛋白质分子之间的相互作用较弱，蛋白质能够保持溶解状态；而在高盐浓度下，盐离子与蛋白质分子之间的相互作用增强，导致蛋白质发生沉淀。
基于这一原理，盐析法利用盐浓度的变化来控制蛋白质的溶解度，从而实现蛋白质的分离和纯化。
具体操作时，首先将含有蛋白质的溶液加入适量的盐溶液中，通过搅拌使其充分混合。
随着盐浓度的增加，蛋白质逐渐失去溶解性，最终发生沉淀。
然后，通过离心等手段将沉淀的蛋白质分离出来，即可得到较为纯净的蛋白质样品。
盐析法的优点在于操作简便、成本低廉、对蛋白质的活性和结构影响较小，适用于大多数蛋白质的纯化。
然而，盐析法也存在一些局限性，例如对于一些特定的蛋白质可能无法有效分离，需要结合其他方法进行纯化。
总的来说，盐析法是一种常用的蛋白质纯化方法，其原理是通过调节盐浓度来控制蛋白质的溶解度，实现蛋白质的分离和纯化。
在实际操作中，我们需要根据具体的蛋白质特性和实验要求来选择合适的盐析条件，以达到最佳的分离效果。
希望本文能够帮助大家更好地理解盐析法的原理和应用，为蛋白质纯化工作提供一定的参考。
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６ ｌ
酸、 浓硝 酸 ， 观察记 录 现象 。
（） ２ 实验结 果 与分 析 表 ２是无 机 酸沉 淀蛋 白质 的实 验现 象 。
表 ２ 无 机 酸 沉 淀 蛋 白质
③第 ①步 后 的 １ 管 和 ２号 管部 分溶 液分别 加 号
入过 量饱 和硝 酸银 和饱 和 乙酸铅 ， 观察 记 录现 象 。
几乎所 有 蛋 白质 都 因加热 变性 而凝 固。热 对蛋 白质变 性作 用 主要 体 现在 热 使 分 子振 动 程 度 增加 ， 蛋 白质分子 内 和 分 子 间 的 各 种 作 用 力 （ 键 、 电 氢 静
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｉ ｈ ｓｐ ｐ ｒ ｏ ｔ ｎ ｅ ｐ ｅ ｏ ｎ ｃ ｕ ｒｎ ｎ ｔ ｅ ｂ ｏ ｈ ｍｉａ ｘ ｅｉ ｎ ｓｒ ｃ ： ｎ ｔ ｉ ａ ｅ ，ｓ ｍｅ ｓｒ ｇ ｈ ｎ ｍｅ ａ ｏ ｃ ｒｉ ｇ ｉ ｈ ｉｃ ｅ ｃ ｌ ｐ ｒ ａ ｅ ｍｅ ｔ” ｐ ｏｅｎ ｒ ｔ ｉ
白质沉淀。因此 ， 无机酸可 以使蛋 白质发生沉淀变
性 。 １ 管加 过量 的盐 酸沉 淀消 失 ， 号 溶液 澄清 。２号
管 加过 量硫 酸 ， 液 呈 黄 色 透 明 状 。３号 管 加 入 过 溶
表明低 浓度 的重 金 属 盐 能使 蛋 白质 发 生 沉 淀变 性 。 当溶 液 的 ｐ 值 大 于 等 电 点 时 ， 渡 金 属 离 子 Ｈ 过
结 果表 明 ， 金属 离 子 造成 的蛋 白质 变 性 是不 可逆 重 的， 虽然 变性 时往往 产 生沉淀 ， 如果 在小 于等 电点 但
的环境 下蛋 白质变 性 而 不 沉 淀 ， 有 沉 淀并 不 意味 没 着 蛋 白质 没有 变性 。
２ ２ 无机 酸沉淀 蛋 白质 ．
② 将 ３４ ５号 管 分 别 用 １％ 氢 氧化 钠 或 １％ 、、 ０ ０
ｐ ｅ ｉ ｉａｉ ｎ ｒ ａ ｔ ｎ ａ ｄ ｓ ｌ ｎ －ｏ ｔ ｒ ｃｐ ｔ ｔ ｅ ｃｉ ｎ ａ ｔ ｇ ｕ ” ｏ ｏ ｉ
ＺＨＡＮＧ ｎ ｕ Ｙｕ —ｒ ， ＺＨＡＮＧ ｉ ｉ ， ＹＵ ｎ Ｌ Ｘｉ ａｉ Ｃａ —ｑ ｎ Ｙｉ ｇ ， Ｕ ｕ—ｒ ｎ
（ ．Ｓ ｈｏ ｏ ｈ ｒ ａｙａ ｄＢｏｎ ｉｅｒ ｇ Ｃ ｏｇ ｉｇＵ ｉｅｓｙｏ Ｔ ｃ ｎ ｌ ｙ Ｃ ｏ ｇ ｉ ０ ５ ， １ ｃ ｏｌ ｆ ａｍ ｃ ｎ ｉｅｇｎ ｅ ｎ ， ｈｎ ｑｎ ｎｖｒｉ ｆ ｅｈ ｏｏ ， ｈ ｎｑｎ ４ ０ ０ Ｐ ｉ ｔ ｇ ｇ０ Ｃ ｉａ ２ ｉ ｔ ｄ ｌ Ｓ ｈｏ ｏ ｉ ｈ ｎ ，Ｊ ｃｅ ｇ ４ ０ ０， ｈｎ ） ｈｎ ； ．Ｆｒ ｄｅ ｃ ｏｌ ｆ ｎ ｅ ｇ ｉ ｈ ｎ ８ ０ Ｃ ｉａ ｓ Ｍｉ Ｊｃ ｎ ０
表 １ 重 金 属 沉 淀 蛋 白质
从 表 ２可 以看 出 ， １步 ３支试 管 在 加 入蛋 白 第 （ ） 验结 果与 分析 ２实
质 溶 液后 ， 内两 液界 面处 都 出现 了 白色 的环 状 蛋 管
每一 步 的实验现 象 如表 １所示 。第 ①步 ３只试
管在加 入相 应 的重 金 属 盐后 都 产 生 了大 量 的沉 淀 ，
过程 中 ， 同一 个小 实验 学生 得 出的结果 不一 致 ， 且 而
铅等 均为分 析 纯 。
２ 实 验 方 法 及 结 果
２ １ 重金 属沉 淀蛋 白质 ．
根据所 学 理论 知 识 不 能 对 实 验 现 象 进 行 科 学 的解 释 ， 样 的 情 况 也 引 起 了 一 些 生 化 工 作 者 的 注 这 意 ［４。本 文按 照教 材 中的实 验 方 法通 过 多次 重 复 １］ － 实验对 该 实 验课 程 中不 易 解 释 的现 象 进 行 了全 面
ｐ ｅ ｉ ｔ ｔ ｎ ｒ ａ ｔｏ ｎ ａｔ —ｏ ” ｗｈ ｃ ｔ ｅ ｔ ａ ｏ ｘ ｌｉ ｒ ｎａｙ ｅ ｎ ｄ ｔｉ． Ｉ ｒ － ｒ ｃｐｉ ｉ ｅ ｃ ｉｎ ａ ｄ ｓ ｌｉ ａｏ ｎｇ ｕｔ ｉ ｈ ｓｕｄ ｎ ｓ ｃ ｎ ｎ ｔｅ ｐａ ｎ ａ ｅ ａ ｌｚ ｄ ｉ ｅ ａｌ ｔｐ ｏ
乙酸 中和 ， 观察 记 录现象 。 （） ２ 实验 结果 与分 析
（） １ 实验 方法
两 步实 验后 ， 管 的现象 如表 ３所 示 。 各
这 个 实 验 中第 ① 步 学 生 在 操 作 时 现 象 基 本 一 致 ， 在 第② 步 中和 时 ， 但 ３号管 、 ５号管 的现象是 随加
从第 ② 步 １ 号试 管 取 出部分加 水 稀释 沉淀不 溶
解 ； 管加 入过 量 的 ０５ 的 乙酸铅 ， ２号 ．％ 沉淀 不溶 解 ； ３号 试 管 加 过 量 饱 和 硫 酸 铜 溶 液 沉 淀 溶 解 ， 液 溶
变蓝 。
丙 氨 酸 、 氨酸 、 氨 酸 等 含 苯 环 的 氨基 酸 所 特 有 ， 酪 色
（ ｇ Ｐ 、 ｕ Ａ ） 与 蛋 白质 侧 链 上 的 巯 Ｈ 、ｂ Ｃ 、 ｇ 等 能
量 浓硝 酸 ， 淀 仍 然存 在 但 溶 液 变 黄 。 蛋 白质 沉 淀 沉
在 过量 的浓 盐酸 和 过 量 的 浓硫 酸 中重 新 溶 解 ， 跟 这
基、 羧基 、 基等带 负 电荷 的基 团作用 生 成难溶 于 水 羟 的蛋 白质一 盐 复 合 物 ， 而破 坏 蛋 白质 的空 间构 型 从
在 生物化 学 实 验 中 ， 蛋 白质 沉 淀 反 应 与盐 析 “
其它试 剂 ： 牛血 清 蛋 白溶 液 、 三氯 乙酸 、 基 水 磺
杨酸 、 盐 酸 、 硝 酸 浓硫 酸 、 酸铜 、 酸银 、 酸 浓 浓 硫 硝 乙
作 用 ” 一个 验证 蛋 白质性 质 的 必修 实 验 。在 实 验 是
关 键 词 ：蛋 白质 变 性 ；沉 淀 ；蛋 白质 凝 固
中 图分 类号 ：５ ３ Ｑ—３ 文 献 标 识 码 ： Ｂ ｄ ｉ１ ．９９ ｊｉ ｎ １７ — ３５ ２ １ ．１０ ９ ｏ： ３ ６／．ｓ ．６２ ４ ０ ．０ １０ ．１ ０ ｓ
Ａｎ ｌ ｓｓ ｏ ｅ ｂ ｏ ｈ ｍｉ ａ ｘ ｅ ｉ ｎ ｐ ｏ ｅ ｎ ａ ｙ ｉ ｆｔ ｉ ｃ ｅ ｃ ｌｅ ｐ ｒｍｅ ｔ” ｒ ｔ ｉ ｈ
生 物化学 是生 命科 学 、 学 、 农 医学等 专业 的一 门
重 要基 础课 ， 生物 化 学 实验 教 学 是 生物 化 学 教 学 的
１ 实验 材 料
蛋 白质溶 液 ： ５ Ｌ鸡 蛋 清 ， 蒸 馏 水 稀 释 至 取 ｍ 用 ｌＯ Ｌ， 拌均 匀后 用 ８层 纱 布 过滤 ， 鲜 配制 蛋 白 Ｏｍ 搅 新
ｖｄ ｓ ｎ ｔｏ ｌ ｅ ｅ ｓ ｒ ｒ ｕ ｄ ｒ ｏ ｔ ｄ ｎ ｓｔ ｎ ｅ ｓａ ｄ ｔ ｅ ｓ ｅ ｕ ａｉ ｅ ｋ ｏ ｅ ｇ ｅｔｒ ｂ ｔ ｉ ｅ ｏ ｎ ｙ ａ ｎ ｃ ｓ ａｙ ｇ ｏ ｎ ｗｏ ｋ ｆｒｓｕ ｅ ｔ ｏ ｕ ｄ ｒｔｎ ｈ ｐ ｃ ｌｔ ｎ ｗｌｄ ｅ ｂ ｔ ， ｕ ｖ ｅ
入 的碱或 酸 由少 到 多 ， 出现 沉 淀 后 ， 淀再 消失 。 先 沉
① 取 ３支试 管编 号为 １２、。在 １号试 管 中加 、 ３
入 浓盐 酸 ｌ ５滴 ， ２试 管 中加入 浓 硫 酸 １ 在 ０滴 ， ３ 在
加 入浓 硝酸 １ 。小心 的 向六支 试 管 中 ， ０滴 沿管 壁加 入 蛋 白质 溶液 ６滴 ， 不要 摇 动 ， 观察 各 管 内两液 界 面
处无 白色 环状 蛋 白质沉 淀 出现 。
学生 在操 作 时加入 的碱 或 酸 数 量 不 一 致 ， 到 的结 得 果不 一致 ， 的有 沉 淀 ， 的无 沉 淀 ， 的 能 观察 到 有 有 有
②摇 动 ３支试 管 ， 分别 加入 过量 浓盐 酸 、 硫 再 浓
沉淀 消失 等 等 。
６ ２
表 ３ 加 热 沉 淀 蛋 白质
实
室 秆
１ ％ 乙酸 中和 ， 中和边 测 ｐ 值 ， 录 出现 沉淀 或 ０ 边 Ｈ 记
沉 淀消失 的 ｐ Ｈ值 。 （） ２ 实验 结果 分析
加热 反应之前 测 定各管 的 ｐ 值及 反应 结 果 见 Ｈ
表 ４ 。
表 ４ ｐ 值 、 ａ １ 加热 沉 淀 蛋 白质 的影 响 Ｈ ＮＣ 对
ａ ｓ ａｕ ｂ ｅ ｒ ｆｒ ｎ ｅ ｆｒｔ ａ ｈ ｎ ． ｌｏ ａ ｖ ｌ ａ ｌ ｅ ｅｅ ｃ ｏ ｅ ｃ ｉ ｇ Ｋ ｅ ｒ ｓ： ｐ ｏ ｅｎ ｄ ｎ ｔ ｒ ｔｏ ｙ ｗｏ ｄ ｒ ｔｉ ｅ ａｕ ａｉｎ；ｐ ｅ ｉ ｉ ｔｏ ｒ ｃ ｐ ｔ ｉｎ；ｐ ｏｅｎ ｃ ａ ｕ ａ ｉｎ ａ ｒ ｔ ｉ ｏ ｇ ｌ ｔ ｏ
质溶 液 。
重 要组 成部分 。在 生 物 化 学 实 验 教 学过 程 中 ， 过 通 让 学生 做实 验 ， 察 并解 释实 验 现 象 达到 训 练 其基 观
本 操作 技能 ， 培养 其独 立观 察 、 录 、 析 问题 能力 ， 记 分 为后续 的专 业课 程学 习奠定 良好 的基 础 。
０ ８０ ） ４００
摘 要 ：该文针对生物化学实验蛋 白质沉淀反应与盐析作用 中一些学生不能 科学解 释的实验 现象进行 了详细
瑛 鲁 秀敏 ，
（ ． 重庆理 工 大 学 药学与 生物工程 学 院 ，重庆 ４ ０ ５ １ ０ ０ ４；２ 山西晋 城一 中，山西 晋城 ．
分析 。为学生更深刻地理解理论知识做 了必要的铺垫 ，也为今后的教学提供了宝贵的参考资料。
这 也 常规蛋 白质定性 检 测 的原 理 。
２ ３ 加 热 沉淀 蛋 白质 ． （） １ 实验 方法
３号 试 管 中 加 入 饱 和 硫 酸 铜 后 ｐ 值 变 为 Ｈ
２ ９ ０ 小 于 实验 中鸡 卵 清 蛋 白 的 等 电 点 ４ ６２， ．８ ， ． ｌ 蛋 ］
白质 表面带 了较 多 的 正 电荷 ， 能 与 ｃ 结 合 生 成 不 ｕ