实验四五、蛋白质的盐析作用和透析
蛋白质的盐析与透析

蛋白质的盐析与透析一、实验目的1.了解蛋白质的分离纯化方法2.掌握蛋白质的盐析及透析方法二、实验原理在蛋白质溶液中加入一定浓度的中性盐,蛋白质即从溶液中沉淀析出,这种作用称为盐析。
盐析法常用的盐类有硫酸铵、硫酸钠等。
蛋白质用盐析法沉淀分离后,需脱盐才能获得纯品,脱盐最常用的方法为透析法。
蛋白质在溶液中因其胶体质点直径较大,不能透过半透膜,而无机盐及其它低分子物质可以透过,故利用透析法可以把经盐析法所得的蛋白质提纯,即把蛋白质溶液装入透析袋内,将袋口用线扎紧,然后把它放进蒸馏水或缓冲液中,蛋白质分子量大,不能透过透析袋而被保留在袋内,通过不断更换袋外蒸馏水或缓冲液,直至袋内盐分透析完为止。
透析常需较长时间,宜在低温下进行。
三、实验材料和试剂10%鸡蛋白溶液,含鸡蛋清的氯化钠蛋白溶液,饱和硫酸铵溶液,硫酸铵晶体,1%硝酸银溶液。
四、实验步骤(一)蛋白质盐析取10%鸡蛋白溶液5ml于试管中,加入等量饱和硫酸铵溶液,微微摇动试管,使溶液混合后静置数分钟,蛋白即析出,如无沉淀可再加少许饱和硫酸铵溶液,观察蛋白质的析出;取少量沉淀混合物,加水稀释,观察沉淀是否会再溶解。
(二)蛋白质的透析注入含鸡蛋清的氯化钠蛋白溶液5ml于透析袋中,将袋的开口端用线扎紧,然后悬挂在盛有蒸馏水的烧杯中,使其开口端位于水面之上。
经过10分钟后,自烧杯中取出1ml溶液于试管中,加1%硝酸银溶液一滴,如有白色氯化银沉淀生成,即证明蒸馏水中有Cl-存在。
再自烧杯中取出1ml溶液于另一试管中,加入1ml 10%的氢氧化钠溶液,然后滴加1-2滴1%的硫酸铜溶液,观察有无蓝紫色出现。
每隔20分钟更换蒸馏水一次,经过数小时,则可观察到透析袋内出现轻微混浊,此即为蛋白质沉淀。
继续透析至蒸馏水中不再生成氯化银沉淀为止。
实验报告记录透析完毕所需的时间。
附:胶棉半透膜的制备市售5%的胶棉液,加入干燥的150mL锥形瓶中,将锥形瓶横斜不断转动,使瓶的内壁和瓶口都均匀沾有胶棉液。
盐析透析实验报告

一、实验目的1. 了解蛋白质盐析与透析的基本原理和方法。
2. 掌握蛋白质盐析与透析的实验操作步骤。
3. 分析实验结果,验证实验原理。
二、实验原理1. 盐析:蛋白质在低盐浓度下溶解度增加,称为盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质溶解度下降并先后析出,称为盐析。
盐析是一个可逆过程,当除去引起蛋白质沉淀的因素后,被盐析的蛋白质仍可重新溶于水中,其天然性质不发生变化。
2. 透析:透析是一种分离技术,利用半透膜的选择透过性,将溶液中的小分子物质与蛋白质等大分子物质分开。
在透析过程中,蛋白质分子由于不能透过半透膜,而小分子物质可以透过,从而实现分离。
三、实验材料1. 实验试剂:10%鸡蛋清溶液、饱和硫酸铵溶液、0.9%NaCl溶液、蒸馏水。
2. 实验器材:烧杯、量筒、磁力搅拌器、透析袋、滤纸、剪刀。
四、实验步骤1. 准备实验试剂:按比例配制10%鸡蛋清溶液、饱和硫酸铵溶液和0.9%NaCl溶液。
2. 盐析实验:a. 取适量10%鸡蛋清溶液放入烧杯中。
b. 将饱和硫酸铵溶液缓慢加入鸡蛋清溶液中,边加边搅拌。
c. 观察蛋白质盐析现象,记录实验结果。
3. 透析实验:a. 将盐析后的蛋白质溶液倒入透析袋中。
b. 将透析袋放入烧杯中,加入0.9%NaCl溶液。
c. 将烧杯放入磁力搅拌器中,搅拌一段时间。
d. 取出透析袋,观察蛋白质透析现象,记录实验结果。
4. 分析实验结果:a. 观察盐析实验中蛋白质的沉淀现象,分析盐析原理。
b. 观察透析实验中蛋白质的沉淀现象,分析透析原理。
五、实验结果与分析1. 盐析实验结果:随着饱和硫酸铵溶液的加入,鸡蛋清溶液中的蛋白质逐渐沉淀,溶液变浑浊。
2. 透析实验结果:将蛋白质溶液进行透析后,透析袋内出现白色沉淀,表明蛋白质分子较大,无法透过半透膜。
3. 实验结果分析:a. 盐析实验验证了蛋白质盐析原理,即蛋白质在低盐浓度下溶解度增加,在较高盐浓度下溶解度下降,最终沉淀析出。
b. 透析实验验证了透析原理,即蛋白质分子较大,无法透过半透膜,而小分子物质可以透过,实现分离。
蛋白质的盐析实验现象及结论

蛋白质的盐析实验现象及结论1. 盐析实验概述说到蛋白质的盐析实验,大家可能会想:“这又是什么鬼?”其实,这个实验简单来说就是用盐来“调戏”蛋白质,让它们变得有趣起来。
就像在聚会上,有些人喝多了就开始跳舞一样,蛋白质在盐的影响下也会发生变化。
那么,盐析到底是怎么回事呢?别着急,我们慢慢来。
1.1 盐析的原理盐析,顾名思义,就是用盐来分离蛋白质。
这个过程就像是给蛋白质下了一场雨,让它们从“聚会”中散开。
盐分的加入会改变溶液的离子环境,让蛋白质的溶解度降低。
就好比一个热闹的聚会,突然来了一个喜欢安静的人,大家就纷纷溜了,最后只剩下他一个。
盐的加入,降低了蛋白质在水中的“活跃度”,使它们聚集在一起,形成沉淀。
1.2 实验步骤要进行这个实验,首先得准备一些纯净的蛋白质溶液。
然后,慢慢加入盐,看看会发生什么变化。
就像给咖啡加糖,慢慢地搅拌,观察变化。
你会发现,随着盐的增加,蛋白质开始逐渐沉淀,形成小团块。
这时候,如果你像个小科学家,认真观察的话,简直就像在看一场魔术秀,惊奇又有趣。
2. 实验现象观察接下来,我们来聊聊这个实验的现象。
真的是“不可思议”啊!你会看到,随着盐的不断加入,溶液的颜色和状态都在发生变化。
就像天气变了,云彩开始聚集一样,蛋白质也开始成团。
此时,别忘了记录下这些有趣的变化,这可是你未来向朋友们炫耀的资本!2.1 沉淀的形成首先,刚开始加入盐的时候,溶液可能看起来还是很清澈,像小溪一样流畅。
但是随着盐的增加,蛋白质就像被施了魔法,慢慢地开始聚集,沉淀下去。
那一瞬间,你会感觉自己仿佛在看一场壮观的水上表演,真的是“美不胜收”。
2.2 变化的色彩此外,盐的加入还会导致溶液的颜色变化。
有时候,颜色会变得更加浓郁,仿佛是在给蛋白质穿上了华丽的舞衣。
简直就是“华丽转身”,让人忍不住想多看几眼。
这些现象不仅好玩,还能帮助我们理解蛋白质的特性,简直是“一举两得”。
3. 实验结论及意义经过一番实验观察,咱们终于可以得出一些结论啦。
蛋白盐析实验报告

一、实验目的1. 了解蛋白质盐析的原理和过程。
2. 掌握蛋白质盐析实验的操作步骤。
3. 通过实验观察蛋白质盐析现象,验证实验原理。
二、实验原理蛋白质盐析是指在高浓度的盐溶液中,蛋白质的溶解度降低,从而从溶液中析出的过程。
盐析是利用蛋白质在不同盐浓度下的溶解度差异,实现对蛋白质的分离和纯化。
实验中,常用饱和硫酸铵溶液作为盐析剂,因为硫酸铵对蛋白质的盐析效果较好,且对蛋白质的性质影响较小。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 鸡蛋清- 饱和硫酸铵溶液- 蒸馏水- 滴管- 试管- 磁力搅拌器- 透析袋- 离心机2. 实验仪器:- 电子天平- 烧杯- 移液器- 移液管- 酒精灯- 酒精- 镊子- 纱布四、实验步骤1. 准备饱和硫酸铵溶液:将硫酸铵固体溶解于蒸馏水中,配制成饱和溶液,备用。
2. 配制蛋白质溶液:取一定量的鸡蛋清,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀,配制成蛋白质溶液。
3. 盐析实验:a. 取一支试管,加入2ml蛋白质溶液。
b. 用滴管向试管中加入饱和硫酸铵溶液,使硫酸铵溶液与蛋白质溶液的体积比为1:1。
c. 用磁力搅拌器搅拌,观察蛋白质的盐析现象。
4. 透析实验:a. 将上述盐析后的溶液转移至透析袋中,并放入烧杯中。
b. 用蒸馏水浸泡透析袋,使透析袋内的溶液充分与蒸馏水接触。
c. 将烧杯放入冰箱中,让蛋白质在透析过程中逐渐析出。
5. 观察实验现象并记录:a. 观察蛋白质在盐析过程中的沉淀现象,记录沉淀量。
b. 观察蛋白质在透析过程中的析出情况,记录析出量。
6. 实验结果分析。
五、实验结果与分析1. 实验现象:a. 在加入饱和硫酸铵溶液后,蛋白质溶液出现白色沉淀,表明蛋白质发生了盐析。
b. 在透析过程中,蛋白质逐渐从透析袋中析出,沉淀量逐渐增多。
2. 实验结果分析:a. 蛋白质在饱和硫酸铵溶液中的溶解度降低,导致蛋白质发生盐析,形成白色沉淀。
b. 在透析过程中,蛋白质分子量较小,可以通过透析袋,而盐类等小分子物质则被截留在透析袋内,从而实现蛋白质的纯化。
蛋白质的盐析实验报告

一、实验目的1. 了解蛋白质盐析的原理和方法。
2. 掌握蛋白质盐析实验的基本操作步骤。
3. 分析蛋白质盐析过程中可能出现的现象及其原因。
二、实验原理蛋白质盐析是指在蛋白质溶液中加入一定浓度的中性盐,使蛋白质从溶液中沉淀析出的过程。
这是因为中性盐中的离子与蛋白质分子争夺水分子,破坏了蛋白质的水化层,导致蛋白质溶解度降低,从而发生沉淀。
蛋白质盐析是一个可逆过程,当降低盐浓度或去除盐离子时,蛋白质可以重新溶解。
盐析过程中,蛋白质的沉淀和溶解受多种因素影响,如盐的种类、浓度、pH值、温度等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜鸡蛋清、硫酸铵、蒸馏水、pH试纸、移液器、试管、烧杯、搅拌器等。
2. 实验仪器:电子天平、恒温水浴锅、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备蛋清溶液:取新鲜鸡蛋,轻轻敲破蛋壳,取出蛋清,按新鲜鸡蛋清1份,九份0.9%NaCl溶液的比例稀释配制蛋清液,混匀,用四层纱布过滤后备用。
2. 配制硫酸铵溶液:称取适量硫酸铵,溶于适量蒸馏水中,配制成所需浓度的硫酸铵溶液。
3. 盐析实验:将蛋清溶液分为若干份,分别加入不同浓度的硫酸铵溶液,充分搅拌,观察蛋白质沉淀情况。
4. 沉淀与溶解实验:将沉淀的蛋白质用蒸馏水洗涤,观察蛋白质是否能够重新溶解。
5. 分析实验现象:记录蛋白质沉淀和溶解的情况,分析实验结果。
五、实验结果与分析1. 实验现象(1)随着硫酸铵浓度的增加,蛋清溶液中蛋白质沉淀逐渐增多。
(2)当硫酸铵浓度达到一定值时,蛋白质沉淀量达到最大。
(3)继续增加硫酸铵浓度,蛋白质沉淀量不再增加。
(4)用蒸馏水洗涤沉淀后的蛋白质,部分蛋白质重新溶解。
2. 实验分析(1)蛋白质盐析过程中,随着硫酸铵浓度的增加,蛋白质溶解度降低,导致蛋白质沉淀。
(2)当硫酸铵浓度达到一定值时,蛋白质沉淀量达到最大,说明此时蛋白质溶解度最低。
(3)继续增加硫酸铵浓度,蛋白质沉淀量不再增加,说明蛋白质已经达到饱和状态。
(4)用蒸馏水洗涤沉淀后的蛋白质,部分蛋白质重新溶解,说明盐析是一个可逆过程。
蛋白质盐析实验报告

蛋白质盐析实验报告一、引言蛋白质作为生命的基本组成单位,在维持细胞结构和功能方面起着重要作用。
研究蛋白质结构和特性的方法有很多,其中蛋白质盐析是一种常用的分离和纯化方法。
本实验旨在通过蛋白质盐析实验,探索蛋白质与盐溶液相互作用的原理和规律。
二、实验原理蛋白质盐析是利用电解质溶液与蛋白质之间的相互作用来分离和纯化蛋白质。
当蛋白质和盐溶液混合后,盐的存在会引起蛋白质和溶液中水分子之间的电荷作用力的变化。
如果盐浓度适当,蛋白质会被盐吸引而出现沉淀。
反之,当盐浓度过高时,蛋白质会溶解。
三、实验步骤1. 准备工作:准备所需的蛋白质溶液和盐溶液。
选择合适的盐和浓度,通常常用的是氯化铵或硫酸铵溶液。
2. 将一定量的蛋白质溶液倒入试管中。
3. 逐渐加入适量的盐溶液,同时用玻璃杯轻轻摇晃试管。
4. 观察试管中的现象,记录出现沉淀的盐浓度,称之为盐析点。
5. 测定盐析点后,可以尝试不同浓度的盐溶液,观察蛋白质的溶解和沉淀情况。
四、实验结果和讨论在实验中,我们选择了牛血清蛋白(BSA)作为蛋白质溶液,采用氯化铵作为盐溶液。
通过逐渐加入氯化铵溶液,我们观察到以下现象:当盐溶液浓度较低时,蛋白质溶液呈现均匀的透明状态,没有出现明显的沉淀。
随着盐浓度的逐渐增加,当盐浓度达到一定值时,蛋白质开始出现沉淀。
这表明盐的存在改变了蛋白质和溶液中水分子之间的相互作用力,导致蛋白质被吸引而形成沉淀。
随着盐浓度的继续增加,蛋白质的沉淀量逐渐增多,直到盐浓度过高时,蛋白质又重新溶解。
通过不断尝试不同盐浓度的溶液,我们可以得到蛋白质盐析的曲线。
曲线上的盐析点表示蛋白质在该浓度下开始出现沉淀的临界浓度。
进一步调整盐溶液的浓度,还可以观察到蛋白质的再溶解点。
实验结果表明,蛋白质盐析的发生与盐浓度密切相关。
合适的盐浓度可以促使蛋白质沉淀,从而实现蛋白质的分离和纯化。
这是因为盐溶液中的离子与蛋白质分子之间相互作用的改变,导致蛋白质出现沉淀。
而当盐浓度过高时,离子作用力过于强大,蛋白质再次溶解。
蛋白质透析的实验报告

蛋白质透析的实验报告《蛋白质透析的实验报告》摘要:蛋白质透析是一种常用的实验技术,用于分离和纯化蛋白质。
本实验报告描述了蛋白质透析的原理、实验步骤和结果分析,以及实验中可能遇到的问题和解决方法。
通过本实验报告的学习,读者可以了解蛋白质透析的基本原理和操作技巧,从而为进一步的科研工作提供参考。
引言:蛋白质是生物体内最重要的分子之一,它们在细胞的结构和功能中发挥着重要作用。
然而,由于蛋白质在生物体内存在复杂的环境中,其分离和纯化是一项具有挑战性的工作。
蛋白质透析作为一种常用的分离和纯化技术,可以有效地去除蛋白质溶液中的盐类和小分子杂质,从而得到纯净的蛋白质样品。
本实验报告将介绍蛋白质透析的原理、实验步骤和结果分析,以及实验中可能遇到的问题和解决方法。
材料和方法:1. 实验材料:蛋白质样品、透析袋、透析缓冲液、透析槽等。
2. 实验步骤:将蛋白质样品置于透析袋中,将透析袋放入透析槽中,加入透析缓冲液,进行透析。
3. 结果分析:通过测定透析前后蛋白质样品的浓度和纯度,分析透析效果。
结果和讨论:实验结果表明,经过透析处理后,蛋白质样品的浓度得到了显著提高,同时其纯度也得到了明显的改善。
这表明蛋白质透析可以有效地去除蛋白质溶液中的盐类和小分子杂质,从而得到纯净的蛋白质样品。
然而,在实验中也可能会遇到一些问题,如透析效果不佳、透析缓冲液的选择等,需要及时解决。
结论:蛋白质透析是一种常用的分离和纯化技术,本实验报告介绍了蛋白质透析的原理、实验步骤和结果分析,以及实验中可能遇到的问题和解决方法。
通过本实验报告的学习,读者可以了解蛋白质透析的基本原理和操作技巧,从而为进一步的科研工作提供参考。
盐析分离蛋白质实验报告

一、实验目的1. 理解盐析分离蛋白质的原理和方法;2. 掌握盐析分离蛋白质的操作步骤;3. 分析实验结果,总结盐析分离蛋白质的优缺点。
二、实验原理蛋白质在溶液中的溶解度受到多种因素的影响,其中盐浓度是一个重要因素。
当向蛋白质溶液中加入中性盐时,溶液的离子强度增加,导致蛋白质分子之间的相互作用增强,从而降低蛋白质的溶解度,使其从溶液中沉淀析出。
这种现象称为盐析。
通过调节盐浓度,可以使不同蛋白质在不同浓度下依次沉淀,从而实现蛋白质的分离。
三、实验材料1. 实验试剂:鸡蛋清、硫酸铵、氯化钠、氢氧化钠、氢氧化铵、蒸馏水;2. 实验器材:试管、移液管、烧杯、磁力搅拌器、离心机、滤纸、滤器。
四、实验步骤1. 准备蛋白质溶液:取一定量的鸡蛋清,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀,制成蛋白质溶液。
2. 盐析分离蛋白质:(1)取一定量的蛋白质溶液,加入硫酸铵,搅拌均匀,观察蛋白质沉淀情况。
记录沉淀的硫酸铵浓度。
(2)继续加入硫酸铵,观察蛋白质沉淀情况。
记录沉淀的硫酸铵浓度。
(3)加入氯化钠,观察蛋白质沉淀情况。
记录沉淀的氯化钠浓度。
(4)加入氢氧化钠或氢氧化铵,观察蛋白质沉淀情况。
记录沉淀的碱浓度。
3. 透析分离蛋白质:(1)将沉淀的蛋白质溶液转移到透析袋中,放入烧杯中,加入蒸馏水,浸泡一段时间。
(2)取出透析袋,观察蛋白质沉淀情况。
记录透析过程中的沉淀情况。
4. 离心分离蛋白质:(1)将透析后的蛋白质溶液转移到离心管中,离心分离。
(2)取出离心后的沉淀,记录沉淀的重量。
五、实验结果与分析1. 盐析分离蛋白质结果:(1)在硫酸铵浓度为5%时,观察到蛋白质开始沉淀。
(2)随着硫酸铵浓度的增加,蛋白质沉淀量逐渐增多。
(3)在氯化钠浓度为2%时,蛋白质沉淀量达到最大。
(4)加入氢氧化钠或氢氧化铵后,蛋白质沉淀量有所减少。
2. 透析分离蛋白质结果:(1)在透析过程中,蛋白质沉淀量逐渐减少。
(2)透析结束后,蛋白质沉淀量明显减少。
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可逆沉淀反应—蛋白质虽已沉淀析出, 可逆沉淀反应 蛋白质虽已沉淀析出,但 蛋白质虽已沉淀析出 它的分子内部结构并未发生显著变化, 它的分子内部结构并未发生显著变化,如 果把引起沉淀的因素去除后, 果把引起沉淀的因素去除后,沉淀的蛋白 质能重新溶于原来的溶剂中, 质能重新溶于原来的溶剂中,并保持其原 有的天然结构和性质。 有的天然结构和性质。利用蛋白质的盐析 作用和等电点作用,以及在低温下乙醇、 作用和等电点作用,以及在低温下乙醇、 丙酮短时间对蛋白质的作用等所产生的蛋 白质沉淀都属于这类沉淀反应。 白质沉淀都属于这类沉淀反应。
不可逆沉淀反应—蛋白质发生沉淀时, 不可逆沉淀反应 蛋白质发生沉淀时,其 蛋白质发生沉淀时 内部结构空间构象遭到破坏, 内部结构空间构象遭到破坏,蛋白质分子 由规则性的结构变为无秩序的伸展肽链, 由规则性的结构变为无秩序的伸展肽链, 使原有的天然性质丧失, 使原有的天然性质丧失,这时蛋白质已发 生变性。 生变性。这种变性蛋白已不能再溶解于原 来溶剂中。 来溶剂中。
但是,在一定的物理化学因素影响下, 但是,在一定的物理化学因素影响下, 由于蛋白质胶体颗粒的稳定条件被破坏, 由于蛋白质胶体颗粒的稳定条件被破坏, 如失去电荷、脱水、甚至变性, 如失去电荷、脱水、甚至变性,而以固体 形式从溶液中析出, 形式从溶液中析出,这个过程称为蛋白质 的沉淀反应。 的沉淀反应。这种反应可分为可逆沉淀反 应和不可逆沉淀反应。 应和不可逆沉淀反应。
3、实验器材 、 试管及试管架、滤纸、研钵、烧杯、 试管及试管架、滤纸、研钵、烧杯、玻璃棒 、漏斗
• 四、操作方法 (1)取一个烧杯,加入 )取一个烧杯,加入10ml蛋白质氯化钠溶 蛋白质氯化钠溶 液和10ml饱和硫酸铵溶液,混匀,静置约 饱和硫酸铵溶液, 液和 饱和硫酸铵溶液 混匀, 10min,则球蛋白沉淀析出; ,则球蛋白沉淀析出; (2)过滤后向滤液中加入硫酸铵粉末,边加 )过滤后向滤液中加入硫酸铵粉末, 边用玻璃棒搅拌,直至粉末不再溶解, 边用玻璃棒搅拌,直至粉末不再溶解,达到 饱和为止,此时析出的沉淀为清蛋白; 饱和为止,此时析出的沉淀为清蛋白;
• 三、试剂和器材 • 1、实验材料:鸡蛋 、实验材料: • 2、实验试剂 、 蛋白质溶液: 鸡蛋清, 蛋白质溶液:取5ml鸡蛋清,用蒸馏水稀释 鸡蛋清 层纱布过滤, 至100ml,搅拌均与后用 层纱布过滤,新 ,搅拌均与后用4-8层纱布过滤 鲜配制。 鲜配制。 蛋白质盐析溶液 其他试剂: 其他试剂:0.1%硫酸铜溶液 硫酸铜溶液 • 3、实验器材 、 试管及试管架、透析袋、玻璃棒、线绳、 试管及试管架、透析袋、玻璃棒、线绳、烧杯
• 四、操作方法 支试管, 蛋白质溶液, (1)取1支试管,加入约 ) 支试管 加入约1ml蛋白质溶液,加 蛋白质溶液 硫酸铜溶液3-4滴 观察沉淀的生成。 入1%硫酸铜溶液 滴,观察沉淀的生成。 硫酸铜溶液 (2)在蛋白质可逆沉淀反应中,将用硫酸铵 )在蛋白质可逆沉淀反应中, 盐析所得的清蛋白沉淀倒入透析袋内, 盐析所得的清蛋白沉淀倒入透析袋内,用线 绳或透析袋夹江透析袋口扎紧, 绳或透析袋夹江透析口扎紧,把透析袋浸 入盛有蒸馏水的烧杯中进行透析, 入盛有蒸馏水的烧杯中进行透析,并经常用 玻璃棒搅拌,每隔15分钟换水一次 分钟换水一次, 玻璃棒搅拌,每隔 分钟换水一次,仔细观 察透析袋中的蛋白质沉淀变化情况。 察透析袋中的蛋白质沉淀变化情况。
•
五、思考题 鸡蛋清为什么可用作铅中毒或汞中毒的 解毒剂? 解毒剂?
(3)静置,倒去上清液,取部分清蛋白沉淀, )静置,倒去上清液,取部分清蛋白沉淀, 加水稀释,观察它是否溶解, 加水稀释,观察它是否溶解,留取部分作 透析用。 透析用。
•
五、思考题
高浓度的硫酸铵对蛋白质溶液溶解度有何影 为什么? 响,为什么?
实验四 蛋白质可逆沉淀和不可逆沉 淀的比较
• 一、目的要求 了解蛋白质的沉淀反应、 了解蛋白质的沉淀反应、变性作用 。 学习透析操作技术。 学习透析操作技术。 • 二、实验原理 蛋白质分子在水溶液中, 蛋白质分子在水溶液中,由于其表面形成了 水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒, 水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒,所 以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相似。 以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相似。
实验三 蛋白质的盐析作用
• 一、目的要求 了解蛋白质的的沉淀反应 学习盐析操作技术 • 二、实验原理 用大量中性盐使蛋白质从溶液中沉淀析出 的过程称为蛋白质的盐析作用。 的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲 水胶体, 水胶体,蛋白质溶液在高浓度中性盐的影响 蛋白质分子被中性盐脱去水化层, 下,蛋白质分子被中性盐脱去水化层,
同时所带电荷被中和, 同时所带电荷被中和,结果蛋白质的胶体 稳定性遭到破坏而沉淀析出。 稳定性遭到破坏而沉淀析出。析出的蛋白 质仍保持其天然性质,当降低盐的浓度时, 质仍保持其天然性质,当降低盐的浓度时, 还能溶解。因此, 还能溶解。因此,蛋白质的盐析作用是可 逆过程。 逆过程。
• 三、 材料与试剂 1、实验材料:鸡蛋 、实验材料: 2、实验试剂 、 蛋白质氯化钠溶液: 蛋清, 蛋白质氯化钠溶液:取20ml蛋清,加蒸馏水 蛋清 200ml和饱和氯化钠溶液 和饱和氯化钠溶液100ml,充分搅匀后, 和饱和氯化钠溶液 ,充分搅匀后, 以纱布滤去不溶物( 以纱布滤去不溶物(加氯化钠的目的是溶解 球蛋白)。 球蛋白)。 其他试剂: 其他试剂:①硫酸铵粉末 ②饱和硫酸铵溶液