紫外分光光度法测猕猴桃中维生素C的含量
紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素C

第 32 卷第 1 期 2009 年 01 月
t/min 图 1 VC 在偏磷酸和醋酸中的稳定性
2. 2 最大吸收峰的选择 准确吸取 2.0 mL 的 VC 标准溶液于 50 mL 容量
瓶中用蒸馏水定容,然后以蒸馏水作空白,在 190~ 400 nm 的波长范围内多次进行光谱的连续扫描,确 定 VC 最大吸收峰在 246.0 nm。 2. 3 维生素 C破坏剂的选择
Vol.32 No.1 Jan . 2009
紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素 C
张立科 1,田水泉 1,谢太平 1,张洪浩 1,范顺利 2
(1.河南许昌学院化学化工学院,河南 许昌 461000;2.河南师范大学化学与环境科学学院,河南省环境污染控制重点实 验室,河南 新乡 453007)
[ 摘 要] 在 0~450 μg/mL 线性范围内,以 Cu2+ 作催化剂,以溶解氧将还原型维生素 C(VC)氧化为 246.0 nm 处无吸收的氧
完全破坏,测出的仅是 Cu2+ 的吸光度值。本文提出了
反应中 Cu2+ 不作氧化剂而作为催化剂来催化溶液中
的溶解氧去氧化还原型 VC,使之在 2462)。Cu2+ 的量不影响
VC 在 246.0 nm 处的吸光度,Cu2+ 本身本底吸收小。确
定 Cu2+ 用量为 30 μg。
ZHANG Li-ke1,TIAN Shui-quan1,XIE Tai-ping1,ZHANG Hong-hao1,FAN Shun-li2
紫外分光光度计法测定果蔬中维生素c的含量

紫外分光光度计法测定果蔬中维生素c的含量紫外分光光度计法是一种常用的测定果蔬中维生素C含量的方法。
维生素C具有强的紫外吸收性质,在265nm处有最大吸收峰。
通过测定样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度,可以比较它们的维生素C含量。
以下是该方法的详细步骤:一、目的本实验的目的是通过紫外分光光度计法测定果蔬中维生素C的含量,了解其含量变化情况,为科学饮食提供参考。
二、原理维生素C具有强的紫外吸收性质,在265nm处有最大吸收峰。
在实验条件下,一定浓度的维生素C溶液与其吸光度呈线性关系。
通过比较样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度,可以求出样品中维生素C的含量。
三、实验步骤1.标准曲线的制作(1)配制不同浓度的维生素C标准溶液。
分别称取0.05g、0.1g、0.2g、0.3g、0.4g的维生素C,用蒸馏水定容至100mL,得到浓度分别为5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL、40mg/mL的溶液。
(2)用1cm石英比色皿分别在紫外分光光度计上测定各标准溶液在265nm处的吸光度。
(3)以维生素C浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2.样品处理(1)将果蔬样品洗净,晾干表面水分。
(2)将样品切成小块,放入榨汁机中榨汁,收集榨出的汁液。
(3)用纱布过滤,去除汁液中的杂质和果肉颗粒。
(4)将滤液倒入50mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
3.测定样品吸光度(1)用移液管准确移取5mL样品溶液于1cm石英比色皿中。
(2)在紫外分光光度计上测定样品溶液在265nm处的吸光度。
4.计算样品中维生素C的含量(1)从标准曲线上查得相应的维生素C浓度(mg/mL)。
(2)计算样品中维生素C的含量(mg/100g),公式如下:维生素C含量 = 查得浓度× 溶液体积× 稀释倍数 / 样品质量其中,溶液体积为50mL,稀释倍数为100(即5mL样品溶液稀释成50mL),样品质量为榨出的果蔬质量。
紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量

紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量1 序言1.1 研究的目的和意义维生素是必须得从食物中获取并且在物质代谢过程中起到了极其重要的作用的一种物质[1]。
这类物质在生物体内不能合成或者合成量特别少,不足以维持生物体的正常的生理功能,虽然生物体对维生素的需要量很少,但所需量必须经常从食物中获得,所以我们研究维生素具有重要的意义[2]。
维生素C是维生素的一种,维生素C在医学上被称作抗坏血酸,具有防治坏血病的功效,它是显示抗坏血酸生物活性的一类有机化合物的总称[3]。
维生素C广泛的存在于我们常见的水果和蔬菜中,所以我们能够准确地测定出水果中地维生素C的含量,对我们的日常饮食和健康的生活具有重要的指导意义。
1.2维生素C含量的研究史中国是人口众多的国家,人口密度相对较大,病毒发病率较高,我国在对抗病毒的战争中起到一个关键作用。
SARS病毒首先出现在我们中国,死于SARS 病毒的90%是我们中国人。
国内对于维生素C的生产水平已经处于领先地位,可以彻底解决病毒的问题,只是生产的维生素C大部分都外销,我们中国人服用维生素C的平均剂量,远远低于一些欧美国家和日本。
目前,围绕着维生素C 含量的测定产生了一系列的研究课题和任务,因为它对人们日常饮食具有重要指导意义,成为了现今国内外研究的热点,现在主要有2,4-二硝基苯肼比色法、碘量法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等来测定维生素C的含量。
1.2.1碘量法武文等[4]利用I₂的氧化性,用淀粉作指示剂,采用I₂作标准溶液进行直接滴定,这叫做直接碘量法。
直接碘量法的滴定原理:维生素C分子中的二烯醇基可被I₂氧化成二酮基,当维生素C分子中的二烯醇基被I₂完全氧化后,过量的I₂与淀粉指示剂发生显色作用,使溶液变蓝,所以当滴定到溶液中有蓝色出现时,即为滴定终点。
直接碘量法测定水果和蔬菜中维生素C的含量时,要求所测的果蔬溶液为无色和浅色的是样溶液或者提取液,该方法测维生素C不需要特殊的测定仪器,操作非常简便、准确。
分光光度法测定果蔬中Vc的含量

Divide all Luminosity Law and Determine the Content of Vitamin C in the Fruits and Vegetables
CAO Shu—jie
(Department of Chemistry,Nanyang Normal University,Nanyang 473061,China)
作者: 作者单位: 刊名:
英文刊名: 年,卷(期): 被引用次数:
曹书杰, CAO Shu-jie 南阳师范学院,化学系,河南,南阳,473061
河南教育学院学报(自然科学版) JOURNAL OF HENAN INSTITUTE OF EDUCATION(NATURAL SCIENCE) 2005,14(3) 1次
O.18 O.16 O.14 O.12 0.10 《O.08 O.06 0.04 0.02
phenhnl图2显色源自用■对吸光度的影响pH图3酸度对吸光度的影响
图4反应时问对吸光度的影响
Vc/(1 0。‘mol/1) 图5标准曲线 2.3.6果蔬中vc的测定 取去皮橙子、苹果、梨、白萝卜各509,在榨汁机中分别榨 汁,将其定容至250ml容量瓶中,再各取2ml于50ml容量瓶 中,加4 mlFe(Ⅲ)标准液,6mlphell,用Imol/LHAc定容,于暗 处放置20分钟后,以空白试剂作参比,分别测其吸光度. 每种样品各测三次,求平均值.最后得样品中含Vc的量为: 橙子:0.141 609/lOOg,苹果:0.011 589/lOOg,梨:0.012 1is/lOOg,白萝卜:O.025 659/lOOg 2.4干扰物质 果蔬中含有的铁是以有机物形式存在,不与phen直接 络合.故不影响测定结果.
紫外光度法测定维生素C实验报告

紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C(VC)是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液(维生素C水溶液在pH 5~6之间稳定)中,在245 nm 波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器:容量瓶(100 ml、1000 ml)、移液管(0.5 ml、5 ml)、烧杯、紫外分光光度计实验用品:98%浓硫酸(分析纯,1.84 g/ml)、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重(含量为99.7 %)、维生素C片(2片)、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用0.5 ml移液管移取0.27 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中,搅拌,冷却至室温后移入1000 ml容量瓶,稀释至刻度,待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中,加0.005 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
猕猴桃中维生素C提取工艺条件研究

猕猴桃中维生素C提取工艺条件研究唐功; 杨肖; 黄小蓉; 王柯然; 朱欣【期刊名称】《《西北民族大学学报(自然科学版)》》【年(卷),期】2019(040)003【总页数】5页(P34-38)【关键词】猕猴桃; 维生素C; 紫外分光光度法【作者】唐功; 杨肖; 黄小蓉; 王柯然; 朱欣【作者单位】阿坝师范学院资源与环境学院四川汶川623002【正文语种】中文【中图分类】TQ281猕猴桃(ActinidiachinensisPlanch),又称为奇异果、猴仔梨等.其外观形态一般为椭圆状,成熟的猕猴桃成红褐色,表皮被覆有浓密的绒毛.其内部是呈亮绿色的果肉,中间有一排黑色的种子,可以食用,其口感酸甜、鲜嫩,且营养丰富[1].猕猴桃中富含的维生素C是柠檬的2倍,苹果的40倍左右[2].维生素C有降低血管的通透性,加速血液凝固,刺激凝血的作用,能促使血脂下降,增加人体应对感染的抵抗力[3].因此,猕猴桃中维生素C的提取研究对猕猴桃的营养研究具有重要意义. 目前有很多研究和测量维生素C含量的方法.如:2,6-二氰靛酚法、碘量法[4]、铅硫化氢法、2,4-二硝基肼法[5]和荧光光度法[6].但上述方法一般存在样品需进行复杂的预处理、受干扰因素强、需较长的时间等问题.本实验用紫外分光光度法[7]间接测量猕猴桃中维生素C的含量,获得较好的效果.实验用紫外分光光度法探究在不同提取剂、盐酸的用量、温度的影响下猕猴桃中维生素C的含量及变化规律,以此为猕猴桃中维生素C有效提取提供一定的参考依据.1 材料与方法1.1 材料与设备四川省汶川县水磨镇、三江镇猕猴桃,市售.标准抗坏血酸溶液(100μg/mL):准确称取10mg抗坏血酸于烧杯中,加入2mL10%的盐酸,溶解后转入到100mL容量瓶中,加入蒸馏水定容至刻度线,摇匀.10%(m/V)的盐酸溶液;2%(m/V)的草酸;5%(m/V)的三氯乙酸.1mol/L的NaOH溶液.紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司.电子天平,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司.HH-S2型水浴恒温水浴锅,金坛市医疗仪器厂.1.2 实验方法1.2.1 猕猴桃汁的制备流程猕猴桃→挑选→清洗→沥干→切碎→打浆→过滤→猕猴桃汁.1.2.2 样品的处理将猕猴桃用清水洗净,去皮,切成小块.称取样品于榨汁机中,打磨成浆液后,加入提取剂.将其转移到100mL容量瓶中,加入蒸馏水定容至刻度线,充分摇匀,静置一段时间后,进行过滤,将滤液在不同的温度、不同的盐酸含量下进行单一变量处理后,待用.1.2.3 标准曲线的制作[8]分别准确移取标准抗坏血酸溶液(mL)0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8、1.0mL于试管中,再分别往试管中加入蒸馏水(mL)9.9、9.8、9.7、9.6、9.5、9.4、9.2、9.0mL.则抗坏血酸溶液浓度为(μg/mL):1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0μg/mL.分别转移到石英比色皿中,用紫外分光光度法,在n=243nm处[9]测量其吸光度.以抗坏血酸浓度为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,以蒸馏水作空白对照,作标准曲线.研究采用的紫外可见光分光光度计的紫外光波长范围为195~375nm,其光源为氘灯,使用时环境温度控制在15~30℃,环境湿度控制在60%以下.1.2.4 提取剂的选择[10]将处理好的猕猴桃,准确称取三份(均50g)于烧杯中,再放入榨汁机中粉碎,往三份中分别加入2mL 2%的草酸,5%的三氯乙酸,2%的草酸+10%的盐酸作提取剂.将捣碎后的浆液转移到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线处,摇匀后过滤,取滤液测定.取三支试管,均加入0.4mL 10%的盐酸,分别加入0.2mL不同提取剂提取的样液,用蒸馏水稀释至10mL后摇匀.以蒸馏水为空白对照,用紫外分光光度计在243nm处[9]测定其吸光度.再取三支试管分别加入不同提取剂提取的样液0.2mL、2mL蒸馏水和0.8mL1mol/L的NaOH溶液,混匀,15min后加入0.8mL 10%的盐酸,混匀,并用蒸馏水定容至10mL,得到碱处理样液.以蒸馏水为空白对照,用紫外分光光度计在243nm处[9]测定其吸光度.1.2.5 温度对猕猴桃中维生素C提取的影响[11-12]将猕猴桃洗净、去皮、切碎,准确称取猕猴桃5份,每份30g,各加入2mL 2%的草酸后,按前面1.2.2对样品进行处理.得到滤液后,每份均准确移取10mL于新的5支试管中,分别置于15℃、25℃、35℃、45℃、55℃的水浴锅中,加热20min.按照1.2.4中的方式对样品和待测碱处理液进行吸光度的测定,以此得出不同温度下猕猴桃中维生素C的含量及变化规律.1.2.6 盐酸的量对猕猴桃中维生素C提取的影响将洗净、去皮、切碎的猕猴桃,准确称取5份,每份30g.分别加入10%的盐酸(mL)0.5、1.0、1.5、2.0、3.0mL,按前面1.2.2的方式对样品进行处理.再按照1.2.4中的方式对样品和待测碱处理液进行吸光度的测定.1.2.7 计算公式由待测样品和待测碱处理样液的吸光度之差,来查取标准抗坏血酸曲线,即可得到抗坏血酸溶液的浓度(维生素C的含量),从而计算出猕猴桃样品中维生素C的含量.猕猴桃中维生素C的含量(mg/100g)=200*C/m*V.其中m为样品质量(g);C为从标准曲线上查到的维生素C的含量(μg/mL);V为测试时所吸取的提取液的体积(mL)[5].2 结果与分析2.1 标准抗坏血酸曲线的绘制根据1.2.3的制作方法,得出抗坏血酸的标准曲线,见图1.其线性回归方程为:y=0.0814x+0.0064,R2=0.9995.图1 标准抗坏血酸曲线2.2 提取剂的选择根据测量,得出样品及待测碱液的吸光度,结果见表1.表1 不同提取剂提取的样品吸光度及待测碱液吸光度从图2可知,用2%的草酸作提取剂效果最好,猕猴桃中维生素C的含量为:71.40mg/100g.用2%的草酸+10%的盐酸作提取剂时效果较差.图2 不同提取剂对维生素C提取影响2.3 温度对猕猴桃中维生素C的提取影响根据研究,得出不同温度下样品及待测碱液的吸光度.见表2.从图3可以看出,当提取温度由15 ℃增加到25℃时,猕猴桃中维生素C的提取率迅速上升并达到最大值.当提取温度由25℃上升到55℃时,猕猴桃中维生素C的提取率下降.原因是提取温度过高时,维生素C容易发生化学反应使其含量减少,提取率下降[13].所以25℃条件有利于猕猴桃中维生素C的提取.表2 不同温度下提取的样品吸光度及待测碱液吸光度图3 不同温度对维生素C提取的影响2.4 盐酸的用量对猕猴桃中维生素C的提取影响由表3可知,不同盐酸的用量下样品及待测碱液的吸光度.表3 不同盐酸的用量下提取的样品吸光度及待测碱液吸光度不同盐酸用量下猕猴桃中维生素C的含量及变化规律见图4.由图4可知,当加入盐酸1.5mL时,提取效果最好,提取的维生素C含量为78.73mg/100g.图4 不同酸度对维生素C提取的影响3 结果研究表明,在2%的草酸作提取剂,温度为25℃时,盐酸的用量为1.5mL时,提取效果最好.此研究测量方法及提取方法简单,实验效果好,适用于研究猕猴桃中维生素C的提取,同样也适用于其他果蔬中维生素C的提取.参考文献:【相关文献】[1] 宋美晶.不同品种猕猴桃的成分研究[J].辽宁师范大学学报,2012(4):76.[2] 丁焱.维生素C的功能和应用[J].宿州师专学报,2002(03):61-62.[3] 姜晔,姜杰锋.维生素C的临床应用[J].菏泽医学专科学校学报,2007,19(3):81-83.[4] 王风霞,黄玉琴,谢天柱.测定果蔬中维生素C含量的方法[J].落叶果树,2013,45(2):8-11.[5] 刘薇,王君,刘德明,肖俐.分光光度法测定蓝莓果中维生素C的含量[J].湖南农业科学,2013(02):35-36.[6] 朱启忠.维生素C测定方法的比较研究[J].菏泽学院学报,1997(2):73-75.[7] 李军.紫外分光光度法测定果蔬中的维生素C[J].河北科技师范学院学报,2000(1):41-44.[8] 李春霞,李艳.果蔬中抗坏血酸的几种测定方法[J].安徽农业科学,2013(35):13756-13757.[9] 王林霞,李佳娜,许秋梅.果蔬中维生素C含量测定方法比较[J].绍兴文理学院学报(自然科学),2017(02):75-79.[10] 赵玉强,罗小莉,杨文君.雅安4种常见水果维生素C含量的测定与比较[J].生物资源,2014,36(2):64-66.[11] 宋崇富,杜功名,田志美.探究酸度、温度、放置时间对维生素C稳定性的影响[J].阜阳师范学院学报(自然科学版),2015(2):31-34.[12] 李姝晋,易芳.水果蔬菜中维生素C含量测定及其稳定性研究[J].科研导刊(中旬刊),2017(12):60-61.[13] 刘文玉,刘德灿,魏长庆,等.番茄籽油脱臭馏出物中天然维生素E提取工艺的研究[J].粮食与油脂,2016,29(09): 52-55.。
紫外分光光度法测定猕猴桃中Vc含量
紫外分光光度法测定猕猴桃中维C含量实验报告书摘要利用维生素C对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,用紫外分光光度法测定猕猴桃中Vc含量,最大吸收波长为245nm,标准曲线方程为y=19.132x,相关系数R2=0.9968,一个猕猴桃中维生素C含量约为87毫克。
关键词:紫外分光光度法、猕猴桃、维C、含量1 前言维生素C又称抗坏血酸,是一种水溶性维生素。
能预防牙龈出血及萎缩,提高人体免疫力;对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效[1]。
维生素C的主要作用是提高免疫力,预防癌症、心脏病、中风,保护牙齿和牙龈等。
另外,坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少,从而减少黑斑和雀斑,使皮肤白皙。
富含维生素C的食物有猕猴桃、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等,可以说,在所有的蔬菜、水果中,维生素c含量都不少。
美国专家认为,每人每天维生素C的最佳摄入量应为200-300毫克,最低不少于60毫克[2]。
2 实验目的猕猴桃是一种营养价值极高的水果,其可溶性固形物质含量为20%,含亮氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸等十多种氨基酸,含有丰富的矿物质。
每100克果肉含钙27毫克,磷26毫克,铁1.2毫克,还含有胡萝卜素和多种维生素,其中维生素C的含量达100毫克,有的品种高达300毫克以上,是柑桔的5--10倍,苹果等水果的15--30倍,因而在世界上被誉为“水果之王”[3]。
常见的Vc的测定方法有2,6一二氯靛酚法、2,4一二硝基苯肼法、铅硫化氢法、碘量法以及荧光光度法…,近来也有报道利用分光光度法测定Vc含量。
本实验采用紫外分光光度法测定猕猴桃中Vc含量。
3 实验原理1.紫外吸收光谱是基于物质的生色团和助色团的特性对紫外光谱的吸收,可用于物质的鉴定和结构分析。
2.维C在紫外光区(200-400nm)显示特征的吸收谱带,最大光吸收(λmax)为245nm。
因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度,测得维C含量。
紫外光度法测定维生素C实验工作报告
紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C(VC)是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液(维生素C水溶液在pH 5~6之间稳定)中,在245 nm 波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器:容量瓶(100 ml、1000 ml)、移液管(0.5 ml、5 ml)、烧杯、紫外分光光度计实验用品:98%浓硫酸(分析纯,1.84 g/ml)、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重(含量为99.7 %)、维生素C片(2片)、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用0.5 ml移液管移取0.27 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中,搅拌,冷却至室温后移入1000 ml容量瓶,稀释至刻度,待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中,加0.005 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
紫外分光光度法测定水果中维生素C 的含量毕业论文
题目:紫外分光光度法测定水果中维生素C 的含量摘要:目前研究维生素研究维生C的测定方法的报道较多,如滴定法、光度分度法、高效液相色谱法等,特别是紫外分光度测定法。
本论文利用维生素C 具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性, 建立了紫外分光光度快速测定水果维生素C含量的新方法。
维生素C 浓度在1.00—12.0µg/mL 范围内与吸收值呈良好的线性关系;检出限为0.014µg/ mL;加标回收率在97.9% —99.0% 之间。
该法操作简单,结果准确,应用于维生素C含量的测定, 结果令人满意。
关键词:维生素C,紫外分光度测定法,水果前言维生素C是可溶于水的无色结晶,是一种分子结构最简单的维生素。
维生素C有防治坏血病的功能,所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。
维生素C能保能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态,还有解毒作用等。
其广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜,特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富,对饮食健康、医疗保健都具有十分重要意义。
近年来测定维生素C的方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。
1 维生素C的性质及测定方法1.1 维生素C概述维生素C又叫抗坏血酸(Ascorbicid),广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜中含量较多,是一种水可溶性小分子生物活性物质,也是人体需要量最大的一种维生素。
维生素C具有还原性(其结构式如图1),可以与许多氧化剂发生氧化还原反应,因此可以利用其还原性测定维生素C的含量。
目前食品中测定维生素C含量的方法主要有碘量法,是利用维生素C的氧化还原性为基础的一种氧化还原方法。
因其酸度不易把握,碘需要标定且易挥发,而维生素C不易稳定保存,使测定结果易出现偏差,且这种方法不适合微量分析;国标GB/T6195-1986是采用2,6—二氯靛酚滴定法。
利用样品溶液由蓝色转变为粉红色来辨别其滴定终点的到使测定准确度降低。
另外还有荧光光谱分析法J、色谱电化学法等,这些方法都存在着一定的局限性,如操作过程复杂,所用试剂不稳定,速度慢、背景干扰大。
紫外法测定猕猴桃维生素中含量
紫外法维生素C含量的测定班级:应化41 姓名:刘理民学号214094008一、实验目的:1、掌握紫外分光光度计的原理2、掌握紫外法测定水果中维生素C含量的测定二、实验原理:维生素C在水果中含量较多,由于其具有较强的还原性,对光敏感,容易被氧化。
紫外法测定维生素C含量,速度快,操作简单,不受其他还原性物质等成分的干扰。
根据维生素C具有对紫外光产生吸收、对氧不稳定的特性,在243nm处测定样品液与活性炭处理样品液两者吸光度之差,并通过标准曲线求出维生素C的含量。
三、实验用品:1、仪器:紫外分光光度计,试管,容量瓶,漏斗,分析天平,移液管,研钵等。
2、材料:猕猴桃3、试剂:1%盐酸,活性炭四、操作步骤:(一)、标准曲线的制作:1、维生素C标准溶液的配制:在分析天平上准确称取维生素C 0.025+-0.001g,加入5ml10%盐酸溶解后转入250ml容量瓶中,用蒸馏水冲洗烧杯2~3次,洗涤液均倒入250ml容量瓶中,再用蒸馏水稀释至刻度,混匀,即为100g/l维生素C标准溶液。
2、吸收曲线的测绘用蒸馏水为空白溶液,用4号标准溶液在220~300nm波长下,隔10nm测其吸光度,吸收峰附近隔2nm测定一次。
以波长为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制吸收曲线,找出最大吸收波长λmax。
3、测定并绘制标准曲线取50ml容量瓶5个,依次加入100g/ml维生素C标准溶液1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml,分别加入蒸馏水至刻度,摇匀。
以蒸馏水为空白溶液,在243nm处测定系列维生素C标准溶液的吸光度。
以维生素C的量为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
(二)、样品中维生素C的含量测定:1、样品的提取:将水果样品洗净、擦干、切碎,在台秤上粗测5~6g,再用小烧杯在分析天平上准确称量,放入研钵中,逐步加入1~5ml1%盐酸溶液,匀浆;然后完全转入50ml容量瓶中,再用1%盐酸少量冲洗研钵2~3次,冲洗溶液完全转入50ml容量瓶中,用1%盐酸稀释至刻度。
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紫外分光光度计法测猕猴桃中维生素C
一:实验目的
1、了解从果蔬中提取VC的方法.
2、掌握用紫外分光光度法测定猕猴桃中Vc的原理、基本过程及操作关键。
3、利用猕猴桃中Vc的含量来评价猕猴桃的营养价值。
二、实验原理
紫外快速测定维生素C法,是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,于243 nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差,通过查标准曲线,即可计算样品中维生素C的含量。
三:仪器和试剂
紫外分光光度计,分析天平,0.2~0.4 mL 10%盐酸,0.6~0.8 mL 1 mol·L-1 NaOH 溶液
四:操作步骤
(一)标准曲线的制作
1.抗坏血酸标准溶液的配制:用分析天平准确称取抗坏血酸10 mg,加2 mL 10%盐酸,加蒸馏水定容至100 mL,混匀。
此抗坏血酸溶液的浓度为100 μg·mL-1 2、标准曲线的绘制
3.消光值的测定:以蒸馏水为空白,在243 nm处测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值,以抗坏血酸的含量(μg)为横坐标,以相应的消光值为纵坐标作标准曲线。
(二)样品的测定
1.样品的提取:将猕猴桃样品洗净、去皮、切碎、混匀。
称取5.00 g于研体中,加入2~5 mL 1% HCl,匀浆,转移到25 mL容量瓶中,稀释至刻度。
若提取液澄清透明,则可直接取样测定,若有浑浊现象,可通过离心(10000 g, 10 min)来消除。
2.样品的测定:取0.1~0.2 mL提取液,放入盛有0.2~0.4 mL 10%盐酸的10 mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。
以蒸馏水为空白,在243 nm处测定其消光值。
3.待测碱处理液的制备:分别吸取0.1~0.2 mL提取液,2 mL蒸馏水和0.6~0.8 mL 1 mol·L-1 NaOH溶液依次放入10 mL容量瓶中,混匀,15min后加入0.6~0.8 mL 10% HCl,混匀,并定容至刻度。
以蒸馏水为空白。
在243 nm处测定其消光值。
4.由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和标准曲线,即可计算出样品中维生素C的含量。
5.也可直接以待测碱处理液为空白,测出待测液的消光值,通过查标准曲线,计算出样品的维生素C的含量。
五:结果计算
μ×V总
维生素C的含量(μg/g)=————
V1×W总
式中:μ——从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量(μg)
V1——测消光值时吸取样品溶液的体积(mL)
V
——样品定容体积(mL)
总
——称样重量(g)
W
总
六:问题讨论
出了本方法以外还有什么方法测定果蔬中维生素c
七:参考文献:
1 郑虎.药物化学.北京:人民卫生出版社,2003,443.
2 刘文英.药物分析.北京:人民卫生出版社,1999,212.
3李军.紫外分光光度法测维生素C,河北职业技术师范学院学报,2000 (14):1~4.。