人参皂苷 研究 实验经典.ppt
人参中提取次生代谢产物人参皂苷实验设计
人参中提取次生代谢产物人参皂苷实验设计
人参皂苷是人参的主要有效成分，具有多种药理活性，如抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。
设计人参皂苷实验时，可以从以下几个方面考虑：
1. 实验目的：明确研究对象和目的，例如探究人参皂苷对某种疾病的治疗效果、研究人参皂苷的药理机制等。
2. 实验设计：确定实验的基本设计，包括实验组和对照组的设置、不同剂量和时间的选择等。
可以考虑采用动物模型或细胞模型进行实验，也可以考虑临床试验。
3. 人参皂苷提取方法：选择合适的人参皂苷提取方法，常见的方法包括超声波提取、酶法提取、水提取与醇提取等。
提取过程中要注意操作规范，确保提取效果。
4. 实验指标：选择适当的指标来评价人参皂苷的药理活性，可以包括生物化学指标、细胞指标或临床指标。
例如，可以测定某种疾病模型动物的生化指标变化、细胞增殖程度以及临床患者的疗效评估等。
5. 统计分析：对实验数据进行统计分析，根据实验设计选择合适的统计方法，如方差分析、t检验等，确定实验结果的可靠性和显著性。
需要注意的是，在设计实验过程中，应遵循伦理原则和实验规范，确保实验的科学性和可信度。
实验结果对于科学研究和临床应用有重要意义，但前提是确保人参皂苷的提取与应用符合相关法律法规和伦理规定。
人参皂甙的作用PPT课件
李宁 （81050625） 05生技3 班
.
1
人参皂甙的分类
▪ 人参皂甙都属于三萜类皂甙，目前可分为 三类：
▪ 一为人参皂甙二醇型，有人参皂甙Rb1， Rb2，Rc，Rd，Rh等；
▪ 二为人参皂甙三醇型，有人参皂甙Re，Rf， Rg1，Rh等；
▪ 三为齐墩果酸型，有人参皂甙Ro，Rh3， Ri等
.
8
.
9
.
10
20(R)-人参皂甙Rg3抗肿瘤作用机制
▪ 一、抑制肿瘤细胞的增殖
▪ 国内学者富力和鲁岐应用流式细胞术研究
发现20(R)-人参皂甙Rg3可抑制肿瘤细胞的 增殖，主要作用于G2期，可有效抑制肿瘤 细胞有丝分裂前期蛋白质和ATP的合成，
使肿瘤细胞增殖速度减慢。有人还认为人
参皂甙Rg3有抗肿瘤生长的作用，且与其他 抗肿瘤药物，如5-氟尿嘧啶、长春新碱、
液内加入溶血卵磷脂后可立即增加细胞内
Ca2+浓度，然而，当以人参皂甙Rg3预处理 MM1细胞后，由溶血卵磷脂所引起的细胞内
Ca2+ 浓度高峰.消失了。
13
❖ 四、促进肿瘤细胞的凋亡
❖ 细胞凋亡(Apoptosks)的特征为细胞内 出现凋亡小体，即细胞受外界各种刺 激后出现细胞固缩、染色质浓聚、细 胞膜皱折、最后裂解成许多有膜包裹 的颗粒—凋亡小体。富力、鲁岐通过 在细胞增殖动力学研究中观察到 20(R)-人参皂甙Rg3 促进肿瘤细胞凋 亡而产生凋亡峰。
▪ 人参皂甙二醇型和三醇型在人参皂甙中占
大多数，目前认为此类是人参的主要活性
成分.
.
2
人参皂甙的作用
人参总甙的作用 人参皂甙单体的作用
.
3
人参总甙的作用
高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量
高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量皂苷类是人参的主要成分和药效成分，采用高效液相色谱法可准确测定人参中各皂苷类成分，本文主要介绍采用液相色谱测定在超微粉碎技术下得到不同粒度的粉末中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。
标签：高效液相色谱法，人参，人参皂昔本品为五加科植物人参Pana：c ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎。
它具有大补元气，补脾益肺，生津养血，安神益智等之功效。
临床用于体虚欲脱，肺虚气喘，肢冷脉微，脾虚食少，口渴少津，内热消渴，气血不足等[1]。
皂苷类成分是人参的主要活性物质和药效成分，因此提高它的提取率就可增强其生物利用率，以下将介绍同一批次的人参，在样品经过振动磨型超微粉碎机粉碎后得到不同粒度的粉体的皂苷含量进行测量[2]。
1 实验仪器与材料1.1 实验仪器AEL-200电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司），AB204-N精密分析天平（METTLER TOLEDO），Agilent 1260型HPLC（Agilent Technologies），TKCD-1006超声波清洗仪（南昌科昌达超声波设备厂），Heal Force final Filter 超纯水機（上海浦东分析仪器设备厂），HH-4数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司），SQW-25系列超微粉碎机（山东济南三清易辰）。
1.2 实验材料人参皂苷标准品Rb1，Re，Rg1：中国药品生物制品检定所；乙腈（HPLC）。
1.3 样品制备同一批次人参（吉林省长白山）：人参粗粉（过40目筛）；人参样品经过超微振动磨型得到粒径分别为76.006～86.348 μm、29.963～30.025 μm、25.088～25.488 μm、22.163 μm。
1.4 对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品适量，精密称定，加甲醇定容；分别精密量取上述对照品溶液各1 mL，置于同一10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
人参皂苷及其抗衰老作用的研究
人参皂苷是五加科草本药用植物人参、西洋参等的主要有效成份。
至今为止,人们已从人参植物中至少分离出40多种人参皂苷单体。
按人参皂苷在薄层色谱中Rf值的大小,由小到大命名为R0,Ra1, Ra2, Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, Rg2,Rh1等。
按皂苷元的不同,人参皂苷可分为达玛烷型和齐墩果型皂苷(R0, Rh3)两种。
其中根据糖基在苷元上连接位置的不同,达玛烷型皂苷又分为原人参二醇型和原人参三醇型皂苷。
其代表分别为Rb1和Rg1。
其中二醇型和三醇型皂苷占人参皂苷的大多数,被认为是人参的最主要活性成分。
随着社会老龄化步伐的加快和现代生活水平的提高,人们在极力寻找开发天然抗衰老药物的同时,人参皂苷的抗衰老作用也受到了越来越多学者的重视,关于人参皂苷抗衰老作用机制的研究也不断深入。
抗氧化作用：正常代谢过程所产生的自由基如果能很快被机体防御系统所清除,不会造成危害,如不能完全被清除,则会使生物大分子遭到损伤,导致人体衰老。
已有结果表明,人参皂苷既可抑制自由基的产生,也可直接对抗自由基对组织及细胞的损伤作用,或直接清除自由基,还可增强机体本身抗氧化系统的功能,从多个环节阻断自由基的损伤作用。
张嘉麟等对老年鼠血液中抗氧化酶活力影响研究表明人参皂苷Rb1, Rg1均能显著提高超氧化物歧化酶(SOD )和过氧化氢酶(CAT)活力,增强了机体防御毒性氧自由基损伤的能力,具有抗衰老的作用。
调节神经系统大脑记忆能力的减退,是衰老的早期表现症状之一。
实验已证实神经递质及其受体的变化与脑功能的衰老密切相关,具体表现就是学习和记忆功能障碍。
早期研究发现人参皂苷Rb1能促进递质的释放,薛箭飞等首先证明了人参皂苷Rb1促进递质释放的机制与其上调突触蛋白磷酸化水平有关,并证实了Rb1的作用机制是通过PKA细胞信号转导途径而完成的。
Cheng等认为乙酰胆碱(Ach)是人体大脑中重要的神经递质传递者,缺少Ach ,会导致学习和记忆能力的损伤。
人参皂苷 研究 实验 ppt课件
刺激皮肤成纤维细胞 的活性, 促进胶原蛋
白合成
促进细胞的新陈代谢, 加快衰老皮肤细胞核
酸和蛋白质的合成
恢复细胞正常的生理功能
人参皂苷
发挥抗氧化和清除自由基作 用减少脂质过氧化产物的沉
积Hale Waihona Puke 人参皂苷 研究 实验增加皮肤中SOD 含量和活性
Experience
（人参皂苷）
人参皂苷 研究 实验
（不含人参 皂苷）
实验结果
人参皂苷 研究 实验
人参皂苷如何抵抗人体衰老
人参皂苷 研究 实验
创新点
创 新 点
人参皂苷 研究 实验
问题
人参皂苷 研究 实验
可行性
人员？资金？ 技术？ 设备？.......
以
人参单价 ¥400/kg
上
数
据
人工价格 ¥1000/h
仅
供
参
宣传及设备价格¥2000/h
考
400+1000+2000=¥3400/(kg •h )
人参皂苷 研究 实验
遗传程序学说
衰老也是由遗传基因决定，近年来端粒( telomere) 与端粒酶( telomerase)的发现使衰老的遗传程序学 说有了新进展。DNA每复制1次,端粒即丢失50～ 200 bp,当它缩短到一定程度时,细胞则停止分裂、 衰老、死亡。
人参皂苷 研究 实验
Ginsenoside
细胞的衰老是细胞内发生化学反应过程中有害物质堆积的结果。在这 些化学反应中，产生称之为自由基的毒素。自由基最终损伤细胞，引 起个体衰老。伴随着衰老，损伤越来越多，许多细胞不能正常行使功 能或者死亡。当这些现象发生时，可能引起机体死亡。机体内时刻产 生着自由基,但同时又具有有效的自由基清除系统(如超氧化物歧化酶 等) ,使体内自由基维持在正常水平。随着年龄的增长,这种平衡逐渐 被破坏,造成自由基的过剩。过量自由基可通过过氧化作用攻击细胞 膜、线粒体膜等膜性结构及核酸、蛋白质和酶类等生物大分子,引起 细胞膜和线粒体膜上的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化,产生脂质过氧 化物。这些脂质过氧化物及其分解产物使核酸及蛋白质分子发生交联 聚合,进一步造成DNA基因突变或复制异常及生物酶活力下降,最终导 致细胞功能严重受损以至衰老、死亡。
人参皂苷及其衍生物的研究-PPT
2
前言
•
人参皂苷（Ginsenoside）是一
种固醇类化合物，三萜皂苷。主要存在于
人参属药材中。人参皂苷被视为是人参中
的活性成分，因而成为研究的目标。因为
人参皂苷中的各类成分作用不一，在美国，人 参制剂被列为饮食补充剂；但在欧洲，尤其是德 国人则把人参当作药品。在几个欧洲国家，人参 及其他草药被医生当作处方签，植物医药原理也 再次在医学院中被讲授。在设定医疗性草药安全 及疗效的E委员会专刊中，德国政府认可人参可作 为疲劳和乏力时的补品。
近年来对人参皂苷在抗癌方面的研究较多，也 取得了许多成就，相信在未来，人参皂苷会使我 们在抗癌药物研究方面取得成就。
8
谢谢！
9
• 齐墩果烷型：齐墩果酸型 - C型，苷原为
齐墩果酸。
4
研 究 发 展 史
1962-1965日本天然药物化学家柴田首先鉴定各种人参皂苷的结 构。 1966柴田教授发表二醇型原人参皂核的生产方法。 1968-1984全球各先进国家开始研究人参皂苷的生产与抗癌学术 研究。 1985日本 Odashima,S.发表人参皂苷可抑制肝癌细胞生长。 1987韩国Yun,T.K.发表人参对各种癌症有预防作用。 1991日本 Ota,T. 发表人参皂苷的代谢途径 1991日本Kikuchi,Y.发表人参皂苷可与化疗药物Cisplatin发挥协 同作用抑制肿瘤 1993Tode,T.发表人参皂苷可抑制人类卵巢癌细胞 1994日本Kikuchi,Y.发表口服人参皂苷在体内的转化途径 1996Kitagawa,I.发表人参皂苷能抑制肿瘤的浸润与转移 1998Akao,T.与Kobashi,K.发现人参皂苷CK是人参二醇型皂苷在 体内的主要抗癌代谢产物 2000中国大陆开发人参皂苷成为国家第一类抗癌新药 2001中国大陆肿瘤药理学家韩锐发表人参皂苷抗癌演讲 2002中国台湾第一代含人参皂苷保健食品完成动物实验与人体 临床观察
人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：①人参二醇型-A 型，②人参三醇型-B型，③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷，其皂苷元为达马烷型四环三萜，A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20（S）-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20（S）-protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物，其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。
[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷，总皂苷含量约4％，人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微甘苦，具有吸湿性。
人参皂苷易溶于水，甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
《认识人参皂苷》课件
人参皂苷能够调节机体免疫功能，增强机体抵抗 力，对于提高人体健康水平有积极作用。
人参皂苷的研究展望
深入探究作用机制
进一步深入研究人参皂苷的作用机制，为其在医药和保健品领域 的应用提供更加科学和有力的支持。
开发新型药物和保健品
基于人参皂苷的生物活性，开发新型药物和保健品，以满足更多人 群的健康需求。
抗疲劳作用
抗疲劳作用
人参皂苷具有抗疲劳作用， 能够提高机体的耐力和抗疲 劳能力。
提高能量代谢水平
人参皂苷可以促进能量代谢 ，提高机体的能量生成和利 用效率，从而增强机体的耐 力和抗疲劳能力。
缓解肌肉疲劳
通过调节肌肉收缩和舒张的 信号转导通路，人参皂苷能 够缓解肌肉疲劳，减轻运动 后肌肉酸痛等症状。
增强机体免疫力
人参皂苷可以增强机体免疫 力，提高机体抵抗力，减少 疲劳状态下感染疾病的风险 。
03 人参皂苷的药理 作用
对心血管系统的作用
抗心肌缺血
人参皂苷可以改善心肌缺 血症状，增加心肌收缩力 和心输出量，减少心肌耗 氧量。
抗心律失常
人参皂苷可以调节心肌细 胞膜的离子通道，减少心 律失常的发生。
根据糖链的长度和连接方式
人参皂苷可分为单糖链、双糖链和多糖链皂苷，其生物活性也有所不同。
02 人参皂苷的生物 活性
抗肿瘤作用
抗肿瘤作用
抑制肿瘤细胞增殖
人参皂苷能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散 ，诱导肿瘤细胞凋亡，并增强机体免疫功 能，从而达到抗肿瘤的效果。
人参皂苷能够抑制多种肿瘤细胞的增殖过 程，阻止细胞周期的异常进展，从而控制 肿瘤的生长。
人参皂苷的化学结构
01
02
03
苷元
人参皂苷的苷元是四环三 萜类化合物，具有多个羟 基和羧基。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验
王红丽教授在进行人参皂甙抗皮肤衰老作用实验时发现,口服人参皂苷 100 mg/kg•d-1使D - 半乳糖所致的衰老模型小鼠皮肤中SOD活力 、羟脯氨酸含量明显升高,丙二醛(MDA)含量显著降低,血中CAT、谷 胱甘肽过氧化物酶( GSH2Px)活力显著升高。其机制如下：
刺激皮肤成纤维细胞 的活性, 促进胶原蛋
白合成
促进细胞的新陈代谢, 加快衰老皮肤细胞核 酸和蛋白质的合成
恢复细胞正常的生理功能
人参皂苷
发挥抗氧化和清除自由基作用 减少脂质过氧化产物的沉积
c
增加皮肤中SOD 含量和活性
Experience
（人参皂苷）
c
（不含人参 皂苷）
实验结果
c
人参皂苷如何抵抗人体衰老
c
创新点
创 新 点
c
问题
c
可行性
c
遗传程序学说
衰老也是由遗传基因决定，近年来端粒( telomere) 与端粒酶( telomerase)的发现使衰老的遗传程序学 说有了新进展。DNA每复制1次,端粒即丢失50～ 200 bp,当它缩短到一定程度时,细胞则停止分裂、 衰老、死亡。
c
Ginsenoside
是一种固醇类化合物，三萜皂苷。其只在 人参属植物中可发现到。人参皂苷被视 为是人参中的活性成分，因而成为研究 的目标。因为人参皂苷影响了多重的代 谢通路，所以其效能也是复杂的，而且 各种人参皂苷的效能是难以分离出来的。 采取人参提取分离技术。
Ginsenoside
LOGO
c
c
衰老机制
1. 程序性衰老理论 2. 自由基理论 3. 遗传程序学说
c
程序性衰老理论
一个物种衰老的机率，可以通过他的基因预测。基 因决定了细胞能活多久。当细胞死亡，器官功能开 始失常，最终将不能维持生命所必需的生物学功能 。
c
自由基理论
细胞的衰老是细胞内发生化学反应过程中有害物质堆积的结果。在这 些化学反应中，产生称之为自由基的毒素。自由基最终损伤细胞，引 起个体衰老。伴随着衰老，损伤越来越多，许多细胞不能正常行使功 能或者死亡。当这些现象发生时，可能引起机体死亡。机体内时刻产 生着自由基,但同时又具有有效的自由基清除系统(如超氧化物歧化酶 等) ,使体内自由基维持在正常水平。随着年龄的增长,这种平衡逐渐被 破坏,造成自由基的过剩。过量自由基可通过过氧化作用攻击细胞膜、 线粒体膜等膜性结构及核酸、蛋白质和酶类等生物大分子,引起细胞膜 和线粒体膜上的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化,产生脂质过氧化物。这 些脂质过氧化物及其分解产物使核酸及蛋白质分子发生交联聚合,进一 步造成DNA基因突变或复制异常及生物酶活力下降,最终导致细胞功 能严重受损以至衰老、死亡。
人员？资金？ 技术？400/kg
上
数
据
人工价格 ¥1000/h
仅
供
参
宣传及设备价格¥2000/h
考
400+1000+2000=¥3400/(kg •h )
参考可得每份产品的 价格在50到100元之 间
c
总结
借助衰老学说,运用现代科学研究新技术,从 文献研究、实验研究及临床研究三方面入手, 采用适当的实验方法, 进一步从细胞、分子 、基因水平对人参皂苷抗衰老机制进行多方 位研究,为人参药物、保健、美容等系列产品 的开发利用提供一定的理论指导。
c
c