《教学分析》-Rh血型鉴定完整版
《Rh血型鉴定试验》课件

通过Rh血型鉴定,可以进一步辅助确定亲子关系。
研究领域
Rh血型鉴定可用于人类遗传学研究和种群遗传学分析等领域。
结论和总结
Rh血型鉴定试验是一项重要的实验操作,对于临床和研究领域具有重要意义,能够为各种血液相关操 作提供有力支持。
鉴定试验的目的
Rh血型鉴定试验用于确定个体血液中是否具有Rh抗原,以便预测是否会出现 Rh血型不相容的血型抗体反应。
鉴定试验的步骤
1
试剂准备
2
准备所需的试剂和材料,确保操作环
境无菌。
3
结果记录
4
根据凝集程度或试管内溶血情况判断 Rh血型,并记录结果。
取样
从被鉴定者的血液中获取足够的血样。
试验操作
按照特定步骤进行试验操作,包括试 管法和凝集反应法。
鉴定试验的原理
Rh血型鉴定试验基于血清中的特定抗体与红细胞上的特定抗原之间的反应, 通过观察凝集程度或溶血情况判断Rh血型。
结果解读
凝集程度较大,无溶血现象表示Rh阳性;凝集程度较小,有明显溶血则为Rh阴性。
应用领域
临床血型鉴定
Rh血型鉴定可用于输血配型、妊娠管理和器官移植等临床血液相关操作。
《Rh血型鉴定试有重要的医学意义和临床应用。本课件将 介绍Rh血型的背景知识、鉴定试验的目的、步骤、原理、结果解读以及应用 领域。
背景知识
Rh血型是由Rhesus猴子的一种抗原决定系统决定的,具有Rh抗原的人被称 为Rh阳性,无Rh抗原的人被称为Rh阴性。
鉴定rh血型的流程

鉴定rh血型的流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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1. 准备。
收集患者的血液样本。
准备抗A、抗B血清。
血型鉴定 ppt课件

四、实验步骤
1、取清洁玻片两块,分别标明“抗A”和 “抗B” 2、将标准抗A和抗B血清各一滴,分别滴在 相应玻片上的中央处 3、用75%乙醇的棉球消毒指端或耳垂,用 消毒采血针刺破皮肤取血
血型鉴定
4.用消毒牙签沾血少许与充分混合。
ABO血型系统根据受试者红细胞上是否含有 凝集原和凝集原的种类,将血型分为A, B, O及AB 型。ABO血型鉴定是将受试者红细胞分别加入到 标准A型血清、标准B型血清中进行鉴定。
血型鉴定
含某种凝
集原的红 细胞
+
含相应凝 集素的血
清
=
红细胞凝 集反应
血型鉴定
血型(blood group)通常指红细胞膜上特异性 抗原的类型.
血型鉴定
4.注意区别凝集现象与红细胞叠连。发生 红细胞凝集时,肉眼观察呈朱红色颗粒, 且液体变得清亮。
血型鉴定
七.实验小结
1.含某种凝集原的红细胞与含相应凝集素 的血清相遇,会产生凝集现象 .因此血型 不相容的两人不能互相输血。
2.临床上在输血前必须注意鉴定血型,进行 交叉配血,以确保安全输血。
ABO血型鉴定
血型鉴定
目录
一.实验目的 二.实验原理及相关知识 三.实验材料 四.实验步骤 五.实验结果 六.注意事项 七.实验小结
血型鉴定
精品资料
• 你怎么称呼老师?
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你 是否会认为老师的教学方法需要改进?
• 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭
血型鉴定
• “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我 笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
Rh血型鉴定试验

Rh血型鉴定 Rh血型鉴定 盐水抗- 试剂血清检测Rh( 盐水抗-D试剂血清检测Rh(D)血型
一,试剂 1,IgM抗-D试剂血清 IgM抗 2,Rh(D)阴性,Rh(D)阳性红细胞悬液 Rh( 阴性,Rh( 3,待检红细胞悬液
Rh血型鉴定 Rh血型鉴定
二,操作 1,取12×75mm干净小试管3支,分别标记检 12×75mm干净小试管 干净小试管3 阳性对照, 测,阳性对照,阴性对照 2,3支试管中各滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 支试管中各滴入IgM抗 试剂血清1~2滴 3,按标记分别滴入红细胞悬液 4,混匀后3400转/分离心15秒 混匀后3400转 分离心15秒 5,轻轻摇动试管,观察结果. 轻轻摇动试管,观察结果.
Rh血型鉴定结果判断 Rh血型鉴定结果判断
检测管
IgM抗D 抗 待检红细胞悬液 Rh(D)阴性红 ( ) 细胞悬液 Rh(D)阳性红 ( ) 细胞悬液 试验结果 1~2滴 1滴 1滴 1滴
阴性对照
1~2滴
阳性对照
1~2滴
阳性(阴性) 阴性)
阴性
阳性
被检测血样标本为Rh( ) 阴性) 被检测血样标本为 (D)阳性(阴性)
Rh血型鉴定完整版ppt课件

㈣.RH血型的临床意义: 1.与输血关系: Rh-第一次接受Rh+血液→不溶血,产生抗体
Rh-第二次接受Rh+血液→产生大量的抗体,溶血
2.与新生儿溶血病的关系:孕妇血浆中如有Rh抗体, 妊娠Rh血型不配合胎儿时,其中IgG类的Rh抗体可以通 过胎盘进入胎儿体内。
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2 .Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因
• • • • • •
受检细胞直抗阳性
高蛋白试剂引起缗钱状凝集 纤维蛋白造成的凝块 定型试剂中存在的其它抗体 多凝集细胞造成的假阳性 鉴定器材和试剂血清被污染
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3.Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因
• • • •
受检细胞悬液浓度太高,与试剂血清比例失调。
凝集
次
病人 血清
病人 2%RBC
病人 + 献血员 血清 2%RBC
病人 + 献血员 2%RBC 血清
献血员 献血员 2%RBC 血清
室温5min后 1000-2000 rpm ×1-2min 观察。
无凝集 无凝集
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【报告方式】
1.如两管均无凝集,则报告: 病人XX(X型)血清+献血者XX(X型)红细胞 有或无凝集溶血 病人XX(X型)红细胞+献血者XX(X型)血清 有或无凝集溶血
Rh血型的遗传学说及命名
Rh--Hr命名法(Wiener学说) CDE命名法(Fisher--Race学说) 数字命名法
二.Rh血型系统
㈠.Rh抗原
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① Rh抗原有40多种,
② Rh抗原的发育 Rh抗原是胎儿早期就充分发育并维持整个一生,脐带血或 新生儿的红细胞Rh血型与成人一样强。 ③ 与临床关系最密切:D、E、C、c、e 5种,D的抗原性最强。 抗原强弱次序为 D>E > C> c>e
RH血型分析

红细胞上D抗原数
10.000 - 30.000 8300
30-6000 <30
D抗原的检测方法
各种实验对应的试剂 血型血清学 分子生物学 单克隆抗 剂盒(商品化)
设计引物(难度大) + 多克隆抗
试 自行
血型鉴定流程
受检标本
盐水介质检测
阳性
阴性
测序
抗人球蛋白介质
阳性 加做直抗实验
阴性 吸收放散实验
? 碱基变异:包括突变、缺失、拼接位点变异 等。
近几年的研究发现
? D基因结构存在种族差异 (-)白种人中基因是完 全缺失的.
? 在黑人中(-)个体,D基因却完整存在, 66% 的D基因在第3内含子和第 4外显子之间有 37的 插入片断,导致了抗原的不表达。
? 黄种人中(-)个体表现出明显的多态性 .
示 Rh 盒子序列的接合区
RHD 基因与 RHCE 基因在 RH 座位上方向相反,但与 SMP1 基因方向相同(图中空心箭头);RHD 阴性单 倍体 RHD 基因缺失发生在上下游盒子的接合区之间。
D和RHCE基因结构图
1p36.11
等位基因的形成
? 基因缺失:基因完全缺失形成 (-)单倍体;
? 基因交换:由于基因和基因在座位上方向相 反,二个同源基因之间发生交换的机率增大, 通常基因为供者基因,为受者基因;
? 1940年还发现,三例血型相同,同种输血后却发生 了Байду номын сангаас重的输血反应 .
? 同一年,一名 O型孕妇产后大出血,输入 O型丈夫 的血液后发生了溶血性输血反应,这是人类由于 妊娠产生的同种免疫作用的第一例报告
? 这就表明除血型系统外 ,还存在另外的血型系统 .
血型系统的命名
血型系统Rh资料课件

MN血型系统
根据红细胞表面是否存在 M和N抗原,将人类血型 分为M型、N型、MN型 和NN型。
血型系统的生物学意义
01
02
03
04
血型系统与免疫学
血型抗原可以触发免疫反应, 导致红细胞破坏和溶血。
输血配型
在输血过程中,必须确保供血 者和受血者的血型相容,以避
免免疫排斥反应。
遗传学研究
疾病关联
血型系统是遗传学研究的重要 工具,有助于揭示人类进化和
新生儿溶血病的症状包括黄疸、贫血、肝脾肿大等,严重时可能导致胆红素脑病 或死亡。
04
CATALOGUE
Rh血型系统的检测方法
抗原检测
红细胞抗原检测
通过检测红细胞表面的抗原,确 定个体的Rh血型。常见的抗原检 测方法包括直接抗球蛋白试验和 间接抗球蛋白试验。
基因检测
通过检测基因序列,确定个体的 Rh血型。基因检测可以更准确地 预测个体的抗原类型,但目前技 术尚不普及。
血型系统是指根据血液中的抗 原和抗体划分的血型类别。
血型系统是血液分类的一种方 法,用于确定个体之间的血缘 关系和输血配型。
血型系统的分类
01
02
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ABO血型系统
根据红细胞表面是否具有 A或B抗原,将人类血型分 为A型、B型、AB型和O型。
Rh血型系统
根据红细胞表面是否存在 D抗原,将人类血型分为 Rh阳性(D抗原阳性)和 Rh阴性(D抗原阴性)。
抗体检测
血清抗体检测
通过检测血清中的抗体,判断个体是 否产生了针对Rh抗原的免疫反应。 抗体检测通常用于孕妇,以预防新生 儿溶血病。
直接抗球蛋白试验
通过检测红细胞上的抗体,判断个体 是否发生了免疫反应。直接抗球蛋白 试验主要用于诊断自身免疫性溶血性 贫血等疾病。
Rh血型鉴定试验ppt课件

凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物,溶解 后产生正电荷,可中和红细胞外表带负电荷的 唾液酸,减少细胞间排斥力,使红细胞发生非 特异性凝集。正常红细胞可引起非特异性凝集 为可逆性的,假设是抗体致敏红细胞被凝聚胺 凝集,那么是特异性的不可逆的凝集。本法的 特点是快速,灵敏,适用于临床交叉配血,尤 其是提高了Rh血型系统抗原抗体反响的强度, 使其检出更为灵敏。
Rh血型鉴定方法
Rh血型系统中主要有5种抗原,除特殊要求外, 普通只用抗D血清检查有无D抗原。普通生理条 件下Rh抗体属IgG型抗体,不能在盐水介质中与 红细胞发生凝集,因此必需采用其它技术,常用 的方法有以下几种:
1.酶介质法
木瓜酶(或菠萝酶)可以破坏红细胞外表电荷的 唾液酸,降低其外表电荷从而减少红细胞间排 斥力,使得红细胞相互靠拢;同时酶还可以部 分地改动红细暴露,这样在相应的不完全抗体 作用下,就可促进Rh血型系统的抗原与抗体 反响,使红细胞发生凝集。酶介质法有一期法 (直接法)与二期法(间接法)。酶介质法总的特 点是简单,经济,但较费时,准确性和稳定性 较差,尤其要留意因木瓜酶能破坏红细胞上的 M、N、S抗原的构造,破坏其抗原性,所以 不能用于检查此类系统。
2.抗球蛋白实验 (Coombs test)
不完全抗体与含相应抗原的红细胞结合,但不 引起红细胞凝集称致敏红细胞。在盐水介质中 不完全抗体只能致敏红细胞,运用抗球蛋白抗 体后,致敏红细胞外表的球蛋白与抗球蛋白抗 体相遇那么发生特异性凝集反响。目前抗球蛋 白抗体有:用人球蛋白免疫动物产生的抗体, 另外单克隆杂交瘤技术也用于某些抗球蛋白抗 体的制备,用于血型血清学中对不完全抗体的 检测。抗球蛋白实验又分为直接抗球蛋白实验 和间接抗球蛋白实验。
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三、其它红细胞血型系统
MNSsU血型系统 有40个抗原,基因表达产 物为MN唾液酸糖蛋白、Ss唾液酸糖蛋白
P血型系统 Kell血型系统 Kidd血型系统 Lewis血型系统
㈡.Rh系统抗体
① 多是通过外来RBC免疫刺激后产生,即通过输血或妊娠 免疫而产生。这些抗体均为IgG。一般在初次免疫后2~6个月 内出现,经再次免疫后,3周内抗体浓度可达到高峰。大约 1/3的Rh阴性的人,经Rh阳性抗原免疫后,不产生抗D.非免疫 的Rh抗体极为罕见.
② D抗原是非ABO红细胞抗原中免疫性最强的抗原,可以引 起抗D的产生,抗D与D红细胞产生严重的溶血反应。
原理: 降低介质的离子强度→可减少RBC外围的离子云 ①促进IgG分子在两个RBC之间搭桥→使之结合, ②能缩短抗原与抗体的反应时间,并提高其灵敏度。
(2).抗人球蛋白法:又称Coombs试验 直接法:可检查受检者的RBC是否已被不完全抗体致敏;
间接法:可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。
D变异型的定义: 有些含D抗原的红细胞与某些抗D血清反应,
而与另一些抗D血清不反应,这些红细胞所含的D 抗原可能缺少完整D抗原的某些成份或者呈现很 弱的抗原活性,这些D抗原统称为D变异型。
D变异型包括弱D型(Du)和不完全D型 (partial D)
D变异型抗原的特点
与一些抗D血清发生凝集反应,而与另一些 抗D血清不发生凝集反应,要证实这种弱表现的 D抗原,需用间接抗球蛋白试验。
疫家兔和豚鼠得到的抗血清将人红细胞分为Rh阴性和 Rh阳性 1939年
Levine和Stetsen在一患死胎的孕妇血清中检测到 一种抗体,此为人类发现的第一例Rh抗体 1941--1945年
确定了人体红细胞上含有Rh系统的六种抗原,即D、 d;E、e;C、c。D和d;E和e;C和c表现为对偶关系, 但d抗原只是推测。
(五).交叉配血
【原理 (principle) 】(盐水法)
天然IgM类 血型抗体
+
对应的红 细胞抗原
室温 盐水介质
凝集
主
次
病人 病人 血清 2%RBC
病人 + 献血员
病人 + 献血员
血清 2%RBC 2%RBC 血清
室温5min后
1000-2000 rpm ×1-2min 观察。
无凝集 无凝集
献血员 献血员 2%RBC 血清
(3).酶介质法: 原理: ①木瓜酶或菠萝酶可以破坏RBC表面的唾液酸, 使RBC膜失去电荷,缩小RBC间的距离; ②酶可以部分地改变RBC结构,使某些隐蔽的 抗原得以暴露,增强凝集性
(4).聚凝胺法: 本法用于临床配血是切实可行的。
2 .Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因
• 受检细胞直抗阳性 • 高蛋白试剂引起缗钱状凝集 • 纤维蛋白造成的凝块 • 定型试剂中存在的其它抗体 • 多凝集细胞造成的假阳性 • 鉴定器材和试剂血清被污染
㈠.Rh抗原
① Rh抗原有40多种, ② Rh抗原的发育
Rh抗原是胎儿早期就充分发育并维持整个一生,脐带血或 新生儿的红细胞Rh血型与成人一样强。
③ 与临床关系最密切:D、E、C、c、e 5种,D的抗原性最强。 抗原强弱次序为 D>E > C> c>e
④ 我国Rh-频率约占人群中的0.34%
Rh血型的 D变异型
㈢. Rh血型鉴定
常规情况下,红细。例如:家系调查、父权鉴定、产 前检查、确定纯合子或杂合子以及配血试验中 发现有不规则抗体存在等情况下才需做Rh血型 全部表现型的定型
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1.Rh血型鉴定及方法学评价:
Rh抗体属IgG不能在盐水介质中与RBC发生凝集。 (1).低离子强度盐水试验
凝聚胺法
【原理】 • 红细胞膜表面的唾液酸带有的大量的负电荷,可避免其发
生自发凝聚,使红细胞保持最大的表面面积,增加氧的转 移能力和气体扩散。红细胞悬浮在电解质内,阳离子被红 细胞的负电荷吸引,红细胞被扩散的双层离子云围绕,形 成zeta电位,它决定红细胞之间的排斥作用。
Rh血型的定义
根据红细胞上D抗原的有无可将人类 红细胞分为Rh阳性和Rh阴性,即红细胞 上缺乏D抗原的人是Rh阴性;红细胞有D 抗原的人是Rh阳性
Rh血型的遗传学说及命名
Rh--Hr命名法(Wiener学说) CDE命名法(Fisher--Race学说) 数字命名法
二.Rh血型系统
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【报告方式】
1.如两管均无凝集,则报告:
病人XX(X型)血清+献血者XX(X型)红细胞 有或无凝集溶血
病人XX(X型)红细胞+献血者XX(X型)血清 有或无凝集溶血
2. 任何一管或两管有凝集或溶血:
(XX配血法)
立即复查血型或查明其他原因如实报告,并与病室
联系,决不能随便输血。
盐水法评价
• 安全输血包括检测ABO相合与否,也包括免疫性抗体的检 测。最初的交叉配血以盐水介质为主,而盐水介质实验只 能发现ABO不配合,不能检出IgG抗体,所以血库《标准》 不要求盐水介质实验的配血 ,而要求在血清学配合实验 中使用能展示ABO不配合和在37℃有活性的、有临床意义 重要抗体的方法。从安全输血的角度和今后发展趋势分析, 盐水介质法将会和其他技术联合运用。
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3.Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因
• 受检细胞悬液浓度太高,与试剂血清比例失调。 • 漏加或错加定型试剂 • 观察结果时摇动用力过度,摇散弱凝集。 • 试剂血清保存不当引起变质
㈣.RH血型的临床意义: 1.与输血关系:
Rh-第一次接受Rh+血液→不溶血,产生抗体
Rh-第二次接受Rh+血液→产生大量的抗体,溶血
教案编制
授课内容:Rh血型系统 授课学时:1学时 重点内容:Rh血型抗原与抗体及临床意义;
交叉配血 熟习内容:Rh血型鉴定方法。 了解内容:其它红细胞血型系统
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二.Rh血型系统
Rh 血型系统的发现
1937年--1939年 Landsteiner和Wiener用恒河(rhesus)红细胞免