高效石油烃降解菌的筛选及其初步分类鉴定

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石油降解菌的筛选及其降解能力的初步研究

石油降解菌的筛选及其降解能力的初步研究
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第 2 卷 第 4期 5 20 0 7年 8月
石河子大学 学报 ( 自然 科 学 版 ) Ju a o S i z U i r t( aua S i c ) or l t h ei nv sy N t l c ne n ‘ h ei r e
新疆 石 油 污染 严 重 , 油污 染 土壤 生 物 处 理技 石
12. N . 2 A培 养基
牛肉膏 50/ , 白胨 1. / ,a 1 .gL 琼月 . L蛋 g 0O LN C 0/ , 旨 g 5
1 0 / ̄p 7. 7. 8. a I, H 2~ 4。
12 3 降解 液体 培 养基[ .. 0 ]
3石河子大学牛命科学学 院 , 新疆石河子 820 ; 303 4北京理工大学生命科学 与技术学 院 , 北京 1 0 1 0 8) 0 摘要 :为了获得 高效石 油降解 菌株 , 以原油为唯一碳源 , 从克拉玛依石油污染土壤 中分离筛选得到 l 4株细菌 , 利用 紫外分光光度法 、 三苯基四氮唑法和吐温 8 氯化 0法对其仃油 降解能力进 行了研 究。结 果表 明 : 菌株 中 M3 M 、 9 、 7M 和 M1 的石油降解能 力较高 , I 降解 牢分别达到 7 . %、6 2 8 .%和 6 .% , 16 5 . %、8 2 0 3 且这 些菌株 均有较 高的 T ℃脱 氢 T一
术发 展较 晚 , 本研 究从 新船 克拉 玛依 油 田取样 , 污 对
过程 中 由于 泄漏 和 溢 出 对周 围土 壤 、 态 环 境 和 人 生 类 健康 造成 了极 大 的危害 , 日益 受 到人们 的关 注 _ 。 l
染 土样 的主要性 质 和残 油 量 进行 分 析 测 定 , 选 降 筛 解 石油 的菌 株 , 行石 油降解 效 果实验 , 优势 菌株 进 对

石油烃降解菌Rhodococcus sp.15—3的分离鉴定及特性研究

石油烃降解菌Rhodococcus sp.15—3的分离鉴定及特性研究
Z HANGL ZHAO S u — i, I e g l g, HANG Ja S N io u, h o we L n — i Z F n in, HE B a
(.p nK yLb rtyo co i oi l n ier g f gi l r n i n e tMiir giu ue N nig giu ua U i r t 1 e e a oa r Mi bo g a E g ei r ut a E v o m n, ns y f r l r, aj T l rl nv sy O o f r l c n n o A c ul r t oA c t n A ct e i,
关键词 : 红球菌 ; 分离鉴定 ; 石油生物降解
中图 分 类 号 : 7 文 献 标 识 码 : X12 A 文 章 编 号 :62 2 4 (0 80 — 7 7 0 17 — 0 32 0 )5 1 3 — 5
TheI o ato a s l i n nd Char c e i a i so ka s De r di c e i a t r z ton faAl ne - g a ngBa t rum Rho c c uss 1 -3. do o c p 5
最适温度 、H值和盐浓度 ( a 1分别 为 3 p N C) 0℃、.、 %, 70 2 在低温(0℃) 高盐 ( 5 N C) 1 及 4 % a 1环境下也有 良好 的降解 能力 。1— %~ 5 3菌株
可 以降解原油 中 C C 的正构烷烃 、 芳香烃及姥鲛烷 。在含 5gL ・ 原油的培养基 中,0℃培养 5 3 , d后 菌株 1 — 5 3对原油 的降解 率
au e p a d N C o c n r t n frd g a ig n o t d c n y sr i 5 3 w r 0 , H7 0 a d 2 Na 1 e p ci ey I s l h dh g — t r , H n a 1 n e t i e r d n — c a e a eb tan 1 - e e 3 p . n % c ao o C s e t l .t t l a ih a r v i

高矿化度条件下石油烃降解菌种的筛选与评价

高矿化度条件下石油烃降解菌种的筛选与评价

0 0

0 0

酵母 膏/ g

0 0

O 1 .0 0 5 0 .0 0
05 0 .0
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绵羊 红细 胞/ 0 g
Na /g CI 02 0 .0
C S Jg uO
O0 1 . 0
O0 1 . 0
培养 基 培养 基 培 养基 培养基
O20 . 0 200 . 0 0 0 . 0 2 500 .0 0 0 0 0
N ,O H, Jg N
1 0 .0 0
010 . 0
010 . 0




牛 肉膏/ g
蛋 白胨/ g
O30 . 0
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
取1 L 含油污水水样 ,接人20 L m 5 富集培养基 ,3 c摇床振荡培养4 。取0 L富集液涂布到筛选 m 0I C 8 h .m 2 培养基平板 ,3 ℃恒温培养4 。挑取生长较好 、菌落较大的菌株分别在细菌 、真菌和放线菌分离培养基 7 8 h 平板上分离 、 纯化 ,纯化后的菌种在原油培养基平板上驯化3 4次 , ~ 获得石油降解菌种。观察菌株的生长 情况 、菌落特征和菌体形进行初次筛选。
达 2. 8 %、5 . 5 1 %。偏酸或偏碱环境 均不利于菌体生长 ,培养温度对 2株菌体生 长和石油 降解 率影 响较大 ,晟佳 温 5 度是 3 ℃。在 高矿化度条件下 ,菌株对原汕仍有降解作用 ,降黏率为 4 %以上 。原油组分分析结果表 明,菌种在 5 0 以原油为碳源培养后 ,使原 油组 分中沥青质 、非烃及芳烃类含量均发生变化 。 关键词 :石油降解 ;菌种筛选 ;矿化度 ;降黏率

大庆油污土壤中石油降解菌的筛选和鉴定研究

大庆油污土壤中石油降解菌的筛选和鉴定研究
机械化工 DOI: 10.19392 / j.cnki.1671-7341.201913137
科技风 2019 年 5 月
大庆油污土壤中石哈尔滨师范大学地理科学学院 黑龙江哈尔滨 150025
摘 要: 从大庆油井旁含油土壤中筛选出两株石油降解菌,经过形态观察和生理生化鉴定,最后 16S rDNA 鉴定。结果表明: C3J1-2 为微小杆菌属( Exiguobacterium) 、A3J1-1 为不动杆菌属( Acinetobacter) 。
2.3 16S rDNA 鉴定 将测得的 16S rDNA 序列提交至 Gen Bank,下载同源性达 97%以上的序列,用 MEGA 软件构建系统进化树。最终得出, 鉴定 C3J1-2 为微小杆菌属( Exiguobacterium) 、E1J4-1 和 A3J1-1 均为不动杆菌属( Acinetobacter) 。 3 结论展望 最终得出,鉴定 C3J1-2 为微小杆菌属 ( Exiguobacterium) 、 E1J4-1 和 A3J1-1 均为不动杆菌属 ( Acinetobacter) 。本研究丰 富了石油烃降解菌的研究,为石油污染的微生物修复提供了菌 种资源和相关信息。可以深入进一步研究细菌的具体降解效 果,未更好发挥细菌作用提供参考。 参考文献: [1]曹云者,施烈焰,李丽和,李 发 生. 石 油 烃 污 染 场 地 环 境 风险评价与风险管理[J].生态毒理学报,2007( 03) : 265-272. [2]汪洋.大庆油田石油污染土壤堆肥修复及微生物群落 结构研究[D].东北农业大学,2017. [3]涂书新,韦朝阳.我国生物修复技术的现状与展望[J]. 地理科学进展,2004( 06) : 20-32. [4]董丁,卢彦珍,唐美华,陈国 松. 一 株 石 油 烃 高 效 降 解 菌 的筛选及降解性能研究[J].南京工业大学学报( 自然科学版) , 2017,39( 03) : 58-62+89. [5]陈 敏. 微 生 物 学 实 验[M]. 杭 州: 浙 江 大 学 出 版 社, 2011.6. [6]程丽娟,薛泉宏. 微生物学实验[M]. 北京: 科 学 出 版 社,2012. [7]程水明,刘仁荣.微生物学实验[M].武汉: 华中科技大 学出版社,2014.5. [8]东秀珠,蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册[M].北京: 科 学出版社,2005. [9]R.E 布坎南,N.E.吉本斯,等. 伯杰细菌鉴定手册( 第八 版) [M].北京: 科学出版社,1984. [10]王立秀,陈伟,谢桂林,周亮.阿南原,等.跳肠道细菌的 分离鉴定 及 降 解 纤 维 素 细 菌 的 筛 选[J]. 昆 虫 学 报,2018,61 ( 07) : 835-842.

高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理研究

高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理研究

高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理研究高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理研究概述油脂废水是各种生产过程中常见的工业废水,具有高浓度、高粘度和难降解的特点。

传统的处理方法如物理方法和化学方法在处理这类废水时存在着效率低、工艺复杂和对环境污染等问题。

因此,研究高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理具有重要意义。

本文将探讨高效油脂降解菌的筛选方法以及其在油脂废水处理中的应用。

一、高效油脂降解菌的筛选方法1. 筛选菌种的来源高效油脂降解菌主要从自然环境中筛选获得,如油田、市区下水道和石油化工厂等。

这些环境中富含大量的油脂,是高效油脂降解菌的潜在来源。

2. 筛选菌种的方法(1)富集培养法:通过连续传代培养,利用油脂为唯一碳源来增加油脂降解菌的数量。

(2)筛选培养基的优化:为了提高油脂降解菌的筛选效率,可以通过优化培养基成分和条件,如pH值、温度和培养时间等。

3. 初步筛选方法通过测定菌株对油脂的降解率、生长速度等指标,初步筛选出具有较高降解能力的菌株。

4. 准确筛选方法(1)酶活测定法:通过测定油脂降解菌体外分泌的酶活性,筛选出具有高降解能力的菌株。

(2)分子生物学方法:利用16S rDNA基因测序技术,鉴定出属于高效油脂降解菌的菌株。

二、油脂废水的强化处理1. 微生物降解方法高效油脂降解菌通过分泌酶类降解废水中的油脂物质,将其分解为小分子物质,使废水中的油脂得以降解。

该方法具有效率高、成本低和对环境友好等优点,是一种较为理想的处理方法。

2. 强化菌株的应用将筛选出的高效油脂降解菌株应用于油脂废水的处理中,可以增加废水处理系统的油脂降解能力。

通过培养优良菌株,可以形成一种稳定的微生物群落,提高废水处理系统的稳定性和连续性。

3. 条件优化在使用高效油脂降解菌处理油脂废水时,需要优化处理条件,如菌株的培养条件、温度和pH值等,以提高处理效果。

4. 协同处理法将高效油脂降解菌与其他废水处理方法结合,如物理方法和化学方法,可以使废水处理效果更好。

石油污染对土壤微生物群落影响及石油降解菌的筛选鉴定

石油污染对土壤微生物群落影响及石油降解菌的筛选鉴定

石油污染对土壤微生物群落影响及石油降解菌的筛选鉴定摘要:近年来,随着经济的快速发展,人们对石油原材料和石油产品的需求量迅速增加。

然而,社会经济的发展导致了石油污染进一步扩大。

石油在开采、运输、储存、加工和生产过程中,会泄漏到环境中并随着水体和大气循环进入土壤,进而破坏土壤的组成和结构,影响其通透性。

石油是一种复杂的有机混合物,由各种极性和非极性的烷烃、环烷烃和芳香烃、胶质和沥青等物质组成。

针对石油污染土壤修复,按处置地点可分为原位修复技术和异位修复技术两大类。

本文重点对近年来国内外原位修复技术中的原位热脱附、原位高级氧化、气相抽提、生物通风、阴燃技术的应用研究进展进行了综述,分析了当前研究存在的问题,并对其发展方向做了展望。

关键词:石油污染;土壤微生物群落影响;石油降解菌;筛选鉴定引言石油烃-重金属复合污染土壤也日渐引起了国内外学者的高度重视。

研究表明,不同年代开发的油井周围土壤中重金属有效态和全量随着油井运行时间的增长呈现增高的趋势。

原油和钻井液中含有的重金属及油田开采区农业生产中化肥的施用,常导致土壤重金属浓度提高,致使油田开采区土壤呈现石油烃和重金属复合污染特征。

土壤中有机污染物和重金属复合污染的交互作用常会产生不同的环境行为和环境效应。

目前,有机-重金属复合污染的研究主要集中在农药、有机鳌合剂、石油烃及芳香类化合物与重金属之间的复合污染。

石油生产、运输和应用,农业机具清洗或泄漏等途径都会产生石油烃与重金属复合污染。

1材料与方法1.1试验材料试验采用土壤为远离油井污染的清洁耕作层黄绵土,有机碳含量6.26mg/kg,pH值为8.11,土壤颗粒机械组成为小于0.002mm的黏粒占10.97%,0.002~0.05mm的粉粒占72.05%,0.05~2mm的砂粒占16.98%。

供试原油为延长石油公司采自陕西安塞的原油,密度是0.858g/cm2,黏度系数为4.05mPa.s;柴油为普通商品油品,密度是0.854g/cm',黏度系数为3.45mPa.s。

烷烃降解菌SY16的筛选、鉴定及降解能力测定

烷烃降解菌SY16的筛选、鉴定及降解能力测定
1 实验材 料 .
从扶余油 田东区采油,厂经常被含油废水浸 i 泡 的土地 上选 取 了 8处采 样 点 , 去除 表层 5CI l 的 Y 浮土 , 5 0 l 之间, 在 ~1 Y CI 使用经过高温灭菌 的铲 子取 土 ,装到 灭菌 的塑 料袋 中 ,封 口,一2 O℃冷 冻保存 ,第二 天进 行分离 纯化 。
石 油 烃 降 解 菌 ( doa o D gaao Hyrcr n erdt n b i B c r ,H ) at i e a DB 是能 将 石油 烃作 为 唯一 碳 源 进行
的筛选是是徽生物技术处理石油污染的关键 。 本文从抚余油田石油污染的土壤中筛选出一 株高效降解烃类化合物的微生物 ,并通过个体形 态 、菌 落形 态对 其进 行 了初步 鉴定 。
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牛 态 环 境 2 0 ,65: 34 19 0 7 l()19 -3 8
Ec og n En r m e ol y a d vion nt
ht:w .ec. l t / ww esi On p/ j C Emale i r esi o - i dt @jec. m : o t
物 群 落 的种属 组 成 【。 目前 在处 理 石油 污 染土 壤 3 』 时 ,所 选用 的微 生物 对污 染土 壤 中烃类 的降 解针 对性较差 ,降解率较低【 7 J 。高效降解烃类徽生物
烷烃和芳香烃等 ,有些成分有致癌变 、 致突变 、 致 畸变作 用 ,并 能通过 食 物链 在动植 物及 人 体 内 富集 ,被列 为 重点 污染 物【。进 人环 境 中的石 油 , 2 J 由于 生 物学 的和 某 些 非 生物 学 的机 制 ( 主要 是 光 化学 氧化 )而逐 步 降解 【。大 量 研究 表 明 ,在 自 2 J 然界净化石油烃类污染的综合因素中 ,天然微生 物的生物降解作用已成为消除环境中石油烃类污 染 的 主要机 制 【。 j J

石油降解菌株的筛选 鉴定及其石油降解特性的初步研究

石油降解菌株的筛选 鉴定及其石油降解特性的初步研究

(2)pH值对菌株降解效率的影响:在pH值为7.0时,菌株X的降解效率最高, 达到60%以上。当pH值偏离7.0时,其降解效率明显下降。
(3)盐度对菌株降解效率的影响:在低盐度条件下,菌株X的降解效率较高。 随着盐度的增加,其降解效率逐渐降低。当盐度超过5%时,其降解效率显著下降。
(4)产物分析:利用GC-MS等技术,我们对菌株X降解石油烃的产物进行了 分析。结果显示,菌株X能够将石油烃主要降解为脂肪酸、酚类化合物等中间产 物。这些中间产物在进一步降解过程中转化为二氧化碳和水,从而实现石油烃的 生物修复。
2、筛选流程:首先,采集油污土壤和石油废水样品,进行富集培养;其次, 通过初筛和复筛,获得具有较强石油降解能力的菌株;最后,通过形态学和分子 生物学鉴定,确定菌株种类。
3、鉴定步骤:将筛选得到的菌株进行16S rDNA分子鉴定,利用细菌分类学 软件进行比对分析,最终确定菌株的种属。
4、石油降解特性分析:采用液体培养法测定菌株的石油降解能力,通过测 定不同时间点石油烃类物质的含量,计算菌株的降解速率和降解效率。
1、菌株筛选
从石油烃污染地区采集土壤样品,采用富集培养法,经过多步筛选,获得具 同温度、pH值、盐度等条件下,对菌株降解石油烃的能力进行测定。通 过改变环境因素,观察其对菌株降解效率的影响。同时,利用气相色谱-质谱联 用(GC-MS)等技术,对菌株降解的产物进行分析。
参考内容
一、引言
石油烃是石油和天然气的主要成分,它们在自然环境中的存在和降解对全球 碳循环和环境生态有着重要影响。厌氧降解菌在石油烃的降解过程中扮演着关键 角色。本次演示旨在筛选出具有高效石油烃厌氧降解能力的菌株,并对其降解特 性进行研究,以期为石油烃污染的生物修复提供理论依据。
二、材料与方法
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高效石油烃降解菌的筛选及其初步分类鉴定近年来,随着石油化学品的大量应用,一些污染物已经成为人们关注的焦点。

石油烃,作为最常见的污染物,被投入环境会极大地破坏生态环境。

因此,研究降解石油烃的微生物成为当今社会的热门研究方向。

筛选到的高效石油烃降解菌可以用来处理污染的环境,以改善环境质量。

石油烃降解菌分为两类:一类是完全降解石油烃的菌,另一类是部分降解石油烃的菌。

完全降解的菌能够将石油烃分解成水、碳氢氧化合物和硫化物;而部分降解的菌仅能将石油烃分解成部分组分,或者将高分子物质分解成低分子物质。

石油烃降解菌的筛选和鉴定,是基于菌类的鉴定和解析,从而获取具有降解功能的微生物菌株。

石油烃降解菌的筛选及其初步分类鉴定,一般采用具体的技术方法,如PCR、测序、RT-PCR、存量分析技术、液相色谱法和质谱法等,以实现微生物的细菌鉴定。

首先,根据细菌的培养条件选择表征对象;其次,使用PCR和测序技术获取基因组序列;接着,采用多元结构基因序列的聚类分析技术,将菌株划分到不同的分类单元中;然后,使用RT-PCR方法以及液相色谱法和质谱法等技术,进一步分析基因序列及其编码蛋白质的结构和功能,以确定菌株具有高效石油烃降解功能。

除了上述技术之外,还可以采用其他的实验方法。

例如,可以采用生态学的方法来筛选石油烃降解菌,例如分子系统发育聚类分析、共生小组测定,以及祖先和进化形态特征等方法,以获得降解功能菌
株。

此外,还可以采用分子模拟法,预测石油烃降解菌的蛋白质结构和功能,以及识别有效的降解活性酶。

综上所述,石油烃降解菌的筛选及其初步分类鉴定,其实质是一项复杂的系统生物学研究,需要借助于先进的生物技术,以确定具有有效降解石油烃的微生物菌株。

任何一种分类鉴定方法都不可能完全准确,因此,最佳方法是将多种技术结合起来,以发掘具有高效降解石油烃能力的菌株。

该研究所获得的结果,将为后续石油烃污染的治理提供有力支持,可能会改善环境质量,保护生态环境,为建设良好的生态环境起到重要作用。

但是,该研究也存在一定的局限性,例如由于筛选的菌的数量有限,以及筛选的菌株的种类受到地域的限制,从而影响研究的准确性。

此外,由于石油烃污染的环境条件复杂,微生物的生成有其特定的要求,因此,在后续研究中,应该加强对微生物生成条件的研究,以便更好地改善污染环境。

综上,从石油烃降解菌的筛选及其初步分类鉴定的角度出发,通过系统地进行分类学研究,研究人员可以筛选出具有高效石油烃降解能力的菌株,为石油烃污染的治理提供依据,从而达到改善环境质量的目的。

从而,石油烃降解菌的筛选及其初步分类鉴定,是一项重要的科学研究,它不仅有助于提高石油烃降解菌的鉴定准确性,也有助于改善石油污染的综合治理。

希望未来的研究可以更好地揭示石油烃降解菌的分类特征,并在环境改善方面发挥重要作用。

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