饲料中烟酸和叶酸的测定方法提要
HPLC法检测饲料中的烟酸叶酸
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HPLC 法检测饲料中的烟酸叶酸
烟酸属于 B 族维生素，又称尼克酸或维生素 B5，具有促进细胞新陈代谢，扩张血 管的作用，也有缓解末梢血管痉挛的效果。烟酸作为微量营养素对动物脂肪代谢、生产 性能、 疾病预防、 预防奶牛酮血症有积极的作用； 肌体缺乏烟酸时会引起新陈代谢障碍。 叶酸是一种广泛存在于绿色蔬菜中的 B 族维生素， 通过对一碳基团的传递参与嘌吟、 嘧啶的合成以及氨基酸的代谢，从而影响核酸的合成和蛋白质的代谢，对正常血细胞的 形成有促进作用， 并能促进免疫球蛋白的生成。 动物缺乏叶酸会引起贫血、 红细胞减少、 生长停止等病症。 对于烟酸和叶酸的分析，经典的方法有微生物法和分光光度法，近年来普遍采用高 效液相色谱法。 本次实验根据 GB/T17813.7-1999 《复合预混料中烟酸、 叶酸的测定 高 效液相色谱法》 ， 采用日立高效液相色谱仪 Primaide 配紫外检测器对烟酸和叶酸进行检 测，重现性良好。 z 仪器 1) 四元梯度泵 PM1110 2) 自动进样器 PM1210 3) 柱温箱 PM1310 4) 紫外检测器 PM1410 5) PSM 色谱工作站。 z 色谱条件 色谱柱：HitachiLaChromC18(5μm)4.6mmI.D.x250mmL 柱 温：30℃ 流 速：1.0mL/min 波 长：275nm 进样量：20 μL 流动相：取 500mL 去离子水，加 10mL 冰乙酸，1.3mL 三乙胺，20mL 己烷磺酸 钠（0.005mol/L）,用去离子水定容至 1L，调 pH=3.2，过滤；取上述溶液 850mL 与 150mL 甲醇混合，脱气。
烟酸的合成实验报告
烟酸的合成实验报告
注意事项：
（1）试验的检验人群：适用于空腹血糖稍偏高或偶有糖尿的糖尿病疑似人群，但空腹血糖明显过高（高于
7.0mmol/L）的重型显性糖尿病患者，大量葡萄糖会加重胰岛负担，应改为馒头餐试验或直接诊断。
（2）试验开始的最佳时间为早晨7～9时，此时测量的空腹血糖结果较为标准；
（3）在试验的3个小时过程中，受试者不可以喝茶及咖啡，不可以吸烟，也不能做剧烈运动，以免影响血糖监测的结果。
烟酸需求
烟酸是人体和动物中不可缺少的营养成分，人体每天对烟酸的需求量为：成人10-20mg，婴儿4-11mg。
烟酸也是猪、鸡等动物日粮中必需的，其所需的烟酸，除来自肠道微生物的合成和饲料中直接供给外，饲料中色氨酸在合成蛋白质并有多余的情况下，能在体内合成烟酸，所以饲料中的色氨酸含量，也是决定烟酸需要量的重要因素。
高效液相色谱紫外检测法测定添加剂预混合饲料中叶酸含量
高效液相色谱紫外检测法测定添加剂预混合饲料中叶酸含量冯秀燕;杨宝良;魏秀莲;张亚君【摘要】本实验建立了添加剂预混合饲料中叶酸测定的高效液相色谱紫外检测测定方法。
样品经碳酸钠溶液提取，通过阴离子交换柱净化富集，高效液相色谱紫外法测定。
结果表明：叶酸浓度为0.1~250.0μg/mL时，具有良好的线性关系，样品回收率为79.9%~100.4%，相对标准偏差小于10%，定量限可达0.3 mg/kg，适用于添加剂预混合饲料中叶酸含量的测定。
%A high performance liquid chromatography(HPLC)method was developed for the determination of folic acid in feed additive premix.Sample was extracted by the solution of Na2CO3,and purified by ion exchange column.The results showed that:in the range of 0.1~250.0μg/mL,there was a good linear correlation between the peak area and concentration of folic acid.The average recovery rates in feed were 79.9% ~ 100.4%.The relative standard deviation was below 10%.The quantification limit was 0.3 mg/kg.It was a suitable method for determination of folic acid in feed additive premix.【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2016(000)007【总页数】3页(P16-18)【关键词】饲料;叶酸;高效液相色谱法;测定【作者】冯秀燕;杨宝良;魏秀莲;张亚君【作者单位】北京市饲料监察所，北京朝阳 100107;北京市饲料监察所，北京朝阳 100107;北京市饲料监察所，北京朝阳 100107;北京市饲料监察所，北京朝阳100107【正文语种】中文【中图分类】S816.17针对陈粮制定的最新销售政策即定向销售政策近期将启动，许多陈粮销售企业将根据政策开始实行，其主要的销售对象就是规模玉米深加工和饲料企业。
饲料烟酰胺检测国标要求
饲料烟酰胺检测国标要求
饲料烟酰胺是饲料添加剂中的一种，它能提高动物的生长速度和免疫力，有助于改善动物的健康和生产性能。
然而，由于烟酰胺具有对人体有害的潜力，其使用受到了严格的监管。
为保障动物饲料的安全性，在我国，对饲料中烟酰胺含量的检测标准已经制定出来。
国家标准《饲料中烟酰胺检测方法》GB/T 22510-2008规定了饲料中烟酰胺的检测方法和标准。
该标准适用于各种类型、形态和成分的饲料中烟酰胺的测定。
该标准指出，饲料中烟酰胺的检测方法应该采取高效液相色谱法（HPLC）进行分析。
按照检测要求和设备实际情况，样品的前处理可以通过直接提取或者水解提取来进行。
对于直接提取样品，要求样品中烟酰胺的提取率应该大于75%。
如果采用水解提取样品，则样品中烟酰胺的水解率应该大于98%。
检测时要求，样品提取后浓缩至一定程度，使其量在检测范围内。
该标准规定了烟酰胺的检测范围为0.010~500mg/kg，检测限为0.005mg/kg。
并指出，仪器的误差值为0.05mg/kg。
此外，该标准还规定了样品的储存和运输要求，保证样品在提取和检测过程中不受损坏和污染。
通过对饲料中烟酰胺的检测，可以保障动物饲料的安全性和质量，减少对人和动物的危害。
此外，该标准的实施还有利于推动饲料生产企业在生产过程中加强质量管理和安全监管，提高饲料生产的标准化和规范化水平。
宠物饲料中8种水溶性维生素同步分析方法研究
宠物饲料中8种水溶性维生素同步分析方法研究严华;李兰;王继彤;贾铮;姚婷;刘佳;徐思远;田静;樊霞【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2022(34)12【摘要】本研究旨在建立宠物配合饲料中8种水溶性维生素(维生素B_(1)、维生素B_(2)、维生素B_(6)、烟酸、烟酰胺、D-泛酸、D-生物素和叶酸)的同步分析方法。
试验在宠物配合饲料样品中加入同位素内标,用1%盐酸溶液在50℃水浴40 min后,再用10%氨水溶液调节pH至6.0,沉淀后取上清液进行分析。
以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,SB-AQ C18色谱柱(100 mm×3.0mm,1.8μm)为分离柱,梯度洗脱,洗脱液经电喷雾离子源在正离子模式下进行电离,多反应监测模式采集数据,内标法定量。
结果表明:8种水溶性维生素在5.0-2000 ng/mL内具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))大于0.9950,犬粮和猫粮在3个添加水平下的加标回收率分别为80.0%-117.3%和81.0%-112.2%,相对标准偏差分别为1.04%-5.28%和1.06%-10.20%。
该方法操作简便、过程快速、分析灵敏、结果准确,可实现宠物配合饲料中8种水溶性维生素的同时检测。
【总页数】14页(P8072-8085)【作者】严华;李兰;王继彤;贾铮;姚婷;刘佳;徐思远;田静;樊霞【作者单位】中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所;北京市兽药饲料监测中心【正文语种】中文【中图分类】S816【相关文献】1.同步测定饮料中糖精钠和苯甲酸钠含量的方法研究2.ICP-AES同步检测微量元素预混合饲料中多种元素的方法研究3.水溶性维生素分析方法研究进展4.SPE-UPLC-MS/MS分析植物运动型饮料中多种水溶性维生素含量的研究5.饲用酶添加剂预混料中酸性蛋白酶活力测定方法研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
添加剂预混合饲料叶酸的检验操作规程
添加剂预混合饲料叶酸的检验操作规程Folic acid[质量标准依据] GB/T7302-2008分子式：C19H19N7O6分子量：441.40（按1999年国际原子量）1.技术要求：1.1外观和性状本品为黄色或橙黄色结晶性粉末，无臭、无味。
在水、乙醇、三氯甲烷或乙醚中不溶、在氢氧化碱或碳酸盐的稀溶液中溶解。
1.2项目和指标2.试验方法2.1叶酸含量测定2.2.1试剂和溶液氢氧化钠溶液：0.1mol/L；稀盐酸：取盐酸234ml，加水稀释至1000 ml；锌粉；亚硝酸钠溶液：0.1%；氨基磺酸铵溶液：0.5%；二盐酸萘基乙二胺溶液：0.1%；对照品溶液的制备：称取叶酸对照品（同时测定水分）0.08g （准确至0.00002g），置100ml容量瓶中，加氢氧化钠溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀。
精密吸取2ml，置另一100ml容量瓶中，加盐酸溶液20ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
每1ml 约含叶酸对照品16μg。
样品溶液的制备：按对照品溶液的制备法制备，即得。
2.2.2测定方法精密量取对照品溶液和样品溶液各60ml，分别置具塞锥形瓶中，各加锌粉0.5g（可稍过量），连续振摇20min，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液，各精密吸取续滤液2ml，分别置10 ml量瓶中，各依次加水3ml、盐酸溶液1ml与亚硝酸钠溶液1ml，混匀，放置2min，各加氨基磺酸铵溶液1ml，混匀，放置10min，各加二盐酸萘基乙二胺溶液1ml，混匀，放置10min，用水稀释至刻度，摇匀。
另精密吸取对照品溶液与样品溶液各20ml，分别置100ml量瓶中，各加盐酸溶液20ml，用水稀释至刻度，摇匀。
各精密吸取2ml，分别置10ml量瓶中，自“依次加水3ml”起，依法操作；另取水2ml置10ml量瓶中，自“依次加水3ml”起，依法操作，作为空白，用分光光度计测定，以1cm的比色皿在550±1nm的波长处测定上述两组溶液的吸收度。
叶酸的测定方法
叶酸的测定方法微生物法1.原理叶酸是酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L. C, ATCC 7469）生长所必需的营养素。
在一定条件下，L.C的生长繁殖与培养基中叶酸含量呈正比关系，细菌增殖的量以光密度值计，通过与标准曲线相比较，计算出样品中叶酸的含量。
2.适用范围参考《Methods of Vitamin Assay》，第4版。
本方法适用于各类食物中叶酸的测定。
检测限为0.1ng。
3.仪器与设备（1）恒温培养箱（2）离心机（3）高压消毒锅（4）震荡器（5）接种针和接种环（6）分光光度计4.试剂除特殊说明外，本实验中所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。
（1）菌种：酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L.C, ATCC 7469）（2）磷酸缓冲液(0.05mol/L, pH6.8):称取4.35g Na3PO4·12H2O,10.39g Na2HPO4·7H2O溶解于800ml水中。
临用前用约5g抗坏血酸调节pH至6.8。
（注：叶酸对光、热敏感，易被氧化破坏，抗坏血酸有助于保护叶酸被氧化。
）（3）鸡胰酶溶液：称取100mg干燥的鸡胰酶（Difco公司）（注：含有叶酸轭合酶，用于水解叶酸多谷氨酸盐），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，3000rpm离心10min,取上清液备用。
临用前现配。
（4）蛋白酶-淀粉酶溶液：分别称取200mg蛋白酶（Sigma公司）和淀粉酶（Sigma公司），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，离心3000rpm 10min,取上清液备用。
临用前配制。
（5） 2+8乙醇溶液：量取20ml无水乙醇溶液，加入80ml水混匀。
（6） 01mol/L NaOH: 称取0.4g氢氧化钠，加2+8乙醇溶液溶解并稀释至1L。
（7） 10mol/L NaOH。
称取400g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L。
（8）叶酸标准储备液（200mg/ml）：准确称取200mg叶酸标准品（Sigma公司，纯度大于98%），用0.01mol/L NaOH溶解并定容至1L。
分光光度法测定饲料添加剂叶酸含量的方法研究
101.0
95.0~102.0
101.3
96.7
从表 2 可以看出，用两种方法分别测定饲料
添加剂叶酸含量，最大标准偏差≤0.3%，证明本
97.1
0.2
0.3
0.1
0.2
分册,2009,36(03):158-161.
[3] 叶晓利,康文怀,李巧玲,等.高效液相色谱-串联质谱法
测定水果中叶酸及其稳定性[J].食品工业,2020,41(01):
波长 281nm 处用分光光度计测定各溶液吸光度。
20min、30min、40min、50min、60min 后 测 定 其 结
Байду номын сангаас
2.1 标准曲线及相关系数
相对稳定。静置时间≥50min 时，测定结果较之
2
结果与讨论
准确移取 1.2.2 中叶酸标准工作液 0.05mL、
果，测定结果表明静置时间≤40min 时测定结果
叶酸一种水溶性 B 族维生素，是动物机体必
粉、血浆、叶酸片等基质，鲜有用于饲料添加剂叶
需的一种维生素，是脂肪代谢不可或缺的辅酶，
酸的分光光度法。本研究采用简单、快捷的分光
对氨基酸代谢和蛋白质、核酸的生物合成有重要
光度法测定饲料添加剂叶酸的主成分含量，该方
[1]
影响 。在动物机体中，叶酸缺乏会引起巨幼红
[11] 马景宏,张旭,王为黎.微生物分析法测定保健食品中
叶酸[J].中国微生态学杂志,2007(06):576-577.
[12] 柳琪,滕葳,王利民,等.氨基酸分析仪测定饲料添加剂
作者（通信作者）简介：霍艳杰，
（1979-），女，陕西渭
南人，主要从事食品、农产品、环境等常规理化项目的测
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饲料中烟酸和叶酸的测定
1.方法提要
目前饲料中都添加有多种维生素，以保证动物健康生长。
如果动物完全缺少一种或数种维生素,或者是摄入量不足,某些代谢过程就将受到损害,从而导致生长受阻或者疾病。
烟酸又称尼克酸是参与体内酶系统的一种维生素，对机体的碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢起主要作用，当肌体缺乏烟酸时则可引起新陈代谢的障碍；叶酸是一种广泛存在于绿色蔬菜中的B族维生素，缺乏叶酸会使得雏鸡生长不良，羽毛不正常，贫血和骨短粗症等。
本实验参照GB/T17813-1999《复合预混料中烟酸、叶酸的测定》，对4％蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。
2.试剂及标准溶液配制
2.1试剂
甲醇：色谱纯
冰乙酸：分析纯
三乙胺：分析纯
0.005mol/L己烷磺酸钠溶液
0.1mol/L碳酸钠溶液
提取液：在已装入500mL去离子水的1000mL容量瓶中，加入10mL冰乙酸，
1.3mL三乙胺，去离子水定容至刻度摇匀（PH=3.2）。
取850mL上述溶液与150mL 甲醇混合，超声脱气备用。
流动相：在已装入500mL去离子水的1000mL容量瓶中，加入10mL冰乙酸，
1.3mL三乙胺，20mL0.005mol/L己烷磺酸钠溶液，去离子水定容至刻度摇匀，
调PH值至3.2，过0.45μm滤膜。
取该溶液750mL与250mL甲醇混合，超声脱气备用。
烟酸和叶酸标准品
2.2标准溶液配制
标准溶液的浓度为1、2、5、10、15、20μg/mL。
3.仪器及工作条件
3.1仪器
3.1.1LC5510高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）。
3.1.2DM-100在线脱气机（北京东西分析仪器有限公司）。
3.1.3超声波水浴
3.2色谱条件
色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm。
流动相：甲醇+己烷磺酸钠+冰乙酸+三乙胺。
流速：1.0mL/min。
检测波长：275nm。
柱温：30℃。
进样量：20μL。
4.分析步骤及分析结果
4.1试样处理
称取饲料样品2g左右（精确至0.0001g）于50mL棕色容量瓶中，加入5mL0.1mol/L 碳酸钠溶液，浸湿样品，加入70mL的提取液，混匀，超声提取20min，冷却至室温，用提取液定容至刻度，充分摇匀，过滤待测。
4.2测定
4.2.1标准曲线的绘制
将标准系列工作液依次按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积。
以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
图1烟酸标准曲线
图2叶酸标准曲线
4.2.2样品的测定
将样品溶液按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积，计算含量。
图310µg/mL烟酸、叶酸标样谱图
图4样品谱图。