血液中乙醇的测定顶空气相色谱法

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气相色谱仪对血液中酒精(乙醇)分析

血液中乙醇含量分析测定专用气相色谱仪随着新《交通法》的实施，驾车者血醇含量的检测日趋普遍，气象色谱法定性及定量检测血醇含量是唯一司法认定的检测手段。

我公司血液中乙醇含量检测解决方案是参考国外同类检测方法，并基于《中华人民共和国公共安全行业标准》（GA/ 105-1995）而开发的用带自动顶空进样器并配有双柱双检测器的气相色谱法进行的血液中的乙醇含量的定性及定量检测分析。

本方案检测方法先进，仪器配置合理，操作简单，适合各级公安部门及司法鉴定中心配备。

饮酒驾车国家质量监督检验检疫局发布的《车辆驾驶人血液、呼气酒精含量阈值与检验》国家标准，该标准规定：车辆驾驶人员血液中的酒精含量大于或等于20毫克／100毫升、小于80毫克／100毫升为饮酒驾车。

醉酒驾车血液中的酒精含量大于或者等于80毫克／100毫升为醉酒驾车。

自己估量据专家估算：排除个人体重、体温、性别、年龄、人体脂肪含量、是否经常饮酒等因素，一般喝2／5瓶普通瓶装啤酒，或半两50度左右的白酒，或2两左右的12度红酒，就能达到“酒后”标准。

仪器配置：适合用户：公安部门，司法鉴定中心，医院，研究单位。

分析图谱可用标准里面的图截取……酒驾新规内容一、有下列违法行为之一，一次记12分：（一）驾驶与准驾车型不符的机动车的；（二）饮酒后或者醉酒后驾驶机动车的；（三）驾驶公路客运车辆载人超过核定人数20％以上的;（四）造成交通事故后逃逸，尚不构成犯罪的；（五）使用伪造、变造机动车号牌、行驶证、驾驶证或者使用其他机动车号牌、行驶证的;（六）在高速公路上倒车、逆行、穿越中央分隔带掉头的。

第十五条有下列情形之一的，不得申请增加大型客车、牵引车、中型客车准驾车型：（一）发生交通事故造成人员死亡，承担全部责任或者主要责任的；（二）醉酒后驾驶机动车的；（三）在本记分周期和申请前最近连续三个记分周期内有饮酒后驾驶机动车行为的；（四）在本记分周期和申请前最近连续三个记分周期内有驾驶机动车行驶超过规定时速百分之五十以上行为，机动车驾驶证未被吊销的。

顶空-气相色谱法测定血液中的酒精含量

顶空-气相色谱法测定血液中酒精含量摘要：以叔丁醇为内标，采用顶空-气相色谱法对血液中的酒精含量进行分析。

该方法在5~160 mg/100mL 浓度范围内线性良好，回收率在90%~110%之间，方法的检出限为0.38 mg/100mL 。

关键词：顶空-气相色谱法血液乙醇2008年世界卫生组织的事故调查显示，大约50%~60%的交通事故与酒后驾驶有关，酒后驾驶已经被列为车祸致死的主要原因。

在中国，每年由于酒后驾车引发的交通事故达数万起；而造成死亡的事故中50%以上都与酒后驾车有关，酒后驾车的危害触目惊心，已经成为交通事故的第一大“杀手”。

根据国家质量监督检验检疫局发布的《车辆驾驶人员血液、呼气酒精含量阈值与检验》(GB19522—2004)中规定，驾驶人员每血液酒精含量大于等于20 mg/100mL 小于80 mg/100mL 为酒后驾车；血液酒精含量大于或等于80 mg/100mL 为醉酒驾车。

本文参照公安部GA/T842-2009标准，以叔丁醇为内标，顶空-气相色谱法分析血液中的酒精含量。

该方法准确可靠，重复性好。

1．实验部分1.1仪器与试剂岛津GC-2010 Plus 气相色谱仪，配FID 检测器，顶空进样器（DANI HSS-86.50） 1.2分析条件 1.2.1色谱条件色谱柱：Stabilwax ，30 m×0.25 mm×0.25 μm 进样口温度：200℃柱温程序：70℃(4 min) 20℃/ min 150℃(1 min) 柱流量：1.2 mL/min 进样方式：分流分流比：5:1 检测器温度：230℃ 氢气流量：40 mL/min 空气流量：400 mL/min 尾吹气流量：30 mL/min 1.2.2顶空条件平衡温度：70℃ 平衡时间：15 min 定量环温度：105℃ 传输线温度：110℃ 1.3样品制备用移液枪移取0.50 mL 待测血液样品于顶空瓶中，加入0.1 mL 叔丁醇水溶液（200 mg/100mL ）作为内标，密封后待测试。

血中乙醇的顶空气相色谱分析

基金项目　校级科研项目,项目编号:07LG002。

作者简介　刘兆(1974—　),男,汉族,讲师,法医学博士。

2008年第4期No 142008　Journal of Chinese Peop le πs Public Security University (Science and Technol ogy )　总第58期Su m58血中乙醇的顶空气相色谱分析刘　兆,温永启,张惠芹(中国人民公安大学刑事科学技术系,北京　100038)摘　要　目的:探讨改良测定血中乙醇的顶空气相色谱分析方法。

方法:以正常人空白血液添加乙醇为样本,采用1,4-二氧六环作为内标物并在稀释液中加入硫脲和高氯酸以提高挥发性并促进蛋白质的降解,通过顶空气相色谱法进行定性定量分析,在对实际案例检样的检验中与采用“标准方法”检测的结果进行对比。

结果:采用新方法定量分析时,血中乙醇在010625mg/mL ～1mg/mL 范围内线性关系良好(r 2=019996),各浓度组的变异系数(CV )<2%,血中乙醇的最低检出限为012μg/mL (S/N ≥3)。

结论:以1,4-二氧六环为内标物的新方法简便、准确,比以往的方法更加灵敏且避免干扰,适用于血醇的定性、定量检验。

关键词　乙醇;顶空气相色谱;法医检验中图分类号　D9181930　引言血醇检验是法医毒化分析中的一项基本工作,在酒后驾车、中毒死亡等案件的鉴定中至关重要[1]。

目前国内公共安全行业标准中使用的方法(以下简称方法A )采用叔丁醇作内标物,通过顶空气相色谱法进行血中乙醇的检验[2],同时还可检测出甲醇、丙醇、戊醇等易挥发性物质。

所述方法中用作内标物的叔丁醇由于保留时间较短,易与其他挥发性物质产生干扰,且其定性、定量检验需使用约3mL 血液,在一些特殊情况中实属较大的消耗。

为改善上述问题,本实验方法(以下简称方法B )采用保留时间较长的1,4-二氧六环作为内标物以避免与其他挥发性物质的干扰,在检样制备中所用的稀释液里加入硫脲和高氯酸可提高挥发性和分解蛋白质[3],以便提高灵敏度,减少检样的消耗。

顶空气相色谱法检测血液中的乙醇含量

顶空气相色谱法检测血液中的乙醇含量张伟;荆丽红;郭卫【摘要】目的建立顶空气相色谱法检测血液中乙醇含量的检测方法.方法取0.5 ml待测血样2份加入叔丁醇内标液0.1 ml于20 ml顶空瓶中,顶空进样.在特定的色谱条件下,血中的乙醇能与样品中可能存的主要干扰成分实现分离,阳性对照血中的乙醇、叔丁醇保留时间分别作为对照,以保留时间定性,用内标法以乙醇对内标物的峰面积比进行定量分析.结果乙醇的保留时间为3.482分,叔丁醇的保留时间为4.394分,相对标准偏差(n=10)均小于5％,该方法检测结果准确.结论顶空气相色谱法检测血液中的乙醇含量,血样直接顶空进样,不受进样误差干扰,结果稳定,操作方便,分析时间短、线性关系良好、灵敏度高,适用于涉嫌酒驾案件的全血中乙醇含量的测定.【期刊名称】《医学信息》【年(卷),期】2018(031)019【总页数】3页(P155-157)【关键词】气相色谱;乙醇;顶空进样;酒精检验【作者】张伟;荆丽红;郭卫【作者单位】天津公安警官职业学院,天津 300382;天津市公安局南开分局技术队,天津 300110;天津津实司法鉴定中心,天津 300202【正文语种】中文【中图分类】O657.7顶空气相色谱法（HS-GC）又称液上气相色谱分析，是一种联合操作技术，可对血液中乙醇的定性定量分析。

《刑法修正案》和修改后的《道路交通安全法》正式实施后，“醉酒驾驶”正式入刑，血液酒精含量检验结果作为认定犯罪嫌疑人是否醉酒的重要依据。

本文依据公安部发布的行业标准GA/T 842-2009血液酒精含量的检验方法、GA/T 1073-2013生物样品血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空-气相色谱检验方法和中华人民共和国司法部SF/Z JD0107001-2010顶空气相色谱法对血中乙醇的定性定量分析方法，结合本实验室仪器特点，建立一种快速、准确、精密度高的检测方法，以适应对涉嫌酒驾案件的血中酒精含量检验工作[1]。

顶空气相色谱内标法测定血液中乙醇含量

Ｄｅｅｍｉａｉｎｏｈｔａｏｏｔｎｎｂｏｄｗｉｅｄｐｃａｈｏｔｇａｈ（ｎｅｎｌｔｎａｄｍｅｈｄＺｔｒｎｔｏｆｔｅｅｈｎｌｎｅｔｌｏｔｈａｓａｅｇｓｃｒｍａｏｒｐｙｉｔｒａａｄｒｔｏ）ｃｉｈｓＯＵＬｉ
Ｃｈｉａ）ｎ
［ｓｒｃ］ＯｂｅｔｅＴｏｐｏｏｅａｒｐｄａａｙｉｍｅｈｄｆｒｔｅｄｔｒｎｔｎｏｔａｏｏｔｎｌｏｙＡｂｔａｔｊｃｉｖｒｐｓａｉｎｌｓｓｔｏｏｈｅｅｍｉａｉｆｅｈｎｌｃｎｌｏｏｎｅｎｌｓａｄｒｎ．０ｍＬｏｗｏｂａｋｂｏｄｓｍｐｅｘｄｗｉｔａｏ，－ｒｐｎｌａｏ。ｅｔｂｔｌｃｈｌｔｒａｔｎａｄａｄ０５ｆｔｌｎｌｏａｌｓｍｉｅｔｅｈｎｌ１ｐｏａｏ，ａｉｈ
进行分析，内标法以醇类对内标物的峰面积比进行定量。在０１０．／０用．～４Ｏ０ｍｇ１０ｍＬ范围内线性良好，出限为检０１ｍｇ１０ｍＬ．／０。结论顶空气相色谱内标法直接顶空进样，受进样误差干扰，不结果稳定，作方便，析时间短、操分
ｎｌｆｂｏｄｗｉｈｉｔｒｅｅｃｏｏｅｔｇｔｂｒｓｎｅｎｔｅｓｍｐｅｎｃｉｖｄｂｓｌｅｓｐｒ — ｏｌｏｔｔｅｍａｎｉｅｆｒｎｅｃｍｐｎｎｓｍｉｈｅｐｅｅｔｄｉｈａｌｓａｄａｈｅｅａｅｉｅａａｏｈｎｎｔｎＥｔａｏ，－ｒｐｎｌｔｒ－ｕｙｌｏｏｆｂａｋｂｏｄｓｍｐｅｒｏｔａｔｄｒｓｅｔｅｙＲｅｕｔＴｈＧＣｉ．ｈｎｌ１ｐｏａｏ，ｅｔｂｔｌａｃｈｌｏｌｎｌｏａｌｓｗｅｅｃｎｒｓｅｅｐｃｉｌ．ｓｌｓｏｖｅＨＳ（ｎｅｎｌｔｎａｄｍｅｈｄｏｋｔｅｈｇｏａｉｔｆａｃｈｌａｄｔｒ— ｕｙｌｏｏｓｉｔｒａｔｎａｄ，ｎｓｄｉｔｒａａｄｒｔｏ）ｔｏｈｉｈｖｌｔｉｏｌｏｏｓｎｅｔｂｔｌａｃｈｌｎｅｎｌｓａｄｒａｄｕｅｓｌｙａＨＳＧＣ。ｅｅｔｒｏｌｍｅｉｎｚｔｎｔｏｔｅｔｓ．ｍｐｒｄｗｉｈｌｏｏｓｓａｄｒａｌｓｏｅａｉｇｐｒｌｌｄｔｃｏｆｆａｏｉａｉｏｄｈｅｔＣｏａｅｔｔｅａｃｈｌｔｎａｄｓｍｐｅｐｒｔａａｌｌｏｈｎｅｙ，ｔｅｒｔｎｉｎｔｍｅｗａｓｄａａｉｎａｄｔｅｑａｔａｉｅｏｅｋａｅｓｕｅｏａａｙｅａｃｈｌ．ｅｉｔｒａｈｅｅｔｏｉｓｕｅｓｒｔｎｈｕｎｉｔｆｐａｒａｗａｓｄｔｎｌｚｌｏｏｓＴｈｎｅｎｌｏｔｖｓａｄｒｔｏｓｕｅｏｅｋａｅｆｉｔｒａｓａｄｒｔｏ．ｏｉｅｒｔｆａｃｈｌｓｄｔｃｅｔｉｔｎａｄｍｅｈｄｗａｓｄｆｒｐａｒａｏｎｅｎｌｔｎａｄｍｅｈｄＧｏｄｌａｉｙｏｌｏｏｓｗａｅｅｔｄｗｉｎｎｈ

顶空气相色谱法检验血液中乙醇含量

顶空气相色谱法检验血液中乙醇含量作者：张滢刘阳来源：《中国科技纵横》2014年第16期【摘要】本文采用顶空进样方法，通过改进色谱条件，改进数据处理方式，从而建立一个改进的血液中乙醇的检验方法，以获得更好的分离效果和线性关系，解决实际应用中存在的同一个样品无法重复进样，标样存储和取用的问题。

【关键词】内标曲线法顶空气相色谱血液中乙醇相对标准偏差乙醇广泛存在于日常饮用的各种饮品中，可以说是涉及人数最多、应用范围最广、滥用程度最高的一种毒（药）物。

长期过量饮酒或慢性酒精中毒可诱发或导致心脑血管疾病、消化系统疾病、精神障碍等多种疾病，甚至导致死亡。

饮酒后人的中枢神经活动会变得迟钝，致使手足活动迟缓、生理机能减退、视力听力等感知能力降低，还会导致行为异常，从而发生意外甚至犯罪，比如车祸、吸入呕吐物窒息而死、酒后肇事等[1]。

酒后驾驶更是一直以来困扰我们的世界性的社会问题，是造成交通肇事的主要原因[2]。

血液中乙醇含量（blood alcohol concentration，BAC）的检验在判定饮酒后驾车、饮酒后违法犯罪、饮酒中毒死亡等案事件中起到十分重要的作用。

现阶段对于血中乙醇含量的检测方法主要有化学法、光谱法、电池法、酶学法和气相色谱法[3，4]。

其中顶空气相色谱法（HS/GC）具有分离效率高、检测灵敏度高、分析速度快、准确度较高、精密度高、杂质干扰少等诸多优点[5、6]，因而在BAC的测定中得到广泛应用。

但是在实际应用中我们发现，实验过程往往受到同一个样品无法重复进样的问题，标样的储存和取用问题的困扰。

因此，本文着重从上述三个问题入手，力争可以解决实际操作过程中遇到的这些问题。

1 实验部分1.1 仪器与试剂药品试剂：无水乙醇（Sigma-aldrich，色谱纯），叔丁醇（Fluka，色谱纯）。

仪器设备：顶空进样器（Agilent 7894E Headspace Sampler）；气相色谱仪（Agilent 6890N GC），GILSON活塞排代式移液器（M1000型），GILSON空气排代式移液器（P100型）。

顶空气相色谱法测定血中乙醇含量不确定度分析

顶空气相色谱法测定血中乙醇含量不确定度分析何文芬;金广庆【摘要】Objective To establish a method for evaluation of uncertainty in determination of ethanol in blood by headspace gas chromatography coupled with flame ionization detector (HS-GC-FID). Methods The concentration of ethanol in blood sample was analyzed by HS-GC-FID. According to the relevant documents for uncertainty evaluation, sources of uncertainty were analyzed, followed by calculation of component factors, combined standard uncertainty (Uc) and expanded uncertainty (Ur). Results The standard uncertainties caused by random effects, balance, purity of the standard, flask, pipet and used standard curves were respective as 7.892×10-3(U1), 1.053×10-4(U2), 1.290×10-3(U3), 1.290×10-4(U4), 2.887×10-3(U5) and 7.069×10-3(U6). On the basis of the data ofU1~U6, the combined standard uncertainty (Uc=0.0111) and expanded uncertainty (Ur=0.0222) were obtained. Conclusions The uncertainty in the measurement of ethanol in blood derives mainly from parallel measuring error and importation of standard curves.%目的：对使用顶空气相色谱法测定血液中乙醇含量的方法进行不确定度分析。

顶空气相色谱内标法测定血液中乙醇含量

【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】ｅｔｈａｎｏｌ；ａｕｔｏ－ｈｅａｄｓｐａｃｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄ
血液中乙醇含量的检测是法医鉴定和临床诊断的常规检测项目。目前国内常用的方法主要有气相色谱法、干化学法、速率法等，其中干化学法、速率法影响因素较多，结果不稳定［１］。气相色谱法是《中华人民共和国公共安全行业标准》（ＧＡ／Ｔ１０５－１９９５）中规定的检测方法。本文采用ＧＡ／Ｔ１０５－１９９５中要求的气相色谱法，采用样品直接顶空进样，中等极性的毛细管气相色谱柱分离，叔丁醇作为内标物。顶空气相色谱（内标法）优化了顶空进样器和气相色谱仪的各项工作参数，以期建立一种快速简便、高效准确的分析方法，适用于批量样品的测定。１材料与方法１．１仪器与试剂（１）仪器。７８９０Ｎ型气相色谱仪（美国Ａｇ－ｉｌｅｎｔ公司）；氢火焰离子化检测器（ＦＩＤ）；色谱柱：柱长３０ｍ，内径０．５３ｍｍ，液膜厚１μｍ；具有中文软件操作的化学工作站；７６９４Ｅ型顶空进样器（美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；２０ｍＬ顶空瓶及配套瓶盖。（２）试剂。标准物质：乙醇、正丙醇、叔丁醇均为分析纯；其中叔丁醇用作为内标，使用前均配成１ｍｇ／ｍＬ的工作液
计算式中Ｗ１、Ｗ２为２份检材平行定量测定的结果，Ｗ为２份检材平均值。１．４．２将检测的蜂面积代入公式计算２结果２．１乙醇、正丙醇、叔丁醇的保留时间分别为１．２７、１．６９、２．２３ｍｉｎ。２．２取３种不同浓度的标准溶液（２０、８０、４００ｍｇ／ｍＬ）进行分析，在０．０～４００．０ｍｇ／１００ｍＬ乙醇浓度范围内线性良好。根据３倍基线噪声所对应的标准物质的浓度，计算出该方法的检出限为０．１ｍｇ／１００ｍＬ。２．３取混合的血样进行加标回收试验。加入的乙醇浓度为８０ｍｇ／ｍＬ。每份血样分装成４份平行样品，其中１份用以测定样品的本底值，其余３份加入乙醇标准溶液后进行测定，计算其加标回收率为９８．５％，回收率良好。［３－４］２．４取１ｍｇ／ｍＬ的乙醇、叔丁醇混合标准溶液，加入１０个检测瓶，连续测定１０次，以乙醇、叔丁醇的峰面积分别计算标准差和变异系数，乙醇、叔丁醇的变异系数分别２．５６％、２．７４％。在本精密度试验中得到的值均小于１０％，查相关文献得知，精密度良好［５］。３讨论３．１柱温的选择柱温是影响气相色谱分离的重要因素之一。本实验在４０～８０ ℃范围内考察了柱温对分离的影响，并在不同柱温下，对和乙醇结构近似的常见低级醇类，如甲醇、异丙醇、正丙醇、叔丁醇配制了混合溶液进行了试验。结果表明，与乙醇最接近的峰为甲醇和异丙醇，因此以它们的分离情况作为考察指标，温度越高，乙醇与甲醇、异丙醇保留时间越接近，分离不好。进行多次研究发现，在作者设定的色谱条件下，４０ ℃时乙醇与甲醇和异丙醇的分离情况和峰形最好，其余物质，如正丙醇、叔丁醇亦不会产生干扰，因此试验最后选定柱温为４０ ℃。甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、叔丁醇的保留时间分别为１．００、１．２７、１．４９、１．６９、２．２３ｍｉｎ［６－７］。３．２内标物质的选择内标法可在一定程度上消除操作条件

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司法鉴定技术规范
SF/Z JD0107001——2016
血液中乙醇的测定
顶空气相色谱法
中华人民共和国司法部司法鉴定管理局发布
目次
前言 (I)
1 范围 (1)
2 规范性引用文件 (1)
3 原理 (1)
4 试剂和材料 (1)
5 仪器 (1)
6 测定步骤 (2)
7 结果计算 (3)
附录A （资料性附录）乙醇对照品和内标气相色谱图 (4)
附录B （资料性附录）校准曲线 (5)
前言
本技术规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。

本技术规范的附录A和附录B为资料性附录。

本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出。

本技术规范由司法部司法鉴定管理局归口。

本技术规范起草单位：司法部司法鉴定科学技术研究所。

本技术规范主要起草人：卓先义、刘伟、向平、沈保华、卜俊、马栋、严慧。

本技术规范所代替规范的历次版本发布情况为：SF/Z JD0107001——2010。

血液中乙醇的测定
顶空气相色谱法
1 范围
本技术规范规定了血液中乙醇的顶空气相色谱测定方法。

本技术规范适用于血液中乙醇的定性及定量分析。

本技术规范的方法检出限为0.01mg/mL；定量下限为0.05mg/mL。

2 规范性引用文件
下列文件对于本技术规范的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本技术规范。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本技术规范。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD）
GA/T 122 毒物分析名词术语
3 原理
本法利用乙醇的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测，经与平行操作的乙醇对照品比较，以保留时间进行定性分析；以峰面积为依据，用内标法定量。

4 试剂和材料
除另有说明外，水为GB/T 6682规定的二级水。

4.1 乙醇
色谱纯。

4.2 乙醇标准溶液
精密称取适量乙醇，用水配成10.0mg/mL乙醇标准储备溶液。

储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6个月。

试验中所用其它浓度的标准溶液均从上述储备液稀释而得，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为3个月。

4.3 叔丁醇
色谱纯。

4.4 叔丁醇溶液
精密称取适量叔丁醇，用水配成5.0mg/mL叔丁醇储备液。

储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为12个月。

将储备液用水稀释，得40.0μg/mL叔丁醇内标工作液，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6个月。

5 仪器
5.1 气相色谱仪
配火焰离子化检测器（FID）。

5.2 顶空进样器
配1mL定量进样环。

5.3 样品瓶
10mL，顶空自动进样器用。

5.4 硅橡胶垫
5.5 铝帽
5.6 密封钳
5.7 精密移液器
5.8 自动稀释仪
6 测定步骤
6.1 样品处理
用精密移液器或自动稀释仪取待测血液0.10 mL及0.50 mL 40.0μg/mL 叔丁醇内标工作液，加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀。

6.2 测定
6.2.1 顶空气相色谱测定参考条件
a）色谱柱（1）：DB-ALC1（30m⨯0.32mm⨯1.8μm）石英毛细管柱或相当者；
柱温：恒温40︒C；
色谱柱（2）：DB-ALC2（30m⨯0.32mm⨯1.2μm）石英毛细管柱或相当者；
柱温：恒温40︒C；
b）载气：氮气，纯度≥99.999%，流速8mL/min；
c）进样口温度：150︒C；
d）检测器温度：250︒C；
e）加热箱温度：65︒C；
f）定量环温度：105︒C；
g）传输线温度：110︒C；
h）气相循环时间：3.5min；
i）样品瓶加热平衡时间：10.0min；
j）样品瓶加压时间：0.10min；
k）定量环充满时间：0.10min；
l）定量环平衡时间：0.05min；
m）进样时间：1.00min。

6.2.2 定性测定
样品溶液按照顶空气相色谱测定条件测定，以叔丁醇为内标，记录色谱峰的保留时间。

将待测样品色谱峰的保留时间与乙醇标准对照品的保留时间比较，相对误差在±2%内，空白对照样品内标物色谱峰正常而无乙醇的色谱峰，一般可以认为待测样品中含有乙醇；必要时，选择不同的色谱条件或用气相色
谱-质谱法确证。

如果内标物色谱峰正常，而无乙醇的色谱峰时，可认为检验结果为阴性。

乙醇对照品和内标气相色谱图，参见附录A。

6.2.3 定量测定
本方法采用内标法－校准曲线法或内标法－单点校正法定量测定。

6.2.3.1 内标法－校准曲线法
采用内标-校准曲线法测定（见附录B）。

将乙醇对照品溶液进样，以乙醇和内标峰面积比为纵坐标，乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线，用标准曲线对待测样品进行定量，所测样品中乙醇的浓度值应在线性范围内。

6.2.3.2 内标法－单点校正法
待测血液样品乙醇浓度在标准溶液浓度的±30%内可用单点法定量。

6.3 平行试验
按以上步骤对同一待测样品进行平行试验。

单柱单检测器两份样品测定结果按两份样品的平均值计算，双样相对相差不得超过10％（有凝血块的血样不超过15％）。

双样相对相差按式（1）计算：
| C1 - C2|
双样相对相差（%）= −−−−−⨯ 100 (1)
⎺C
式中：
C1、C2−−两份样品平行定量测定的结果；
⎺C −−两份样品平行定量测定结果的平均值(C1+C2)/2。

双柱双检测器两份样品测定结果的相对标准偏差RSD（%）若不超过5％时（有凝血块的血样不超过10%），结果按两份样品结果的平均值计算。

7 结果计算
血液中乙醇浓度测定采用内标法－校准曲线法定量或按式(2)计算：
A⨯ A i′⨯c
C = −−−−−− (2)
A′⨯A i
式中：
C−−血液样品中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；
A−−血液样品中乙醇的峰面积；
A′−−标准溶液中乙醇的峰面积；
A i′−−标准溶液中内标物的峰面积；
A i−−血液样品中内标物的峰面积；
c−−标准溶液中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)。

附录A
（资料性附录）
乙醇对照品和内标气相色谱图
A.1 按色谱柱（1）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图A.1。

图A.1 按色谱柱（1）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图A.2 按色谱柱（2）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图A.2。

图A.2 按色谱柱（2）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图
附录B
（资料性附录）
校准曲线
配制乙醇浓度为0.10、0.20、0.50、0.80、1.00、2.00、3.00mg/mL的水溶液，按6.1和6.2项下分析，每一浓度点取2份，以乙醇与内标叔丁醇的峰面积比对乙醇浓度做标准曲线。

按色谱柱（1）条件测得的标准曲线方程为X = 1.0761 C - 0.0162（r = 0.9997），按色谱柱（2）条件测得的标准曲线方程为X = 1.0655 C - 0.0177（r = 0.9997）。

式中X为乙醇与叔丁醇的峰面积比值，C 为乙醇工作溶液浓度(mg/mL)。