马波沙星的致突变性和致畸性研究

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畜牧兽医学报
34 卷
阴性 对 照组 以 及阳 性 对照 组母 鼠 的 受孕 率 均 为 50% ~ 100% 之间, 且各组间母鼠受孕率无显著差异 ( P > 0 05) 。从孕鼠的平均着床数来看, 试验各组 孕鼠的平均着床数在 8 8~ 12 1 之间, 各组每批孕 鼠的平均着床数无明显差异( P > 0 05) 。试验结果 表明, 马波沙星对小鼠受孕率无明显影响。 2 4 2 胎鼠检查: 各试验组小鼠的平均活胎数、平 均死胎数、有一个以上死胎的孕鼠率及显性致死率 见表 2。除阳性对照组第 1 批、第 2 批和第 3 批孕 鼠的平均活胎数和平均死胎数与阴性对照组比较差 异显著( P< 0 01 或 P < 0 05) 外, 各试验组每批孕
摘 要: 选用 W istar 大鼠和昆明系 小鼠对马波沙星的遗传毒性进 行研究。试 验结果 显示, 马波沙 星在抑 菌剂量 之
下对鼠伤寒沙 门氏菌不产生致突变作用; 马波沙星不 引起小 鼠骨髓 有微核多 染红细 胞率增 加; 马 波沙星 不引起 雄
性小鼠生殖细 胞染色体畸变而造成的早期胚胎死亡; 20 mg/ kg b. w. 和 100 mg/ kg b. w . 剂 量马波沙 星对母鼠的 生
626 0 67 7 857 3 51 0 281 7 31 0 652 3 164 2 764 7 72 2 787 0 140 7 1067 0 132 6 604 7 40 6
2 3 微核试验 125、250 和 500 mg / kg b. w . 剂
量马波沙星组 小鼠 有微 核多 染红 细 胞( M NPCE )
1 材料与方法
1 1 材料 马波沙星, 含量 98% 以上, 由广东海康 兽药有
限公司提供。昆明系小鼠和 Wistar 大鼠, 分别从中 国军事医学科学院实验动物中心和北京医科大学实 验动物部购入。小鼠和大鼠全价颗粒饲料, 从中国 军事医学科学院实验动物中心购入。菌种由 Ames
收稿日期: 2002-02-25 作者简介: 沈建忠( 1963- ) , 博士, 教授, 主要从事兽医药理与毒理学 方面的研究。
P CE 率无明显差别。阳性对照组小 鼠 M NPCE 率
为 34 4 5 3 ( 雌) 、30 8 2 4 ( 雄) , 极 显著地高于各剂量马波沙星组和阴性对照组( P < 0 01) 。试验各组小 鼠的多 染红细 胞和正 染红 细胞 比 例 ( PCE / NCE ) 为 1 56 ~ 1 63, 其 P CE/ NCE 比例均大 于 0 1。试 验结 果表 明, 马波 沙星 不引起小鼠骨髓 M NPCE 率增高。 2 4 显性致死试验 2 4 1 受孕率和平均着床数: 各剂量马波沙星组、
- S9 Inhibitio n
+ S9 Inhibit ion
- S9 I nhibition
+ S9 Inh ib it ion
- S9 In hib it ion
+ S9 In hib it ion
05 g 0 25 g
135. 0 11. 0 135. 0 15. 1 36. 3 5 5 126 3 10 8 137 7 11 4 32 3 3 2
表 1 马波沙星诱变检测 菌株回复突变数 Table 1 Mutations in test strains induced by marbof loxacin( X SD)
剂量/ 皿
T A97
T A 98
TA 100
T A102
Dose/ dish
- S9
1g
In hib it ion
+ S9 In hi bit ion
127 0
AY ( 5 g)
14 4 128 7 12 5 134 7
17 5 129 7
2AF (5 g)
18 9 34 0 5 6 14 5 34 7 4 0
15 5 33 3 4 2
4N Q 0 ( 5 g)
36 0 5 3 34 0 3 6
37 7 6 7
2A F ( 5 g)
144 3 154 7
畜牧兽医学报, 2003, 34( 3) , 304- 308
A cta V eteri nar ia et Zootechnica Si nica
马波沙星的致突变性和致畸性研究
沈建玲2
( 1 中国农业大学动物医学院, 北京 100094; 2 北京医科大学, 北京 100094)
及有一个以上死胎的孕鼠率和显性致死率, 并用 检验、t 检验和负二项统计模型进行统计分析。 1 2 5 致畸试验[ 6, 10] : 取 3~ 4 月龄 150 只 Wist ar 大鼠( 雌鼠 100 只, 雄鼠 50 只) 随机分成 5 组, 每组 雌鼠 20 只, 雄鼠 10 只, 即高、中和低剂量( 500、100 和 20 mg/ kg b. w. ) 马波沙星组、阳性( 环磷酰胺) 对 照组和阴性( 0 05% 羧甲基纤维素钠) 对照组。各组 同笼过 夜交配, 于 妊娠第 7~ 15 d, 各剂 量组 按 1 mg/ 100g b. w . 灌服含一定浓度受试物的 0 05% 羧 甲基纤维素钠混悬液, 每日 1 次; 阴性对照组灌服等 量的 0 05% 羧甲基纤维素钠溶液, 阳性对照组腹腔
167 7
N aN3 ( 5 g)
17 4 155 0 27 5 162 0
17 0 172 7
2AF ( 5 g)
8 7 292 7 12 2 300 0
17 6 267 7
MMC ( 5 g)
25 1 291 3 16 1 295 7
30 7 283 7
2AF ( 5 g)
14 6 33 3
17 1
文献标识码: A
文章编号 : 0366- 6964( 2003) 03- 0304- 05
马波沙星是一种动物专用 的氟喹诺酮类 抗菌 药, 由美国罗氏公司研制并于 1995 年首次在美国上 市, 目前 FDA 批准该 产品用于 犬、猫等 伴侣动物。 马波沙星抗菌谱广, 抗菌活性强, 内服和注射给药后 吸收快且完全, 体内分布广, 生物利用度高, 尤其在 牛、羊等反刍动物, 其内服和注射的生物利用度远高 于 恩 诺 沙 星、单 诺 沙 星 等 其 他 氟 喹 诺 酮 类 药 物[ 1~ 3] 。马波 沙 星是 一种 可 用于 防治 犬、猫、牛、 羊、猪细菌性感染的抗菌药物[ 1~ 5] 。但是一种药物 开发用于食品动物, 其安全评价结果十分重要。据 报道[ 5] , 培氟沙星可引起精子畸变率增高和睾丸萎 缩, 氧氟沙星能引起哺乳动物胎儿死亡率增加, 这些 提示人们对氟喹诺酮类药物的安全性要引起重视。 到目前为止, 有关马波沙星致突变性和致畸性方面 的研究报道很少, 本文选择 Ames 试验、微核试验、 显性致死试验和致畸试验, 研究马波沙星的致突变 性和生殖毒性, 旨在确定是否存在遗传毒性, 为能否 在临床上使用该药提供毒理学科学依据。
殖机 能和胎鼠的生长发育无明显影响, 对胎鼠不产 生致畸 作用, 500 mg / kg b. w . 剂量马 波沙星对 胎鼠体 长和骨 骼
发育有一定影响, 但不存在剂量反应关系。上述结果表明 , 马波沙星无明显的致突变性和致畸性。
关键词: 马波沙星; 大鼠; 小鼠; 致突变性; 致畸性
中图分类号: S859. 79
注射环磷 酰胺( 10 mg/ kg b. w. ) , 每日 1 次。妊娠 第 20 d 时处死大鼠, 剖腹取出子宫, 进行检查。根 据检查结果, 计算活胎率、死胎率、吸收胎率、畸胎出 现率和母体畸形率, 并用方差分析进行统计分析。
2 结果与分析
2 1 急性毒性 给大鼠和小鼠灌服马波沙星后, 动 物出现轻微中毒症状, 表现为精神沉郁, 食欲减退, 但未出现死亡。马波沙星对 Wistar 大鼠口服 LD50 大于5 000 mg/ kg b. w . , 对昆明系小鼠口服 LD50为 1 000 mg/ kg b. w. , L D50的 95% 可信限为 776 2~ 1288 2 mg/ kg b. w . 2 2 Ames 试验 马波 沙星对鼠 伤寒沙门 氏菌回 复突变试验结果见表 1。由表 1 可见, 每皿中马波 沙星的剂 量在 1 g 时有抑 菌现象。每皿 在 0 05 ~ 0 5 g 剂 量范围 内, 各剂量 组在加 或不加 代谢 活化系统( S9) 时, 4 种试验菌株每皿平均回复突变 菌落数均在溶剂对照组平均回复突变 菌落数的两 倍以内, 且未见阳性 的剂量- 反应关系。阳 性对照 组的平均 回复突 变菌落 数剧增, 呈 明显 的阳 性反 应。试验结果 表明, 马 波沙 星对鼠 伤寒 沙门 氏菌 无致突变作用。
实验室提供, - 80 下保存。 1 2 方法 1 2 1 大、小鼠急性毒性试验: 根据预备试验结果, 选取 30 只 Wist ar 大鼠 ( 体 重 180~ 220 g, 雌 雄各 半) 和 72 只昆明系小鼠( 体重 18~ 22 g, 雌雄各半) , 用 0 05% 羧甲基纤维素钠配制成马波沙星混悬液, 按 1 ml/ 100 g b. w . ( 大鼠) 和 0 1 ml/ 10 g b. w ( 小 鼠) 比例灌胃给药。观察动物的中毒症状, 记录死亡 数, 用寇氏法计算半数致死量。 1 2 2 艾姆斯( A mes) 试验[ 6, 7] : 选取鼠伤寒沙门氏 菌 T A97、T A98、T A100 和 T A102 等 4 种菌株进行 基因型鉴定( 组氨酸需求试验、结晶紫抑制试验、抗 氨苄青霉素、抗四环素试验和紫外线敏感试验) 和自 发回复突变试验。用雄性 Wistar 大鼠肝匀浆 S9 作 为代谢活化物, 以二甲基亚砜( DMSO) 作为溶剂对 照, 每皿分别设 0 05、0 1、0 25、0 5 和 1 g 剂量受 试物进行标准平皿掺入试验。每个剂量设 3 个平行 平皿, 并重复 1 次。同时, 设溶剂对照和阳性诱变物 [ 吖啶 黄( AY) 、4- 硝基喹啉- N- 氧化物 ( 4- NQO) 、叠 氮 钠 ( NaN3 ) 、丝 裂 霉 素 C ( MM C ) 和 2- 氨 基 芴 ( 2AF) ] 对照。 1 2 3 微核试验[ 6, 7] : 取昆明系小鼠 50 只( 体重 20 ~ 25 g ) 随机分成 5 组, 每组 10 只, 雌雄各半, 即高、 中和低剂 量( 500、250 和 125 mg / kg b. w . ) 马波沙 星组, 阴性( 0 05% 羧甲基纤维素钠) 对照组和阳性 ( 环磷酰胺, CP) 对照组。采用一次 灌胃给药, 于给 药后 24 h, 断髓处死小鼠, 进行微核检查。计算有微 核多染红细胞( M NPCE) 率。同时计数多染红细胞 ( PCE) 和 正 染红 细 胞 ( NCE ) 的比 例。用 Kaslen-