茭白总蛋白质双向电泳技术体系的建立

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卷柏总蛋白质提取方法及双向电泳条件的建立_魏琳

567!C*? 等电聚焦仪及附件、 GAA+. >9IEB<J 垂直电泳系统及附
件、循环水浴等购自 9’=?BC+ 6C+?’+&<+ 公司。
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二维凝胶电泳分析
脱色后的双向电泳凝用扫描仪
5’+,=:&+..=? 扫描并数字化，再用图像分析软件 H=-+.<=) 对数
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蛋白质组双向电泳原理及实验步骤ppt课件.ppt

中国历史上吸烟的历史和现状、所采取的措施以及由此带来的痛苦和灾难，可以进一步了解吸烟对人民健康的危害，提高师生的控烟意识
• 最高电压10,000 V • 10–25C 温度控制 • 7, 11, 17, 18, 和 24 cm的聚
焦盘，可以各放12根胶条 • 可以储存10个程序，每个程序有
中国历史上吸烟的历史和现状、所采取的措施以及由此带来的痛苦和灾难，可以进一步了解吸烟对人民健康的危害，提高师生的控烟意识
实验操作
Method
原理
Theory
应用
Application
中国历史上吸烟的历史和现状、所采取的措施以及由此带来的痛苦和灾难，可以进一步了解吸烟对人民健康的危害，提高师生的控烟意识
中国历史上吸烟的历史和现状、所采取的措施以及由此带来的痛苦和灾难，可以进一步了解吸烟对人民健康的危害，提高师生的控烟意识
二维SDS-PAGE
• 同普通SDS-PAGE类似。
• 但一般在垂直电泳系统中无需浓缩胶，因为在IPG胶条中蛋白质区域已得到浓缩，可以认为非限制性IEF胶（低浓度丙烯酰胺胶）充当了浓缩胶。
l 设置等电聚焦时的温度。（17℃）
中国历史上吸烟的历史和现状、所采取的措施以及由此带来的痛苦和灾难，可以进一步了解吸烟对人民健康的危害，提高师生的控烟意识
配制SDS-PAGE凝胶
配制12%的丙烯酰胺凝胶，直接用双向电泳专用梳子；或在上部留0.5cm的空间，用MilliQ水、乙醇或水饱和正丁醇封胶。聚合30分钟。
第
一
向

粘虫中肠总蛋白质双向电泳体系的优化方法

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＥｎｔ粘虫中肠总蛋白质双向电泳体系的优化方法［Ｊ］．环境昆虫学报，２０１７，３９（３）：５４８— ５５５
７１２１００，ＳｈａａｎｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆａｒｍｙｗｏｒｍ（Ｍｙｔｈｉｍｎａｓｅｐａｒａｔａ）ｍｉｄｇｕｔｐｒｏｔｅｉｎｓａｆｔｅｒ
（Ｍｙｔｈｉｍｎａｓｅｐａｒａｔａ）ｍｉｄｇｕｔ
ＡＩＸｉａｎ — Ｌｏｎｇ，ＺＨＡＮＧＹａ — Ｌｉｎ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆ＦＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ
粘虫中肠总蛋白质双向电泳体系的优化方法
艾贤龙，张雅林
（西北农林科技大学植物保护学院，陕西杨凌７１２１００）
摘要：为了今后更好的利用双向电泳技术研究不同处理后粘虫Ｍｙｔｈｉｍｎａｓｅｐａｒａｔａ中肠蛋白表达差异，本研究比较了不同的蛋白提取方法、ＩＰＧ胶条、二硫苏糖醇（ＤＴＴ）浓度和等电聚焦条件，建立了适用于粘虫中肠总蛋白质的双向电泳体系。结果表明：采用Ｔｒｉｓ一饱和酚法提取蛋白质，选取ｐＨ为５—８的线性ＩＰＧ胶条进行第一向等电点分离，按照ＤＴＴ浓度Ｉ和等电聚焦程序ＩＩ进行双向电泳分离，获得了蛋白质点数多、背景清晰、分辨率高的蛋白质

豌豆白化苗蛋白质双向电泳技术的建立

豌豆白化苗蛋白质双向电泳技术的建立赵鑫;刘红霞;陈佰鸿;毕阳【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2010(000)010【摘要】以豌豆白化苗为试验材料.分析了不同的蛋白质提取时间(4 h、8 h及过夜)和蛋白质上样量(500、1 000、2 000μg)对双向电泳蛋白质得率和等电聚焦效果的影响.结果表明,不同的蛋白提取时间和蛋白上样量对等电聚焦效果影响较大.适宜的豌豆白化苗提取时间应至少长于8 h,最好提取过夜,能裂解得到大量蛋白质;适宜的豌豆白化苗蛋白上样量为1 000μg,此条件下,双向电泳的分辨率最高,分离出的蛋白大多为小分子量功能性蛋白.【总页数】4页(P100-103)【作者】赵鑫;刘红霞;陈佰鸿;毕阳【作者单位】中国农业科学院作物科学研究所,农业部作物遗传育种重点开放实验室,国家农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程,北京,100081;甘肃农业大学农学院,兰州,730070;甘肃农业大学农学院,兰州,730070;中国农业科学院作物科学研究所,农业部作物遗传育种重点开放实验室,国家农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程,北京,100081;中国农业科学院作物科学研究所,农业部作物遗传育种重点开放实验室,国家农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程,北京,100081【正文语种】中文【中图分类】S6【相关文献】1.山定子(Malus baccata Borkh.)根系蛋白质提取及双向电泳技术体系的建立 [J], 李丽杰;苏宏;马怀宇;吕德国2.甘草愈伤组织蛋白质组双向电泳技术的建立 [J], 曹君迈;张欣3.基于荧光标记的大黄鱼氧化肌肉蛋白质双向电泳技术的建立 [J], 李学鹏;周明言;渠宏雁;王金厢;朱文慧;徐永霞;仪淑敏;林洪;励建荣4.蚯蚓蛋白质组双向电泳技术体系的建立及条件优化 [J], 吴石金;赵士良;沈飞超;徐铭5.黄瓜雌花花冠蛋白质双向电泳技术体系的建立 [J], 路曼;宋晓飞;李晓丽;孙成振;闫立英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

双向电泳技术在植物蛋白质组学研究中的应用

双向电泳技术在植物蛋白质组学研究中的应用陈小洁;铁双贵;岳润清【摘要】从双向电泳的历史、原理、操作步骤及其在植物蛋白质组学研究中的应用等几方面进行综合阐述,最后提出双向电泳技术中存在的一些问题,并展望了其在植物蛋白质组学研究中的未来应用前景。

%In this paper,it summarized two-dimensional gel electrophoresis from the history,procedure,operating principle and the application in plant proteomics research,finally proposed some problems existing in the two-dimensional gel electrophoresis and prospected its future application prospect of the plant proteomics research.【期刊名称】《现代农业科技》【年(卷),期】2012(000)020【总页数】2页(P13-14)【关键词】蛋白质组学;双向电泳技术;植物【作者】陈小洁;铁双贵;岳润清【作者单位】河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007;河南省农业科学院粮食作物所;河南省农业科学院粮食作物所【正文语种】中文【中图分类】Q75;Q945.7研究表明遗传信息通过基因携带，但基因结构的相对稳定性、数量的有限性，与生命现象的多变性、复杂性存在明显的差异[1]。

为此，研究认为在所有生物体的细胞、组织、细胞器中，各种代谢反应、生理功能的维持均由各组成部分的表面、内部的蛋白质来完成。

蛋白质组是Wilkin S等在1994年第1次提出的。

1997年蛋白质组的定义被其创造者重申为：“蛋白质组指的是一个基因组所表达的蛋白质。

”2000年人类基因组序列草图的完成标志着“后基因组时代”的到来。

茭白茎部膨大前后应激响应的蛋白质组分析

茭白茎部膨大前后应激响应的蛋白质组分析茭白为多年生水生宿根草本植物,主要分布于亚洲东部,在我国有大量栽培,是国内第二大水生蔬菜,深受人们喜爱。

茭白肉质茎的形成与菰黑粉菌侵染密切相关。

茭白肉质茎的膨大过程是菰黑粉菌侵染茭白植株,并在其中生长从而诱发茭白植株产生系列应激响应的过程。

本研究显微观察和比较了菰黑粉菌在正常茭白(龙茭2号和梭子茭)与雄茭不同发育时期茎部组织中侵染分布情况,并采用蛋白双向电泳(two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE)和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laserdesorption/ionization time-of-flight/time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-TOF MS)等技术筛选鉴定了茭白茎部膨大前后的差异蛋白,初步分析了茭白茎部膨大可能的应激响应机制。

一、茭白茎部膨大前后菰黑粉菌侵染分布差异分析雄茭与正常茭白茎部的显微观察发现:雄茭中未检测到菰黑粉菌存在;正常茭白5叶期时茎部已经有菰黑粉菌存在,并以少量的小菌丝簇的形式分布于茭白茎部生长点附近;8叶期时茭白薄壁组织中小菌丝簇数量增多,维管束内菌丝数量明显增加,菰黑粉菌沿着维管束轴向生长;菰黑粉菌在膨大初期的茭白茎部中大量增殖并在维管束周围形成网状结构,而茎部薄壁组织中散布有大量大小不等的菌丝簇。

二、正常茭白茎部膨大前后的差异蛋白的筛选鉴定通过蛋白双向电泳技术对正常茭白与雄茭不同时期(5叶期、8叶期与膨大初期)茎部蛋白质组进行比较分析,筛选获得120个差异蛋白,质谱成功鉴定90个。

根据差异蛋白的功能预测将它们分为7类:23个蛋白与转录与翻译相关,18个蛋白涉及糖类合成代谢,9个蛋白与脂肪酸合成代谢相关,15个蛋白与植物抗逆相关,5个蛋白与细胞分裂相关,9个蛋白参与蛋白酶体泛素途径,5个蛋白与能量合成代谢有关,6个蛋白为其他功能与未知功能。

简述双向电泳技术分离蛋白质的基本技术流程

简述双向电泳技术分离蛋白质的基本技术流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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适于茭白茎部蛋白质组分析的双向电泳技术体系的建立

关键词：白；向电泳；白质组茭双蛋中图分类号：６５２Ｑ８￥４．；１文献标识码：Ａ文章编号：０４—１２（００００８ — ６１０５４２１）３— ２１０
Ａｗｏ— ｍｅｉｎｌｅｅｔｏｈｏｅｉｏｏｏｕｔｂｌｏｒｔｏｃｓｕｄｆｓｅｔｄｉｎｓｏａｌｃｒｐｒｓｓｐｒｔｃｌｓｉａｅｆｒｐｏｅｍｉｔｙｏｔｍ
ｔｎｅｏ２ｎａｄｔｅｎｍｂｒｏｒｃｐｔｔｎｔｎｒａｅｏ４ｏｅｄｄｔ０ｍｉｎｈｕｅｆｐｅｉｉｉｉａｏｍｅｉｃｅｓｄｔｒ５，ｍｅｎｈｌａｗｉｅ，ｌｓｔｓａｓｏｄｎｅ．ｙａｅｗａｌｏｃｎｅｓｄ
向聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法。结果表明：应川 ¨ 氯乙酸（Ｃ一丙酮沉淀法在研磨时加入聚乙烯吡咯烷二ＴＡ）酮（Ｖ）适当增加离心、ＰＰ，沉淀的次数和时】外捉高裂解浓度，以得到浓度较高，，可质量较好的蛋白质样品；在蛋白含量测定中减少误差，２Ｄ ‘ ｆｆ艟的多少、对－Ｅ力法ｔ，等电聚焦的程序进行优化，比较并选择染色方法，最终得到蛋白质点数目多，背景清晰，条纹较少，拖尾现象明显的电泳图谱。
浙江农业学报ＡｔｇｉｈｒｅＺｅａｇｎｉ２（）２１８２１ｃＡｒｕｕａｈｉｅｓ２３：８ —２６，００ａｃｊｎｓ
适于茭白茎部蛋白质组分析的双向电泳技术体系的建立

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量、１２ｄＬ的凝胶浓度、考马斯亮蓝Ｇ一２５０胶体考染法染色，最终可获得蛋白质点较多，背景清
晰，分辨率较高的２一ＤＥ图谱，为进一步开展茭白差异蛋白质组学研究奠定了基础。
关键词：茭白；蛋白质组学；双向电泳
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＦｏｏｄ，ＺｈｅｊｉａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｎｉｎｇｂｏ３１５１００，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｃｈｉｎａ；３．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ＆ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＷａｎｌｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｂｏ３１５１００，Ｃｈｉｎａ）
２１００９５；浙江万里学院生物与环境学院，浙汀波３１５１００）
摘要：为建立茭白总蛋白质双向电泳技术体系，研究了ＴＣＡ／丙酮沉淀法和改良酚抽法两种不同
总蛋白质提取方法、蛋白质上样量、ｐＨ值范围及凝胶质量浓度等条件对２一ＤＥ的影响。结果表明，改良酚抽法更适合茭白总蛋白质的提取，采用１７ｅｍ、ｐＨ４７的胶条、１．０ｍｇ的蛋白质上样
ＴＣＡ／ａｃｅｔｏｎｅｐｒｏｔｏｃｏ１．Ａｎｄａｈｉｇｈｑｕａｌｉｔｙ２－ＤＥｍａｐｗｉｔｈｍｏｒｅｐｒｏｔｅｉｎｓｐｏｔｓ，ｃｌｅａｒｂａｃｋｇｒｏｕｎｄａｎｄｈｉｇｈｐｒｏｔｅｉｎｐｏｉｎｔｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｕｓｉｎｇｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇｏｐｔｉｍｉｚｅｄｐｒｏｃｅｄｕｍｌｉａ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ，ｌｏａｄｉｎｇａｍｏｕｎｔ，ｐＨｒａｎｇｅｓｏｆＩＰＧｓｔｒｉｐａｎｄｇｅｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｅｔｃ．ｏｎ２－ＤＥｍａｐｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｏｄｉｉｅｆｄｐｈｅｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌｉｓｍｏｒｅｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｏｔａｌｐｒｏｔｅｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＺ．１ａｔｉｆｏｌｉａｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈ
茭白总蛋白质双向电泳技术体系的建立
罗海波一，陈伟。，周静峰，宋慧波，郁志芳
（１．浙汀医药高等专科学校生物食品系，浙江宁波３１５１００；２．南京农业大学食品科技学院，江苏南京
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｔｗｏ — ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（２一ＤＥ）ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆＺｉｚａｎｉａ
中图分类号：Ｑ８１文献标志码：Ａ文章编号：ｌ６７３ —１６８９（２０１３）０６ —０５８１ —０５
ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＴｗｏ－ＤｉｍｅｎｓｉｏｎａｌＥｌｅｃｔｒ０ｐｈ０ｒｅｓｉｓＣｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒＰｒｏｔｅｏｍｉｃ
ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＺｉｚａｎｉａｌａｔｉｆｏｌｉａ
ＬＵＯＨａｉ — ｂｏ一，ＣＨＥＮＷｅｉ，ＺＨＯＵＪｉｎｇ－ｆｅｎｇ，ＳＯＮＧＨｕｉ — ｂｏ，ＹＵＺｈｉ－ｆａｎｇ＊