石榴皮水提物的镇痛实验研究
石榴皮单宁的提取及抑菌效果研究
10、5、2.5、1.25、0.625、0.312 mg/mL 的溶液，每个浓
度的单宁溶液各取 1 mL 于不同平板中，加入 15 mL
已灭菌并冷却到 50 益的固体培养基，混匀冷却，待
培养基凝固后取 1 mL 各菌悬液注入平板内，涂布均
匀，制成含菌平板。每个浓度每个菌种做 3 个重复，
以无菌水作对照组，待干燥后按菌悬液的制备方法
1.2.4 正交试验
根据相关资料和初步实验的结果，确定对提取
率有较大影响的 4 个因素分别为提取剂、提取温度、
提取时间和料液比。采用 L（9 34）做正交试验，确定最 佳提取工艺条件。因素及水平见表 1。
表 1 石榴皮单宁提取的正交试验因素水平
水平 A 提取剂 B 提取温度/益 C 提取时间/h D 料液比 g颐mL
. A衍l生l物R，i具g有ht止s血R、e抑s菌er、抗ve癌d等. 多种生理活性。本研
究通过正交试验方法确定石榴皮单宁最佳提取条 件，并研究单宁的抑菌效果，对比常用食品防腐剂的 作用效果，分析石榴皮单宁作为天然食品防腐剂的 可行性咱2暂。
1 材料与方法
1.1 材料 1.1.1 石榴皮粉
新疆石榴购于超市，手工取皮，于 50益恒温烘 干后粉碎过 60 目筛，粉末置于棕色试剂瓶保存备用。 1.1.2 试验用菌株
细菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，霉菌为青霉 菌，酵母菌为面包酵母，均由武昌工学院食品工程学 院实验室提供。 1.1.3 试剂和培养基
主要试剂为甲醇、乙醇、丙酮、醋酸锌、EDTA 二 钠盐、氨水、氯化氨、铬黑 T、硫酸，均为分析纯：上海 国药集团化学试剂有限公司；培养基为牛肉膏蛋白
舒杨雄，陈 亚，谭 念，龚 丽，冯晓栋
（武昌工学院 食品工程学院，湖北 武汉 430065）
两个浸提条件对石榴皮浸提液抑菌效果的影响
空白试验 组结 果 为 ： 两组未 加石 榴皮 浸提 液 的培养基 几 乎均 长满青霉菌 ， 其它 添加 石榴 皮浸提液 的实验组 中 ， 青霉 菌
呈不同抑制现象 。
２ １ 提 取 温度 对 石榴 皮 浸提 液 抑 菌 效 果 的 影 响 ．
将西 昌市 售新 鲜石 榴去 瓤 、 籽一 于 微波 炉 中加热 灭 酶一 于烘 箱 中５ ０℃恒 温烘干一烘 干至恒 重后进行粉碎一粉 碎后过
１３２ 菌落生长直径的测定 ．． 在无菌操作 台上 ， 分别取 不 同浸提 条件 下 的石榴 皮浸 提 液４ｍ ， Ｌ 分别注入 到已灭菌 的平 皿 内， 然后 加入熔化 的培养基 ４ Ｌ 摇匀 ； ０ｍ ， 待培养基凝 固后 ， 用接种 环移 取相 同环 状大小 的 青霉菌接种于培养 基表 面； 将培 养皿放 人 电热恒温 箱 中３ ７℃
３ 讨论
１３ １ 培养基 的制作 ．．
马铃薯琼脂培 养基 制作 方法 ： ６０ｇ 将 ０ 马铃薯 洗净 ， 去皮 ，
切成 大小约为 １ｃ ｍ的小块 ， 放入 水 中煮 沸３ ｉ（ ０ｍ ｎ 可适 当补水 ，
总蒸馏水 ３００ｍ ）用 双层纱 布过 滤 ， 其滤 液 。加 入６ 蔗 ０ Ｌ ， 取 ０ｇ
对上 述 各 组 均 做 两 组 平 行 试 验 ， 将 浸 提 后 的 石 榴 皮 溶 再
浸提 温 度 （ ） ℃
液进 行抽滤 ， 并对滤液定容 至２０ｍ ， ５ Ｌ 之后进行抑菌试验 ， 结果 取其 平均值 ， 同时做一组空 白对 照试验 ， 即不 向培养 基 中加 入
石 榴皮浸提液 而接种青霉菌 。
１３ 抑 菌 效 果 的 测 定 ．
图 １ 浸 提 温 度 对 抑 菌 效 果 的影 响
石榴皮抑菌物质最佳提取条件的研究
驱虫 的效果 ， 可用于治疗久泻 、 久痢 、 便血 、 脱肛 、 崩漏 、
白带 、虫积腹痛等病症。其化学 成分 主要为石榴皮素
（ｒ ａｉ） 白桦 脂酸 （ ｅ ｌ ｃ ） ｇａ ｔ 、 ｎ ｎ ｂｔ ｉ ａｉ 、熊果 酸 （ｒ ｌ ｕｃ ｄ ｕｓ ｉ ｏｃ
ａｉ） ｌ ｃ ￣ 异槲 皮甙 （ ｏ ｕｒｉｉ） 。抑菌 试验证 实 ， ｄ ｉ ｑ ｅｃｒ 等 ｓ ｔｎ 石
培养基 ： 肉膏蛋 白胨培养 基（ 固 、 牛 分 液两种 ） ；
种菌液 的制备 ：在无 菌操作室 中将供试菌接 种至 牛 肉膏培养液 中， ３ ℃下培养 １ 现配现用 。 在 ０ ｄ，
２ 试验方 法
榴 的醇浸出物及果 皮水 煎剂 ， 具有广谱抗 菌作用 ， 其对 金黄色 葡萄球菌 、 血性链球 菌 、 溶 霍乱 弧菌 、 疾杆菌 痢
摘
要 ： 不同条件下对石榴皮抑 茵成分提取进行 了研 究 ， 在 结果 表明， 提取 时间、 提取 温度 和提取料 液比对石榴 皮提
取液 的抑 茵效 力都有显著 的影响 。经正 交试验得 出石榴 皮提取 的最佳 条件是提取 温度 ９ ５℃， 提取 时间 ８ｈ 提取料 ，
液 比 ｌ （／ Ｌ 。 ： ｇ ） ４ ｍ 关 键 词 ： 榴 皮 ； 茵物 质 ； 佳提 取条 件 石 抑 最
，
ｔｅ ｃｌ ｏｐ ｍ ｇ ｎｔ ａｄＨ０ １ ｇ Ｌ ． ｈ ａ ｅｒ ａ ２ ： ／ ） ｓ ｅ ｆｏ ａ ｅｎ ４（ ｍ
石榴皮提取物体内外抗过敏作用的实验研究
石榴皮提取物体内外抗过敏作用的实验研究
杨成;董群
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2013(035)001
【摘要】目的探讨石榴皮提取物在体内、体外的抗过敏作用.方法应用透明质酸酶试验测定石榴皮提取物体外抗过敏作用；过敏小鼠被动皮肤过敏试验,考察其体内抗过敏效应.结果石榴皮提取物能明显抑制透明质酸酶活性,IC50为2.69
mg/mL；降低小鼠蓝色皮肤浸出液的光密度值,减少过敏介质组胺的释放.结论石榴皮提取物具有较好的抗过敏作用.
【总页数】3页(P175-177)
【作者】杨成;董群
【作者单位】皖南医学院医学微生物学与医学免疫学教研室,安徽芜湖241002【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.石榴皮抗Ⅱ型生殖器疱疹病毒的体内外实验研究 [J], 张杰;詹炳炎;等
2.臭牡丹提取物抗炎镇痛抗过敏作用的实验研究 [J], 周红林;刘建新;周俐;周青;连其深
3.石榴皮多酚提取物亚急性毒性实验研究 [J], 布鲁根;常占瑛;刘盟;高晓黎
4.新疆酸石榴皮提取物的体外抑菌实验研究 [J], 田玉娥;刘江杰;王东东;田莉
5.甜茶提取物抗过敏作用的实验研究 [J], 高山;钟正贤;周桂芬;陈学芬
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三颗针水提物体的镇痛与抗炎作用
三颗针水提物体的镇痛与抗炎作用【摘要】本研究旨在探讨三颗针水提物体的镇痛与抗炎作用，为疾病治疗提供新的方法。
首先介绍了三颗针水提物体的提取方法和化学成分分析，揭示了其含有的药效成分。
然后分析了三颗针水提物体在镇痛和抗炎方面的作用机制，揭示了其可能的生物学活性。
研究结果表明，三颗针水提物体能够显著减轻疼痛和减少炎症反应，具有潜在的临床应用前景。
未来研究可以进一步探索三颗针水提物体的作用机制，以及优化其在临床上的应用。
这项研究为开发新的镇痛和抗炎药物提供了重要的参考，对促进药物研究和临床治疗具有一定的指导意义。
【关键词】三颗针水提物体、镇痛、抗炎、提取方法、化学成分、临床应用、研究结果、未来研究方向。
1. 引言1.1 研究背景随着人类生活水平的不断提高，人们对健康的重视程度越来越高。
疾病给人们的生活和工作带来了巨大的负担，因此寻找具有镇痛和抗炎作用的药物就显得尤为重要。
近年来，三颗针水提物体备受关注，因其具有显著的镇痛与抗炎作用而备受青睐。
三颗针水提物体被广泛应用于中医药领域，多种传统药方中均含有三颗针水提物体作为重要成分。
其镇痛与抗炎作用已被众多研究所证实，但其具体的作用机制及有效成分仍有待进一步探究。
本文旨在通过对三颗针水提物体进行深入的提取方法、化学成分分析，探究其镇痛与抗炎作用的研究，为其在临床应用中发挥更大的作用提供科学依据。
三颗针水提物体的镇痛与抗炎作用研究将为中医药领域的发展提供新思路和方向，也为疾病治疗带来新的希望。
部分完结。
1.2 研究目的研究目的主要是通过对三颗针水提物体的镇痛与抗炎作用进行深入研究，探索其可能的药理机制，为新药研发和临床治疗提供理论支持。
具体目的包括：1. 确定三颗针水提物体的提取方法，以最大限度地保留活性成分；2. 分析三颗针水提物体的化学成分，探讨其与镇痛与抗炎作用的关系；3. 研究三颗针水提物体在动物模型中的镇痛作用，评估其在缓解疼痛方面的效果；4. 研究三颗针水提物体在炎症模型中的抗炎作用，探讨其对炎症反应的调节效果。
石榴皮中黄酮的提取研究
石榴皮中黄酮类化合物的提取摘要此文献综述总结了石榴皮黄酮类化合物提取方法, 黄酮的提取方法有微波提取法、有机溶剂提取法、超临界萃取法、超声波辅助提取法等。
现代研究证明, 黄酮类化合物是重要的抗氧化剂, 其生理作用是多种多样的, 超临界萃取法速度快、操作简单, 产品无溶剂残留; 超声波辅助提取无需加热, 对有效成分具有保护作用。
在提取某些黄酮类成分时, 可以将二者合理地结合利用。
对黄酮类化合物的提取方法进行研究, 为开发利用黄酮类化合物提供了一定的科学借鉴依据。
【关键词】石榴皮；黄酮类化合物；提取方法前言石榴（Punica grunatum L. ）属安石榴科植物，中国各地均有分布，种质资源丰富。
石榴皮性温、涩，具止泻、止血、杀菌、驱虫等功能。
近年来报道，石榴皮具有抑制细胞内病毒增殖、抑制体外淋球菌生长、直接杀死病毒和阻止病毒吸附细胞等作用[1 ～2]。
此外，近来研究还发现石榴皮具有一定的抗氧化性。
其内含多种化学成分，黄酮是其中一类较为重要的化合物[3]。
黄酮类化合物广泛存在于植物界，几乎分布于所有的绿色植物中[4]。
黄酮类化合物的生理活性较广泛，具有抗肿瘤，延缓衰老，增强心血管功能，增强免疫力，调节内分泌系统，抗炎，抗过敏，抗病毒等功能。
近年来对其研究较多，然而对石榴中黄酮物质的研究较少。
目前，黄酮类化合物的提取方法很多，本文主要选取常用的提取方法来提取石榴皮中黄酮类物质，比较了不同提取方法对石榴皮总黄酮含量测定的影响，为更好的开发石榴皮总黄酮奠定了基础。
主题1.1黄酮类化合物的提取方法黄酮类化合物种类多，性质差异较大，在植物体内因存在部位不同，结合状态也不同，在花、果和叶等组织中一般以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，则以游离状态存在，在皮、根茎、根等部位也曾发现有苷的结合形式[5]，所以要根据其存在部位、结合形式等来选择适合的提取方法。
1.1.1微波提取法微波加热是透入内部的能量被物料吸收置换成热能对物料的加热, 形成独特的物料受热方式, 具有均匀性的特点, 同时具有反应高效性和强选择性等特点, 而且具有操作简便、副产物少、提取率高等优点。
酸石榴皮的功效
酸石榴皮的功效1.治疗腹泻取15克石榴皮煎水服用，每次饮用10-20毫升，一天服用3-4次，坚持7-10天微微一个疗程，可以有效治疗腹泻。
2.治疗慢性痢疾取15克石榴皮用来煎水服用，同样的每次饮用10-20毫升，日服3-4次，坚持连续服用2周，停药1周后在服用2周，可以有效治疗慢性痢疾。
3.用于烧伤取500克石榴皮，洗净加水500毫升，用文火煎到只剩250毫升后过滤，用纱布浸在里面，然后敷在烧伤处，直到痊愈时纱布自行脱落。
4.用于腹痛、肠胃不适等将石榴皮加红糖煮水可以有效止腹痛，还能有效治疗因饮食不当引起的肠胃不适等症。
5.治牛皮癣用新鲜的石榴皮蘸少许明矾末擦在患处，1日3次。
或者用石榴皮炒成炭状再研成细末1份，加芝麻油3份，调成糊状，涂在患处。
每日2次，连续多次有效。
1、石榴汁含有多种氨基酸和微量元素，有助消化、抗胃溃疡、软化血管、降血脂和血糖，降低胆固醇等多种功能。
可防止冠心病心病、高血压，可达到健胃提神、增强食欲、益寿谈话派延年之功效，对饮酒过量者，解酒有奇效。
2、石榴可谓全身是宝，果皮、根、花皆可入药。
其果皮中含有苹果酸、鞣质、生物碱等成分，据有关实验表明，石榴皮有明显的抑菌和收敛功能，能使肠黏膜收敛，使肠黏腊的分泌物减少，所以能有效地治疗腹泻、痢疾等症，对痢疾杆菌、大肠杆菌有较好的抑制作用。
另外，石榴的果皮中含有碱性物质，有驱虫功效;石榴花则有止血功能，且石榴花泡水洗眼，还有明目的效果。
3、石榴性温、味甘酸涩，入肺、肾、大肠经;具有生津止渴，收敛固涩，止泻止血的功效;主治津亏口燥咽干，烦渴，久泻，久痢，便血，崩漏等病症。
1、减轻静脉曲张石榴籽多酚可以帮助防止由瘀伤所致的静脉曲张，也可减轻动脉血管的脆性。
2、改善皮肤石榴籽多酚可帮助皮肤抵抗自由基和胶原质降解酶伤害。
该保护作用可能有助于防止因皮肤弹性流失而出现的过早皮肤皱纹形成。
3、减轻糖尿病视网膜病变并改善视力糖尿病易于并发动脉脆弱，并影响到视网膜。
鲜石榴皮煮水的功效
鲜石榴皮煮水的功效1.驱虫作用：石榴皮碱Pelletierine对绦虫的杀灭作用极强，1：10000的盐酸石榴皮碱于5-10分钟能杀死绦虫，但1：50000时对绦虫反有兴奋作用。
后来证明此种有效成分实际上是异石榴皮碱。
伪石榴皮碱的驱虫作用不确实。
新鲜石榴皮中含有大量鞣质，临床观察证明，生物碱与鞣质结合比不结合者驱虫效果好，这是因为鞣质能使生物碱变成难溶因而难吸收的化合物，从而可以充分地对肠寄生虫发挥作用。
由于石榴皮毒性较大，现已被更好的药物所代替。
2.抗菌作用：体外试验对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、霍乱弧菌、痢疾杆菌、伤寒及副伤寒杆菌、变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌及结核杆菌有明显的抑制作用。
对多种致病真菌也有抑制作用。
其抗菌作用可能与其中含有大量鞣质有关。
3.抗病毒作用：先将药液注入鸡胚尿囊腔，半小时后接种流感病毒甲型PR8株或先接种病毒再注射药物，孵育48小时后再进行血细胞凝集试验，证明石榴皮煎剂稀释到1：10000-1：100000仍有抑制流感病毒的作用。
其作用也可能是由于含有大量鞣质。
4.其他作用：雌性大鼠或豚鼠服果皮粉后可减少受孕率。
家兔灌服根皮水浸液可促进血液凝固。
【毒性】石榴皮总碱毒性约为石榴皮的25倍，对蛙、小鼠、豚鼠、兔及猫的主要中毒症状是运动障碍及呼吸麻痹，中毒死亡的直接原因是呼吸中枢麻痹。
总碱对心脏有暂时性兴奋，心搏数减少，对骨胳肌有藜芦碱样作用，对神经末梢呈箭毒样作用，对肠管使紧张度降低，对子宫则为兴奋。
足量石榴皮碱由于其箭毒样作用可引起完全麻痹，对植物神经节有烟碱样作用，1mg/kg引起脉搏变慢及血压上升，大量使脉搏显着加快。
1、制成石榴汁饮用：将石榴粒用榨汁机取汁，每天喝一杯，保护心脑血管。
对老年人有益，对男性更有好处。
2、将榨汁机中残渣打成粉末，每天吃几口，对糖尿病人有好处，缓解糖尿病人视力损伤。
3、制作石榴醋：将石榴粒放入玻璃瓶中，倒入酿造的白醋，没过石榴即可。
再放入冰糖依个人口味，三个月后石榴醋即可饮用。
萃取石榴皮的实验报告
萃取石榴皮的实验报告
实验目的：
本实验旨在探究石榴皮中所含的有效成分，分析其萃取方法的影响因素以及优化最佳条件。
实验步骤：
1. 取适量干净的石榴皮样品，进行研磨或切碎，以增加表面积，便于萃取。
2. 准备不同溶剂，如乙醇、水、醚等，作为萃取试剂。
3. 将石榴皮样品置于容器中，加入所选萃取试剂，尽量覆盖样品。
4. 对不同萃取试剂，可以使用超声波浸渍、搅拌等方法进行萃取，以加速溶剂与样品的接触和渗透。
5. 萃取完毕后，将溶液通过滤纸或其他过滤装置进行过滤，以去除固体残渣。
6. 可以对过滤液进行进一步浓缩、减压、蒸发等处理，以获得较为纯净的提取物。
7. 对提取物进行分析，可以使用纸片法、薄层色谱、高效液相色谱等方法进行定性和定量分析。
结果与讨论：
通过实验我们发现，不同溶剂在石榴皮样品中对有效成分的萃取能力存在差异。
乙醇和水作为通用的溶剂，对石榴皮的提取效果较好，而醚溶剂则需要进行更多的操作步骤来获得有效成分。
此外，萃取时间、温度、样品粒度等因素也对萃取效果产生影响。
在实验过程中，我们发现使用超声波浸渍可以显著提高溶剂与样品的接触，并促进有效成分的释放。
此外，研磨或
切碎样品也能提高样品暴露表面积，有利于萃取。
结论：
通过本实验的研究，我们可以得出结论：针对石榴皮样品中有效成分的萃取，乙醇和水是较为适合的溶剂选择，在超声波浸渍的条件下可以获得较好的萃取效果。
此外，研磨或切碎样品也可以提高溶剂与样品的接触面积，从而提高有效成分的扩散速率。
对于进一步分析和应用石榴皮的有效成分，我们可以通过进一步的提取和纯化方法来获得更纯净的样品。
石榴皮水提物对大鼠离体十二指肠运动的作用及其机制的研究
石榴皮水提物对大鼠离体十二指肠运动的作用及其机制的研究【摘要】探索石榴皮水提物对十二指肠段收缩运动的作用及其机制。
分别用0.1、0.5、1、5 mg/ml 4种不同浓度的石榴皮水提物、吗丁啉、吗丁啉与石榴皮水提物混合液、新斯的明、新斯的明与石榴皮水提物混合液作用于大鼠离体十二指肠段，记录给药前第2 min和给药后第2、5、10 min十二指肠段的收缩曲线，比较给药前后收缩波的频率和幅度的变化。
与给药前比较，0.5、1、5 mg/ml 3种不同浓度的石榴皮水提物对十二指肠段的收缩频率均有明显的抑制作用(P<0.05)，0.1 mg/ml组作用不显著(P>0.05)。
除5 mg/ml 组在给药后第10 min的收缩幅度小于给药前(P<0.05)外，其他各组对收缩幅度的影响均不显著(P>0.05)。
石榴皮水提物可明显地阻断新斯的明诱导的十二指肠段持续性收缩;对吗丁啉诱导的收缩加强作用表现为协同效应。
0.5～5 mg/ml 的石榴皮水提物对十二指肠段的收缩频率均有明显的抑制作用，这种抑制作用可能是通过影响乙酰胆碱作用通路实现的。
【关键词】石榴皮水提物;十二指肠运动;吗丁啉;新斯的明;大鼠Abstract：To observe the effects of water-soluble extraction from pomegranate peel on the motility of isolated duodenum segments in rats and its action pathways.The animals were pided into different administration groups. The groups were water extractions from Pomegranate Peel (0.1 mg/ml， 0.5 mg/ml， 1 mg/ml， 5 mg/ml)，domperidone， domperidone and aqueous extract of Pomegranate peel mixed solution， neotigmine， neotigmine and aqueous extract of Pomegranate peel mixed solution. The contractive curve of isolated duodenum of rat was recorded 10 min before and 10 min after drugs administration. The frequency and amplitude of contraction wave were analyzed in the second minute before and the second， fifth， tenth minute after drugs administration.0.5，1，5 mg/ml aqueous extract of Pomegranate peel could significantly reduce the contraction frequency of duodenum segment(P<0.05) by compared after with the before drugs administration，0.1mg/ml aqueous extract of Pomegranate peel also could reduce the frequency， but have no statistically significant (P>0.05). All concentrations of aqueous extract of Pomegranate peel couldn′t influence amplitude other than 5 mg/ml in the tenth minute significantly (P<0.05). Aqueous extract of Pomegranate peel could interrupt durative constriction induced by neotigmine significantly. However， it was intensifying in constriction induced by Domperidone. It may be a synergistic action. The results show that 0.5～5 mg/ml aqueous extract of Pomegranate peel have prominent inhibitory effect on the contractionfrequency of duodenum segment and this effect may be operated by acetylcholine pathway.Key words：Aqueous extract of Pomegranate peel;Duodenum motility;Domperidone;Neotigmine;Rat1 引言石榴(Punica granatum L)属于石榴科，石榴属，落叶灌木或小乔木，石榴皮是石榴的干燥果皮，内含鞣质、黄酮、原花青素等，性酸、味涩，具有涩肠、止血、杀虫之功效[1]。
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生物医学工程研究Journal of Biomed ical Eng ineering Res earch 2009,28(4):263～266 3国家自然科学基金资助项目(30770277);山东省教育厅科技计划项目(J08LE 63)△通信作者 x y @石榴皮水提物的镇痛实验研究3许蓬娟,花春艳,艾洪滨,崔希云△(山东师范大学生命科学学院,山东省动物抗性生物学重点实验室,济南250014)摘要:探讨石榴皮水提物的镇痛作用。
采用小鼠热板法、小鼠醋酸扭体法和小鼠热水甩尾法,观察经胃给予0.06、0.6、6和12mg Πml 四种浓度的石榴皮水提物的镇痛作用。
结果表明:0.6、6和12mg Πml 三种浓度的石榴皮水提物均可使热板所致小鼠舔足反应潜伏期明显延长(P <0.01),与给药前相比,潜伏期提高率最高达71.12%;可使醋酸所致小鼠扭体潜伏期明显延长(P <0.05),扭体次数明显减少(P <0.01),对扭体次数的抑制率最高达64.74%;可使热水所致小鼠甩尾潜伏期明显延长(P <0.01),与给药前相比,潜伏期提高率最高达112.59%;0.06mg Πml 浓度组对三个疼痛模型均无明显影响。
说明0.6～12mg Πml 浓度的石榴皮水提取物具有镇痛作用,但0.06mg Πml 浓度的作用则不明显。
关键词:石榴皮水提物;镇痛;热板法;醋酸扭体法;热水甩尾法中图分类号:R318 文献标识码:A 文章编号:167226278(2009)0420263204Study on A ntalgic E ffect of Water Extraction of Pericarpium GranatiXU Pengj uan ,HU A Cunyan ,AI H ongbin ,C U I X iyun(Colleg e o f Life Scien ce ,Sha ndo ng Normal Univ ersity ,K ey Lab oratory o f Animal R esistance o f Shandong Pro v in ce ,Jinan 250014,China )A bstr act :Probe the an talg ic effect o f water ex tracti on o f Pericarp ium Granati.T he an talg ic effect w as observed b y mice w rithing test ,mice tail 2immersion tes t and h ot 2plate test ,being given four concentrations (0.06、0.6、6and 12mg Πml )of the w ater extraction o f Pericarpium Granati v ia the gas tric perfusion.Results sho wed that (1)the mice ′s pain thresh old w as obv ious ly enhanced (P <0.01),the maximum o f analges ic ratio w as 71.12%in hot 2plate test ;(2)mice ′s writhing latency was remarkably prolonged (P <0.05),writhing responses decreas ed markedly (P <0.01),the max imum o f inh ibitory rati o w as 64.74%;(3)tail 2curl latency in mice tail 2immersi on tes t was observ ably prolonged (P <0.05)and the max imu m of analgesic ratio w as 112.59%w hen res pectively g iv en 0.6、6and 12mg Πm l.T he concen tration o f 0.06mg Πml had n o the effect .It prov es that water extraction o f Pericarpium Granati has antalgic effect when the concentration is higher than 0.06mg Πml.K ey w or ds :W ater extraction o f Pericarpium Granati ;Antalgic ;H ot 2plate tes t ;Writhing test ;T ail 2immersion tes t1 引 言石榴(Punica granatum L.)属于石榴科石榴属落叶灌木或小乔木,石榴皮(Pericarpium Granati )为石榴的干燥果皮,石榴皮提取物是以石榴皮的果皮为原料提取的产品。
石榴皮性酸、味涩,具有涩肠止泻、止血、驱虫,治疗久泻、久痢、便血、脱肛、崩漏、白带和虫积腹痛等功效[1]。
石榴皮煎剂作为治疗腹泻的验方,受到临床医师的重视[2]。
相关实验还表明石榴皮具有抗病毒、抗菌、抗癌、调节免疫系统和保护胃的作用[3]。
但关于石榴皮水提物有无镇痛作用的研究尚未见报道。
本实验采用3种动物疼痛模型E mail :cui i un sin 对石榴皮水提物的镇痛作用进行了初步的探讨,为该药的进一步开发和临床应用提供实验和理论依据。
2 材料与方法2.1 材料2.1.1 石榴皮水提物的制备[4] 将石榴皮粉碎,过200目筛,称重,以料液比(1g:20ml)混合,室温4～5 h,60℃水浴2h,8层纱布过滤,60℃干燥,呈棕色粉末。
石榴皮水提物用双蒸水配制成浓度为60mgΠml 溶液,保存于4℃冰箱。
实验时用双蒸水配成石榴皮水提取物不同浓度的(0.06、0.6、6和12mgΠml)溶液。
本实验所用石榴皮为山东枣庄产甜石榴的当年果皮自然干燥品。
2.1.2 0.6%醋酸溶液 0.6%醋酸溶液(由冰醋酸稀释而成)。
本实验所用试剂均为国产分析纯。
2.1.3 实验动物 昆明种小鼠,体重18～22g,雌雄兼用。
2.1.4 仪器 电子天平,H S-4(B)型恒温浴槽,R B -200智能热板仪,君斯达运动秒表。
2.2实验方法2.2.1 热板法疼痛模型的制备及给药方案[5-8] 选用雌性小鼠。
将小鼠放在50℃的热板上,测定每鼠的舔足反应潜伏期(指小鼠从足接触热板到舔后足所用时间)。
选择痛反应潜伏期在5～30s的小鼠为合格鼠,剔除过敏(<5s)或反应迟钝(>30s)的个体。
24h后进行实验,取合格小鼠30只,随机分为5组,即对照组和4个浓度(0.06、0.6、6和12mgΠml)的给药组,每组6只小鼠。
将小鼠置于50℃的热板上,首先测定5个实验组的基础潜伏期,给药前测两次(间隔10min),取其平均值,然后给对照组用0.2ml双蒸水灌胃,其余4个给药组分别用0.2ml 的0.06、0.6、6和12mgΠml的石榴皮水提取物灌胃,测定各组在给药后30、60、90、120min舔足潜伏期的变化。
超过60s无反应者,潜伏期按60s计。
2.2.2 醋酸扭体法疼痛模型的制备及给药方案[5-8] 取30只小鼠,雌雄兼用,随机分为5组,即对照组和4个浓度(0.06、0.6、6和12mgΠml)的给药组,每组6只小鼠。
对照组用0.2ml双蒸水灌胃,4组给药组分别用0.2ml的0.06、0.6、6和12mgΠml 的石榴皮水提取物灌胃,60min后进行实验,5组小鼠均腹腔注射0.6%的醋酸0.2ml,记录各组小鼠的扭体潜伏期(即从注射醋酸至扭体的时间)及在5m i n内扭体的次数,若15m in内未扭体,潜伏期按15 m i n记录。
2.2.3 热水甩尾法疼痛模型的制备及给药方案[5,8] 在室温26℃条件下,取小鼠,雌雄兼用,将小鼠尾端3cm浸入48℃恒温水浴锅中,记录其甩尾的潜伏期为指标,测2次(间隔10m in),求其平均值,取潜伏期是5～30s的为合格鼠,剔除过敏(<5s)或反应迟钝(>30s)的个体。
24h后进行实验,取合格小鼠30只,随机分为5组,即对照组和4个浓度(0.06、0.6、6和12mgΠml)的给药组,每组6只小鼠。
将小鼠尾端3cm浸入48℃的恒温水浴锅中,首先测定5组动物的基础潜伏期,然后对照组用0.2m l 的双蒸水灌胃,4个组给药组分别用0.06、0.6、6和12mgΠm l的石榴皮水提取物灌胃0.2m l,测定各组30、60、90、120min小鼠的甩尾潜伏期的变化,超过60s无反应者,潜伏期按60s计。
2.3 数据处理实验数据用x±S D表示,各浓度组与对照组间的比较及给药后各时间段与给药前的比较均采用t 检验,以P≤0.05为差异有统计学意义,以P≤0.01为差异有极显著的统计学意义。
各浓度组间用SPSS13.0分析软件(SP SS Inc.Chicago,I ll.,US A)进行数据分析,热板舔足(或热水甩尾)的潜伏期延长的百分率=(给药后的舔足(或甩尾)潜伏期-基础潜伏期)Π基础潜伏期×100%。
醋酸扭体组的抑制率=(对照组扭体均数-给药组扭体均数)Π对照组扭体均数×100%。
3 实验结果3.1 不同浓度石榴皮水提物对小鼠热板测试舔足反应潜伏期的影响由表1和表2可见,各实验组给药后与给药前比较,0.6、6、12mgΠml三个浓度的石榴皮水提物均可延长小鼠的舔足反应潜伏期(P<0.01), 0.06mgΠml的作用不明显(P>0.05);对照组的变化不显著(P>0.05)。
各实验组与对照组相比,0.6、6、12mgΠml石榴皮水提物组的小鼠舔足反应潜伏期明显延长(P<0.01);0.06m gΠm l组的变化不明显(P>0.05);其对舔足反应潜伏期的影响时间出现在给药后60～120min(本实验仅测量到120min)。
但在0.6、6、12mgΠm l三个浓度组之间比较无显著差异(>5)。
462 生物医学工程研究 第28卷1P0.0表1 不同浓度石榴皮水提取物对小鼠热板测试舔足反应潜伏期的影响(n=6,x±S D) Table1 Effect s of Pericarpium Granati i n mi ce hot2plate t est(n=6,x±S D)实验组基础潜伏期(s)药后各时间段的舔足潜伏期(s)30m in60m in90m i n120m i n对照组22.47±6.2521.69±9.0623.05±6.8219.91±4.2620.18±5.100.06m gΠm l组19.22±3.8918.56±5.9821.04±8.3622.75±5.9319.40±6.180.6m gΠm l组22.09±2.5825.24±3.16▲▲27.45±4.28▲37.80±9.9833▲▲25.73±4.243▲6m gΠm l组22.69±4.3224.97±3.9834.29±5.2733▲▲35.90±10.7433▲31.64±7.0333▲12m gΠm l组23.27±2.1325.07±4.6434.41±12.92337.51±9.1533▲▲36.50±15.453 3P<0.05 33P<0.01与对照组相比。