盐酸二甲双胍质检方法
高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度及临床应用
高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度及临床应用王长连1,刘亦伟1,黄品芳1关键词: 盐酸二甲双胍;血药浓度;高效液相色谱法中图分类号: R927.11 文献标识码: B 文章编号: 1672 4194(2007)06 0592 02收稿日期:2007 05 16 修回日期:2007 08 29作者单位:福建医科大学附属第一医院药学部,福州 350005作者简介:王长连(1954~),男,主任药师A:标准溶液[盐酸二甲双胍(M et)+尿苷(Uri)];B:空白血浆;C:标准品+空白血浆(含M et 500ng/m L);D:生物样品.图1 二甲双胍和内标尿苷H PL C 色谱图Fig 1 Chromato gr am of metfo rmin and inter nal standard(ur idine)盐酸二甲双胍(metfo rmin hydro chlor ide,M et)是临床常用的口服双胍类降糖药,近年有一些缓、控释制剂上市。
为了探讨其体内过程与临床疗效,笔者参考有关文献并加以改进[1 4],在实验室建立高效液相色谱法测定M et 血药浓度,报道如下。
1 材料和方法1.1 材料 高效液相色谱系统(包括510泵,996二极管阵列检测器,7725i 进样器,Empo wer 数据处理系统,美国Waters 公司);电子天平(A E 240,上海梅特勒 托利多有限公司);旋涡混合器(XW 80,上海医科大学仪器厂);石英亚沸高纯水蒸馏器(SY Z 550,金坛市丹阳门石英玻璃厂);台式高速离心机(T G L 16G ,上海医用分析仪器厂)。
M et 标准品(美国Sigma 公司,批号113K 0931);尿苷(U r i)对照品(上海化学试剂站分装厂,批号950906);IPR B 8离子对色谱试剂(天津化学试剂二厂,批号20070510);甲醇(国药集团上海化学试剂有限公司,批号T 20060930,色谱纯),实验用水为三蒸水。
HPLC法测定盐酸二甲双胍中二甲双胍的含量
HPLC法测定盐酸二甲双胍中二甲双胍的含量目的：通过HPLC方法测定二甲双胍在盐酸二甲双胍片剂中的含量。
方法：在色谱条件：选择Hypersil CN（200 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，流动相：乙腈：0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调至pH=3.5）（32∶78），检测波长：234 nm，进样量10μl，1.0 mL/min流速，柱温为室温（30℃）条件下进行检测。
结果：二甲双胍在2.56ug·mL-1-64.00ug·mL-1范围内线性关系良好，线性方程为：Y =65347X-324521（r=0.9996），平均回收率为100.46%，RSD为1.43%。
结论：采用高效液相色谱方法，可有效评估盐酸二甲双胍片剂中二甲双胍的含量，本法结果准确、方法简单、灵敏度高。
标签：HPLC法；二甲双胍；盐酸二甲双胍；含量二甲双胍是目前治疗2型糖尿病的首选药物，目前对于盐酸二甲双胍的含量测定方法较多，紫外及高效液相等检测方法，都有相继报道[1]。
考虑到紫外检测不能有效分离制剂中有关物质，所测结果准确性不高，故考虑分析高效液相法对盐酸二甲双胍片剂检测的有效性，结果报道如下：1 材料1.1 仪器与试药岛津LC-20A 型高效液相色谱仪；超声波清洗器；乙腈由国药集团化学试剂有限公司提供，为色谱醇；磷酸、磷酸二氢钾均为分析纯；盐酸二甲双胍对照品（中国药品生物制品检定所，批号：150913-151102）；盐酸二甲双胍胶囊（常州兰陵制药有限公司，国药准字H11021518，批号为：140923、150316、150728）。
2 方法与结果2.1 方法学验证2.1.1 色谱条件色谱柱选择Hypersil CN（200 mm×4.6 mm，5 μm），，流动相：乙腈：0.01 mol/L 磷酸二氢钾溶液（用磷酸调至pH=3.5）（32∶78），检测波长：234 nm，进样量10μl，1.0 mL/min流速，柱温为室温（30℃）。
盐酸二甲双胍缓释片质量标准
盐酸二甲双胍缓释片质量标准
一. 产品名称：
盐酸二甲双胍缓释片
二. 性状描述：
本品为斑点状或类似片状的白色、黄色或类似片状的物质。
三. 质量标准：
1. 外观：本品为斑点状或类似片状的物质，色白、黄色或类似片状，无杂质。
2. 硬度：≥60N。
3. 盐酸二甲双胍含量：90.0%-110.0%。
4. 溶解度：本品在0.1mol/L盐酸和水中均易溶。
5. 铅：≤5mg/kg。
6. 砷：≤3mg/kg。
7. 汞：≤1mg/kg。
8. 镉：≤1mg/kg。
9. 热失重：≤2.0%。
四. 适用范围：
本品适用于治疗2型糖尿病患者的糖代谢异常。
五. 用法用量：
口服。
成人初始每日剂量为500毫克或1克，每日1次，随餐服用。
剂量应在个体化治疗的基础上逐渐递增，不得超过每日2克。
六. 保存方法：
密闭、防潮、光线避免且存放于干燥处。
七. 批准文号：
国药准字H20080875
八. 生产企业：
广东珠江药业股份有限公司
九. 包装：
本品采用铝塑泡腔包装，每板14片，每箱8板。
盐酸二甲双胍质检方法
盐酸二甲双胍质检方法一：质量指标二：质量检验方法1、外观性状目测颜色、颗粒形状，本品应为白色结晶或结晶性粉末，用鼻测其气味，几乎无臭。
2、溶解性（澄清度）盐酸二甲双胍分别能溶于水合甲醇中，且水中的溶解度要远比甲醇中大。
精确称量1.000g盐酸二甲双胍，加10mL水于比色管中，待完全溶解后，比色管从上往下看，如果纯清则表示其在水中的澄清度合格；同样精确称量1.000g盐酸二甲双胍，加30mL甲醇于比色管中，边晃动边使其慢慢溶解，待完全溶解后，比色管从上往下看，如果纯清则表示其在甲醇中的澄清度合格。
3、干燥失重精确称重1.000克样品于一称量皿中，放于105℃干燥炉中4小时至恒重，取出后放于一干燥皿中至室温，称重计算，减重不超过0.5%为样品合格。
计算方法如下：干燥失重=（m样—m干）÷m样4、炽灼残渣600度坩埚，先在高温箱中600℃加热1小时，而后取出放入干燥皿中冷却，精确称重。
准确称重1.000g样品放于坩埚中，直接放电炉加热至没有青烟（约半小时左右）凉至室温加0.5mL 硫酸，继续放电炉加热至无烟(低温加热至硫酸蒸汽，全部除尽)，而后放于600度高温炉中2小时，取出放于干燥皿中完成冷却，精密称量后，再在600-800℃炽灼至恒重，称重计算，小于0.1%为合格。
计算：A最后残渣质量÷m样品质量5、有关杂质（双氰胺对照试验）取二甲样品0.5g，加无水甲醇5mL（沿壁加入）于试管1中，水浴加热至完全溶解（加热取出多次，防止沸出试管），而后自然降温至35度，再加5mL乙醚搅拌冷却至20度，静止30分钟，用滤纸过滤，再用2.5mL乙醚洗试管，同样过滤合并滤液。
滤液。
滤液置水浴上蒸发至干，（可先用电炉蒸干一部分水），残渣加水0.5mL溶解，作为备用样品。
双氰胺对照试样，取双氰胺对照品0.004g，溶于10mL水中，作为备用对照（即没1mL中含0.4mg）展开剂配比：正戊醇、吡啶、水（1:2:1.8），分别取样品5mL、10mL、9mL混合于瓶中备用。
鲁米诺—高碘酸钾化学发光法测定盐酸二甲双胍
鲁米诺—高碘酸钾化学发光法测定盐酸二甲双胍陈文娟;陈建福;陈健旋【期刊名称】《济宁学院学报》【年(卷),期】2012(000)003【摘要】在碱性条件下盐酸二甲双胍对鲁米诺一高碘酸钾化学发光体系有强烈的增敏作用，结合流动注射技术，建立了流动注射化学发光测定盐酸二甲双胍的新方法．在优化的实验条件下，测定盐酸二甲双胍的线性范围为1．0×10-9～7．0×10-5mol／L，检出限为3．4×10-9moL／L，对于浓度为1．0×10-7mol ／L的盐酸二甲双胍连续测定11次，测定值的相对标准偏差为0．8％，以片剂为基体，用标准加入法检验方法的回收率，测得结果在99．6％-101．0％之间．该方法用于盐酸二甲双胍片剂中盐酸二甲双胍的定量分析，结果满意．%A highly sensitive chemiluminesence（CL） method for the determination of metformin hydrochloride by flow injection analysis was developed, based on that the CL intensity of Luminol - KIO4 systems was en- hanced by metformin hydrochloride. The relationship between the CL intensity and the concentration of met- formin hydrochloride was in a linear range from 1.0 ×10-9 to 7.0×10-5 mol/L. The detection limit of met- formin hydrochloride was 3.4 ×10-9 mol/L, Precision of the method was tested at the content rati on level of 1. 0 ×10-7 mol/L of metformin hydrochloride for 11 determinations, and value of RSD was 0.8%. Test for re- covery was made by standard addition method using tablets samples as matrixes, results of recovery were in the range of 99.6% - 101.0%. The proposedmethod was applied satisfactorily to the determination of metformin hydrochloride in tablets.【总页数】4页(P39-42)【作者】陈文娟;陈建福;陈健旋【作者单位】漳州城市职业学院生物与环境工程系,福建漳州363000;漳州职业技术学院食品与生物工程系,福建漳州363000;漳州职业技术学院食品与生物工程系,福建漳州363000【正文语种】中文【中图分类】O657.3【相关文献】1.量子点增敏碱性鲁米诺-高碘酸钾化学发光法测定五氯酚钠 [J], 周敏;吴小玲;李聪;马永钧;王爱连;母爱萍2.鲁米诺—高碘酸钾化学发光法测定盐酸苯乙双胍 [J], 陈文娟;陈建福;陈健旋3.鲁米诺-高碘酸钾化学发光法测定盐酸苯乙双胍 [J], 陈文娟;陈建福;陈健旋4.ZnSe量子点增敏碱性鲁米诺-高碘酸钾流动注射化学发光法测定苯甲酸 [J], 王爱连;罗晓伟;王乐政;国云;马永钧;周敏5.高碘酸钾-鲁米诺后化学发光反应的研究——流动注射-后化学发光法测定异烟肼[J], 马明阳;吕九如因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量
ＨＰＬＣ法测定盐酸二甲双胍片的含量目的：用HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量。
方法：采用Diamond C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：0.01 mol/L磷酸二氢钾缓冲液含0.015 mol/L高氯酸（pH3.0）；流速：1.0 ml/min；柱温：室温；检测波长：218 nm，以峰面积计算。
结果：在0.1~0.3 mg/ml范围内盐酸二甲双胍片的峰面积和浓度呈良好的线性关系，r=0.999 4。
结论：本法简便、快捷、灵敏，可作为盐酸二甲双胍片质量控制的有效方法。
[Abstract]Objective:To establish an HPLC method for the content determination of Metformin Hydrochloride Tables. Methods:Analytical column was Diamond C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)，the mobile phase consisted of 0.01 mol/L postassium dihydrogen phosphate and 0.015 mol/L perchloric acid, the flow rate was 1.0 ml/min,UV detection was set at 218 nm and the peak area was calculated.Results:The linear range of metformin hydrochloride was 0.1~0.3 mg/ml,r=0.999 4.Conclusion:The method is simple，rapid and accurate.It can be used for the quality control of Metformin Hydrochloride Tablets.[Key words]HPLC;Metformin hydrochloride;Content determination盐酸二甲双胍是一种双胍类口服降糖药，用于非胰岛素依赖型糖尿病的治疗。
盐酸二甲双胍质量标准
北京中惠药业有限公司文件分类：体系程序性文件-质量标准文件名称：盐酸二甲双胍质量标准文件编码：SOP-QS001-00页码：第1页共5页制定人审核人批准人签名日期姓名康敬苏曼利窦豆职务质检员质检主管质量管理部经理执行日期：2013年06月01日分发范围：质量管理部、质监室、质检室、物流部文件变更记载文件编码文件名称变更历史及原因执行日期JS·ZL002-04盐酸二甲双胍质量标准根据《药品生产质量管理规范》2010版和《质量标准类文件的编制和标准》（GL·WJ009-02）进行变更。
2012年10月01日SOP-QS001-00盐酸二甲双胍质量标准增加“红外图谱的附图”：文件格式发生变化。
2013年06月01日1 目的：制定盐酸二甲双胍的质量标准，使盐酸二甲双胍的采购、验收、检验、贮存、使用有据可依，保证产品的质量。
2 范围：适用于盐酸二甲双胍的采购、验收、检验、贮存、使用各岗位。
3 职责3.1 物流部：按本标准进行采购、验收和贮存。
3.2 质监室：监督检查以下项目并对该物料行使放行审核权。
3.2.1 物流部是否按本标准进行采购、验收和贮存；3.2.2 取样员是否按抽样程序对待检物料进行取样；3.2.3 质检室是否按本标准进行检验。
3.3 质检室：按本标准进行检验，并及时出具检验报告。
4 内容4.1 物料基本信息4.1.1 物料名称: 盐酸二甲双胍；物料编码：Y010；4.1.2 质量标准的依据: 《中国药典》2010版二部；4.1.3 经批准的合格供应商：天津太平洋化学制药有限公司 ,淮南佳盟药业有限公司4.2 取样方法：取样执行《取样管理规程》（SMP-QA011-00）。
4.3检验项目、方法及可接受标准4.3.1 性状4.3.1.1本品应为白色结晶或结晶性粉末；无臭。
4.3.1.2本品在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中微溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。
4.3.1.3 熔点：照《熔点测定法标准操作规程》（SOP-TP012-00）操作，应为220～225℃。
HPLC-MS法测定盐酸二甲双胍片中毒性杂质N-亚硝基二甲胺（NDMA）的含量
HPLC-MS法测定盐酸二甲双胍片中毒性杂质 N-亚硝基二甲胺（ NDMA）的含量重庆国舒制药有限公司重庆 401338重庆国泰康宁制药有限责任公司重庆 401520摘要：目的建立HPLC-MS法检测盐酸二甲双胍片中毒性杂质N-亚硝基二甲胺的含测定方法。
方法以ACE EXCEL3 C18-AR 4.6mm×100mm，3.0μm为色谱柱，流动相为流动相A：0.1%甲酸溶液流动相B：0.1%甲酸甲醇溶液，柱温40℃，检测波长258nm，流速为0.55ml/min，采用APCI+:MRM扫描模式，定量离子对75.0→43.0 m/z。
结果：该方专属性强，NDMA在0.985ng/ml～98.5ng/ml范围内浓度与峰面积呈良好线性，线性方程为y =8×104 x–1.88×104，相关系数r为0.9999，该方法的回收率在98.58%～101.45%之间，9份溶液平均回收率为99.9%，RSD为0.9%，准确度良好。
结论：该HPLC-MS法能准确检出盐酸二甲双胍片中毒性杂质N-亚硝基二甲胺的含量。
关键词：HPLC-MS法；盐酸二甲双胍片；N-亚硝基二甲胺；含量盐酸二甲双胍片在临床上主要用于单纯饮食控制不满意的II型糖尿病病人，尤其是肥胖和伴高胰岛素血症者，用本药不但有降血糖作用，还可能有减轻体重和高胰岛素血症的效果[1]。
国外报道盐酸二甲双胍片中检出NDMA杂质。
目前所知，NDMA杂质可能通过亚硝化机理生成。
即在一定条件下，胺类化合物尤其是仲胺，）或其他亚硝化试剂反应产生亚硝胺类杂质。
盐酸二甲双胍片与亚硝酸钠（NaNO2中NDMA来源分析：（1）原料引入：盐酸二甲双胍合成起始物料分别是二甲胺和双氰胺，原料药二甲胺本身均含有仲胺结果，但整个合成工艺中均未使用或添加）或其他亚硝化试剂（亚硝酰卤化物、亚硝酸酯、三氧化二氮和亚硝酸钠（NaNO2四氧化二氮），也未使用或添加酰胺类溶剂（如N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮等），所以引入亚硝胺类杂质的风险很低。
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盐酸二甲双胍质检方法
一：质量指标
二：质量检验方法
1、外观性状
目测颜色、颗粒形状，本品应为白色结晶或结晶性粉末，用鼻测其气味，几乎无臭。
2、溶解性（澄清度）
盐酸二甲双胍分别能溶于水合甲醇中，且水中的溶解度要远比甲醇中大。
精确称量1.000g盐酸二甲双胍，加10mL水于比色管中，待完全溶解后，比色管从上往下看，如果纯清则表示其在水中的澄清度合格；
同样精确称量1.000g盐酸二甲双胍，加30mL甲醇于比色管中，
边晃动边使其慢慢溶解，待完全溶解后，比色管从上往下看，如果纯清则表示其在甲醇中的澄清度合格。
3、干燥失重
精确称重1.000克样品于一称量皿中，放于105℃干燥炉中4小时至恒重，取出后放于一干燥皿中至室温，称重计算，减重不超过
0.5%为样品合格。
计算方法如下：
干燥失重=（m样—m干）÷m样
4、炽灼残渣
600度坩埚，先在高温箱中600℃加热1小时，而后取出放入干燥皿中冷却，精确称重。
准确称重1.000g样品放于坩埚中，直接放电炉加热至没有青烟（约半小时左右）凉至室温加0.5mL 硫酸，继续放电炉加热至无烟(低温加热至硫酸蒸汽，全部除尽)，而后放于600度高温炉中2小时，取出放于干燥皿中完成冷却，精密称量后，再在600-800℃炽灼至恒重，称重计算，小于0.1%为合格。
计算：A最后残渣质量÷m样品质量
5、有关杂质（双氰胺对照试验）
取二甲样品0.5g，加无水甲醇5mL（沿壁加入）于试管1中，水浴加热至完全溶解（加热取出多次，防止沸出试管），而后自然降温至35度，再加5mL乙醚搅拌冷却至20度，静止30分钟，用滤纸过滤，再用2.5mL乙醚洗试管，同样过滤合并滤液。
滤
液。
滤液置水浴上蒸发至干，（可先用电炉蒸干一部分水），残渣加水0.5mL溶解，作为备用样品。
双氰胺对照试样，取双氰胺对照品0.004g，溶于10mL水中，作为备用对照（即没1mL中含0.4mg）
展开剂配比：正戊醇、吡啶、水（1:2:1.8），分别取样品5mL、10mL、9mL混合于瓶中备用。
准备一微晶纤维素点版，用针管取10uL双氰胺对照品溶液一点一点慢慢点于板上同一点，每点一点都要用吹风机吹干，点的直径约在3—4mm左右，直至点完。
同样用样品10uL溶液点于板上。
把准备好的展开剂倒入层析缸一边，放入点好的纤维素点板（点向下置于展开剂中），等到展开剂向上升至离点板上边1cm左右取出晾干，用猴头喷雾器装显色液喷于纤维素点板上，样品斑点比对照品斑点颜色要浅（不得更深）。
显色剂配制：10%亚硝基铁氰化钠溶液、10%铁氰化钾溶液、10%氢氧化钠溶液，三试剂等体积混合放置20分钟即得；
6、重金属
（1）准备比色管三支，并标1、2、3做标记；取2mL标准铅溶液，放于试管1中；取二甲双胍样品1个溶于10mL水中于
试管2中；取1mL硫代乙酰胺和5mL混合物（氢氧化钠、
水、甘油混合物15:5:20）于试管3中，在沸腾的水浴中加
热20秒取出备用；分别在试管1和试管2中加入醋酸盐缓
冲液各2mL，然后再分别加入试管3溶液各2mL，分别再
用水稀释至50mL，摇匀，放置一会从上往下看样品2试管
应比标准1试管颜色浅为合格。
（2）取纳氏25mL比色管两支，甲管中加入标准铅溶液2mL与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL，加水稀释至25mL；乙试管中
加入供试品1.0g，加水溶解并稀释成25mL，再在甲乙两管
中分别加入硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2分钟，
同置于白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比
较，不得更深。
7、含量
取三个锥形瓶干燥，做标记1、2、空白；分别精确称取二甲双
胍样品0.07g于1、2瓶中，1、2、空白三瓶中各加入10mL冰
醋酸，再各加5mL醋酸汞5%溶液，再于电加热板上加热溶解
（不能使其在加热时沸腾），直至完全溶解；1、2、空白，各加
两滴萘酚苯甲醇指示剂，后用高氯酸标准溶液滴定，都至黄绿
色，分别记录高氯酸用量。
含量=高氯酸mol/L×0.08282×滴定数mL÷样品重量mg×100% 含量%=（V样-V空白）×C×T÷m
V样----样品消耗滴定液量mL
V空白—空白消耗滴定液量mL
C-------滴定液浓度mol/L
T-------滴定度8.282mg，计算时换为g，即8.282/1000
m-------样品重量g
干燥品含量%=含量%÷（1-水分%）注：水分%=干燥失重。