苏云金芽孢杆菌生物杀虫剂概述
苏云金芽孢杆菌杀虫剂是怎样杀灭害虫的
死 在 恶 劣 的 环 境 条 件 下 如 培 养 基 中 养料 消 耗 殆 尽 细 胞 不 再 分裂 开 始形 成芽抱
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苏云 金 芽 饱 杆 菌 杀 虫 剂 简 称 为 B t 杀虫剂
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现代 发酵 技术制 成 的一 种 无 公 害 杀 虫 剂
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还可 用于 杀灭蚊 蝇 等
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害 虫 为 了 帮 助 农 民 了 解 这 种 杀虫 剂 的 杀 虫 机 理
苏云金杆菌简介
苏云金杆菌简介
苏云金杆菌简称Bt，是包括许多变种的一类产晶体芽孢杆菌。
可用于防治直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目，特别是鳞翅目的多种害虫。
剂型有苏云金杆菌可湿性粉剂(100亿活芽孢/g)，Bt乳剂(100亿孢子/mL)。
在低于25℃干燥通风的情况下可贮存两年。
苏云金杆菌制剂可用于喷雾、喷粉、灌心、制成颗粒剂或毒饵等，也可进行大面积飞机喷洒，也可与低剂量的化学杀虫剂混用以提高防治效果。
草坪害虫的防治用100亿孢子/g的菌粉750g／hm2对水稀释2000倍喷洒，或用乳剂1500～3000g/hm2与52.5～75kg的细沙充分拌匀，制成颗粒剂撒人草坪草根部，防治危害根部的害虫。
也可将苏云金杆菌致死的发黑变烂的虫体收集起来，用纱布袋包好，在水中揉搓，每50g虫尸洗液加水50～l00kg喷雾。
注意事项
1、施用期一般比使用化学农药提前2～3d，对害虫的低龄幼虫效果好，30℃以上施药效果最好；
2、不能与内吸性有机磷杀虫剂或杀菌剂混合使用；
3、苏云金杆菌可湿性粉剂应保存在低于25℃的干燥阴凉仓库中，防止曝晒和潮湿，以免变质。
苏云金芽孢杆菌筛选及其对蚊科幼虫的杀虫活性
苏云金芽孢杆菌筛选及其对蚊科幼虫的杀虫活性苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）是一种常见的土壤细菌，被广泛用作生物杀虫剂。
它通过产生特殊的杀虫晶体蛋白（Cry蛋白），对某些昆虫的幼虫具有高度的杀虫活性，对环境和人类安全无害。
本文主要探究苏云金芽孢杆菌的筛选方法，并研究其对蚊科幼虫的杀虫活性。
苏云金芽孢杆菌的筛选可以通过以下步骤进行：采集土壤样品，将其接种到富含营养的培养基中，如T3培养基。
将培养基孵育在适宜的温度下，并进行连续传代培养，以保持苏云金芽孢杆菌的纯度和活力。
接下来，用半定量法检测培养基中的苏云金芽孢杆菌数量。
可以使用琼脂糖平板法，将一定体积的培养基平铺在琼脂糖平板上，然后在适宜温度下培养。
苏云金芽孢杆菌形成的典型菌落呈灰白色，巨大菌落的培养液显示菌落明显，以及青霉菌类在菌落表面的出现等都是筛选的重要指标。
然后，根据苏云金芽孢杆菌对蚊科幼虫的杀虫活性，进行活性筛选。
将苏云金芽孢杆菌转接到含有蚊科幼虫的培养基中，进行培养。
观察苏云金芽孢杆菌对蚊科幼虫的杀虫效果，并进行杀虫活性测试。
可以通过观察幼虫的死亡情况、体表异常和生长抑制等指标来评估杀虫活性。
选取具有较高杀虫活性的苏云金芽孢杆菌进行进一步研究。
可以通过形态学观察、鉴定晶体蛋白类型和测定晶体蛋白的产量等方法，对选择出的苏云金芽孢杆菌进行深入研究。
苏云金芽孢杆菌对蚊科幼虫的杀虫活性主要依赖于其产生的Cry蛋白。
Cry蛋白在蚊科幼虫的肠道内起到杀虫作用。
当幼虫摄入含有Cry蛋白的培养基时，Cry蛋白与幼虫肠道内的特定受体结合，使幼虫肠道发生溶解和结构破坏，最终导致幼虫死亡。
Cry蛋白具有高度的选择性，对昆虫的杀伤作用明显，而对其他生物几乎无毒性。
研究表明，苏云金芽孢杆菌对蚊科幼虫具有较高的杀虫活性。
对白纹伊蚊幼虫的研究发现，苏云金芽孢杆菌具有很好的杀虫效果。
实验结果显示，苏云金芽孢杆菌处理组的幼虫死亡率明显高于对照组，而且处理组的幼虫体长、体重显著低于对照组，说明苏云金芽孢杆菌不仅能有效杀死蚊科幼虫，还能抑制其生长发育。
苏云金杆菌杀虫剂使用须知
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苏云金芽孢杆菌杀虫剂作用机理及应用
苏云金芽孢杆菌杀虫剂作用机理及应用一、苏云金芽孢杆菌杀虫作用机理1、苏云金杆菌致病机理苏云金杆菌对昆虫的致病作用是通过它所产生的毒素和芽孢而引起的。
一般是伴孢晶体的毒素使昆虫发生毒血症而死亡，由于晶体毒素对昆虫中肠上皮有破坏作用，使肠壁受损，中肠的碱性、高渗内含物进入昆虫血腔，使血液pH升高导致染病幼虫麻痹而死亡。
而芽孢是在肠道中萌发为菌体通过由晶体毒素破坏的中肠肠壁进入血腔，菌体在血腔中进行繁殖从而引起昆虫败血症的发生，造成染病昆虫的死亡。
而β-外毒素是RNA聚合酶的竞争抑制剂，可干扰昆虫有关激素的合成，从而导致幼虫发育畸形或不能正常化蛹。
苏云金芽孢杆菌虽然有较强的杀虫能力，但它必须经吞食过程进入体内才能杀死昆虫。
因此，在实际应用中，将其与吸引昆虫的物质一起喷洒，可以增加昆虫吞食的可能性。
二、苏云金芽孢杆菌在害虫防治上的应用苏云金芽孢杆菌类的各变种对鳞翅目、膜翅目、直翅目、双翅目、鞘翅目等350余种昆虫有不同程度的防治效果，但主要应用于防治下列害虫。
1、经济作物类棉铃虫，红铃虫，造桥虫，烟青虫。
2、蔬菜类菜青虫，小菜蛾，菜螟。
3、粮食作物类二化螟，三化螟，稻苞虫，稻纵卷叶螟，玉米螟等。
4、果树类松毛虫，桃小食心虫，尺蠖，大袋蛾，卷叶蛾等。
三、苏云金芽孢杆菌的使用方法苏云金芽孢杆菌杀虫剂效果对虫龄越小防治效果越好，使用时必须掌握好时机和用量。
苏云金芽孢杆菌农药药效较慢，一般害虫进食30min后停止为害作物，24h开始死亡，48h达到死亡高峰，72h死亡率达95%以上。
1、单用喷粉，喷雾均可。
2、混用为提高药剂的防治效果，特别是在害虫大发生和多种害虫混合发生时，可与非碱性的杀虫双、杀虫单、甲胺磷、三唑磷等常用化学杀虫剂混用，作用互补，效果更佳。
但必须现配现用，最好不和其他杀菌剂混用，以免影响防治效果。
3、与其他生物农药混用可与白僵菌，小菜蛾GV等混用。
四、苏云金芽泡杆菌使用注意事项：1、温度使用苏云金芽孢杆菌制剂的适宜温度在25℃以上，温度过低完全失去杀虫作用：在25～30℃时使用，其防治效果比10～15℃时高出1～2倍，温度低于20℃时最好不使用。
苏云金杆菌
苏云金杆菌杀虫剂苏云金杆菌简称Bt，是包括许多变种的一类产晶体芽孢杆菌。
可用于防治直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目，特别是鳞翅目的多种害虫。
目前世界上研究最深入, 应用最广泛的微生物杀虫剂, 对人畜安全, 不伤害控制害虫群体的天敌, 不污染环境, 是生物防治害虫的重要组成部分, 更适合农作物虫害的综合防治。
苏云金杆菌是一种微生物源低毒杀虫剂，以胃毒作用为主。
该菌可产生两大类毒素，即内毒素（伴胞晶体）和外毒素，使害虫停止取食，最后害虫因饥饿和死亡而外毒素作用缓慢，在蜕皮和变态时作用明显，这两个时期是RNA合成的高峰期，外毒素能抑制依赖于DNA的RNA聚合酶。
该药作用缓慢，害虫取食后2天左右才能见效，持效期约1天，因此使用时应比常规化学药剂提前2～3天，且在害虫低龄期使用效果较好。
由于苏云金杆菌制剂的杀虫活性物质是一种毒性晶体蛋白与活菌的混合物, 其防效易受强光、温度和雨水的影响。
最适宜使用苏云金杆菌的温度是24～32℃, 不适宜温度为13～17℃, 雨水主要影响施药的残效期。
使用苏云金杆菌杀虫剂一定要在阴天或晴天下午4点以后施药于害虫危害部位。
对鱼类、蜜蜂安全，但对家蚕高毒。
苏云金杆菌一般对暴食叶片的鳞翅目害虫防效好, 对结苞、卷叶、钻蛀性害虫防治技术性强。
如: 2 代棉铃虫发育世代较整齐, 前代成虫产卵主要在棉株嫩尖上, 且初孵幼虫有食卵壳的习性, 防治2代棉铃虫, 主要喷在棉株顶部嫩叶正反面, 即可达到防治效果。
稻纵卷叶螟幼虫两龄前结苞较松, 傍晚转苞危害, 防治它应在其幼虫2 龄前, 傍晚施药。
玉米螟幼虫在玉米心叶末期, 有群聚喇叭口内危害习性,只要用苏云金杆菌对着喇叭口喷雾或拌毒土撒施入喇叭口内即可。
小菜蛾( 吊丝虫) 幼虫2 龄前, 喜在十字花科作物叶背群聚食叶肉, 这是防治的最适期。
豆荚螟, 本着治花不治荚的原则, 在日出前重点喷在蕾、花、嫩荚和落地花上。
第2 代茶毛虫的初孵幼虫,有群聚叶背取食叶肉习性, 用苏云金杆菌防治应掌握这一时机。
科普：苏云金杆菌
科普：苏云金杆菌
苏云金杆菌
即苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis，Bt）被发现已有100 年的历史，其在害虫防治中发挥了巨大的作用，是近年来研究最深入、开发最迅速、应用最广泛的微生物杀虫剂。
苏云金杆菌的防虫原理是其菌株可产生内毒素（伴胞晶体）和外毒素两类毒素，使害虫停止取食，害虫均因饥饿、血液败坏和神经中毒而死。
应用领域
苏云金杆菌适用对象非常广泛，可应用于十字花科蔬菜、茄果类蔬菜、瓜类蔬菜、烟草、水稻、玉米、高粱、大豆、花生、甘薯、棉花、茶树、苹果、梨、桃、枣、柑橘、香蕉、芒果、荔枝等多种农作物及森林、草原。
苏云金杆菌杀虫谱较广泛，主要用于防治鳞翅目害虫幼虫，如菜青虫、小菜蛾、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、甘蓝夜蛾、烟青虫、玉米螟、稻纵卷叶螟、二化螟、松毛虫、茶毛虫、茶尺蠖、玉米粘虫、豆荚螟、银纹夜蛾等多种害虫幼虫，部分亚种或菌株对根结线虫、蚊幼虫、韭蛆、甲虫等害虫也有一定防治作用。
注意事项
1.苏云金杆菌在气温较高时（20℃以上）才能充分发挥作用，所以在7～9月份应用效果最好；施药适期一般比使用化学农药提前2～3天为宜。
2.对稻纵卷叶螟、玉米螟、造桥虫、松毛虫和茶毛虫等都有效，但对大螟等效果较差。
3.对蜜蜂低毒，但对家蚕和蓖麻蚕有剧毒，应严格控制，不可在养蚕的地区使用。
若桑叶沾上菌粉时，要用0.2%漂白粉杀菌，洗净、晾干后再喂用。
4.不可与杀菌剂混用。
5.宜密封、遮光，在阴凉、干燥处保存，并且要防鼠咬。
微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bt)的研究现状及应用
《微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌（Bt）的研究现状及应用》苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌，简称Bt。
苏云金杆菌的发现，为人们利用微生物消灭植物病虫害提供了美好的前景。
化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏，而害虫种群的抗药性也日益提高，因此生物杀虫剂因为其“绿色环保”的特点日益引起人们的广泛关注。
现在，人们已经用发酵罐大规模地生产苏云金杆菌并制成粉剂或可湿剂、液剂，应用于农业，对100多种害虫有不同的致病和毒杀作用。
苏云金芽孢杆菌是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。
本文简要介绍作为生物杀虫剂的Bt的发展历史、研究现状和应用情况。
研究历史[1]1901年，日本学者石渡繁胤（Ishiwata Shigetane）从虫尸体液中分离出苏云金杆菌猝倒变种（Bacillus.thuringiensis var.sott）成为苏云金杆菌研究的起点[2]。
1911年，Berliner发现一杆菌，并详细描述了该菌的形态和培养特征，定名为苏云金杆菌（Bacil-lus.thuringiensis），指明苏云金杆菌含伴孢晶体（Paraspora crystl）[3]。
1938年，苏云金杆菌商品化，用于防治地中海粉螟。
20世纪50年代许多国家进行了商业性生产。
1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关，并和Fitz-James于1955年证实，伴孢晶体是一种蛋白质。
1981年，Schnept和Whiteley首次将HD21菌株伴孢晶体的基因克隆到大肠杆菌中，并得到表达。
20世纪60年代用血清学技术进行Bt的鉴定和分类。
自二次世界大战后，苏云金芽孢杆菌被广泛使用，至今已有60多年[4]。
由于其推广力度以及人们的农药使用意识的传统观念限制，目前生物农药仅占全部农药市场份额很少一部分，从此可看出，苏云金芽孢杆菌杀虫剂任然具有较大的发展潜力。
简介Bt是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，为昆虫病原细菌，其菌体为短杆状、有鞭毛，一般单生或形成短链。
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苏云金芽孢杆菌生物杀虫剂概述
[摘要]苏云金杆菌是一种在自然界中广泛分布的好气芽孢杆菌，它能产生特异性的杀虫结晶蛋白, 对鳞翅目、双翅目、鞘翅目、膜翅目、螨类和线虫等许多有害的昆虫有毒杀作用。
[关键词]苏云金芽孢杆菌历史杀虫机理
苏云金杆菌(Bacillus.thuringiensis.简称Bt)从自然界分离出来的昆虫病原细菌，革兰氏染色阳性，在芽孢形成期间能产生伴胞晶体。
它是一类发展时间最早的生物杀虫剂，在害虫的综合防治中已经成为一种占主导地位的生物农药。
自商品化以来，Bt 产品就以其高效安全、对目标害虫的特异性、生物降解无残毒等优点而倍受亲睐，并逐渐成为研究最深入、应用最广泛的生物杀虫剂。
然而Bt 目前仍然不能完全替代化学农药，因为它在具有绿色、环保等优势的同时也具有一些重大缺陷，主要是产品的稳定性较差、残效期短、杀虫速度慢等，另外货架寿命短也是限制其发展的重要因素。
为此人们不断地对它进行改造。
一、苏云金芽孢杆菌的研究历史
1901年，日本学者石渡繁胤(S.Ishiwata)从虫尸体液中分离出一所谓的猝倒细菌(Sott bacteria)。
按现在的分类系统，该菌就是现在苏云金杆菌猝倒变种(Bacillus.thuringiensis var.sott)。
石渡繁胤的发现，成为苏云金杆菌研究的起点[6]。
1911年，Berliner分离出一种杆菌，他详细描述了该菌的形态和培养特征，并定名为苏云金杆菌(Bacillus.thuringiensis)。
他指明苏云金杆菌含伴孢晶体(Paraspora crystl)，但不曾说明伴孢晶体有杀虫的作用。
Berliner所定名的苏云金杆菌按现在的分类系统，应该是苏云金杆菌苏云金变种(Bacillus thuringiensis var. thuringiensis)。
1938年，第一个苏云金杆菌商品制剂Sporeine，在法国问世，并用于防治地中海粉螟。
1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关。
随后，Hannay 和Fitz-James于1955年证实，伴孢晶体是一种蛋白质。
到50年代末，相继发现了苏云金杆菌产生的其它几种毒素。
Heimpel于1967年将它们划分为四类，即α-外毒素、€%[-外毒素(苏云金素) 、β-外毒素、δ-内毒
素(伴孢晶体蛋白消化激活后产生的毒性肽)。
1981年，Schnept和Whiteley首次将HD21菌株伴孢晶体的基因克隆到大肠杆菌中，并得到表达。
1987年，美国Monsanto公司用自己构建的Sev载体系统转移Kurstaki的内毒素基因，获得抗鳞翅目害虫的蕃茄转化株。
我国研究和应用苏云金杆菌起步晚，50年代末才从国外引种苏云金杆菌，60年代投入工业化生产。
但发展相当快，据统计，在70年代，我国的苏云金制剂年产量就达1000吨以上，部分产品出口到泰国、新加坡及我国的台湾、香港等地。
总之，苏云金杆菌的研究进入80年代以后，研究的范围越来越广，包括内毒素毒性蛋白成分，作用机理、苏云金杆菌遗传与育种技术、基因工程、杀虫谱、抗性等的研究。
特别是1992 年联合国在巴西召开的“世界环境和发展大会”，既促进了全球生物防治的发展，同时又推进了Bt 制剂产业化的进程。
二、苏云金芽孢杆菌的生态学分布
苏云金芽孢杆菌在许多生态环境(如土壤、昆虫尸体、贮藏物、植被以及污水、尘埃等基质) 下均有广泛的分布。
Meadow分析了Bt在环境中三种流行的地位：作为昆虫病原细菌，作为土壤微生物，作为phylloplant的居住者。
虽然Bt 菌株的分离从虫尸或仓储粉尘中较土壤中更加容易，但土壤作为微生物的大本营，是苏云金芽孢杆菌分布最为丰富的生境。
因此土壤环境往往被选择作为研究不同苏云金芽孢杆菌资源的材料，许多对特定目标昆虫有毒的亚种(或菌株)也从土壤分离到，如鲇泽亚种(subsp.aizawai)。
苏云金芽孢杆菌的亚种与血清型在土壤中的分布表现出一定的地域特色，且分布数量与土壤类型、pH值、土壤腐殖质、植被及其它微生物种群与数量等有关。
李荣森等1989 年报道了从云南、贵州、四川和陕西等省采集土样的分离体中出现频率最高的是H3和H5，其次是H4、H7和H13。
三、形态学特征及杀虫机理
苏云金杆菌形成芽孢的过程中，在菌体内的一端或两端形成一个或多个形状一致或不同的伴孢晶体，主要成分是具有杀虫活性的蛋白质，故又称为杀虫晶
体蛋白或€%]-内毒素。
Bt的杀虫活性完全或主要来自伴胞晶体。
一般认为杀虫晶体蛋白的杀虫作用过程要经过溶解、酶解活化、与受体结合、插入以及孔洞或离子通道的形成等五个环节。
当被敏感昆虫吞噬后，在昆虫中肠碱性环境条件下溶解释放出原毒素，原毒素又在中场蛋白酶的作用下被激活为毒素，然后与中肠上皮细胞刷状缘膜的受体结合，迅速不可逆地插入到细胞膜中，形成孔洞或离子通道，引起离子渗透，导致细胞膨胀解体。
扰乱中肠内正常的跨膜电势及酸碱平衡，导致上皮细胞退化，内脏机能麻痹，进食停止，最终害虫因饥饿和(或) 败血而死。
有些B t 变种的毒蛋白还能碱解出B2外毒素，在昆虫体内抑制RNA 的合成，使细胞分裂受阻而导致死亡。
四、存在的问题
B t 生物杀虫剂在国内生产应用主要存在四个问题:
一、是药效慢，通常施用一天后才显效果，2 - 3 天害虫死亡，而化学农药30m in 就显效;
二、是成本高，国产B t 制剂毒效太低，用量是常规化学农药的3—5 倍;
三、是倒罐率高，生产时控制不严格，易感染杂菌，其中由溶原性噬菌体引起的发酵倒罐率轻者为15% ～30% ，重者达50% ～80% ，甚至导致工厂的破产，故溶原性噬菌体已成为Bt发酵工业的最大危害;
四、是规格混乱，因执行企业标准，产品规格无统一要求，都由企业自定。
参考文献:
[1]王忠华,舒庆尧,崔海瑞,夏英武.Bt杀虫基因Bt转基因抗虫植物研究进展.植物学通报,1999,16(1):51~58
[2]喻子牛.苏云金芽胞杆菌制剂的生产和应用[M].北京:农业出版社,1993
[3]钟万芳,方继朝,郭慧芳.广谱高效Bt菌株的筛选及其杀虫蛋白基因的克隆.华南农业大学学报,2005,26(4):40~42
[4] Entwistle, P.F., Corey, J.S., Bayley, M.T.Bacillus thuringiensis, an
environmental biopescitide: theory and practice [M]. Chichester, England: John Wiley and Sons Ltd., 1993
[5]彭可凡.苏云金芽孢杆菌杀虫剂的剂型加工研究进展.微生物杂志,2000,20(1):35~37
[6]荣一兵.苏云金杆菌研究的历史和现状.黄石高等专科学校学报,2000,16(3):33~35。