PDA培养基的配制方法

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实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法在实验室中,培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础,正确配制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。

不同的微生物对营养物质的需求有所不同,因此需要根据实验目的和微生物的特性选择合适的培养基,并掌握正确的配制方法。

接下来,我将为大家详细介绍几种实验室常用培养基的配制方法。

一、LB 培养基(LuriaBertani 培养基)LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基,其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。

配制 1L 的 LB 培养基,所需材料如下:胰蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g配制步骤:1、称取上述成分,将其放入一个干净的 1L 烧杯中。

2、加入约800ml 的去离子水,用玻璃棒搅拌,直至溶质完全溶解。

3、用去离子水将溶液定容至 1L。

4、调节 pH 值至 70(通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl 进行调节)。

5、将培养基分装到锥形瓶中,每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。

6、盖上瓶塞,用报纸或牛皮纸包扎瓶口。

7、放入高压灭菌锅中,在 121℃下灭菌 20 分钟。

二、牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基,适用于多种细菌的培养。

配制 1L 该培养基,需要准备以下材料:牛肉膏 3g蛋白胨 10g氯化钠 5g具体配制步骤如下:1、称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放入干净的烧杯中。

2、加入适量的去离子水,搅拌溶解。

3、定容至 1L,搅拌均匀。

4、用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。

5、分装、包扎、灭菌,方法同上。

三、马铃薯葡萄糖培养基(PDA 培养基)PDA 培养基常用于培养真菌,尤其是霉菌。

配制 1L 的 PDA 培养基,材料如下:马铃薯 200g葡萄糖 20g琼脂 15 20g配制流程:1、将马铃薯去皮,切成小块,称取 200g,放入锅中,加入约1000ml 去离子水,煮沸 20 30 分钟,直到马铃薯块变软。

马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制

马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
实验一 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
一、食用菌菌种种类
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。
1)母种(一级菌种):用孢子分离或组织分 离等培育的菌丝体称为母种。
2)原种(二级菌种):把母种扩大到木屑、 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。
3)栽培种(三级菌种):由原种扩大培养成 为生产上使用的菌种称为栽培种。
4)菌种:实质上就是经过人工培养并进一步 繁殖的食用菌的纯菌丝体。
二、食用菌的制种程序
种菇
孢子分离 组织分离
接种→母种(一级) 接种→培养→原种(二级)
培养
接种→→栽培种(三级)
经过这样三级培养,食用菌菌丝数量大大增加。
一般1支试管菌种可繁殖4~6瓶原种,每瓶原种又 可扩大繁殖60~100瓶栽培种。
母种
原种和 栽培种
三、菌种生产常用的设备和用具 1、接种设备 ⑴ 接种室 ⑵ 接种箱 ⑶ 超净工作台
超净工作台
三、菌种生产常用的设备和用具
2、灭菌设备

1)手提式:容量小,适于斜面试

管及玻璃器皿等;
压 蒸
2)立式: 容量大,投资大;
气 灭
3)卧式:容量大,投资大;

4)家用24或26 cm压力锅:母种、
胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g葡萄糖或蔗糖1820g琼脂20ghpda培养基配制方法马铃薯去皮去芽眼切成片玉米大小称取20g70mlo煮沸1520min双层纱布过滤取滤液并补足100ml琼脂2g熔化葡萄糖2g分装试管不要倒到试管壁上塞上棉塞捆扎灭菌高压蒸气灭菌1530min制成斜面检查灭菌效果即2830培养23d1每人制5支试管斜面
三、菌种生产常用的设备和用具
3、培养设备 ⑴ 培养室 ⑵ 生化培养箱

食用菌栽培学实验---食用菌母种的制作实验

食用菌栽培学实验---食用菌母种的制作实验

食用菌母种的制作实验一、目的要求了解无菌操作规程,熟练掌握PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)的制作、母种的转管与培养技术。

二、材料与用具(1) 材料:马铃薯、葡萄糖、琼脂、酒精棉球、高锰酸钾、37%甲醛溶液、紫外线灯、标签纸等。

(2)用具:锅、玻璃棒、18mm×180mm试管、棉塞、纱布、牛皮纸、1000mL量筒、手提式高压蒸汽灭菌锅、菜刀、砧板、天平、烧杯、接种箱、超净工作台、接种针、酒精灯、恒温培养箱等。

三、内容与方法(一)PDA母种培养基的制作1.PDA培养基配方去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂18-20g,水1000mL,pH自然。

此配方培养基适用于香菇、黑木耳、金针菇、滑菇、灵芝、草菇、平菇等多种菌种,但不适用于双孢菇等有特殊营养要求的食用菌。

2.配制方法(1)确定使用量:根据人数确定使用量,一般每人制作10-20支培养基供接种用。

(2)制备营养液:马铃薯去皮、挖掉芽眼,切成黄豆大小的块。

称量后用略多于用量的水煮开,并维持10-20min,至马铃薯块酥而不烂,再用2层纱布过滤,取其滤液,定容至1000ml待用;琼脂称好后,用剪刀剪成小段,再用清水浸泡,以利于熔化;将琼脂条放人滤液申边煮边搅拌,至全部熔化。

再将溶液倒入量器中,加入葡萄糖,并不断搅拌使之完全溶解。

一般情况下,此营养液的pH不需要特意调节。

(3)营养液分装:趁热用注射器分装营养液。

营养液以装人试管容量(或高度)的1/5 左右为宜,一般18mmx180mm试管注人8-10ml营养液即可。

注意防止培养液粘到近管口的壁上装好后,塞好棉塞,每7支或10-12支捆成束,管口一端用防潮纸包扎好,待灭菌。

(4)灭菌:按照高压蒸汽灭菌锅的操作规程使用。

①加水:先向外锅加水,略超过支架。

②装锅:将灭菌物品装人锅内,不宜装得过满过紧,应留下1/5空间及空隙,以利蒸汽流通,并检查导管是否与排气网结合紧密,畅通。

③盖锅盖:对好内锅上插孔,盖好锅盖,对角将螺丝旋紧。

实验室常用培养基

实验室常用培养基

.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。

配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。

如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。

标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。

培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。

(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。

成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。

(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。

天然培养基一般不必调整pH。

(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。

pda培养基配置的原理

pda培养基配置的原理

pda培养基配置的原理
PDA培养基,通常也称为紫外通道培养基,是一种用于培养真菌菌株的液态培养基,是一种灰白色的粉末状的混合物,主要由酵母粉、蔗糖、凝胶、血清、矿质元素和碳水化合物组成。

其特性包括低氧,抑制杂菌的生长,促进真菌生长,还可以用来检测真菌菌株间的相互关系,如同它们之
间的系谱关系和共同特征。

PDA培养基在正确配制组成后,可以利用紫外
光照射这种培养基,以特殊的光照强度使背景发紫外反射,使图像突出显示;经过紫外照射变色,从而使得真菌和伪菌的形态明显区分开来,增强
菌类识别的准确性和效率,大大提高了识别菌类的速度。

首先,PDA培养基的成分配比必须谨慎控制,以确保培养基的稳定性。

这意味着主要原料(如碳水化物、矿质元素、血清、酵母粉和蔗糖)的含
量需要精确地控制在配置规定范围内。

比如,给定的亚硝酸盐对真菌的增
长具有显著的抑制作用,因此PDA培养基中的含量必须严格控制,以保证
培养基的可靠性和可控性。

此外,使用PDA培养基还需要考虑不同环境条件下的配置要求。

因此,在添加各种原料之前,首先检查培养基的pH值,防止不同种类的酵母形成
软化物,以及酵母毒素对真菌菌株的毒性影响,在环境pH值确定后,整体
培养组份比例应考虑到环境pH值影响,在使用硝酸钠时应控制在10毫克/升,另外要注意原料混合温度,以免改变培养基的性质。

最后,在配置PDA培养基时,还应注意维持良好的材料制备条件,以
免影响真菌的有效性和分类识别精度,确保高质量的培养基可以有效地提
升细菌的分类准确率。

在配制培养基时,需要保证过氧化物能量的首要性,才能达到预期的培养效果。

实验方法与步骤

实验方法与步骤

2.2 培养基的配制2.2.1 PDA固体培养基(1L)取新鲜的马铃薯,在洗净、去皮后称取200 g,切碎后放入装有800 mL蒸馏水的1 L的烧杯内。

使用控温电热套加热、煮沸30 min后,4层纱布过滤,收集滤液。

最后,用电子天平称取20 g蔗糖、15 g琼脂粉,倒入收集到的滤液中,搅拌均匀后定容至1000 mL。

2.2.2 Bavendamm氏反应培养基(1L)在1000 mL的PDA固体培养基中,加入0.4mM 鞣酸,并搅拌均匀。

2.2.3 氧化带测定培养基(1L)在1000 mL的PDA固体培养基中,加入0.04%的愈创木酚,并搅拌均匀。

2.2.4 液体产酶培养基(1L)即PDA液体培养基。

取新鲜的马铃薯,在洗净、去皮后称取200 g,切碎后放入装有800 mL蒸馏水的1 L的烧杯内。

使用控温电热套加热、煮沸30 min后,4层纱布过滤,收集滤液,并称取20 g蔗糖(或葡萄糖),并搅拌均匀。

最后,用量筒均匀地量取50 ml的培养基,倒入150 ml的三角瓶中。

2.3 实验方法2.3.1 菌种的纯化和扩大培养从桂林南方食用菌研究所购买的15个平菇菌株,需要利用PDA固体培养基进行菌种的纯化以及扩大培养,才能够在实验过程中使用。

在无菌操作台内,使用灭菌后的镊子,取菌种培养瓶内的平菇菌株,接种到事先配制好PDA固体培养基平板上,并放入28℃的恒温培养箱中。

待平菇菌株的菌丝长好后,再次转接到PDA平板上,28℃恒温培养8 d,进行扩大培养。

待菌丝长满整个平板后,即可用灭菌后的打孔器,将PDA平板上的菌种制成直径12 mm、厚2mm 的菌种塞,备用。

2.3.2 初筛用打孔器分别取1片纯化且培养好的直径12 mm、厚2mm的菌丝,接种于装有Bavendamm氏反应培养基的平板中心,置于恒温培养箱中,28℃条件下恒温培养。

最后,每天按时记录菌落周围是否产生棕色的轮环,有棕色轮环出现者记录为(+),无棕色轮环出现者则记录为(-),且用相机拍下平板上菌落周围的变化情况。

pda培养基的制作流程

pda培养基的制作流程

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马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制

马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
酒精: ⑴ 70%酒精:一般用于手、种菇表面消毒; 酒精 一般用于手、种菇表面消毒; 升汞: ⑵ 0.1%升汞:常用于玻璃器皿、非金属器械 升汞 常用于玻璃器皿、 及种菇表面消毒; 种菇表面消毒; 一般用于用具、器皿消毒; ⑶ 0.1%KMnO4:一般用于用具、器皿消毒;
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品 、
石炭酸: ⑷ 5%石炭酸: 喷洒墙壁 、 地面及擦洗桌面等 , 也 石炭酸 喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等, 可用来苏尔代替; 可用来苏尔代替; ⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭:用法同上; 来苏尔、 来苏尔 新洁尔灭:用法同上; 甲醛(福尔马林) ⑹ 甲醛 ( 福尔马林 ) : 用于菇房和接种箱等空气消 毒; 方法:关闭门窗消毒,自行气化; 方法:关闭门窗消毒,自行气化; 用量: 甲醛+ 立方米。 用量:10ml甲醛+5g KMnO4/立方米。 甲醛
四、母种生产技术
②综合马铃薯培养基 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 ( 或 蔗 糖 ) 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、 、 、维生素 、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 自然。 琼脂 、 、 自然 适合培养草菇、猴头菌、 适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌 种分离、保藏。 种分离、保藏。
四、母种生产技术
食用菌母种培养基的种类繁多, 食用菌母种培养基的种类繁多 ,由于不同营养 类型的食用菌对营养物质的要求不同, 所以, 类型的食用菌对营养物质的要求不同 , 所以 , 在 培养不同食用菌母种时, 培养不同食用菌母种时 , 应选择适宜该菌种的培 养基。 养基。 母种培养基要求营养丰富、 完全、 氮源、 母种培养基要求营养丰富 、 完全 、 氮源 、 维生 素的比例应高。 素的比例应高。 现将食用菌常用的母种培养基列举如下 :
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PDA培养基的配制方法
一、目的要求
1.学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2.学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理
培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质,用以培养、分离、鉴定、
保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中,微生物种类繁多,营养类型多样,加上实训
和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,但不论是何种培养基,均应含有水分、碳源、
氮源、能源、无机盐等。不同微生物对pH值要求不一样,所以配制培养基时,还应根据不
同微生物对pH值的要求,将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具
琼脂,可溶性淀粉,葡萄糖, 10﹪NaOH,10﹪HCl,1mol/L NaOH,lmol/L HCl,KNO3,NaCl,
K2HPO4·3H20,MgSO4·7H20,FeSO4·7H2O;试管,三角瓶,烧杯,量筒,玻璃棒,天平,牛角匙,PH
试纸,棉花,牛皮纸,记号笔,纱布,
四、操作方法与步骤

(一) 培养基的配制
PDA培养基的配制 其配方如下:土豆200g,葡萄糖20g,琼脂15~20g,水1000mL,pH值自然。
(1)称量和熬煮 药品实际用量计算后,按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水
1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充
水分到1000ml。
(2)加热溶解 把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小
火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装 按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培
养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为
宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(4) 加棉塞 培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止
外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎 加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润
湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

(二) 棉塞的制作
棉塞的作用有二:一是防止杂菌污染;二是可过滤空气,保证通气良好,并可减缓培养基水分的蒸发,所以
正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。正确的棉塞是形状、大小,松紧应与试管口(或三角烧瓶)完全适
合。过紧则妨碍空气流通,操作不便;过松时,空气会毫无障碍地进入试管(或三角烧瓶)中,达不到灭菌的目
的。棉塞过小往往易掉进试管内,因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响。正确的棉塞头较大,加塞
时,应使棉塞长度的1/3留在试管口外,2/3在试管口内(见实训图6-4)。目前,有条件的实训室已使用坚固
的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞,制作棉塞要选纤维较长的棉花,一般不选用脱脂棉。因为它
容易吸水变湿,造成污染,而且价格也贵。棉塞制作方法见图6-5
实图6-4棉塞 实图6-5 棉塞的制作方法
(三)斜面与平板培养基的制作
斜面与平面培养基是常用的琼脂固体培养基。将熬制好的琼脂培养基趁热装入试管灭菌后摆鞋面,凝固
后即成斜面培养基。斜面培养基常用于菌种培养、菌种保藏等工作。将灭菌后的琼脂培养基倾注于无菌培养
皿中,凝固后即成平板培养基。平板培养基常用于分离菌种、菌落计数、菌落形态观察及菌种鉴定等。斜面
与平板培养基的制作过程大致为:溶解原料、融化琼脂、调PH、分装、灭菌和制斜面或平板。
1、溶解原料
为加速原料的溶解,最好用热水。先将原料依次加入到占配制量一半的水中,待全部溶解后在加足水
量。如配方中有马铃薯、麸皮、胡罗卜、豆芽等天然原料,需将其熬制约30min,取出定量滤液,在将所需
的其他原料加入滤液中。
2、融化琼脂
琼脂的用量可灵活掌握。用作保藏菌种的培养基,琼脂用量可提高至2.5%,以增加持水性。冬季
的气温低,琼脂用量可适当减少。琼脂用前可剪成小段,以利于融化。待溶液煮沸是再加入,不断搅拌至
完全无琼脂块状物时再停止加热。
3、调整PH
用洁净干燥的玻璃棒沾一点培养基滴在试纸上,立即与比色板比较。一般用10%NaOH或HCl调节。
4、分装
将培养基趁热倒入垫有纱布的漏斗中,使培养基直接滤至试管或三角瓶中,试管装量一般为管高的1/4
左右,三角瓶的装量约为其容量的一半。勿使培养基玷污容器口部。口部塞有棉塞,试管每7或9 支扎一
捆,棉塞外面包牛皮纸,以防在灭菌过程中被水汽打湿。
5、灭菌
分装后的培养基应随即灭菌。除特殊情况外,一般培养基均用高压蒸汽灭菌,在104kPa压力下,灭菌
20-30min 。
6、制作斜面或平板
将灭菌后的试管趁热斜置于棍条上,倾斜度以试管中的培养基约占试管长度的1/2为宜,凝固后即成
斜面培养基。待灭菌后三角瓶内的培养基冷却至45~50时,以无菌操作法向无菌培养皿中倒入培养基,装
置以刚覆盖整个培养皿底部为宜(约15ml),凝固后即成平板培养基。
五、高压蒸汽灭菌法
该法使用高压灭菌锅,在121℃,O.105MPa压力下灭菌15~30min。微生物实训所需的一切器皿、器
具、培养基(不耐高温者除外)、无菌水、工作服等物品都可用此法灭菌。
高压蒸汽灭菌锅是能耐一定压力的密闭金属锅,有立式或卧式(实图8-1、2 )两种。
灭菌锅上附有压力表、排气阀、安全阀、加水口、排水口等。卧式灭菌锅还附有温度计。有的还有蒸汽
人口。灭菌锅的加热源有电、煤气和蒸汽三种。
高压蒸汽灭菌的操作过程
(1) 加水 将灭菌锅内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,以水面与三角架相平为宜。立式锅
是直接加水至锅内底部隔板以下1/3处。有加水口者由加水口加入至止水线处。
(2) 装料 将装料桶放回锅内,装入待灭菌的物品。放置装有培养基的容器时要防止液体溢出,瓶塞不
要紧贴桶壁,以防冷凝水沾湿棉塞。
(3) 加盖 摆正锅盖,对齐螺口,然后以同时旋紧相对的两个螺栓的方式拧紧所有螺栓,打开排气阀。
(4) 排气 用电炉或煤气加热,待水煮沸后,水蒸气和空气一起从排气孔排出。一般认为,当排气流很
强并有嘘声时,表明锅内空气已排净(沸后约5min)。
(5) 升压 当锅内空气排净时,即可关闭排气阀,压力开始上升。
实图7-1 立式灭菌锅 实图7-2 卧式灭菌锅
1.安全阀 2.压力表 3.放气阀
4.软管 5.紧固螺栓 6.灭菌桶
7.筛架8.水
(6)保压 当压力表指针达到所需压力刻度时,控制热源,开始计时并维持压力至所需时间。本实训用
121℃、20rnin灭菌。
(7)降压 达到所需灭菌时间后,关闭热源,让压力自然下降到零后,打开排气阀。放净余下的蒸汽
后,再打开锅盖,取出灭菌物品,排掉锅内剩余水。
(8)无菌检查 将已灭菌培养基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h,若无菌生长,则放人冰箱或阴凉处保
存备用。
4.化学药品灭菌 化学药品消毒灭菌法是用能抑制或杀死微生物的化学制剂进行消毒灭菌的方法。能
破坏细菌代谢机能并有致死作用的化学药剂为杀菌剂,如重金属离子等;仅阻抑细菌代谢机能,使细菌不能
增殖的化学药剂为抑菌剂,如磺胺类及大多抗生素等。化学药品对微生物的作用是抑菌还是杀菌以及作用效
果,还与化学药品浓度的高低、处理微生物的时间长短、微生物的种类及微生物所处的环境等有关。
微生物实训室中常用的化学药品有2%煤酚皂溶液(来苏尔)、O.25%新洁尔灭、0.1%升汞、3%~5%
的甲醛溶液和75%乙醇溶液等。
5.注意事项
(1)使用高压灭菌锅应严格按照操作程序进行,避免发生事故;灭菌时,操作者切勿擅自离开;务必待压
力降到零后,才可打开锅盖。
(2)干热灭菌时电烘箱中物品不要摆得太拥挤,以免阻碍空气流通而影响灭菌效果;灭菌物品不要与电烘
箱内壁的铁板接触,以防包装纸烤焦。
(3)记述高压蒸汽灭菌的操作过程及注意事项。
六、实验报告(思考题)
1.培养基根据什么原理配制成?牛肉膏蛋白胨培养基中不同成分各起什么作用?
2.配制培养基有哪几个步骤?在制备培养基的过程中应注意些什么问题? 为什么?
3.记录本实训配制培养基的名称、数量,并图解说明其配制过程,指明要点。
4.培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌?已灭菌的培养基如何进行灭菌检查?

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