基于杯[4]芳烃探头的固相微萃取-毛细管电泳法测定尿样中的兴奋剂普萘洛尔异构体

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色
谱
第 !" 卷
# # 普萘洛尔是一 种 ! ! 阻 断 剂， 其两种旋光异构体 都被国际反 兴 奋 剂 机 构 （ "#$%& ’()*!+#,*(- ’-.(! "’+’ ） 列为运 动 员 禁 用 药 物， 其常用的分析手 /0 ， 段为高效液相 色 谱 1 质 谱 法 （ 2345 1 67 ） ， 样品的预 处理多为固相萃取 法， 分析过程包括筛选与确证两 个阶段
。由于手性 拆 分 的 复 杂 性， 兴奋剂检测中
一般没有 提 供 异 构 体 的 相 关 信 息。 "’+’ 要 求 从 事兴奋剂 检 测 的 实 验 室 对 于 ! ! 阻 断 剂 检 测 的 最 小 要求 检 出 限 （ 8*(*898 $.:9*$.& ,.$;#$8<(/. %*8! *)= ， 6>34 ） 为 %& ’ 8- 1 4
收稿日期： !""- .$$ ."+ 第一作者： 周兴旺， 男， 博士研究生 $ 通讯联系人： 曾昭睿， 女， 教授， 博士生导师， &’()*# ： +,+-./ / 012$ -32$ 4.$ 基金项目： 国家自然科学基金资助项目 （ %"$ !"01-"!2 ） 、 国家 “ 2#0 ” 计划资助项目 （ %"$ !""! 55! 6!""+ ） $
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# # 普萘洛尔标准 储 备 液 的 配 制： 准确称取普萘洛 尔盐酸盐 $ 8- 于 $% 84 容 量 瓶 中， 用二次蒸馏水 定容， 于 " J 冰箱中保存。 ! ! #" 探头的制备 # # 736? 涂 层 的 制 备 过 程 主 要 包 括： （$） 石英纤 维的预处理； （!） 溶 胶 溶 液 的 制 备； （(） 在石英纤维 上进 行 涂 层； （ " ）736? 涂 层 的 老 化 处 理［ - ］。 取 ’$& ! 8- 双缩水甘油基 杯 ［"］ 芳 烃 以 及 ’% 8- I2! ’’% 在室温下于 塑 料 管 中 超 声 搅 拌 反 应 !% 8*( ， 再 加入适量 A2!B7A 、 $%% ! 4 B?A7 和 $% 8- 3627 ， 超声搅拌下 再 反 应 ’ 8*( ， 得 到 溶 胶 清 液。 将 已 去 掉保护层的干燥的石英纤维 一端插 入 溶 胶 清 液 中 ’ . $% 8*(（ 视涂层厚度反复操作数次） ， 取出后干 燥 $! K ， 在氮气保护 下 于 !,% J 老 化 ! K ， 所得探头涂 层厚度为 *% ! 8 。用同样方 法制 备了不 含 杯 ［"］ 芳 烃的 A2!B7A 探头 （ 涂 层 厚 度 为 *% ! 8 ） 用于对比 实验。 ! ! $" 萃取与反萃取条件 # # 萃取条件： 采用顶空固相微萃取方式， 萃取温度 为 )% J ，萃 取 时 间 为 (% 8*( ，L<A2 浓 度 为 " 8#% 1 4 ， 氯化钠质 量 浓 度 为 (%% - 1 4 ， 磁力搅拌速度 为$ %%% $ 1 8*( 。 # # 反萃取条 件： 反 萃 取 装 置 为 自 行 设 计。 采 用 超 （ 体 积 比 为 $% 声反萃取方式， 反萃 取 溶 剂 为 乙 腈 ! 水 / "% ） ， 反萃取温度为 "% J ， 反萃取时间为 $’ 8*( 。 ! ! %" 普萘洛尔的手性拆分条件 # # 新 毛 细 管 依 次 采 用 $ 8#% 1 4 L<A2 冲 洗 (% 8*( ， 二次蒸馏水冲洗 $% 8*( ， $ 8#% 1 4 25% 冲洗 (% 8*( ， 二次蒸 馏水 冲洗至 中性， 然后 用缓冲 溶液 冲洗 至平衡。两次分析间各用二次蒸馏水和缓冲溶液冲 洗毛细管 ’ 8*( 。优 化 后 的 拆 分 条 件： $%% 88#% 1 4 磷酸 （ 含 $% 88#% 1 4 羟 丙 基 ! ! ! 环 糊 精， 用三乙醇胺 调 ,2 值为 !& ’* ） 为 缓 冲 体 系； 电动进样 （ - ME + , =） ； 电泳分离电压 (% ME ， 柱温 !% J 。 ! ! &" 加标尿样的制备与检测 # # 尿样取自一个月内无服药史的健康人。尿样中 使 尿 样 呈 碱 性 且 L<A2 浓 度 加入一定量的 L<A2 ， 为 " 8#% 1 4 ， 置 于 " J 冰 箱 中 保 存。 碱 性 尿 样 中 的 沉淀物由 %& "’ ! 8 微 孔 滤 膜 过 滤。 在 已 装 入 搅 拌 磁 子 和 $& ’ - L<5% 的 $% 84 萃 取 瓶 中 加 入 经 L<A2 处理后的尿样清液 ’ 84 ， 加标后立即用带硅 橡胶垫的瓶盖封闭。
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。 "’+’ 鼓 励 在 实 验 结
果中提供异构体含量的相关信息。 # # 毛细管电泳技术在手杂 体 系 的 手 性 异 构 体 拆 分
时多采用液 ! 液萃 取 或 固 相 萃 取 法 对 样 品 进 行 预 处 理。固相微萃取技术 （ 736? ） 是 !% 世 纪 )% 年 代 初 期发展起来的一种 新 型 样 品 预 处 理 技 术， 该技术能 把样品净化、 预富 集 与 进 样 融 为 一 体 线固相微萃取 1 毛 细 管 电 泳 技 术
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基于杯 ［ !］ 芳烃探头的固相微萃取 !毛细管电泳法 测定尿样中的兴奋剂普萘洛尔异构体
! 周兴旺 $ ， ， 3 李秀娟 $ ， 3 曾昭睿 $
（ $ $ 武汉大学化学与分子科学学院，湖北 武汉 +0""1! ； ! $ 湖北师范学院化学与环境工程系，湖北 黄石 +0-""" ） ［+］ 芳 烃 羟 基 硅 油 探 头， 运用自行设计的反萃取装置实现了顶 摘要： 采用溶胶 ’ 凝胶法制备了一种双缩水甘油基杯 空固相微萃取与毛细管电泳的离线联用， 结合超声反萃取和场放大进样技术成功地 测 定 了 尿 样 中 兴 奋 剂 普 萘 洛 尔 芳烃探头与商品化探 异构体的含量。实验考察了固相微萃取条件和反萃取条 件 对 测 定 结 果 的 影 响， 比较了杯 ［+］ 头对于尿样中普萘洛尔异构体的萃取性能， 结果表明基于 杯 ［+］ 芳烃探头的固相微萃取过程能够实现满意的净化 效应与预富集效应。利用毛细管电泳 ’ 二极管阵列检测器对加标尿样中普萘洛尔 异 构 体 测 定 的 线 性 范 围 为 "4 "- , $" (/ 7 8 ， 检测限为 2 , $" ! / 7 8 ， 相对标准 偏 差 小 于 #4 - 9 （ ! 5 #） ， 两 种 异 构 体 的 加 标 回 收 率 为 2# 9 , $"1 9 （! 5 -） 。该探头的可重复使用 （ 6 $-" 次） 性能良好。 关键词： 杯 ［+］ 芳烃； 固相微萃取； 毛细管电泳； 兴奋剂； 普萘洛尔异构体 中图分类号： :#-23 3 文献标识码： 5 3 3 文章编号： $""" ’21$0 （ !""# ） "$ ’"""$ ’"+3 3 栏目类别： 研究快报
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