DNA损伤修复基因与放射性肺损伤研究进展
DNA 氧化损伤与慢性阻塞性肺疾病关系的研究进展
DNA 氧化损伤与慢性阻塞性肺疾病关系的研究进展许时丽;周玉生;李荣;盘捷【摘要】Chronic obstructive pulmonary disease(COPD)is a preventable and treatable disease,manifesting as air-flow limitation caused by chronic inflammation of airways and progressive destruction of lung parenchyma and structure. The patho-genesis of COPD is resulted by a variety of complex mechanisms such as inflammation,protease / antiprotease imbalance,oxida-tive stress,DNA damage,apoptosis,cell senescence and cell repair defects. This paper reviews the relationship between oxida-tive DNA damage and chronic obstructive pulmonary disease.%慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种可以预防和治疗的疾病，其特点是气道的慢性炎症以及肺实质和肺泡结构的渐进破坏，引起不完全可逆的气流受限。
COPD的发病是多种复杂机制相互作用的结果，如炎性反应、蛋白酶/抗蛋白酶失衡、氧化应激、DNA 损伤、细胞凋亡、细胞衰老和细胞修复功能缺陷。
本文对氧化应激引发的 DNA 氧化损伤与COPD的关系进行综述。
【期刊名称】《中国全科医学》【年(卷),期】2014(000)033【总页数】3页(P4015-4017)【关键词】肺疾病,慢性阻塞性;DNA;氧化性应激;综述【作者】许时丽;周玉生;李荣;盘捷【作者单位】421001 湖南省衡阳市，南华大学药物药理研究所;421001 湖南省衡阳市，南华大学药物药理研究所; 南华大学附属第二医院药剂科;南华大学附属第二医院药剂科;南华大学附属第二医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R563慢性阻塞性肺疾病(COPD)是以咳嗽、咳痰和喘息为临床表现，具有气流阻塞特征的慢性支气管炎和/或肺气肿，肺功能检查出现气流受限，即吸入支气管舒张剂后，第一秒用力呼气末容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC%)<70%，且不能完全可逆[1]。
急性肺损伤机制研究进展
急性肺损伤机制研究进展朱凯锐;赵航【摘要】急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALL/ARDS)是临床上的危重症,死亡率能达到40％-60％,当前仍无特效疗法.治疗药物和方法的研究都基于对ALI/ARDS 发病机制的深刻认知,本文总结归纳了ALL/ARDS的机制研究,希望能为ALL/ARDS 治疗药物和方法的后续研究提供参考.【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2018(031)019【总页数】4页(P2872-2874,2925)【关键词】急性肺损伤;急性呼吸窘迫综合征;凋亡机制;炎症机制【作者】朱凯锐;赵航【作者单位】浙江工业大学,浙江省杭州市310000;浙江工业大学,浙江省杭州市310000【正文语种】中文【中图分类】R563.8急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是危重的ICU患者脓毒症后的常见并发症。
1994年，ARDS的美国—欧洲共识会议(AECC)发表了一份关于定义、机制，相关结果和临床试验协调的声明试图描绘以及指导治疗，然而，由于适用于ALI和ARDS定义标准重叠，特别关于低氧水平和成像解释，仍然存在一些混乱[1]。
2012年，ARDS的柏林定义发表，强调了基于低氧血症的程度对ARDS 3个分类，轻度，中度和重度。
ALI与高发病率和死亡率密切相关，近年来，一些研究者报告了存活率的改善，主要是由于实施新的保护性通气策略和药物治疗。
即便如此，仍然需要使用多种方法(生物，基因组和遗传)的持续研究工作，以提供ALI清楚的基础病理生理机制。
本文将重点阐述ALI机制研究进展。
1 病理学特征1.1 发病机制 ALI/ARDS的常见原因是败血症(最常见的原因是肺源性的严重败血症)、外伤、误吸、多次输血、急性胰腺炎、吸入性损伤和某些类型的药物毒性。
弥漫性肺泡损伤(DAD)是临床ALI的主要病理学相关特征。
该过程的组织学表征在早期渗透或早期损伤阶段中发生，经过增生或组织化阶段，最后进入愈合或消退阶段[2]。
DNA损伤修复基因与放射性肺损伤研究进展
DNA损伤修复基因与放射性肺损伤研究进展周芊【摘要】@@ 恶性肿瘤严重威胁着人类的生命健康.胸部肿瘤约占恶性肿瘤的35%～45%,放射治疗是胸部肿瘤最主要的治疗手段之一,而放射性肺炎(radiation pneumonitis,RP)作为胸部肿瘤放疗常见的严重并发症和剂量限制因素,其发生率达5%～15%,一旦发生,通常引起严重的临床后果[1].【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2010(039)021【总页数】4页(P2970-2973)【关键词】辐射损伤;放射疗法;肺损伤;DNA损伤修复基因【作者】周芊【作者单位】第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆,400042【正文语种】中文【中图分类】R563.9%R730.55恶性肿瘤严重威胁着人类的生命健康。
胸部肿瘤约占恶性肿瘤的35%～45%，放射治疗是胸部肿瘤最主要的治疗手段之一，而放射性肺炎(radiation pneumonitis，RP)作为胸部肿瘤放疗常见的严重并发症和剂量限制因素，其发生率达5%～15%，一旦发生，通常引起严重的临床后果[1]。
不同个体接受放射治疗后放射性损伤的差别很大，遗传学和分子生物学研究提示，个体基因型差异和基因变异与放射性损伤相关。
本文就目前有关放射性肺损伤的发生机制以及DNA损伤修复基因在其中的作用进行综述。
1 放射性肺损伤发生机制放射性肺损伤表现为早期的放射性肺炎和后期的放射性肺纤维化。
以往认为早期放射性肺炎的靶细胞为肺泡Ⅱ型细胞、血管内皮细胞，靶细胞及微血管的损伤为其发病的主要机制[2]，但伴随分子生物学技术的发展，人们逐渐认识到单一的靶细胞或靶组织受损观点难以解释放射性肺损伤过程的动态变化。
目前认为肺的辐射敏感亚单位为肺泡/毛细血管复合体，放射性肺损伤表现为弥漫性肺泡受损。
放射诱导的活性氧直接作用于实质细胞并由此改变细胞因子的微环境从而启动一系列“分子级联”反应;随着活性氧自由基的增多，导致脂质过氧化、DNA和蛋白质的氧化以及致炎因子的进一步激活，最终导致肺纤维化[3-4]。
KAP1在恶性肿瘤发生、发展及治疗中作用的研究进展
KAP1在恶性肿瘤发生、发展及治疗中作用的研究进展刘秀文1，2，曹锟1，刘新光11 广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞523808；2 广东医科大学基础医学院摘要：恶性肿瘤是当前威胁人类健康的重要疾病，其整体发病率和死亡率均较高，并且呈现逐年上升趋势。
深入研究恶性肿瘤的发病机制对其早期诊断和治疗以及预后改善至关重要。
KRAB相关蛋白1（KAP1）是一个多功能蛋白质，能够参与基因转录抑制、DNA损伤修复、免疫调节、胚胎发育以及病毒感染等。
越来越多研究发现，KAP1在多种恶性肿瘤细胞中高表达，并通过调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学行为，参与恶性肿瘤的发生、发展，同时在肿瘤治疗耐药和免疫治疗中发挥一定作用。
但目前KAP1促进恶性肿瘤发生、发展的机制尚不完全清楚，仍需进一步研究。
关键词：恶性肿瘤；KRAB相关蛋白1；恶性生物学行为；耐药性；免疫治疗doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.25.026中图分类号：R730 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）25-0099-04恶性肿瘤是当前威胁人类健康的重要疾病，其整体发病率和死亡率均较高，并且呈现逐年上升趋势。
早发现、早诊断、早治疗能够有效延长恶性肿瘤患者生存时间，改善生存质量。
因此，寻找有效的生物标志物成为恶性肿瘤早期诊断和靶向治疗的关键。
KRAB相关蛋白1（KAP1）又称三重基序蛋白28、转录中介因子1β，最早于1996年由费雷德曼团队采用亲和层析法分离得到［1］。
KAP1属于TRIM蛋白家族的重要成员，能够参与基因转录抑制、DNA 损伤修复、免疫调节、胚胎发育以及病毒感染等［2］。
越来越多研究发现，KAP1在多种恶性肿瘤细胞中高表达，并通过调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学行为，参与恶性肿瘤的发生、发展。
本文结合文献就KAP1在恶性肿瘤发生、发展及治疗中作用的研究进展作一综述。
1 KAP1的分子结构及其生物学功能人类KAP1的编码基因定位于染色体19q13.43，全长6 254个碱基，包含17个外显子。
放射性肺损伤的风险预测进展
万方数据
匡堂！堕鏖煎壅；！！！生！！旦 整！！堂箜！！塑』竺！！！垦！！！型！！：！！！！！塑！！！：塑！！
性肺损伤发生的严重程度与超过肺放射性耐受量（ 阈值）的肺体积大小有着非常密切的关系。全肺照 射时，发生放射性肺损伤的阈值很低，约为６～８ Ｇｙ，但部分肺组织受到照射时，放射性肺损伤的阈 值一般为２０～３０ Ｇｙ。美国放射肺癌学协作组 （ＲＴＯＧ）在一个前瞻性的研究中发现Ｖ２０的大小不 仅与放射性肺炎的发生率高低相关，而且与放射性 肺炎的严重程度明显相关。Ｖ２０＜２０％时，无放射 性肺炎发生，２２％～３１％时。８％的患者发生２级 放射性肺炎，３２％时，才出现３级以上的放射性肺 炎【引。Ｃｌａｕｄｅ等［７３分析了９０例接受３一ＤＣＲＴ的 ＮＳＣＬＣ患者放射性肺炎的发生情况：所有患者 Ｖｄｏｓｅ平均值为Ｖ２０＝１８％，Ｖ３０＝１３％，Ｖ４０＝ １０％；单因素和多因素分析均表明Ｖｄｏｓｅ与放射性 肺炎发生率相关。Ｈｅｒｎａｎｄｏ等回顾性分析２０１例 未手术接受放疗的ＮＳＣＬＣ病例，３９例（１９％）发 生１级及以上放射性肺炎。放射性肺炎组的平均 Ｖ２０、Ｖ３０、Ｖ４０值分别为３４．７％、２９．９％、２４．４％（＂ ＝３９）；未发生放射性肺炎组的平均Ｖ２０、Ｖ３０、Ｖ４０ 值分别为２８．７％、２３．８％、２０．２％（咒一１６２）。因而 Ｖ２０、３０、Ｖ４０是放射性肺炎的有效预测因子。
肺癌的遗传易感性研究和家族遗传分析
论文题目：肺癌的遗传易感性研究和家族遗传分析1. 引言肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率在所有癌症中均居前列。
虽然吸烟是肺癌的主要风险因素，但遗传因素在肺癌的发生中也扮演着重要角色。
近年来，随着基因组学和分子生物学研究的进展，人们对肺癌的遗传易感性和家族遗传机制有了更深入的了解。
本文将系统探讨肺癌的遗传易感性研究、家族遗传分析以及相关的分子机制。
2. 肺癌的遗传易感性2.1 遗传易感基因的发现●EGFR基因：EGFR突变在非小细胞肺癌（NSCLC）中常见，特别是亚洲人群。
EGFR突变患者对酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗反应良好。
●KRAS基因：KRAS突变在吸烟相关的NSCLC中较为常见，预示着较差的预后和对TKI治疗的耐药性。
●ALK基因重排：ALK基因重排在NSCLC患者中约占5%，ALK抑制剂对这类患者有显著疗效。
●TP53基因：TP53突变在多种癌症中普遍存在，突变形式多样，预示着肿瘤的侵袭性和预后差。
2.2 全基因组关联研究（GWAS）全基因组关联研究通过分析大规模人群的基因型与表型数据，识别出多个与肺癌易感性相关的基因位点：●5p15.33位点：包含TERT和CLPTM1L基因，与多种癌症的易感性相关。
●6p21位点：HLA基因簇所在区域，提示免疫反应在肺癌发生中的作用。
●15q25位点：包含CHRNA5-CHRNA3-CHRNB4基因簇，与尼古丁依赖和肺癌风险相关。
3. 家族遗传分析3.1 家族性肺癌的特点●家族聚集性：家族中多名成员患有肺癌，且发病年龄较早。
●非吸烟相关：一些家族性肺癌病例发生在非吸烟者或轻度吸烟者中，提示遗传因素的作用。
3.2 家族性肺癌的遗传模式●常染色体显性遗传：某些家族性肺癌表现为常染色体显性遗传模式，即携带致病基因的个体有50%的概率将基因传递给子女。
●多基因遗传：家族性肺癌可能涉及多个基因的共同作用，这些基因的累积效应增加了患病风险。
3.3 遗传咨询和风险评估●家族史采集：详细记录家族中每位成员的疾病史，识别高风险个体。
高氧诱导新生鼠肺上皮细胞dna损伤及其修复基因ogg1的研究
ＤＮＡ损伤修复延迟，同时增加细胞凋亡【２２１。
研究已发现，ＯＧＧｌ在对抗氧化性ＤＮＡ损伤中起到重要作用。
然而，高氧致新生鼠ＢＰＤ的发生过程中是否存在肺上皮的ＤＮＡ损伤，以及该损伤是否与ＯＧＧｌ基因有关？相关研究少有报道。
本研究就以上问题展开探索，从而阐明ＤＮＡ损伤与ＢＰＤ的关系，试图为ＢＰＤ的防治寻找新的思路和途径。
材料与方法一、材料（一）实验动物健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠（中国医科大学附属盛京医院动物实验中心）。
（二）试剂兔抗大鼠多克隆ＯＧＧｌ抗体（Ａｂｅａｍ，ａｂ２２７６６）、ＳＰ．Ｃ抗体（ＳａｎｔａＣｒｕｚ）、ＴＲＩＴＣ标记的山羊抗兔荧光二抗（ＳａｎｔａＣｒｕｚ）、ＤＡＰＩ（Ｓｉｇｍａ）、Ｔｒｉｚｏｌ（ＴａＫａＲａ）、ＰｄｍｅＳｃｄｐｔ＠ＲＴｒｅａｇｅｎｔＫｉｔ（ＴａＫａＲａ）、ＳＹＢＲ⑩ＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑＴＭＩＩ试剂盒（ＴａＫａＲａ）、ＲｃａｌｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔｉｖｅＰＣＲ引物设计（ＴａＫａＲａ）、ＢＣＡ试剂盒（碧云天）、］３－ａｃｔｉｎ（ＳａｎｔａＣｒｕｚ）、蛋白Ｍａｒｋｅｒ（北京天根）、ＰＶＤＦ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、ＥＣＬ试剂盒（Ｍｉｌｉｐｏｒｅ）、彗星实验试剂盒（北京博乐通）、ＳＹＢＲＧｒｅｅｎ染料（Ｂｉｏｔｉｕｍ）、８－ＯＨｄＧＥＩＡＫｉｔ（Ｃａｙｍａｎ）、核酸酶ＰＩ（Ｓｉｇｍａ）、碱性磷酸酶（Ｓｉｇｍａ）、ＷｉｚａｒｄＧｅｎｏｍｉｃＤＮＡＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）、胰蛋白酶（Ｍｅｒｃｋ）、Ｉ型胶原酶（Ｇｉｂｉｃｏ）、ＤＭＥＭ培养基（ＨｙＣｌｏｎｅ）、胎牛血清（ＨｙＣ：ｌｏｎｅ）。
（三）仪器氧箱、测氧仪（美国ＯＭ．２５ＭＥ）、气体分析仪（Ｄａｐｅｘ）、温度湿度计、动物手术器械、．８０℃超低温冰箱（海尔）、石蜡包埋机、石蜡切片机、冰冻切片机、光学显微镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ）、共聚焦激光扫描显微镜（ＢＩＯ－ＲＡＤ）、荧光显微镜（Ｎｉｋｏｎ）及ＮｉｋｏｎＥ２０００图像采集软件及分析软件、透射电子显微镜、倒置相差显微镜（Ｎｉｋｏｎ）、细胞培养超净台（Ｔｈｅｒｍｏ）、细胞培养箱（Ｔｈｅｒｍｏ）、恒温水浴箱、高速低温离心机（Ｓｉｇｍａ）、移液器、电子天平、紫外分光光度仪（ＵＶ－６００Ａ）、超声新生鼠ＡＥＣＩＩ细胞的分离、纯化、培养参照我们先前的培养方法。
DNA损伤修复与铂类耐药研究进展
DNA损伤修复与铂类耐药研究进展【摘要】铂类是非小细胞肺癌化疗的基本药物，它的耐药机制复杂，其中ＤＮＡ损伤修复能力改变是铂类耐药的重要分子基础。
全文综述DNA损伤修复机制——碱基切除修复、核苷酸切除修复、酶修复及DNA 双链断裂修复等研究进展。
【关键词】 DＮＡ损伤耐药修复XPD ERCC1DNA损伤修复是恢复正常DNA序列结构和维持遗传信息相对稳定有关的细胞反应。
DNA损伤修复基因可修复不同原因导致的DNA损伤，从而保护遗传信息的完整性。
DNA 损伤修复有4种基本形式，即碱基切除修复、核苷酸切除修复、酶修复和双链断裂修复。
1 碱基切除修复碱基切除修复切除和替换由内源性化学物作用产生的DNA碱基损伤。
DNA糖基化酶参与此过程，随后糖磷酸键断裂，切去碱基残基，DNA连接修复损伤。
参与BER的基因主要有X线修复交叉互补基因，DNA连接酶hOGG1，MPG，APG，APE1。
XRCC1是第一个从哺乳动物细胞中分离出来的对电离辐射敏感的基因，位于，大小为32 kb。
XRCC1和DNA聚合酶β、DNA连接酶Ⅲ相互作用,参与碱基切除修复。
XRCC1基因缺陷的细胞对DNA损伤敏感，单链断裂增加，姊妹染色体互换率比正常细胞高10倍多。
DNA修复能力和XRCC1 399Arg/Gln基因表型的变化有关，存在XRCC1 399位点多态性的NSCLC病人对铂类抗药[3，4]，而且这一位点的多态性与食管癌、肺癌及前列腺癌的易感性相关。
２核苷酸切除修复核苷酸切除修复是哺乳动物细胞DNA 修复的主要途径；是保护宿主免受肿瘤侵害的必要因素；是清除大规模铂类化合物所致DNA螺旋扭曲的惟一机制。
NER分为转录互补修复和全基因组修复。
TCR修复活性基因DNA转录链中转录阻滞的基因，而GGR修复活性基因中DNA非转录链中损伤的基因。
NER相关的蛋白有XP、复制蛋白A、RPA复制因子、RFC、PCNA和转录因子TFIIH，其中XPA和RPA复合物是损伤识别因子，能够确定DNA损伤部位并可清除铂类所致的DNA 加合物。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
综 述DNA损伤修复基因与放射性肺损伤研究进展*周 芊综述,杨镇洲审校(第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆400042)关键词:辐射损伤;放射疗法;肺损伤;DN A损伤修复基因do i:10.3969/j.issn.1671 8348.2010.21.055中图分类号:R563.9;R730.55文献标识码:A文章编号:1671 8348(2010)21 2970 04恶性肿瘤严重威胁着人类的生命健康。
胸部肿瘤约占恶性肿瘤的35%~45%,放射治疗是胸部肿瘤最主要的治疗手段之一,而放射性肺炎(r adiat ion pneumonitis,RP)作为胸部肿瘤放疗常见的严重并发症和剂量限制因素,其发生率达5%~ 15%,一旦发生,通常引起严重的临床后果[1]。
不同个体接受放射治疗后放射性损伤的差别很大,遗传学和分子生物学研究提示,个体基因型差异和基因变异与放射性损伤相关。
本文就目前有关放射性肺损伤的发生机制以及DN A损伤修复基因在其中的作用进行综述。
1 放射性肺损伤发生机制放射性肺损伤表现为早期的放射性肺炎和后期的放射性肺纤维化。
以往认为早期放射性肺炎的靶细胞为肺泡型细胞、血管内皮细胞,靶细胞及微血管的损伤为其发病的主要机制[2],但伴随分子生物学技术的发展,人们逐渐认识到单一的靶细胞或靶组织受损观点难以解释放射性肺损伤过程的动态变化。
目前认为肺的辐射敏感亚单位为肺泡/毛细血管复合体,放射性肺损伤表现为弥漫性肺泡受损。
放射诱导的活性氧直接作用于实质细胞并由此改变细胞因子的微环境从而启动一系列!分子级联∀反应;随着活性氧自由基的增多,导致脂质过氧化、DN A和蛋白质的氧化以及致炎因子的进一步激活,最终导致肺纤维化[3 4]。
大量研究证实,转化生长因子 (T GF )、血小板源性生长因子(PDGF)、肿瘤坏死因子(T N F )、白介素 1(IL 1)、白介素 6(IL 6)、表面活性物质载体蛋白和细胞黏附素分子(ICA M 1、E 选择蛋白)在放射性肺损伤的发生中起着重要作用[5 6]。
国内外学者对这些生物标志物进行了大量研究,尤其T GF 1,目前公认其血浆中水平可作为放射性肺损伤的预测因子。
K im等[7]测定了34例肺癌患者放疗前、放疗起始、放疗中、放疗结束时及结束后2周、4周6个时限点血浆T GF 1水平发现,发生放射性肺损伤患者,在放疗过程中T GF 1降低,放疗结束时开始升高,结束后4周血浆T GF 1水平明显高于未发生放射性肺损伤患者。
T GF 分子质量为25kD,由两个12.5kD亚基通过二硫键连接而成,共有5种同分异构体及5种细胞膜受体,可调节细胞生长、分化。
T G F #型和型受体是其主要的信号转导受体,T G F 1与#、型受体的亲和力又比T GF 2大10~80倍。
T GF 首先与其型受体结合,再与#型受体结合,然后通过多个环节和机制导致细胞外基质(ECM)过度积聚和纤维化发挥生物学作用:(1)刺激ECM产生细胞合成大量ECM,如#、、∃型胶原和非胶原糖蛋白等;(2)通过抑制ECM降解酶,如基质金属蛋白酶(M M Ps)、纤溶酶原激活物(P A)活性,增强这些降解酶抑制物的活性,从而减少ECM降解;(3)促进ECM产生细胞表达 平滑肌肌动蛋白( SM A)并使其活化而发生表型转化为肌成纤维细胞(M FB),后者能合成和分泌大量胶原成分;(4)增加ECM受体如整合素的表达,从而促进ECM与细胞间的相互作用。
T GF 还可与其他细胞因子如PDG F、IL 1等协同发挥生物学效应。
IL 1是由单核巨噬细胞合成分泌的一种前炎症细胞因子,有I L 1 和IL 1 2种亚型,在组织急性损伤中起重要作用。
IL 1能诱导其他炎症细胞因子、趋化因子、黏附分子、急性期蛋白和组织蛋白酶等的合成,对嗜中性粒细胞、巨噬细胞具有趋化和促进释放炎症介质作用。
PDG F是由A链和B链组成的二聚体,分为AA、AB和BB3个亚型,通过靶细胞膜上的PDG F受体发挥作用。
P DGF能刺激间叶来源的细胞分裂、生长,是纤维母细胞的有丝分裂原,并能促使纤维母细胞转化为M FB及介导M FB表达 #胶原基因,能使静止期的G0细胞进入G1及S1期。
T N F为一种多功能性多肽,在炎症和免疫过程中具有重要调节作用,有T N F 和T N F 2种亚型。
T N F 与其受体结合可刺激多个信号转导途径,引起多种转录因子、细胞因子、生长因子、受体、细胞黏附因子等炎症及急性期蛋白表达。
2 DN A损伤修复基因细胞受到照射后,D NA分子将产生多种类型的损伤,包括碱基错配、修饰、脱嘌呤或脱嘧啶位点形成、D NA单链、双链断裂以及DN A蛋白质交联等。
由于体内存在DN A损伤修复系统,损伤的D NA就能被体内多种参与DN A损伤修复基因及其编码的酶所识别并通过多条途径进行修复。
DN A损伤修复途径包括碱基切除修复(BER)、DN A双链断裂修复(DD SBR)、核酸切除修复(N ER)和错配修复(M M R)4类,而电离辐射导致的DN A损伤主要是碱基损伤和DN A链断裂[8],故涉及的DN A损伤修复途径主要是BER和DDSBR。
2.1 BER BER途径在短小DN A片段损伤修复中起主要作用。
单功能DN A糖基酶通过水解碱基和脱氧核糖的糖苷键切除受损碱基,并留出一个无碱基位点,即无嘌呤/无嘧啶(A P)位点,随后在脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(A P E1)帮助下切开DN A骨架,暴露游离的5% 末端脱氧核糖磷酸盐(dR P)和3% 羟基[9]。
双功能DN A糖基酶(如OG G1和N EIL1)具有糖苷酶和A P裂解酶活性,能通过一个3%脱氧核糖磷酸基团和一个5%磷酸盐形成一个无碱基位点,A PE1水解这个3%脱氧核糖磷酸基团后变成3%羟基,Po l 与之结合。
哺乳动物细胞中, Po l 连接已切开的DN A骨架,并且该聚合酶的脱氧核糖磷酸裂解酶结构域能去除5%脱氧核糖磷酸,再根据W atson Crick*基金项目:国家自然科学基金资助项目(30970865)。
碱基互补原则填补无碱基位点,最后由DN A连接酶&/ XRCC1复合物将其连接,整个损伤修复过程完成[10]。
另外, NEIL1/2D NA糖基酶也能激活碱基切除修复途径,并能切除受损碱基和同时暴露3%和5%端游离的磷酸[11]。
多核苷酸激酶(P NK)切除3%磷酸,DN A Po l 连接受损位点并通过互补的核苷酸填补缺口,XR CC1/DN A连接酶&再连接已切除的DN A 骨架。
因此碱基切除修复涉及的相关基因为hO GG1、A PE1/ Ref 1及XRCC1。
2.1.1 hOG G1基因 8 羟基鸟嘌呤DN A糖苷酶(8 ox ogua nine DN A glycosy lase,O GG1)基因位于人染色体3p26.2,由7个外显子和6个内含子组成,其等位基因在这个区域的缺失将导致产生肿瘤。
O GG1基因启动子T A T G和终止子T GA序列分别位于第1和第7外显子,对其启动子序列分析发现存在两个CpG岛,无T A T A或是CA A T盒,这个结果说明hOG G1基因是一个看家基因,能在细胞周期中持续表达。
OG G1是hO GG1基因表达产物,同时具有糖苷酶和A P裂解酶活性,属于单碱基切除修复酶,最主要功能是修复DN A氧化损伤和其他修复基因共同维护DN A稳定性。
人O GG1细胞表达OGG1 和OG G1 2种不同亚型,O GG1 在细胞核和线粒体中均有表达,但O GG1 仅表达于线粒体2种亚型共享起始的316个氨基酸,不过C末端完全不同。
研究发现,重组OG G1 蛋白无DN A糖基酶活性。
电离辐射可以通过直接电离和ROS的间接作用致伤DN A,导致DN A单链和(或)双链断裂从而引起细胞死亡。
OG G1能识别并清除由活性氧攻击DN A 氧化产生的8 羟基脱氧鸟嘌呤(8 O HdG),防止复制时G/A 错误配对,造成子细胞由G/C到A/T的突变。
若hO GG1失活或被人工敲除,使细胞修复8 OH dG能力降低或丧失,该细胞内遗传物质的突变率将比野生型高50倍,因此,hO GG1在DN A氧化损伤修复过程中起着重要作用[12 13]。
目前多数研究表明,O GG1受2种转录因子调节:(1)I NF 通过特异性识别一个CCA A T盒模序调节hOG G1表达[14];(2)通过真核基因表达中重要的锌指转录因子Sp1调节hO GG1表达。
Y oun等[15]发现镉可通过抑制Sp1活性而下调人OG G1转录,但Brav ard等[16]研究发现,镉能可逆性抑制胞内hOG G1活性,而其抑制纯化的hO GG1活性在加入ED T A 后不能恢复。
2.1.2 A PE1/Ref 1 人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子(apur inic/apr imidinic endo nuclease/redo x factor 1, AP E1/Ref 1)基因位于14号染色体q11.2~12,含4个内含子和5个外显子,共2.6kb。
A PE1/Ref 1启动子约300bp,位于CpG岛区,无T AT A盒,CCA AT盒和Sp1能够影响其基础转录水平,氧化应激后cA M P应答元件(CRE)可上调A PE1/ Ref 1转录水平。
启动子上游含有1个A型负性钙反应元件(nCaR E A)序列和2个B型负性钙反应(nCaRE B)序列,故AP E1/Ref 1可通过与自身启动子结合抑制转录,从而进行自身调节。
AP E1/Ref 1蛋白含318个氨基酸,相对分子质量为36.5kD,其N端包含一个核定位信号区(NL S)主要通过Cy s65发挥氧化还原功能,而C端在DN A无碱基位点发挥修复酶活性。
研究发现,Cy s65突变后A PE1/Ref 1蛋白无氧化还原活性,但并不影响其修复功能,而DN A修复途径所需的各种氨基酸突变也并不影响其氧化还原功能,因此认为AP E1/Ref 1的氧化还原和修复功能能各自独立发挥作用[17]。
AP E1/Ref 1的修复功能可使氧化损伤所致的有丝分裂后期不分裂细胞存活,E3330是一种苯醌和萘醌的类似物,可选择性抑制A PE1/Ref 1氧化还原活性进而抑制细胞增殖[18]。
新近体内外研究显示A PE1/Ref 1还可作为一种核糖核酸内切酶剪切c myc CRD RN A中的特定序列[19]。
A PE1/Ref 1蛋白的转录后修饰形式有磷酸化、氧化还原、乙酰化及蛋白水解作用等。
A PE1/Ref 1蛋白磷酸化位点分散在整个分子中,这些可能的潜在磷酸化位点包括酪氨酸激酶#和(CK#和CK)、蛋白激酶C(PK C)以及糖原合酶激酶3 (G SK3)等蛋白的共有序列。