循环肿瘤细胞检测原理及其应用
外周血循环肿瘤细胞(CTCs)分离富集检测及其临床应用
仅能揭示瞬时的基因组特征 不可行 无 58%（肺癌）
49.6%（肺癌）
97.2%（肺癌） 未见报道 不可以 不可以 数据质量较差
CTC检测助力肿瘤诊疗
2 最具潜力的液体活检---CTC检测
7
2.1 CTC概念
循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)指从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞。
03 非典型形态
• CTC入血后随血液快速流动。 • 与其他细胞碰撞、受到血管壁 的挤压。 • 受机体免疫系统以及药物的攻 击。 • CTC形态有别于肿瘤组织、细 胞大小、形态及表型发生变化。
瘤标志物
Weinberg提出CTC 可作为具有临床实 践价值的诊断指标， 为临床提供重要信
息
CTC的EMT状态与 肿瘤治疗效果和复
发相关
CFDA批准叶酸受 体阳性CTC检测试
剂盒
1869 1889
1976
1982
2004
2007 2008
2011
2012
2013
2014
2016 2017
提出“种子与土壤”假说， 即肿瘤细胞可随血液在 体内循环，进入其他器 官如同种子遇到土壤，
03 非典型形态
•相同肿瘤的不同细胞之间的基因 与表型存在差异。
• 不同实体肿瘤来源CTC，不同患 者CTC表面抗原表达、分布存在差 异。
Burrell RA, et. al. Nature. 2013 ;501(7467):338-45.
2.3 循环肿瘤细胞特点---非典型形态
01 稀有性
02 异质性
优点：非侵入式； 无创； 可重复性取样； 获取全面的疾病信息。
Alix-Panabières C, Pantel K. Clin Chem. 2013 Jan; 59(1):110-8.
循环肿瘤细胞CTC检测 PPT
阴性富集流程图
全亚型、高效率、非依赖
通用于绝大部分实体肿瘤、非血源性循环稀有细胞的富集
我们的选择
imFISH
imFISH技术将基因水平的FISH技术与蛋白水平的 免疫荧光染色技术相结合,是兼具核遗传信息及细 胞形态改变的精准CTC鉴定分析方法。
技术优势： ➢ 核酸水平稳定性、灵敏度高（80％） ➢ 引入CD45染色，提高特异性（97％) ➢ 细胞计数、核型分析、表型分析、分子分型
便捷性
CTC只需采集少量外周静脉血便可进行检测，对人体基 本无创，取样便捷，适于动态连续性监测。
循环肿瘤细胞CTC临床应用方向
CTC临床重点应用：一、辅助诊断
判断病灶良恶性 无创便捷，发现早期隐匿转移
辅助传统TNM参考分期 提供适时诊断信息，实现精准治疗
辅助诊断
CTC检测应用于辅助诊断
诊断难
异常占位，良性? 恶性? 病灶位置不宜活检怎么办? 有创操作，是否有瘤细胞种植？
诊准难
肿瘤异质性的影响? 临床分期与病理分期不一致?如何针对肿瘤时空信 Nhomakorabea变化提供
即时诊断信息?
辅助诊断
CTC功能：
对尚未完善病理诊断的患者，CTC 可联合影像学、血清学作为辅助判断病灶良恶性的指标。 同时,CTC是对原发灶与转移灶信息的全面反映，可弥补现有传统TNM 分期的不足，提示早 期微转移的存在风险，指导临床调整诊疗策略，制定更加合理的个体化诊疗方案（如进一 步筛查转移、拟定新辅助化疗、辅助化疗方案等。
联合影像学更客观评价疗效 监测耐药发生
疗效评估、耐药性监测
胰腺癌
49.00% （单8）
75.49%
72.39% 70.3% 70.92%
（8+17） （8+17） （1+8） （8+3）
循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用
循环肿瘤细胞C T C检测及临床应用Prepared on 22 November 2020循环肿瘤细胞检测及临床应用中文摘要：循环肿瘤细胞是从原发肿瘤扩散，进入到血液或淋巴系统的肿瘤细胞。
循环肿瘤细胞在血液中含量稀少，一般先将循环肿瘤细胞富集，然后再进行检测，现在已经开发了多种细胞富集和检测技术。
本文主要对CTCs的富集和检测技术研究进展，以及CTCs在临床分析和研究上的应用进行了综述。
关键词：循环肿瘤细胞富集检测临床Abstract:Circulatingtumorcellscomefromtheprimarytumorproliferation,andprolife ration,癌症转移的过程是循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells，CTCs)从原发肿瘤分离，通过循环系统扩散，进入血液或者淋巴系统，在远处形成新的肿瘤，最终导致大多数的癌症病人死亡。
1869年，Ashworth在一例癌症死亡患者的外周血中发现了类似肿瘤的细胞，并首次提出了CTCs的概念。
从此，越来越多的研究表明，CTCs的出现与癌症密切相关。
通过上皮-间质转化(EMT)，实体瘤的上皮细胞进行细胞的变化，使他们通过增加流动性和侵袭性脱离组织，进入到血液中，附着，、发展成远端转移。
由于CTCs能够代表原发肿瘤的表型和遗传组成，并能够作为任何转移性肿瘤的”液体活检”，CTCs的富集分离和特征研究，十分具有吸引力。
CTCs的富集和计数技术已经建立，其中CTCs的计数可以成为预测指标，当其大于已知的阈值时，就预示着病人就患有转移性乳腺癌，、前列腺癌，、结直肠癌等。
基于临床试验，美国FDA批准了一种临床检测CTCs的CellSearch技术，用于上述癌症的CTCs的富集和计数。
CellSearch技术成功的证明了CTCs确实表征了疾病的活跃，CTCs数量的增加预示着病情的恶化，可以通过CTCs了解原发性和转移性肿瘤，以CTCs为基础的分析，可以帮助人们实时诊断和预测，对病情做出决定，并取样检测耐药性。
尿液中循环肿瘤细胞检测在癌症治疗监测中的应用
▪ CTC检测的研究方法创新
1. 研究人员正在探索新的研究方法，如液体活检和无创性CTC 检测技术，以减少对患者的痛苦和不适。 2. 此外，通过整合多种技术手段，如基因测序、蛋白质组学和 代谢组学等，以实现更全面、准确的CTC检测。 3. 利用人工智能和机器学习技术，对CTC进行检测和分析，以 提高检测效率和准确性。
▪ 循环肿瘤细胞的特性
1. CTCs具有高度的运动性和侵袭性，能够在血管内皮细胞间 自由穿梭，避免被免疫系统清除。 2. CTCs表面表达特定的膜蛋白，如EpCAM、CEA等，可作为 其分子标志物进行检测和分离。 3. CTCs在血液循环中的稳定性较高，能够长时间存活并避免 被清除，从而实现远程转移。
1. CTC检测可以用于监测癌症的复发风险，提前采取预防措施。 2. CTC检测可以用于评估患者预后，为医生制定康复计划提供参考。 3. CTC检测可以降低癌症患者复发的风险，提高生活质量。
CTC检测在癌症治疗副作用管理中的应用
1. CTC检测可以用于预测癌症治疗可能导致的副作用，帮助医生及时采取措施减轻症状。 2. CTC检测可以用于评估患者对治疗的耐受性，确保治疗的安全性和有效性。 3. CTC检测可以降低癌症治疗过程中患者的不良反应，提高治疗满意度。
1. CTC检测可以提高医疗资源的利用效率，减少浪费。 2. CTC检测可以协助医疗机构合理分配医疗资源，提高医疗服务水平。 3. CTC检测可以为政府制定癌症防治政策提供科学依据。
循环肿瘤细胞检测在胃癌诊疗中的应用及研究进展
循环肿瘤细胞检测在胃癌诊疗中的应用及研究进展摘要：循环肿瘤细胞的检测是一种新兴的肿瘤诊疗技术，在胃癌诊疗中的应用和研究进展也备受关注。
本综述将详细阐述循环肿瘤细胞检测在胃癌诊疗中的应用及研究进展，包括其概念、检测技术、临床应用和未来发展方向。
关键词：胃癌循环肿瘤细胞检测研究进展胃癌（gastric cancer，GC）是一种常见的消化道恶性肿瘤，我国胃癌的发病率和死亡率均居恶性肿瘤第3位[1]。
尽管近年来诊断技术、手术技术和围手术期管理的发展，但GC的预后仍然很差。
由于早期GC往往无症状，并且由于大规模筛查不受欢迎，因此大多数患者被诊断时已经为晚期[2]。
循环肿瘤细胞（CTCs）是指从肿瘤内部脱落并在患者血液、体液中循环存在的单个肿瘤细胞。
作为一种新型的肿瘤标志物，CTCs的检测技术具有无创、动态监测和准确度高等特点，有望为胃癌诊疗提供新的手段[3, 4]。
本研究综述将重点探讨循环肿瘤细胞检测在胃癌诊疗中的应用及其研究进展。
一、CTCs的概念早在1869年，Thomas Ashworth 在尸检中发现转移性癌症患者血液中的循环肿瘤细胞（CTCs），这些细胞与原发肿瘤相似[5]。
CTC是肿瘤内部脱落并在患者血液、体液中循环存在的单个肿瘤细胞，因此其可提供关于肿瘤特性和肿瘤生长模式的关键信息，而且不受限于传统的病理活检样本的数量和位置。
然而，CTCs在血液中含量极微，故对检测技术要求较高。
因19世纪检测技术的限制未能进行进一步相关研究，直到几十年后才慢慢有方法来分离出CTCs，并对其进行相关研究。
据目前的研究CTC在血液中有多种存在形式，包括不同的分子分型[上皮型CTC（epithelial CTC，E-CTC）、间质型CTC（mesenchymal CTC，M-CTC）和混合型CTC]和细胞分型[单个CTC、循环肿瘤微栓（circulating tumor microemboli，CTM）和中性粒细胞CTM（CTC-neutrophil clusters）][1, 6]。
循环肿瘤DNA的检测技术及其临床应用
循环肿瘤DNA的检测技术及其临床应用近年来，随着肿瘤治疗的不断深入，循环肿瘤DNA （circulating tumor DNA，ctDNA）的检测逐渐引起了人们的关注。
ctDNA是肿瘤细胞在血液中释放的DNA片段，通常是短片段（150-200 bp）的双链DNA，其含量较低且易被血液中其他DNA污染。
然而，通过优化实验条件和测序技术，目前已经可以对ctDNA进行有效和准确的检测，并且已有广泛的临床应用。
一、循环肿瘤DNA的检测技术目前，检测ctDNA的技术主要包括数字式PCR（digital PCR）、酶联免疫吸附法（ELISA）、多重热融曲线分析（MCA）、放射化学发光检测（RCA）和下一代测序（NGS）等。
数字式PCR是目前最常用的技术之一。
它采用微小反应体积，将DNA分散于许多单独的小区域进行扩增，可以检测出非常低的DNA量。
与传统PCR技术相比，数字式PCR可以准确地定量ctDNA，其检测灵敏度可达0.01%。
另一种常用的ctDNA检测技术是ELISA。
该技术利用针对肿瘤特异性标志物的抗体，可准确鉴定ctDNA中的癌细胞来源。
然而，它的灵敏度和特异性相对较低，只能用于筛查。
MCA可以检测ctDNA的序列特征，因此，它可以在PCR扩增的同时，对不同的DNA序列进行鉴定。
与数字式PCR相比，MCA可以检测较长的DNA片段，适用于较大的目标基因区域或全基因组分析。
RCA是一种新型的扩增技术，可将单个DNA分子扩增到可见的DNA量，并可检测非常低的DNA含量。
RCA对ctDNA纯化和富集效果较好，因此被广泛用于肿瘤的早期筛查和诊断。
NGS是一种高通量测序技术，对肿瘤的品种和类型进行快速和精确的鉴定。
同时，它还可以检测各种基因突变和结构变异，为肿瘤治疗提供参考。
二、循环肿瘤DNA的临床应用ctDNA是肿瘤细胞释放的DNA片段，它在诊断、预后评估和治疗监控等方面具有广泛的应用。
1．诊断：对于那些无法或难以取得实体肿瘤组织的肿瘤复发病例，循环肿瘤DNA的检测可以为肿瘤复发提供准确的证据。
循环肿瘤DNA检测在肿瘤诊断中的应用
循环肿瘤DNA检测在肿瘤诊断中的应用循环肿瘤DNA (circulating tumor DNA, ctDNA) 是指存在于血液或其他体液中的肿瘤细胞释放出的DNA分子。
肿瘤细胞的生长、分裂和死亡会导致DNA断裂和释放，进而使ctDNA进入循环系统。
相比于传统的组织样本，ctDNA能够提供更全面、实时的肿瘤信息，因此在肿瘤诊断中具有广泛的应用前景。
循环肿瘤DNA检测主要通过采集患者的血液样本进行分析。
与传统组织样本不同，ctDNA的优势在于其易采集和跟踪诊断，同时能够提供肿瘤的全遗传信息。
利用ctDNA进行肿瘤诊断的主要应用包括以下几个方面：1.早期诊断和筛查：ctDNA检测可以在早期发现肿瘤相关的遗传变异，帮助早期诊断肿瘤。
目前常用的筛查方法主要是基于ctDNA中的肿瘤特异性突变检测。
一些研究表明，通过ctDNA检测可以有效地发现早期肺癌、结直肠癌、卵巢癌等肿瘤，并在早期治疗阶段进行干预。
2.疾病监测和复发风险评估：ctDNA检测可以有效监测治疗后的肿瘤残留或复发。
由于ctDNA能够提供全身肿瘤的遗传信息，因此可以通过监测ctDNA的动态变化来评估治疗的疗效。
比如，经过外科手术切除的肿瘤患者，可以通过ctDNA检测监测手术后是否存在残留病灶；经过化疗或放疗的患者，可以通过ctDNA检测来评估治疗后的复发风险。
3.个体化治疗指导：肿瘤的治疗效果往往受到肿瘤的遗传特征的影响。
通过ctDNA检测，可以获得肿瘤的遗传信息，并对肿瘤进一步进行分型，从而指导个体化的治疗方案。
比如，某些患者可能对特定的靶向药物具有敏感性，通过检测ctDNA 中与靶向药物相关的突变，可以为患者选择合适的靶向治疗药物。
4.肿瘤进展监测：ctDNA检测还可以用于监测肿瘤的进展和转移。
随着肿瘤的生长和分裂，肿瘤细胞释放的ctDNA会逐渐增多，通过定期监测ctDNA的水平变化，可以判断肿瘤的发展趋势，及时调整治疗方案。
此外，ctDNA检测还可以检测肿瘤的异源性转移，即从原发肿瘤到其他器官或组织的转移。
循环肿瘤细胞的检测方法及在小细胞肺癌中的临床应用
循环肿瘤细胞的检测方法及在小细胞肺癌中的临床应用
循环肿瘤细胞(CTC)是指从原发肿瘤中脱落的癌细胞进入血液
循环，并在其他器官形成转移瘤的细胞。
CTC的检测可以反
映肿瘤的生长和转移情况，为肿瘤的筛查、诊断、治疗和预后评估提供了有力的手段。
下面介绍一种常用的CTC检测方法
及其在小细胞肺癌中的临床应用。
1. CTC检测方法
目前常用的CTC检测方法主要包括免疫磁珠分选法、流式细
胞术、聚合酶链反应等。
其中，免疫磁珠分选法广泛应用于临床检测中。
该方法利用肿瘤细胞表面的特定抗原与磁珠偶联，经过样品预处理后，磁珠上的肿瘤细胞被磁场分选出来，再通过细胞形态学分析、免疫荧光染色和分子分析等方式进行检测和鉴定。
2. 在小细胞肺癌中的临床应用
小细胞肺癌(SCLC)是一种高度侵袭性的肺癌，易发生转移和
复发，预后较差。
CTC检测作为SCLC治疗中的监测手段，
可以帮助医生及时评估治疗效果和预测患者的预后。
研究显示，采用CTC检测可以提高SCLC的诊断准确率和敏感性，尤其
对于无法取得组织样本的患者有较高的诊断价值。
同时，CTC 检测还可以预测SCLC患者的疗效和生存期，指导医生制定个体化的治疗方案和监测计划。
总的来说，CTC检测是目前肿瘤诊断和治疗的重要手段之一，
对于SCLC的诊断和治疗具有很强的临床应用价值。
随着技术的不断改进和完善，CTC的检测方法和临床应用将进一步完善和推广。