灯盏花内生真菌分离及其产黄酮内生真菌的初步研究
灯盏花素杂质化学成分研究

灯盏花素杂质化学成分研究灯盏花(Hemerocallis fulva)是一种常见的园艺植物,被广泛种植和用作观赏植物。
它的花瓣呈现出鲜艳的黄色或橙色,非常美丽。
除了观赏价值,灯盏花还有许多药用价值,包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用。
这些药用效果可能与灯盏花的化学成分有关。
灯盏花的化学成分已经被广泛研究。
研究发现,灯盏花中含有多种化学成分,包括黄酮类化合物、生物碱、糖类化合物等。
黄酮类化合物是灯盏花最重要的活性成分之一。
灯盏花中已经鉴定出的黄酮类化合物主要有杂黄酮、异黄酮等。
这些黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药用作用。
灯盏花还含有多种生物碱。
生物碱是一类含有碱基的有机化合物,具有多种药理活性。
研究发现,灯盏花中的生物碱主要有苦参碱、满江红碱等。
这些生物碱具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等活性,对人体健康有一定的益处。
糖类化合物也是灯盏花的重要成分。
研究发现,灯盏花中的糖类化合物主要有葡萄糖、果糖等。
这些糖类化合物具有一定的保湿作用,可以改善皮肤干燥问题。
除了以上成分,灯盏花还含有多种微量元素和维生素。
微量元素是人体所需的一些重要元素,如锌、铁等。
维生素是维持人体正常生理功能所需的有机物质,如维生素C、维生素E等。
这些微量元素和维生素对人体健康具有重要作用。
灯盏花是一种具有丰富药用价值的植物。
它含有多种化学成分,包括黄酮类化合物、生物碱、糖类化合物等。
这些化学成分具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药用作用。
灯盏花还含有多种微量元素和维生素,对人体健康有一定的益处。
需要进一步研究来揭示灯盏花的化学成分和药用机制,以及利用它们的科学方法来开发相关药物。
灯盏花中总黄酮提取工艺优化研究

灯盏花中总黄酮提取工艺优化研究何双英;陈京;胡璟【摘要】目的用正交试验法优选灯盏花中总黄酮的的提取工艺.方法以总黄酮提取量为指标.选择提取乙醇用量、提取时间、醇提浓度为考察因素,采用正交试验法确定灯盏花中总黄酮的最佳提取工艺.应用紫外分光光度法测定总黄酮含量.结果灯盏花中的总黄酮的最佳提取条件为10倍量的60%乙醇提取2次,每次1 h,总黄酮平均回收率为97.78%,RSD为0.65%.结论优选的灯盏花总黄酮提取工艺稳定可行.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2010(014)007【总页数】3页(P763-765)【关键词】灯盏花;总黄酮;工艺优化;紫外分光光度法【作者】何双英;陈京;胡璟【作者单位】浙江省义乌市中心医院中药房,浙江,义乌,322000;浙江中医药大学生物工程学院,浙江,杭州,310053;浙江中医药大学生物工程学院,浙江,杭州,310053【正文语种】中文Abstract:A i mTo optimize the extraction procedure of the total flavonoids from breviscapine.M ethods Using the extraction yield of total flavonoids as the assess ment index,some important factors in the experimental orthogonal design,such as volume of extraction alcohol,extractingtime,content of alcohol,were studied in detail.The total flavonoids contentextracted from breviscapine was determined by spectrophotometric method.Results The opti mized extraction procedure was asfollows:60%alcohol,10 times volume of the weight of the dried material,refluxing 1h for twice.The average recovery rate of the total flavonoidswas 97.78%,while RSD was 0.65%.Conclusion The optimum extraction was reasonable and useful for further development.Key words:breviscapine;total flavonoids;the control of the extraction;UV spectrophotometry灯盏花 (Erigeron breviscapus)又名灯盏细辛,为菊科植物短葶飞蓬的全草,主要分布于我国西南部云南、广西、四川、贵州、西藏等地。
灯盏花叶斑病病原菌生物学特性初步研究

物系大棚等 地栽 培 的灯盏 花植 株上 采集 病 叶, 在 P A培养基上用常规方法作组织分离和单孢 纯化 。 D
收稿 1期 :0 8—0 3 20 4—2 3 基金项 目: 云南 省 自然科学基 金( 编号 :0 3 0 4 M) 红河学 院硕博 20C04 ;
彼( z e ) C a k 培养基为基础 , p 以硝酸钾 、 硝酸铵、 肉 牛 浸 膏 、 白胨 、 母粉 等 5种 氮源 等 量置换 硝 酸钠 作 蛋 酵 为 不 同的氮 源 , 以不加 氮 素 、 氯 化钠 的 培养基 为 并 加 对 照。
经致病性测定后 , 选取有代表性的菌株移人 P A培 D 养基平板上 ,5℃恒温培养 , 2 获得供试菌种 。 12 环 境 因素 对 茵丝 生长 和孢 子 形成 的影 响 .
12 1 温度 对菌 丝 生 长 和产 孢 的影 响试 验 .. 病 原
350m的中山和亚高 山开 阔山坡 、 0 草地 、 林缘… , 是一 种 民 间 常 用 药 用 植 物 J 具 有 重 要 的 药 用 价 , 值 一 , ’ 全草人 药 ,已人 《 ] 中华人 民共 和 国药典 》 。 自17 9 4年版《 云南省药 品标准》 录以来 j被云 收 , 南省制药工业广泛用作制药原料。 近年来 , 随着大面积人工栽培 , 出现了许多病害
叶斑病菌的生物学特性进行 了系统研究 , 为该病 的
预 测预 报及 防 治研究 提 供理论 依 据 。
1 材料 与 法
彼 ( zpk 培养 基为基础 , Cae ) 以葡 萄糖 、 果糖 、 蔗糖 、 乳糖 、 麦芽糖、 可溶性淀粉等 6种糖等量置换蔗糖作
为不 同 的碳 源 , 以不加 碳源 作 为 对 照 , 菌 前用 0 1 灭 . m lLHC 或 0 1mo LN O 调 p o 1 / . l a H / H值 至 7 0 . 。接
灯盏花-大黄配伍的提取工艺优化研究

灯盏花-大黄配伍的提取工艺优化研究赵紫玉;张雪娟;陈昕;黄莹;黄郑炜;崔影彤;潘昕;吴传斌【期刊名称】《广东药科大学学报》【年(卷),期】2017(033)005【摘要】目的优化灯盏花-大黄的配伍提取工艺并进行生产放大试验,为制备灯盏花-大黄胶囊提供依据.方法采用单因素试验结合正交试验,考察不同乙醇体积分数、回流时间及提取次数对灯盏花素、大黄素和大黄酚提取质量分数的影响,优选最佳提取工艺,并考察放大生产对提取效果的影响.结果最佳提取工艺为:乙醇体积分数为60%,回流时间为30 min,提取次数为1次;影响提取的主次顺序为乙醇体积分数〉提取次数〉回流时间,其中乙醇体积分数对灯盏花-大黄提取率的影响具有统计学意义(P〈0.05);放大生产3批样品的提取质量分数稳定,与小试试验结果差异无统计学意义.结论优化后的提取工艺稳定可靠,能满足生产放大的要求,同时也为进一步制备灯盏花-大黄胶囊提供了依据.【总页数】6页(P600-605)【作者】赵紫玉;张雪娟;陈昕;黄莹;黄郑炜;崔影彤;潘昕;吴传斌【作者单位】[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000;;[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000;;[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000;;[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000;;[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000;;[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000;;[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000;;[1]中山大学药学院,广东广州510006 [2]珠海市药膳学会,广东珠海519000【正文语种】中文【中图分类】R282.4【相关文献】1.掌叶大黄多糖提取工艺及定量方法优化研究2.灯盏花中总黄酮提取工艺优化研究3.灯盏花-大黄配伍的提取工艺优化研究4.响应面法对大黄多糖提取工艺优化研究5.大黄游离蒽醌提取工艺的正交优化研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
灯盏花总黄酮与微量元素含量分析及其药效机理的研究

灯盏花总黄酮与微量元素含量分析及其药效机理的研究【摘要】目的研究中药灯盏花中总黄酮及微量元素的含量,为治疗心脑血管疾病的机理提供科学的依据。
方法采用醇提法提取灯盏花中总黄酮,紫外分光光度法测定药物中总黄酮的含量,测定吸收波长为λ=510 nm;采用HNO3-HClO4湿法消化,原子吸收分光光度法测定钾、钙、钠、镁、铁、铜、锌、锰、镍9种微量元素的含量。
结果测定结果显示,灯盏花中含有丰富的微量元素和黄酮类化合物,微量元素含量较高的是铁、铜、锰元素。
结论实验结果为研究中药灯盏花中黄酮类化合物与微量元素在治疗心脑血管疾病中的作用机制,为临床合理应用和开发中药灯盏花提供了有用的数据。
【关键词】灯盏花总黄酮微量元素Abstract:ObjectiveClinical studies indicated that the flavone and trace elements play a beneficial role to maintaining the cardio-cerebral vascular system functions. The contents of flavone and trace elements in Erigeron Breviscapus(Vant)Hand.-Mazz were determined to study the basis of the effect that the flavone and trace elements in Chinese herbal medicines with cardio-cerebral vascular diseases . MethodsThe flavone in Erigeron Breviscapus(Vant)Hand.-Mazz was extracted by alcohol and the content of flavone was determined at the wavelength of 510nm by ultraviolet spectrophotometry. The contents of nine trace elements and constant elements in Erigeron Breviscapus (Vant)Hand.-Mazz, including potassium, calcium,sodium, magnesium,iron,copper,zinc, manganese and nickel were determined by flame atomic absorption spectrophotometry, the sample was treated with HNO3-HClO4.ResultsThe results showed that there were comparatively rich trace elements and flavone, among which are comparatively high iron,copper and manganese in Erigeron Breviscapus(Vant)Hand.-Mazz . ConclusionIt provided useful data for discussing the basis of effect the content of flavone and the trace elements cure for cardio-cerebral vascular diseases in Erigeron Breviscapus(Vant)Hand.-Mazz and for using Erigeron Breviscapus(Vant)Hand.-Mazz in clinical studies.Key words:Erigeron Breviscapus(Vant)Hand.-Mazz; Flavone;Trace element灯盏花又名灯盏细辛,是菊科植物短葶飞蓬[Erigeron breviscapus(Vant)Hand.-Mazz]的植物,含有黄酮、吡喃酮、倍半萜等五十多种化学成分[1],具有活血舒筋、止痛消积等功效,临床上广泛用于治疗脑梗塞、缺血性心脏病等心脑血管疾病,其有效成分之一为总黄酮[2]。
灯盏花素杂质化学成分研究

灯盏花素杂质化学成分研究灯盏花素(Hypericin)是一种重要的植物化学成分,在植物中具有广泛的分布。
它是一种植物类黄酮化合物,是一种光敏受体,可以被紫外线激活,产生一种强烈的荧光。
灯盏花素在植物中具有多种生物活性,如抗微生物、抗癌、抗病毒、抗氧化等。
对灯盏花素的研究具有重要意义。
本文将对灯盏花素进行较为详细的研究,主要内容包括其化学成分、生物活性、生物合成途径、提取纯化方法等方面。
一、灯盏花素的化学成分灯盏花素是一种典型的邻羟基菲的天然产物,其分子结构式为C30H16O8。
灯盏花素是一种典型的多环多酚类黄酮化合物,其分子结构中含有两个邻酮酚基团和一个羟基羧基。
灯盏花素还具有多个双键和碳环,具有较好的光敏性和抗氧化性。
二、灯盏花素的生物活性灯盏花素在植物中具有多种生物活性,具有很强的抗病毒和抗癌活性。
研究表明,灯盏花素对多种病毒具有抑制作用,如HIV病毒、流感病毒等。
灯盏花素还能够干扰病毒的复制和传播过程,对病毒感染具有明显的抑制作用。
灯盏花素还具有一定的抗肿瘤活性,能够抑制肿瘤细胞的增殖和转移,促使肿瘤细胞凋亡。
灯盏花素还具有一定的抗氧化活性,具有保护细胞膜和减少自由基损伤的作用。
灯盏花素在药物研发和医学应用中具有广阔的前景。
三、灯盏花素的生物合成途径灯盏花素的生物合成途径尚不十分清楚,但有研究表明,灯盏花素的生物合成可能与多酚类黄酮化合物的合成途径类似。
灯盏花素的合成可能起始于一种天然存在的多酚类黄酮前体,随后经过一系列酶促反应和氧化反应,形成灯盏花素的结构。
光敏性和光合作用也可能对灯盏花素的生物合成起到重要作用。
灯盏花素的合成途径值得深入研究和探讨。
四、灯盏花素的提取纯化方法灯盏花素的提取纯化方法包括常规有机溶剂提取、Sephadex LH-20柱层析、高效液相色谱层析等。
常规有机溶剂提取是一种简单、快速的提取方法,但提取效率较低,同时易受其他化合物的干扰。
Sephadex LH-20柱层析是一种有效的纯化方法,可以将灯盏花素与其他化合物有效分离。
银杏内生真菌的分离鉴定及其产黄酮的初步研究的开题报告

银杏内生真菌的分离鉴定及其产黄酮的初步研究的开题报告题目:银杏内生真菌的分离鉴定及其产黄酮的初步研究一、研究背景与意义:银杏是我国的特产之一,其果实富含黄酮类化合物,具有较高的药用和保健价值。
近年来,有关银杏内生菌的研究越来越受到人们的关注。
内生真菌是指生长在植物组织内或在植物的种子、果实、根系、幼苗等部分与植物共生的微生物。
内生真菌可以利用植物体内的物质为生长提供能量,同时也对植物的生长和健康状态产生影响。
因此,研究银杏内生真菌在银杏黄酮类物质的合成中的作用,对于进一步挖掘银杏的生物功能和开发植物源天然产物具有重要意义。
二、研究内容和方法:该研究的主要内容为从银杏植物体中分离鉴定内生真菌,并对其产生的黄酮化合物进行初步研究。
具体方法如下:1. 从不同地理区域的银杏树叶、树皮、根部等样品中,采用切片法和分离培养法分离出内生真菌;2. 采用形态学、生理生化和分子生物学等方法对菌株进行鉴定和分类;3. 对产生黄酮类物质的菌株进行筛选,并进行初步的药理活性评价;4. 采用质谱分析技术对黄酮类物质进行结构鉴定。
三、预期成果和意义:本研究的预期成果有以下几点:1. 从不同来源的银杏样品中分离出多种内生真菌,鉴定其分类信息和生理生化特征;2. 筛选出产生黄酮类化合物的内生真菌,并初步评价其药理活性;3. 结合质谱分析,鉴定出内生真菌产生的黄酮类化合物的结构;4. 对银杏内生真菌对银杏黄酮的合成机制和生物活性的影响进行初步研究,为古老植物资源的深度挖掘和开发提供科学依据。
本研究的意义在于深入挖掘银杏的生物功能和开发银杏天然产物,为我国医学和保健产业的发展做出贡献。
同时,本研究还可以为其他古老植物的研究提供参考和借鉴。
灯盏花黄酮类化学成分的研究

灯盏花黄酮类化学成分的研究
张卫东;陈万生;王永红;刘文庸;孔德云;李惠庭
【期刊名称】《中国中药杂志》
【年(卷),期】2000(25)9
【摘要】目的 :研究灯盏花的化学成分。
方法 :分离纯化采用硅胶柱色谱 ,结构鉴定采用IR ,MS ,NMR及文献有关数据比较。
结果 :从灯盏花全草的提取物中分离并
鉴定了 5个黄酮化合物 ,为3 ,5 ,6 ,4′ 四羟基 7 甲氧基黄酮(Ⅰ ) ,5 ,7,4′ 三羟基黄
酮(Ⅱ ) ,3 ,5 ,6 ,7,4′ 五羟基黄酮(Ⅲ ) ,黄芩素(Ⅳ )和 5 ,7,4′ 三羟基双氢黄酮(Ⅴ )。
结论 :化合物I,III,V为首次从本植物中分得。
【总页数】3页(P536-538)
【关键词】灯盏花;化学成分;黄酮;硅胶柱色谱
【作者】张卫东;陈万生;王永红;刘文庸;孔德云;李惠庭
【作者单位】上海第二军医大学药学院;上海医药工业研究院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1;R286.0
【相关文献】
1.黄蜀葵花黄酮类化合物的化学成分及药理作用研究进展 [J], 黎晶晶;徐柏颐
2.牡丹花黄酮类化学成分研究 [J], 赵伟;耿岩玲;崔莉;段文娟;王晓;闫慧娇
3.合欢花黄酮类化学成分的研究 [J], 耿红梅
4.粉葛花黄酮类化学成分研究 [J], 常欣;袁园;谢媛媛;胡久丽;袁丹
5.灯盏花黄酮苷化学成分的研究 [J], 张卫东;陈万生;王永红;杨根金;孔德云;李惠庭因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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西岛表业学板2018年31卷2期318S o u t h w e s t C h i n a J o u r n a l of Agricultural S c i e n c e s Vol. 31N o. 2文章编号:l〇〇l -4829(2018)2 -0318 -04D O I:10. 16213/ki.scjas.2018. 2. 017灯盏花内生真菌分离及其产黄酮内生真菌的初步研究杨梦莉1’2,赖泳红1’3*,郭凤根4,崔晓龙1’3,王永霞1’3,肖炜1’3,李治滢1’3(1.云南大学生命科学学院/云南省微生物研究所,云南昆明650091;2.中国医学科学院医学生物学研究所,云南昆明650118;3.云南大学省部共建云南生物资源保护与利用国家重点实验室,云南昆明650091;4.云南农业大学农学与生物技术学院,云南昆明650201)摘要:【目的】本研究对昆明市寻甸县人工栽培的大田灯盏花的根、茎、叶、花的内生真菌进行分离鉴定,旨在筛选产黄酮的内生 真菌菌株。
【方法】釆用纯培养方法分离植物内生真菌,利用形态鉴定及显色反应筛选产黄酮内生真菌。
【结果】共获得内生真菌 40株,经显微形态观察40株内生真菌初步分类鉴定为14个属。
通过黄酮类物质特异颜色反应,筛选到7株内生真菌产黄酮类物 质,这7株内生真菌经初步鉴定为交链孢属(Akemaria sp.)、镰孢霉属(Fusarium sp.)、痕格孢属(Sirosporium sp.),根中内生菌产 黄酮最高质量浓度为2.625 mg/L。
【结论】灯盏花不同部位内生真菌的数量、分布和种群存有差异性,从根部分离到的内生真菌产 黄酮类质量浓度最高。
关键词:灯盏花;内生真菌;多样性;黄酮中图分类号:Q93-331 文献标识码:AIsolation and Selection of Flavones-formingEndophytic Fungi from Erigeron breviscapusY A N G M e n g-l i1'2 ,L A I Y o n g-h o n g1'3 * ,G U O F e n g-g e n4 ,C U I X i a o-l o n g1'3 ,W A N G Y o n g-x i a1'3 ,X I A O W e i1'3 ,L I Z h i-y i n g1'3(1. Y u n n a n Institute of M i c r o b i o l o g y,S c h o o l of Life S c i e n c e s,Y u n n a n U niversity, Y u n n a n K u n m i n g650091,C h i n a;2.Institute of M e d i c a lB i o l o g yC h i n e s e A c a d e m y of M e d i c a l S c i e n c e s,Y u n n a n K u n m i n g650118 ,C h i n a;3.State K e y L a b o r a t o r y for C o n s e r v a t i o n a n d Utilization ofB i o-R e s o u r c e s in Y u n n a n,Y u n n a n U n i v e r s i t y,Y u n n a n K u n m i n g650091,C h i n a;4.C o l l e g e of A g r o n o m y a n d B i o t e c h n o l o g y,Y u n n a n A g r icultural U niversity, Y u n n a n K u n m i n g650201,C h i n a)A b s t r a c t:【O b j e c t i v e】 In o r d e r to s c r e e n e n d o p h y t i c fu ngi w h i c h c a n p r o d u c e f l a v o n o i d s,the e n d o p h y t i c f u n gi in r o ot s,s t e m s,leaves a n dflowers o f似 w e r e isolated a n d identified. [ M e t h o d] E n d o p h y t i c fun g i w e r e isolated b y u s i n g p u r e culture a n d selectsd u ce df l a v onoids s u b s t a n c e s b a s e d o n m o r p h o l og y a n d specific color reaction. [ R e s u l t]40e n d o ph y ti c f u n gi w e r e isolated f r o m6re-viscapus a n d identified to fo ur te en g e n e r a b a s e d o n m o r p h o l o g y a n d s c r e e n e d s e v e n strains p r o d u c e d flavon oi ds s u b s t a n c e s b y m e a n s of specific color reaction. S e v e n strains p r o d u c e d fl avonoids s u b s t a n c e s w e r e identified as Alternaria sp. ,Fusarium sp. , a n d Sirosporium sp. T h e hig he s t quality co nc e n t r a t i o n of f lav onoids s u b s t a n c e s f r o m e n d o p h y t i c fu n g i roots w a s 2. 625m g/L.【C o n c l u s i o n】 It h a s s h o w n that q u a n t i t y, spe ci e s a n d distributing of the e n d o p h y t i e fungi varied in different parts of Erigeron breviscapus,a n d the c o n c e n tr at io n of flavono i ds s u bsta nc e s f r o m e n d o p h y t i c f u n g i roots w a s the highest.K e y w o r d s:Erigeron breviscapus;E n d o p h y t i c fungi ;Diversity ;F l a v o n o i d s【研究意义】灯盖花又名灯盖细辛[£^妒「〇«/^- iiiscapiM (Vant. )Hand. -Mazz.],属菊科紫竞族飞蓬属多年生草本植物[1],主要分布于云南、贵州、广 西、湖南、西藏等地。
作为一种药用植物,它具有散 寒解表、止痛舒络、除湿祛风等功效M。
黄酮是灯收稿日期=2017-01-16基金项目:国家自然科学基金(31660089);云南省科技条件平 台建设计划项目(2〇〇9D A O〇2);云南省教育厅基金(2〇15Y O〇2) 作者简介:杨梦莉(1987 -),女,硕士,云南永善人,主要从事微 生物资源研究,E-m a i l:y a n g m e n g l i7@163. c o m,*为通讯作者,瓦- m a i l:l a i y h l996@a l i y i m.c o m。
盏花重要的药效成分之一[3],目前,临床上灯盏花 主要用于治疗中风、治疗脑梗塞、心绞痛及冠心病 等[4]。
灯盏花是一种需求量大的重要药用植物,值 得深入研究。
【前人研究进展】内生菌能促进植物 的生长、增加植株的抗逆性、产生多种代谢活性产 物、增加宿主植物的他感作用等[5]。
研究发现植物 内生菌的代谢产物与植物的药用物质表现出一致 性[6],因此,若能筛选出产活性物质的内生真菌,就 能利用发酵技术生产有效的代谢物质。
【本研究切 入点】目前,关于灯盏花的研究大量集中在灯盏花2期杨梦莉等:灯盏花内生真菌分离及其产黄酮内生真菌的初步研究319的药理作用、HPLC测定及其生物学特性调查研究 等方面,而对于灯盏花内生真菌多样性及其产黄酮 真菌的筛选,只有国内李治滢[7]和何永美[8]等人曾 做过相关研究。
【拟解决的关键问题】本研究对灯 盏花内生真菌进行分离、鉴定,以揭示其内生真菌的 多样性,并对分离得到的内生真菌进行产黄酮内生 真菌筛选,为探索灯盏花药效成分新的生产途径提 供依据。
1材料与方法1.1供试植物灯盏花为一年生苗,由寻甸县灯盏花栽培基地 提供。
1.2分离培养基PDA培养基,查氏培养基[9]。
待倒平板时于培 养基中加青霉素(80 U/mL)抑制细菌生长。
1.3内生真菌的分离取灯盏花新鲜健康植株,分别对根、茎、花、叶用 自来水冲洗干净,用滤纸吸干水分,再用无菌水冲洗 3遍,放入75 %酒精浸泡1 ~2min,无菌水冲洗3 遍,再用0.1 %升汞消毒,无菌水清洗3次。
在无菌 条件下,用灭过菌的手术剪将植株各器官剪成长宽0. 5 c m X0.5 c m的小片,接种到真菌固体培养基 上,置于28 °C温箱培养4 ~ 10 d。
待各植物组织切 面长出菌落后挑取边缘部分,经纯化后即为灯盏花 内生真菌。
空白对照:将最后一次洗涤的灭菌水涂 布于空白平板中,28 °C培养,结果材料周围未见任 何菌长出,证明所得菌株为内生菌[M°]。
1.4分类鉴定对分离获得的灯盏花内生真菌进行插片法培 养,根据显微形态特征的观察并分类鉴定[9_11]。
1.5菌株液体发酵培养采用PDA液体培养基进行发酵,将在平板上活 化后的菌株接种于装有100 mL液体培养基的250 mL三角瓶内。