川芎内生真菌的分离与鉴定
GC-YL-10160川芎检验操作规程
二氧化硫残留量（mg/kg）=（V供-V空）×C×0.032×106
W供
式中V供为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml；
V空为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml；
c 为氢氧化钠滴定液摩尔浓度，mol/L；
W供为供试品的重量，g。
0.032为lm l氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g；
【鉴别】
（1）显微鉴别
仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛等。
方法：本品横切面：木栓层为10余列细胞。皮层狭窄，散有根迹维管束，其形成层明显。韧皮部宽广，形成层环波状或不规则多角形。木质部导管多角形或类圆形，大多单列或排成“V”形，偶有木纤维束。髓部较大。薄壁组织中散有多数油室，类圆形、椭圆形或形状不规则，淡黄棕色，靠近形成层的油室小，向外渐大；薄壁细胞中富含淀粉粒，有的薄壁细胞中含草酸钙晶体，呈类圆形团块或类簇晶状。
标 题
正 文
1
2
2.1
2.2
3
3.1
3.1.1
3.1.2
3.2
3.3
3.3.1
3.3.2
4
4.1
4.1.1
4.1.2
4.1.3
4.2
4.2.1
4.2.2
4.2.3
4.3
4.3.1
4.3.2
4.3.3
4.4
4.4.1
4.4.2
4.4.3
5
5.1
5.1.1
5.1.2
6
6.1
6.2
6.3
标准依据：《中国药典》2020年版一部及四部
方法：取本品粉末1g，加乙醚20ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取欧当归内酯A对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液（置棕色量瓶中），作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（3：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
三七内生真菌分离与分子鉴定（Ⅰ）
三七内生真菌分离与分子鉴定（Ⅰ）张玉洁;和泽高;唐龙山;常征;陈中坚;张铁【摘要】Endophytic fungi are isolated from Panax notoginseng and molecular sequences of 18S - ITS - 28S rDNA of the fungi are analyzed. 158 strains of various entophytes are obtained from the root, stem and leaf of P. notoginseng. 91 strains of the endophytic fungi out of 92 strains are molecularly identified belonging to 19 genera. Another one is considered as a new species with highest ITS sequence identity of 84% to the known sequence in GenBank. The results demonstrate that the entophytes in P. notoginseng are diversity and rich, and there are some differences at quantity and species in different organs of P. notoginseng.%对三七（Panax notoginseng）内生真菌进行了分离并通过18S-ITS-28S rDNA 序列分析进行鉴定。
结果从根、茎、叶组织中分离得到158株形态各异的内生真菌。
对其中92株的ITS序列分析显示,91株分属于19个已知属,另1株真菌的ITS 序列与GenBank中已报道的序列最高相似性为82%,认为是一新种。
川芎化学成分的质量评价与分析方法研究
川芎化学成分的质量评价与分析方法研究川芎（学名：Ligusticum chuanxiong Hort.）是一种常见的中药材，主要生长在中国西南地区。
川芎被广泛应用于传统中医药领域，被认为具有活血化瘀、舒筋活络的作用。
为了更好地理解川芎的化学成分及其质量评价与分析方法，我们进行了一系列的研究。
首先，我们对川芎进行了化学成分的分析。
通过色谱质谱联用技术，我们成功地鉴定了川芎中的化学成分包括川芎素、川芎内酯、川芎醇等。
川芎素是川芎的主要活性成分之一，具有抗炎、抑制血小板聚集等药理作用。
川芎内酯则具有镇痛、抗血栓形成等功效。
此外，川芎醇也是一种重要的成分，具有扩张血管、改善微循环等作用。
接下来，我们对川芎的质量评价进行了研究。
川芎的质量评价包括外观质量、理化性质、微生物限度、化学成分等多个方面。
外观质量的评价主要包括形态、色泽、异味等指标，可以通过目视观察和感官判断来进行。
理化性质的评价可以通过测定川芎的含水量、灰分含量、挥发油含量等指标来进行。
微生物限度的评价则是通过检测川芎中的大肠菌群、黄曲霉菌等微生物的数量来判断其是否符合相关标准。
化学成分的评价是川芎质量评价的重要组成部分，可以通过色谱、质谱等技术进行定量和鉴定。
在分析方法的研究中，我们着重探索了川芎的指纹图谱分析方法。
指纹图谱是一种通过测定药材中的多个成分来评价其质量的方法。
我们采用了高效液相色谱技术结合紫外检测器，成功地建立了川芎的指纹图谱。
通过比对川芎不同产地、不同生长期或不同加工工艺的指纹图谱，我们发现了川芎的化学成分具有一定的差异，为川芎的质量评价提供了依据。
此外，我们还利用质谱技术进行了川芎中化学成分的定性定量分析。
质谱技术是一种高灵敏度的分析方法，可以快速准确地鉴定川芎中的化学成分。
我们使用了液相色谱质谱联用技术，建立了川芎中主要成分的定性定量分析方法。
通过该方法，我们可以准确地测定川芎中川芎素、川芎内酯、川芎醇等化学成分的含量，为川芎质量评价提供了可靠的手段。
发酵中药对育肥猪免疫力的影响
发酵中药对育肥猪免疫力的影响作者：张伟伟高婷来源：《国外畜牧学·猪与禽》2024年第02期作者简介：张伟伟（1990－），男，本科，中级畜牧师，主要从事畜牧兽医技术推广工作*通信作者：高婷（1991－），女，助理兽医师，主要从事畜牧兽医技术推广工作摘要：为寻找抗生素生长促进剂的替代品，推动养猪业发展，本试验研究了发酵中药对育肥猪免疫力的影响。
结果显示，日粮中添加不同水平的发酵中药，可以显著提高育肥猪血清中免疫球蛋白水平，表明发酵中药可以有效提高育肥猪的免疫力。
关键词：发酵中药；育肥猪；免疫力中图分类号：S816 文献标志码：A 文章编号：1001-0769（2024）02-0028-032020年7月，我国全面禁止使用促生长类药物饲料添加剂，寻找抗生素替代品对畜牧业发展有非常重要的影响。
发酵中药是一种重要的抗生素替代品，随着研究的深入，应用更加广泛。
发酵中药具有很多优点。
首先，中药通过微生物发酵，可以产生新的有效成分，强化药效，提高动物机体免疫力。
研究发现，将辣蓼、青蒿、杏仁等中药发酵而成的六神曲具有抗菌、抗病毒功效，可以提高机体免疫力[1]。
研究人员通过醋酸乙酯萃取川芎内生真菌发酵液，分离到了一种新的内酯化合物，表明中药经发酵后可以产生新的活性物质[2]。
其次，发酵中药的毒性较低。
研究证实，巴豆经发酵处理后，毒性明显降低，安全性显著提高[3]。
最后，发酵中药可改善肠道微生物群。
饲喂复方中药发酵饲料可增加母猪粪便中乳杆菌属、毛螺菌属等有益菌的数量，减少链球菌、大肠埃希菌等有害菌的数量，从而降低母猪的发病率[4]。
本试验研究日粮中添加不同水平的发酵中药对育肥猪血清中免疫球蛋白水平的影响，为发酵中药在养猪生产中的应用提供参考。
1 试验材料与方法1.1 试验材料本试验的中药组方由松针、白术、黄连、陈皮、黄芪、甘草组成，质量比为4∶4∶2∶3∶4∶3。
将上述中药混合，粉碎，制成200目的超微粉。
川芎的鉴定方法及药理分析与临床应用
川芎的鉴定方法及药理分析与临床应用【摘要】目的：分析川芎的鉴定方法、药理作用与临床应用情况。
方法：从本院中药房采集川芎样本进行鉴定，统计鉴定、性状等。
从本院2021年1月至2022年12月期间收治住院治疗患者中选取200例进行临床资料回顾性分析。
100例实行常规治疗用常规组表示，100例在常规组基础上增加川芎治疗纳入川芎组，统计川芎组疾病分布情况，2组患者临床疗效。
结果：川芎鉴定方法主要有性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定等多种方法，鉴定结果显示产地不同性状或多或少也不同；川芎可用于心血管疾病、脑血管疾病、妇科疾病、支气管哮喘、偏头痛等治疗，心脑血管占比最高，为72.00%；川芎组临床治疗总有效率94.00%，高于常规组84.00%（P＜0.05）。
结论：掌握川芎特征，合理采用性状鉴定法、显微鉴定法、理化鉴定法等进行有效鉴定，可区分川芎真假，评估川芎品质，保证川芎用药安全。
川芎在心脑血管疾病中具有确切疗效，可用于妇科疾病、支气管哮喘等多种疾病治疗，与川芎行气活血、化瘀止痛等功效相关，和川芎主要成分在抗炎、抗血小板聚集、心肌细胞保护、微循环改善等方面具有较强优势相关。
【关键词】川芎；药理分析；临床疗效；鉴定方法川芎是临床应用较为广泛的中草药，来源于伞形科植物川芎根茎，归肝经、胆经、心包经，味辛、性温[1]。
从中医典籍中可知该药具有理气止痛、行气开郁、活血化瘀、祛风燥湿等功效，在胁痛腹疼、风湿痹痛、痈疽疮疡、血虚头痛、经闭痛经等治疗中均有体现。
随着川芎研究的不断深入，发现其在中枢神经系统保护、心肌功能保护、血小板聚集抑制等多方面存在积极作用，适用于心脑血管疾病治疗[2]。
为深入了解中药川芎，对川芎鉴定方法、药理机制、临床应用等进行了探究，现报道如下。
1资料及方法1.1资料从本院中药房采集中药川芎样本进行鉴定。
选取2021年1月至2022年12月期间在本院接受住院治疗患者200例进行临床资料回顾性分析。
100例常规治疗纳入常规组[男48例，女52例；年龄20~78（45.58±12.84）岁；病程0.1~5.5（3.04±1.41）年]。
中药川芎有效成分鉴别的实验材料
对于川芎的认识一、补阳还五汤由黄芪，当归，赤芍，地龙，川芎，红花，桃仁六味药材组成。
本次试验主要研究黄芪，当归，川芎的有效成分。
二、实验分为两部分：川芎中有效成分的提取与分离纯化，以及运用薄层色谱技术对中药中有效成分的鉴别。
三、川芎含挥发油约1％。
鉴定出油中成分有40种，占挥发油的93.64％，其中主成分为藁本内酯（ligustilide）占58％、3-丁酜内酯（3-butylphthalide）5.29％和香桧烯（sabinene）6.08％。
根茎中所含的内酯化合物，除上述提到的二种外，尚含丁烯酜内酯（butylidene phthalide）、川芎内酯（sankyunolide）、新蛇床内酯（neocnidilide）、4-羟基-3-丁酜内酯（4-hydroxy-3-butyl phthalide）、川芎酚（chuanxingol）、双藁本内酯（2，2′-diligustilide），以及3-丁基-3，6，⒎三羟基-4，5，6，7-四氢苯酞等。
含氮化合物有四甲基吡嗪（tetramethylpyrazine，川芎嗪，chuanxiongzine）、perlolyrine、盐酸三甲胺、盐酸胆碱、L-异亮氨酰-L-缬氨酸酐（L-isobutyl-L-valine anhydride）、L-缬氨酰-L-缬氨酸酐、1-乙酰基-β-卡啉、尿嘧啶、腺嘌岭和腺苷。
酸性或酚性化合物有4-羟基-3-甲氧基苯乙烯、1-羟基-1-（3-甲氧基4-羟基苯）-乙烷、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、香荚兰酸、阿魏酸（ferulic acid）、瑟丹酸（sadanic acid）、大黄酸（chrysophic acid）、棕榈酸、香荚兰醛和亚油酸。
此外，川芎根茎尚含中性油，其成分为十五、十六、十七、十八烷酸乙酯，异十七、异十八烷酸乙酯和异十七烷酸甲酯。
另含5，5′-联呋哺甲酰醚（bis-5，5′-formylfurfuryl ether）、匙叶桉油烯醇（spathulenol）、β谷甾醇、蔗糖和一种脂肪酸甘油酯。
多产区川芎内生真菌菌群组成的PCR—DGGE分析
多产区川芎内生真菌菌群组成的PCR—DGGE分析研究采用PCR-DGGE和DNA测序技术，探究了四川5个不同产区间川芎内生真菌群的差异性。
结果表明川芎内生真菌群落结构存在不同个体、不同产区间的差异，同产区不同个体川芎内生真菌的相似程度较高，不同产区间的相似程度较低；道地产区都江堰市石羊镇川芎的内生真菌群落结构较其他4个产区丰富，同时与其他产区相似度均很低，存在其他产区未见的特有种。
综合分析认为在四川5产区中，都江堰市石羊镇的川芎内生真菌种群最为多样且群落结构相对固定，这可能是川芎道地性形成的重要原因。
标签：川芎；内生真菌；PCR-DGGE川芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎，是著名的川产道地药材，主产于四川都江堰金马河上游以西地区[1]。
川芎具有活血行气，祛风止痛之功效；用于月经不调，经闭痛经，癥瘕腹痛，胸胁刺痛，跌扑肿痛，头痛，风湿痹痛。
已有研究表明，不同产地间的川芎活性成分含量及配比存在明显差异[2-3]。
植物内生菌在维持药用植物内环境的稳定性和维系中药品质方面具有重要的作用[4]。
已有研究结果显示，内生真菌多样性受生境的影响显著[5]，不同的生长环境导致药用植物的内生真菌存在地域性的差异，不同产地的同一种药用植物中内生真菌的群落结构存在较大的区别[6-7]。
本研究首次采用PCR-DGGE结合DNA测序技术，对四川5个不同产区的川芎内生真菌菌群结构进行分析，旨在探究不同产区间川芎内生真菌群的差异性，以期从微生态角度阐释道地药材的形成机制。
对丰富中药生物多样性的研究内容，建立川芎微生态群落结构树，深入开发药材中的微生物资源，提高和稳定川芎药材质量等具有十分重要的意义。
1 材料2011年4-5月分别采自四川彭州、都江堰、眉山、彭山，采集时选取长势良好，没有明显病虫害的川芎根茎，采用“S”形平行采样法，每个产区采集20株，每株间隔2～2.5 m。
记录并编号后迅速将样品送回实验室，去掉根和地上部分，清洗干净后，放置在-86 ℃超低温冰箱中保存备用，样品的编号方法和产区见表1。
川芎薄层鉴定
2.2 供试液与阿魏酸对照品溶液的制备取样品粉末（0.5mm）2g，加95%乙醇10ml，浸渍过夜，滤过，滤液置于水浴上浓缩1ml，作供试品溶液。
取阿魏酸对照品1mg，无水乙醇定容至1ml，制成1mg/ml溶液，做对照品溶液。
2.3 薄层层析2.3.1 薄层板的制备硅胶（G254）3g，加0.5%CMC-Na液9ml，研磨均匀后涂布在玻璃板（20c m ×20cm）上，室温置干，于105℃活化1h后置干燥器内备用。
2.3.2 阿魏酸和脂溶性成分的薄层鉴定分别吸取奶芎、山川芎、彭州川芎根茎乙醇提取液和阿魏酸对照品溶液点样于硅胶G254薄层板上，分别在展开剂中①苯-冰乙酸-甲醇（30：1：3）②氯仿-甲醇（95：0.5）③苯-氯仿-甲醇（2：2：0.6）挥发油的薄层色谱比较鉴定1.1供试液制备按照《中华人民共和国药典》（2000版）附录XD挥发油测定法甲法测定，搜集轻油和重油共1ml左右于容量瓶中1.2薄层层析1.2.1 薄层板的制备硅胶（G254）3g，加0.5%CMC-Na液9ml，研磨均匀后涂布在玻璃板（20c m ×20cm）上，室温置干，于105℃活化1h后置干燥器内备用。
1.2.2 显色剂的制备取茴香醛0.5ml，加醋酸50ml，加硫酸1ml，摇匀，即得。
1.2.3 挥发油哦薄层鉴定分别吸取奶芎、山川芎、彭州川芎、都江堰川芎挥发油提取液点样于硅胶G254薄层板上，以石油醚：乙酸乙酯（85：15）上展开。
自然挥干溶剂后，在365nm紫外灯下观察；在254nm紫外灯下观察；用茴香醛试液显色。
药典薄层鉴别取本品粉末1g，加乙醚20ml，加热回流1h，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。
另取川芎对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法（Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各1～2ul，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。
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川芎内生真菌的分离与鉴定汪杨丽，严铸云，郭晓恒，宋杰，陈新，万德光成都中医药大学药学院中药材标准化实验室，四川成都 (610075）E-mail：wangyangli27@摘要：目的：探讨川芎内生真菌类群与川芎品种和产地的关系。
方法：采用平板分离法分离川芎的内生真菌，采用点植法对分离菌株进行分类鉴定。
结果：从6个产地的川芎根茎样品共获得内生真菌50株，经形态观察分类鉴定为1纲、3目、4科、13属。
结论：不同产地及不同品种川芎的内生真菌在数量、分布、种群及其组成存在差异，推测川芎的道地性可能和川芎内生真菌种群有关。
关键词：川芎，内生真菌，分离鉴定川芎为伞形科（Umbelliferae）藁本属植物川芎（Ligusticum chuanxiong Hort.）的干燥根茎，具有活血行气、祛风止痛的功效，是著名的川产道地药材。
四川都江、彭州为川芎的主要产区。
此外，云南丽江、甘肃庄浪和华亭、江西等地也产，分别称“云芎”、“西芎”、“抚芎”[1～3]。
有关不同产地及不同品种川芎的化学成分品质、药理、药效的研究报道较多[4]，但至今未见从川芎根茎分离内生真菌及其内生真菌种群多样性的研究报道。
根据内生真菌和植物互惠共生的关系[5，6]，本文对不同产地及不同品种的川芎进行内生真菌的分离，探讨川芎在特定生境中的微生物群落结构的特征。
1. 材料与方法1.1材料1.1.1植物来源（见表1）1.1.2 培养基 PDA培养基[7]（马铃薯葡糖糖培养基）＋青链霉素混合液[8]（用于分离）；PDA 培养基；促孢培养基（KH2PO41g、KNO31g、MgSO4.7H2O 0.5g、KCl 0.5g、淀粉0.2g、葡萄糖 0.2g、蔗糖 0.2g、琼脂15～20g、蒸馏水 1000ml、PH自然)。
表1 各种川芎的样品情况药材名原植物部位采集地采集时间川芎Ligusticum chuanxiong Hort. 根茎四川彭州敖平2006.5.20川芎L. chuanxiong Hort. 根茎四川都江堰石羊2006.5.22山川芎L. chuanxiong Hort. 根茎四川彭州小鱼2006.7.24山川芎L. chuanxiong Hort. 根茎四川汶川水磨2006.8.10西芎L. sinense Oliv. 根茎甘肃平凉市华亭马峡2006.9.14云芎L. chuanxiong Hort. cv. Jinxiong根茎云南丽江泸沽湖2006.8.17注：以上品种经成都中医药大学严铸云副教授鉴定1.2方法1.2.1. 内生真菌的分离先去掉新鲜川芎的须根，用自来水将川芎根茎表面洗净，用5%的NaClO溶液浸泡5min，用自来水反复的漂洗，稍干后切成适宜大小的小块，在无菌的条件下，用75％酒精中浸泡5 min，用无菌水冲洗3～4次，无菌滤纸吸干，然后用无菌刀片将表皮削去，分别切成5 mm×5 mm×1 mm的小块种植于PDA培养基内，每个培养皿中放7小块，每个样品6个培养皿，置28℃恒温箱中培养3～15d，观察到培养基上从各植物组织块内部向周围长出菌丝并渐渐形成菌落时，采用尖端菌丝挑取法把真菌转移到另一个PDA的试管斜面或者平皿纯化培养，即得内生真菌。
1.2.2内生真菌的鉴定采用插片培养法和点植法，利用光学显微镜对分离获得的川芎内生真菌进行显微形态（真菌菌丝和产孢结构）的观察、分类鉴定。
分类检索参照文献[9，10]。
2. 结果分别采集了川芎道地产区、非道地产区川芎和育苓区山川芎的根茎来分离内生真菌，分离获到内生真菌50 株，经微生物学形态观察，初步鉴定为3目、4科、13属，见表2。
由表2可知，内生真菌在川芎的根茎中广泛分布，在属的水平上呈现微生物的群落的多样性，其中镰孢属（Fusarium)、曲霉属(Aspergillus)、头孢霉属（Cephalosporium）为优势种群，分别占分离的内生真菌总数的28.0%、30.0%、14.0%。
从表3可看出，从不同品种及产地川芎根茎中都分离得到一定数量、不同类群的内生真菌，表明内生真菌在川芎根茎中普遍存在。
但是不同品种及产地川芎内生真菌在数量、分布、种群及其组成存在差异。
表2 川芎内生真菌种群组成目(Order)科(Family)属(Genera)数量/株瘤座孢科（Tuberculariaceae）镰孢属（Fusarium） 14曲霉属（Aspergillus）15青霉属（Penicillium） 1头孢霉属（Cephalosporium）7沃德霉属（Wardonmyces） 1木霉属（Trichoderma） 1节枝孢属（Articulospora） 1轮枝孢属（Verticillium） 1拟小卵孢属（Ovulariopsis） 4丛梗孢科（Moniliaceae）隔指孢属（Dactylella） 2丛梗孢目(Moniliales)暗梗孢科 (Dematiaceae) 链格孢属（Sirodesmium） 1 黑盘孢目(Melanconiales) 黑盘孢科(Melanconiaceae) 棒盘孢属（Coryneum） 1 无孢目 (Mycelia Sterilia) 丝核菌属(Rhizoctonia) 1在属的水平上，13个属中以曲霉属（Aspergillus）和镰孢属(Fusarium)在各产地分布最广；道地产区与非道地产区比较，明显可见道地产区分离得到的内生真菌种群多样性更丰富，其中头孢霉（Cephalosporium）和拟小卵孢属（Ovulariopsis）为两道地产区的共有种群；两个育苓区中，曲霉属是共有种群，节枝孢属（Articulospora）和棒盘孢属（Coryneum）是彭州小鱼洞镇的特有种群，镰孢属(Fusarium)和木霉属（Trichoderma）是阿坝汶川水磨镇的特有种群，其他3个产地也有各自的特有种群，表明不同品种的川芎内生真菌群落在属的水平上具有专一性，可能内生真菌的生长受着两地生态环境中的海拔高度、气候等因素的影响。
虽然甘肃平凉市华亭马峡（2年生）和云南泸沽湖附近分离得到的内生真菌都属于镰孢属和曲霉属，但从内生真菌的数量可知，前者以曲霉属为优势种群，后者以镰孢属为优势种群。
表3 川芎内生真菌数量与种群分布产地属数量/株 合计/株头孢霉（Cephalosporium ）2 拟小卵孢属（Ovulariopsis ） 2 隔指孢属（Dactylella ） 2 轮枝孢属（Verticillium ） 1 彭州敖平镇 （道地产区）链格孢属（Sirodesmium ） 1 8 头孢霉（Cephalosporium ）5 曲霉属(Aspergillus ) 2 拟小卵孢属（Ovulariopsis ）2 镰孢属(Fusarium ) 1 都江堰石羊镇 （道地产区）丝核菌属 (Rhizoctonia )1 11 曲霉属(Aspergillus ) 1 节枝孢属（Articulospora ） 1 彭州小鱼洞镇 （山川芎） 棒盘孢属（Coryneum ） 1 3 镰孢属(Fusarium ) 3 曲霉属(Aspergillus ) 1 阿坝汶川水磨镇 （山川芎） 木霉属（Trichoderma ） 1 5 青霉属(Penicillium ) 1 镰孢属(Fusarium ) 1 甘肃平凉市华亭马峡 （1年生 西芎） 沃德霉属（Wardonmyces ）1 3 曲霉属(Aspergillus ) 10 甘肃平凉市华亭马峡 （2年生 西芎） 镰孢属(Fusarium ) 1 11 镰孢属(Fusarium ) 8 云南丽江泸沽湖附近（金芎）曲霉属(Aspergillus )19从表3还可以看出，川芎根茎中分离的内生真菌在数量、种群的组成上比山川芎的更丰富，这可能是川芎“高山育苓，平坝栽培”后形成优质药材的原因之一。
3. 讨论由文献报道和作者的经验知，可靠的采样方法和可靠的分离手段在植物内生真菌的研究中起着至关重要的作用，它是后续研究工作的基础。
在试验过程中，首先需制定合理的采样方法，采集没有腐烂发霉及虫害的健康川芎根茎，在最短时间内进行新鲜活体植株分离样品处理，以确保植物内生真菌的生存活力及其条件无显著变化；其次，采用5%的NaClO 浸泡根茎5min ，用自来水冲洗30min ，晾干，再在无菌条件下用75%乙醇处理，无菌水反复冲洗3~4次，达到分离材料表面的有效杀毒，从而基本上排除外界环境微生物污染的可能性；再次，在植物内生真菌分离用培养基中加入青霉素和链霉素的混合液，可以有效地抑制细菌的污染。
本文首次对不同品种和产地川芎根茎的内生真菌进行了分离、鉴定，结果表明：不同产地及不同品种川芎内生真菌在数量、分布、种群及其组成存在差异，初步推测川芎的道地性可能和川芎内生真菌种群结构有关。
由于纯培的方法存在一定的局限性，在随后研究中我们将进一步报道非纯培的方法分析内生微生物与川芎质量的关系，以期进一步揭示川芎道地性形成的原因。
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