常见真菌的分离与鉴定
树木共生真菌菌株纯化及快速鉴定方法
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陕北苹果常见真菌病害病原菌的分离鉴定研究
采集 发 病 初 期症 状 典型 的病 叶 、 果 及发病 树 病 白粉病 是一 种外 寄生 菌 ， 主要为 害 叶片和新 梢 ； 皮进 行室 内组 织分 离培养 。 自来水 冲洗材 料 ， 用 再用
收 稿 日期 ：０ ６ ３ ｌ ２０ —０ 一 ７
资金项 目： 延安大学专项基金（ ２ ０ —９ ） ＹＤ ０４ １ １ 作者简介： 振山（ ９ ０ 。 ， 邓 １ ７ 一）男 陕西黄 陵县人 。 延安大学讲师 。
为害较 重 ， 褐斑 病在 北部 和南 部果 区均广 为 分布 ， 尤
以南部多雨地区受害严重。斑点落 叶病 ， 又称褐纹
病 、 色 叶枯 病 、 色斑点 病 和大 星病 等 ， 是 ７ 年 褐 褐 它 Ｏ 代末 ８ ０年代 初在 我 国流行 为 害 的一种 苹 果 叶斑病
［ ］
近年来 ， 由各种病原菌引起 的苹果树腐烂、 叶片 脱落及果实腐烂 ， 在我 国大部分苹果产区均有发生 ，
一
而锈病 ， 又称 赤星病 、 胡子 、 毛疔 、 羊 羊 苹桧 锈病 ［ 。 ａ ］
苹 果轮 纹病和 苹 果炭疽 病是 造成苹 果烂果 的两
些地 区发病 严重 ， 直接 影 响苹果 的产 量和 品质 ， 造
１ 材 料 和 方 法
１ １ 标本 采集 ．
１ １１ 采 集 延安 市 庙 嘴 沟果 园苹 果树 的发病 ． ． 叶片 、 果 。 病 １ １ ２ 从 黄 陵县 、 川 县 、 ．． 洛 富县 采集 典 型发 病
的叶片 及树皮 。
１ ２ 方 法 ．
灰斑病及圆斑等， 中以褐斑病、 其 斑点落叶病在我国
２ ℃恒 温培养 。 ５ 待菌 落长 出后 ， 从边 缘挑 出小 块菌丝
接 到 Ｐ Ａ 平 板 上 。菌 落 长 大 后 ， 打 孔 器 打 取 ６ Ｄ 用
土传病害生防菌的分离筛选及鉴定
Screening and Identification of Antagonisms Against the Soilborne Pathogens
(1Institute of Animal Husbandry and Veterinary, Anhui Academy of Agricultural Sciences , Hefei 230031;
陈丽园等： 土传病害生防菌的分离筛选及鉴定
·9·
土传病害危害程度深。20 世纪 70 年代， 美国俄亥俄州 大学植物病理学教授 Hoitink 等[1]首次利用树皮制作的 堆肥， 成功地防治苗圃中严重的根腐病、 疫霉病和立枯 病等土传病害， 开拓了利用土壤有益微生物对土传病 害进行防治的研究领域。生物防治具有高效、 零污染、 不产生抗药性和防治结合等优势， 其中生防有机肥集 生物肥和有机肥的优点于一身， 有机肥作为拮抗菌的 载体， 能为其提供足够的碳、 氮源， 延长其在土壤中的 生存时间， 使其容易形成优势菌群， 从而有效抑制了病 原菌的生长
基金项目： 国家现代产业技术体系 “国家现代产业技术体系 （蛋鸡） 专项经费” (CARS-41-K19)。 第一作者简介： 陈丽园， 女， 1981 年出生， 福建永定人， 助理研究员， 硕士， 主要从事饲料及环境微生物方面的研究。E-mail： semidry2@。 通讯作者： 詹凯， 男， 1968 年出生， 安徽安庆人， 研究员， 博士， 从事家禽育种及生产研究。通信地址： 230031 安徽省合肥市农科南路 40 号省农科院创 新大楼 402 室 安徽省农科院畜牧所， Tel： 0551-62160598， E-mail： zhankai633@。 收稿日期： 2014-02-20， 修回日期： 2014-05-12。
实验五真菌的分离培养及形态观察
实验五真菌的分离培养及形态观察真菌分离培养应考虑所分离真菌的特性，配制合适的培养基，选择所需的气体环境。
同时, 由于真菌分离材料常污染有大量细菌，所以可在培养基中加入抗菌素并在分离培养过程中严格执行无菌操作。
目的要求1．掌握真菌分离培养方法。
2．认识真菌菌落的特征，比较与细菌菌落有何不同。
3．了解真菌载片培养法。
4．掌握观察真菌的基本方法，并观察其形态特征。
操作步骤—、真菌的分离培养方法（－）平板划线分离法1．取适合真菌的琼脂培养基融化，冷至45℃，注入无菌平皿中，每皿15～20ml，制成平板待用。
2．取要分离的材料（如田土、混杂的或污染的真菌培养物、真菌）少许，投入盛无菌水的试管内，振摇，使分离菌悬浮于水中。
3．将接种环经火焰灭菌并冷却后，蘸取上述菌悬浮液，进行平板划线(同细菌的划线法)。
4．划线完毕，置温箱中培养2～5d，待长出菌落后，钓取可疑单个菌落先作制片检查，若只有一种所需要的真菌生长，即可进行钓菌纯培养。
如有杂菌可从单个菌落中钓少许菌制成悬液，再作划线分离培养，有时需反复多次，才得纯种。
另外，也可在放大镜的观察下，用无菌镊子夹取一段待分离的真菌菌丝，直接放在平板上作分离培养，可获得该种真菌的纯培养。
（二）稀释分离法1．取盛有无菌水的试管5支（每管9ml），分别标记1、2、3、4、5号。
取样品（如田土等）1g，投入1号管内，振摇，使悬浮均匀。
2．用1ml灭菌吸管，按无菌操作法，从1号管中吸取1ml悬浮液注入2号管中，并摇匀；同样由2号管取1ml至3号管，依此类推，直至5号管。
注意每稀释一管应更换一支灭菌吸管。
3．用2支无菌吸管分别由4号、5号试管中各取1ml悬液，并分别注入2个灭菌培养皿中，再加入融化后冷至45℃的琼脂培养基约15ml，轻轻在桌面上摇转，静置，使冷凝成平板。
然后倒置温箱中培养，2～5d后，从中挑选单个菌落，并移植于斜面上。
二．真菌培养性状观察（一）真菌在固体培养基上的生长表现1 .酵母菌菌落：酵母菌在固体培养基上多呈油脂状或蜡脂状，表面光滑、湿润、黏稠，有的表面呈粉粒状、粗糙或皱褶。
常见病原真菌
厚。 顶囊呈球形或近球形， 小梗双层、密生于顶囊
的全部表面。 分生孢子球形、有褐色
色素沉积在细胞壁，粗
糙有刺。
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47
土曲霉
菌落特征： 生长快，绒毛状，
有浅放射状沟纹。
表面肉桂色或黄 褐色；
培养基可呈污褐 色，背面淡黄色 到棕色。
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48
土曲霉
脑脊液直接涂片，细胞有较宽的荚膜。
显微镜下有时可见到出芽现象
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29
实验室检查-病原学检查
直接镜检: 墨汁染色，新生隐球菌呈圆形或椭圆形 的双层厚壁孢子, 外有一层宽阔荚膜, 边缘清楚完 整, 菌体内可见出芽（菌体计数：判断预后及疗效 的指标）
培养：培养基内可加氯霉素, 但不可加放线菌酮, 因后者抑制本菌生长。
既可用于检测，又可根据菌落颜色用于鉴定95%以上 的白念珠菌（绿、翠绿）、热带念珠菌（蓝）、克柔念 珠菌（粉红，模糊有微毛）， 85%的光滑念珠菌 （紫），其它念珠菌呈白色。
30~37℃培养48h后观察结果。
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21
念珠菌显色培养基 CHROMagar Candida
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VITEK全自动微生物鉴定仪
念珠菌病: 最常见，血源感染的第4位。
曲霉菌病: 常见于干细胞移植、实体器官移植、大剂 量化疗患者。
隐球菌病: 艾滋病人患病率为10-20%。
接合菌病（毛霉病）:多见于重症糖尿病、烧伤病及 器官移植病人。
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6
近年深部真菌变迁的特点
念珠菌血症：白色念珠菌为主呈下降趋势 非白念：光滑念珠菌，近平滑念珠菌和热带念珠菌，
健康人具有免疫能力
易感因素 AIDS、 糖尿病、 淋巴瘤、 晚期肿瘤、 SLE、 器官移植
常见病原菌分离方法
常用的几种典型的病原菌分离方法1．斑点病原菌的分离从病斑部分切取每边3～5 mm的小块组织，在70％酒精中浸数秒钟后，移入0.1％的升汞水溶液中处理3～5 min，以灭菌水冲洗3次，移置培养皿的培养基中，然后培养。
2．维管束组织内病原菌的分离从根茎维管束组织分离病菌，可先将寄主病部表面用70％酒精擦拭消毒，将表皮组织用灭菌的解剖刀削去，然后切取其中小块变色的维管束组织，用升汞或漂白粉液消毒后。
，用灭菌水冲洗几次，移置培养基面上。
3．根腐病病原菌的分离根腐或基腐病的分离，由材料的大小决定。
材料小的可仿照斑点病的分离法，材料大的则可以用维管束组织内病原的分离法。
4．肉质组织中病原菌的分离多肉的根、茎及果实等，可以采用维管束组织内病菌分离法除去表面组织，切取小块病组织分离。
如有杂菌感染可采用“直接接种”法，待出现症状后，用此法再行分离。
5．种子内病原菌分离将整个种子或者种子的一部分进行表面消毒(升汞或漂白粉)，用灭菌水洗涤后，移置培养基上。
6．孢子分离法能产生大量孢子的病菌如青霉素、链格孢等，则可配制成孢子悬浮液以稀释法或划线法分离之。
7、土壤带菌分离法为了研究一些真菌在土壤中存活和分布的情形，从有病的土壤中分离它们是必要的。
分离方法是将土壤取出少许，配制成悬浮液，然后用稀释法或划线法分离。
附录2 真菌单孢子分离技术一、目的要求了解单孢分离技术的基本原理，掌握简便实用的单孢分离方法。
二、基本原理单孢分离的方法很多，如振落法、稀释法和直接挑取法。
振落法和稀释法的共同点都是采用某种方法，使真菌孢子较稀疏地分散在水琼脂平板上，然后在显微镜下检查寻找在水琼脂平板表面的单个孢子，一旦找到理想的单个孢子，就通过无菌操作将其(连同一部分培养基)移植到PDA斜面培养基上，置适温下培养，形成的菌落即为单孢系菌株。
直接挑取法是在实体解剖镜下直接挑取单个孢子进行分离纯化的方法。
三、材料、用具与仪器1．材料(依本地资源情况进行选择，下列材料供参考)(1) 稻瘟病叶、病节、病穗颈(Pyricolaria oryzae)。
微生物菌种分离和鉴定技术
微生物菌种鉴定技术
表征（表型）特征 形态特征 生理和代谢特征 生态特征
遗传（基因型）特征 蛋白质比较 核酸碱基组成 核酸序列
分子标尺
多相鉴定技术 Polyphasic Identification
新型显色培养基：
利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物 的培养基 。
微生物快速分离、计数方法
Petrifilm Plate (3M)
微生物快速分离、计数方法
3M Petrifilm Plate
Aerobic Count Plate Coliform Count Plate Rapid Coliform Count Plate E. coli /Coliform Count Plate Enterbacteriaceae Count Plate Yeast and Mold Count Plate Staph. aureus Express Count Plate Environmental Listeria Plate
单细胞（孢子）分离
选择培养基分离
传统选择性培养基
血平板：适于各类细菌的生长，一般细菌检验标本的分离，都应接种此平板。 巧克力血平板：其中含有V和X因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等的标
本。 中国蓝平板或伊红美蓝平板：可抑制革兰阳性细菌，有选择地促进G-菌生长，
是较好的弱选择性培养基。 麦康凯平板：具中等强度选择性，抑菌力略强，有较少革兰阴性菌不生长。 SS琼脂：有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。 碱性琼脂：用于从粪便中分离霍乱弧菌及其它弧菌。 血液增菌培养基：用于从血液、骨髓中分离常见病原菌。 营养肉汤：用于标本及各类细菌的增菌
真菌的鉴定及药敏试验分析
真菌的鉴定及药敏试验分析真菌对人类健康的危害包括由病原性真菌、条件致病真菌所致的深部真菌病和浅部真菌病；由气传真菌所致的变态反应真菌症即过敏；由污染真菌产毒所致的真菌中毒症。
随着医学的发展，特别是抗生素的广泛使用，大量治疗手段的开展，免疫障碍疾病的大量发生，使真菌感染的情况日益增加，医院感染中的真菌感染也不断增加，因而，掌握真菌检验的方法就成为检验工作中的一个重要组成部分。
1 材料与方法1.1 真菌来源收集临床送检标本所分离出的真菌120例，男性84例，女性36例，其中痰液96株，粪便11例，咽拭子12例、尿液5例、血液4例，分泌物3例。
1.2 采集及处理根据真菌侵犯组织和器官的不同而采集不同的标本，而采集最合适的标本是决定能否找到病原性真菌的关键，要尽量用消毒方法采集标本以免污染。
深部真菌病的标本如血液、脑脊液、脓液、尿、痰等应及时收集检查，一般不超过1～2h，以免变质污染，标本采取前，应忌用药。
为避免污染杂菌，在收集标本时，应严格无菌操作，必要时在培养基内加入抗生素类。
1.3 检验方法1.3.1 酵母样菌的检验直接涂片法各类标本，除脑脊液、尿、胸水、腹水等需离心沉淀后取沉淀物作涂片外，其他均可用生理盐水或10％～40％KOH作涂片后直接镜检或用革兰、墨汁、0.1％甲苯胺蓝染色后镜检。
分离酵母样菌所选用的培养基为沙保弱固体或液体培养基，在培养基中可加入各种抗生素抑制细菌的生长、有利于真菌生长含抑制剂的霉菌琼脂。
将备类标本直接接种上述培养基，除新型隐球菌需同时接种两支培养基；一支孵育于37℃，另一支孵育于22～28℃，其他酵母菌均孵育于22～28℃。
每日观察生长情况。
根据酵母菌在培养基上的菌落特征及在玉米粉吐温80培养基上生长物在显微镜下生长情况可作初步鉴定。
1.3.2 丝状真菌的检验某些丝状真菌如孢子丝菌或荚膜组织胞浆菌的直接涂片，必须染色后检查。
真菌的形态和结构通过染色更为清楚，不染色涂片不易保存，染色涂片可长期保存。
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常见真菌的分离与鉴定 发表时间：2010-08-20 发表者：皮肤科 (访问人次：361) 作者：上海长征医院皮肤科 徐红
2005年6月13～19日全国各地举行了第8届中国护足周，主题是“积极治疗足病，杜绝家庭传染”。
在中国,每2个人中就有1人罹患足病，其中成年人发病比例高达75%；超过60%的足病为真菌感染，其中足癣发病率为45.2%，甲真菌病(俗称甲癣)占15.5%；40%的足癣患者是被家人传染的；在真菌患者中只有23.8%寻求治疗，其中50%的患者症状稍有好转就不继续治疗。
真菌其实很常见，真菌就生活在我们身边。 病原真菌的一般特性 真菌（Fungi）是微生物中的一个大类，是一群数目庞大的细胞生物，估计全世界已有记载的真菌有10万种以上。它们的子实体小者用显微镜才能见到，大者可达数十厘米，它们共同特征是具有真正的细胞核，产生孢子和不含叶绿素，以寄生或腐生等方式吸取养料，仅少数类群为单细胞，其他都有分支或不分支的丝状体，能进行有性或无性繁殖，具有纤维素（或其他葡聚糖）或几丁质的微纤维或两者兼有的细胞壁的有机体。对人类和动物致病的真菌大约100余种，属于病原真菌。
一、基本性状 （一）形态结构 真菌分单细胞真菌与多细胞真菌两大类，前者属于酵母菌（yeast）一般呈球形或卵圆形，后者称为霉菌（mold）或丝状真菌，呈丝状分枝，菌丝交织象绒球状，另有一些真菌可因寄生环境及培养条件（养料、温度、氧气等）的不同可交替出现两种形态，即在室温中呈霉菌型，在37℃或体内呈单细胞的酵母型，这类真菌有双相性，所以称之为双态真菌或二相真菌。
真菌的细胞结构与一般植物细胞相似，有定型的细胞核及完善的细胞器，但胞壁与细菌胞壁不同，不含粘肽而是由角质及葡聚糖组成，也含有脂多糖蛋白质，其中酵母菌及类酵母菌皆以出芽增殖，不生长真菌丝，革兰氏染色呈阳性，丝状真菌分菌丝及孢子两部分，形态多种多样，分述如下。
1．菌丝（Hypha） 真菌在合适的环境中，由孢子生出嫩芽，称为芽管。芽管逐渐延长呈丝状，称菌丝。菌丝继续生长并生长分枝，增殖的菌丝交织组成菌丝体。其中一部分菌丝深入被寄生的物体或培养基中吸取养料，称为营养菌丝体。另一部分菌丝向空间生长，称为气生菌丝体。气生菌丝体能产生孢子
者称为生殖菌丝体。菌丝中各个细胞间有明显分隔者，称为有隔菌丝。主要见于病原性真菌。很多非病原真菌的菌丝无明显分隔，称为无隔菌丝。有些菌丝可呈各种特殊形式，如球拍状、破梳状、螺旋状、结节状、关节状、鹿角状、假菌丝。
2．孢子 生成孢子是真菌扩大繁殖的一种方式。真菌孢子的抵抗力、形态及作用等均与细菌芽胞不同，分为无性孢子及有性孢子两大类。不经过两性细胞的结合而形成的孢子叫无性孢子，这一繁殖过程称为无性繁殖。常见的无性孢子有5种：关节孢子、厚壁孢子、孢子囊孢子、芽孢和分生孢子。病原真菌属于不完全菌纲，很少产生有性孢子，大多数是无性孢子。
（1）厚壁孢子：当真菌在不利环境中，由菌丝内胞浆缩浓和胞壁增厚而成，呈圆形。当环境好转时可生成芽管成长为菌丝。
（2）关节孢子：菌丝断裂形成长方形两端略钝圆的孢子叫关节孢子。如白地霉和粗球孢子菌。
（3）孢子囊孢子：为鞭毛菌和接合菌的无性生殖形式。孢子囊中所含的孢子来源于分枝菌丝或胞囊梗顶端膨大形成孢子囊，囊内原生质浓缩集聚，割裂而成，一般数目较多，孢子囊形态多样，因种而异。
（4）芽生孢子：由菌细胞出芽生成，见于念珠菌及隐球菌，前者（类酵母菌）出芽后孢子伸长呈丝状，但不见与母细胞分离，称为假菌丝，在假菌丝上的收缩点也可出芽成芽生孢子。
（5）分生孢子：是子囊菌和半知菌的无性孢子，也是半知菌分类的主要依据，单细胞的分生孢子称小分生孢子，有蒂或无蒂，侧生或游离，分散或成群，圆形、梨形、卵圆形或其它形状，表面粗糙或光滑，或有或无各种纹饰。多细胞的分生孢子称大分生孢子，有纺锤形、棒形、球棍形、镰刀形及其它形状，两端尖或圆或一端圆，厚壁或薄壁，壁光滑或粗糙，有色或无色，分隔有多有少。
（二）培养特性及繁殖方式 1．培养特性 大多数真菌对营养要求不高，只需要水、盐，简单的氮源及碳水化合物就可生长，一般常用沙堡氏琼脂基（主要成分葡萄糖4%、蛋白胨1%、琼脂2%）培养都能生长。但需要弱酸性（pH 4～6）、较低孵育温度（22～28℃），充分温度和氧气供应才能生长良好。侵害内脏的某些真菌在37℃含血的培养基中生长良好。真菌生长都比较缓慢，大多需孵育数天后才成明显菌落，菌落有下列三种类型： （1）酵母型菌落：外观湿润稠软致密，类似一般细菌菌落，镜检只见有圆形或椭圆形生芽细胞（例如隐球菌的菌落）。 真菌的哪些特性决定了其有极强的生存能力？ （2）类酵母型菌落：外观性状似酵母型菌落，镜检除见有出芽的细胞外，尚可见到假菌丝（例如念珠菌的菌落）。
（3）丝状型菌落：由多数分枝的菌丝体向上生长组成疏松的绒球状，表面有很多孢子，显示各种色泽，菌落可呈棉絮状 绒球状 粉末状或石膏样，其正面和背面可显示各种不同色素，常作为鉴定菌种的参考。镜检可见有纵横交织的菌丝及各种孢子（例如各种癣菌的菌落）。
2．繁殖方式 有多样性，包括出芽增殖，菌丝增长，菌丝分枝和断裂，产生无性孢子及有性孢子进行繁殖，因此它繁殖力很强，但生长速度较慢。
（三）变异性和抵抗力 真菌很容易发生变异，在人工培养基中多次移种或孵育过久，就可出现形态结构、菌落性状、色素以及各种生理性状（包括毒力）的改变，用不同的培养基和温度培养真菌，其性状也有改变，真菌对干燥阳光紫外线及一般化学消毒剂耐受性却较强。但对热的抵抗力却不强。60℃以上1小时即可杀死孢子及其菌丝，在1%～3%石炭酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10%甲醛中可被灭活。用甲醛气体熏蒸被真菌污染的衣物用具，可杀灭真菌菌丝及其孢子。但真菌对一般抗菌素及磺胺药均不敏感。只对二性霉素、酮康唑、制霉菌素等非常敏感，治疗真菌感染常用此药。
（四）致病性与免疫性 1．致病性 病原真菌的致病机制还是一个未完全解决的问题；根据其侵害部位，主要分为下列两类：
（1）浅部真菌病：主要由癣菌引起，大多为外源感染，常易侵害皮肤、指（趾）甲及须发等含角质的组织，引起癣症。
（2）深部真菌病：可由各种真菌引起，包括类酵母菌、二相真菌及丝状菌。侵害粘膜、皮下组织、内脏及脑膜等处，有时扩散全身，主要是内源性感染，也可由外源传染；前者是因机体抵抗力降低，如患重病，长期使用免疫抑制剂，广谱抗菌素或放射治疗，患恶性病，严重烧伤等时，造成体内菌群失调，以致常居在体内的某些真菌（如白念珠菌），甚至平时不致病的环境中的真菌（如曲霉、毛霉）等也会乘机侵害，一些传染性较强的内脏真菌病是内外源感染。
2．免疫性 浅部真菌病一般在血中不产生特异性抗体，病后无免疫保护力，只是儿童头癣等青春期后头皮皮脂增多时可以自愈，以后不再感染，其他部位癣症治愈后仍可再感染。深部真菌病虽可产生抗体，但无明显免疫保护作用。
三种癣菌从菌种鉴定上有何共同和不同之处？
临床常见的病原性真菌 一、 浅部真菌 （—）皮肤癣菌 皮肤癣菌又称皮肤丝状真菌，有下列三属（见表1），都只侵犯体表角化组织（皮肤，毛发及指甲和趾甲）。不侵害深部组织，或内脏，皆属外源性传染，由接触患癣病人、动物（狗、猫、鼠、牛、马等）或染菌物体而感染。
1．毛癣菌属 ＊红色毛癣菌 （1）直接镜检：皮屑及甲屑，分枝分隔的菌丝有时可断裂或关节孢子状，毛发：发外型感染表现为发外孢子排列成串。少数为发内型感染孢子在发内排列成链状；毛发穿孔试验阴性。 （2）培养特征：在葡萄糖蛋白胨琼脂，25℃，生长比较快，菌落形态有多种表现，镜检也不完全一样，常见有下列四种：I型：羊毛状：白色羊毛状菌丝充满斜面，典型的卷成筒状，边缘贴牢管壁，呈鲜红色，背面开始在中心有一红色小点，以后形成深红色环，最后成片为葡萄酒色，色素边缘划界非常明显。少数I型菌株表现无红色色素，正面白色，背面呈淡黄色类似石膏I型，亦有正面白色而背面呈灰黑色。II型：绒毛状：粉红色绒毛状菌丝生长，占斜面3/5，菌丝稀疏，透过菌丝可见粉红色的基底，背面颜色同I型相同。III型：粉未状：菌落表面稍有凸起，呈粉末状，粉红色，约占斜面的1/2～2/3，背面同I型。IV型：沟纹状：菌落生长相对较慢，比以上三种类型为小，占斜面的1/3～1/2，菌落中央凸起，从中央向四周有排列比较整齐的放射状沟纹，边缘整齐，表面菌丝甚少。开始微带黄色，以后变粉红，背面同I型。 （3）菌种鉴定：①菌落特征及色素；②大小分生孢子的形态；③玉米粉吐温琼脂上产生红色色素；④毛发穿孔试验阴性；⑤尿素酶试验阴性。 ＊须癣毛癣菌 （1）直接镜检：皮屑内见分枝分隔的菌丝，甲屑内为关节状菌丝。毛发感染为发外型，发内有时有菌丝。
（2）培养特性：在沙氏上生长较快，菌落形态可分为两大类：毛型和粉型；下列I、II型为毛型，III、IV、V型属粉型。自炎症明显的皮损中所分离出的菌株多属粉型。毛型菌落外观均似红毛，应注意鉴别。具体分型①羊毛状（I型），又称趾间毛癣菌，菌落生长快，白色羊毛状。气生菌丝较多且长，排列紧密，充满斜面，好象红毛，正面雪白，背面淡黄色。镜检见较细分枝，分隔的菌丝，胞浆浓。有少量球形或长形小分生孢子，无螺旋菌丝和大分生孢子。间或可见球拍菌丝及结节菌丝。②绒毛型（II型），生长快，菌落雪白。表面有紧密的细短气生菌丝，中央可有乳头状突起，边缘如刀切，背面棕黄色或棕红色。镜检见较细的分枝、分隔的菌丝，小分生孢子多，有时成葡萄串状，无螺旋菌丝或大分生孢子；③乳皮状（III型），开始为乳白色菌丝，不久一部分菌落变为粉末样，色微黄，光滑，似牛乳表面的一层薄膜，可一块块地挑取，中央有少许褶叠，边缘不整齐，背面淡黄或棕黄色。镜检见粗细不一，分枝分隔的菌丝和大量螺旋菌丝，间或可见破梳状菌丝，结节菌丝及球拍菌丝，大分生孢子少，棒状，两端圆，与分生孢子梗的连接处较窄，薄壁光滑，小分生孢子多，球形或长形，有时成葡萄串状排列。④粉末状（IV型），菌落粉末状，表面平坦、光滑。间或有少数白色气生菌丝，中央有乳头状凸起，边缘锯齿状。菌落生长快，充满斜面，色黄或奶油色，外观像石小、背面棕黄或棕红色。⑤颗粒状（V型）：生长快，菌落粉样，表面不平，呈颗粒状。有不规则的褶叠或沟纹，边缘不整齐。下面色黄带红或棕黄。背面棕红色。IV、V镜检均见大量棒状大分生孢子及无数圆形的小分生孢子，少数长型。游离或葡萄状成串，有螺旋菌丝和球拍菌丝。