两种方法检测红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶结果分析


是 检 测 早 期 糖 尿 病 肾 功 能 改 变 的 良好 指 标 , 得 临 床 推 广 使 值
用。
讨
论
参 考文 献 :
血 清 同型 半 胱 氨 酸 ( y 是 体 内 蛋 氨 酸 的 代 谢 产 物 , 动 Hc ) 是 脉 粥 样 硬 化 的危 险 因子 之 一 , 动 脉 粥 样 硬 化 的 形成 和 发 展 都 对 起 了促 进 作 用 。近 年 来 , 内 外 研 究 发 现 He 国 y与 糖 尿 病 微 血 管 病 变 密 切 相 关 【 , 糖 尿 病 肾病 是 糖 尿 病 微 血 管 主 要 并 发 而 症 之 一 。血 清 胱 氨 酸 蛋 白酶 抑 制 物 C C sc 作 为评 价 肾 功 能 ( y ) 的新方法早有报道 , 而对 它 在 糖 尿 病 肾病 诊 断 方 面 的 意 义 研 究
・
经 验 交 流
・
两 种 方 法检 测 红 细胞 葡 萄 糖一一 酸脱 氢 酶 结 果分 析 6磷
邱 定 周 ( 东省 龙 川 Nhomakorabea县 妇 幼 保 健 院 检 验 科 广
【 键 词 】 葡 糖 磷 酸 脱 氢 酶 ; 红 细 胞 ; 实 验 室 技术 和 方 法 关
尚 少 】 。Cy sC肾 小 球 滤 过 率 决 定 其 被 认 为 是 评 价 肾小 球 滤
[ ] 刘 志 红 . 尿 病 肾病 [ ] I 华 。 病 杂 志 , 0 0 1 ( ) 1 糖 J . f 肾脏 J 2 0 ,6 2 :
1 — 31 26 1 .
E] 官 莉莉. 2 尿 轻 链 在 糖 尿 病 肾 病 早 期 诊 断 中 的 临床 意 义 [] 浙 江 大 学 硕 土 学 位 论 文 ,0 15 J. 2 0. . [ ] 史 浪 . 浆 超 敏 c 反应 蛋 白 、 3 血 同型 半 胱 氨 酸 与 糖 尿 病 的关
19 3.
过 率 的 理 想 的 内源 性 标 志 物 。本 研 究 中 早 期 糖 尿 病 肾 病 组 Hc y与 C sC含 量 均 明 显 高 于 健 康 对 照 组 ( y P< 0 0 ) 糖 尿 .5及 病无肾病组( P% 0 0 ) 表 明 Hc 与 C s 是诊 断 糖 尿 病 患 者 .5 , y y C
系 [ ] 实 用 医 学 杂 志 , 0 6 2 ( 7 :0 5 2 5 . J. 2 0 ,2 1 )2 5—0 7 [ ] OiaK, k i P ama t rmb mo ui o c nr t n 4 d Ta a H. ls h o o d l c n e tai n o i da ee l ts J . ib t Re l r c 1 9 , 0 n i ts b me i [ ] D a es sC i P a , 9 0 1 : lu n
[ ] 杨 小 洁 . 胱 氨 酸 蛋 白 酶 抑 制 剂 c检 测 早 期 糖 尿 病 肾 损 6 半
害 的 意 义 [ ] 中 国 糖 尿 病 杂 志 , 0 7 1 ( 1 :8 — 8 . J. 2 0 , 5 1 ) 6 76 9 ( 文责任编辑 本 甘 霖 收稿 1 :0 9 0 — 5 3期 2 0 4 1 )
[ ] W ae Ioh MataK,t 1R nlmp i n s 5 snE,sa oR, t l i e a ea i a me t — . r a
s e td w t ib ts i t e e el [ ] D a ee a e o i e i da ee n h l r J . i tsC r , a h d y b
20 04, 7: 48 26 . 2 26 — 53
肾脏早期损伤的敏感指标 。
本 实 验 中根 据 尿 Mab含 量 将 糖 尿 病 患 者 分 组 。 Ma < l l b 2 g I 为糖 尿 病 无 肾 病 组 , l 2 ~ 3 0mg I 为 糖 尿 病 早 5 m / Mab 5 0 / 期 肾 病 组 。 由表 l 以 看 出 , 期 糖 尿 病 肾 病 患 者 Hc 、 y 可 早 y C sC 与尿 Mab均 明 显 高 于 糖 尿 病 无 肾 病 组 和 健 康 对 照 组 。 而 B 、 l u C 、 G 期 糖 尿 病 肾 病组 与 无 肾病 组 无 明显 差 异 。表 明 糖 尿 rT 病 患 者 即 使 B 、 r 平 正 常 , 不 能 除 外 已 存 在 早 期 肾损 伤 。 uC 水 也
由 表 2可 以 看 出 , 尿 病 肾 病 患 者 血 清 Hc 糖 y与 C sC 与 B 、 y u
C 、 r TG及 尿 Mab 具 有 一 定相 关 性 , 明 糖 尿 病 肾病 患 者 随 l均 表 着 病 程 的 不 断 发 展 , y与 C s 会 不 断 增 高 。 若把 He 、 y He y C yC s c 与 其 他 生 化 项 目的 测 定 结 合 起 来 , 有 助 于 更 客 观 的评 价 糖 将 尿 病 患 者 肾 脏 病 理 改 变 及 肾功 能 状 况 , 可 用 于 糖 尿 病 肾 病 患 并 者 病情 严 重 程 度 的 评 估 。 本 组 资 料 提 示 , y C sC较 C 能 够 更 早 地 反 映 肾 脏 功 He 、 y r 能 的损 伤 。 且检 测 方 便 , 果 稳 定 , 良好 的 特 异 性 和 灵 敏 性 , 结 有
国际检 验 医学杂志 2 1 年 2月第 3 卷 第 2期 It a d F b u r 00 V I 1N . 00 1 n L b Me ,e ray2 1 , 0_ , o 2 J 3
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19 ・ 7
性 , 表 2 见 。 表 2 早 期 糖 尿病 肾病 组 Hc 、 y C s 与其 他 生 化 指 标 相 关 性 y C
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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的检查项目有哪些?

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的检查项目有哪些?

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的检查项目有哪些?检查项目:血常规、骨髓象、胆红素、高铁血红蛋白还原试验、红细胞G-6-PD活性测定【实验室检查】:G-6-PD缺乏症的一般实验室检查与其他溶血性贫血相比较无特异性,其诊断有赖于红细胞G-6-PD酶活性的测定。

G-6-PD缺乏症的筛选实验和酶活性定量测定方法有如下几种。

1.高铁血红蛋白还原试验(methemoglobinreductiontest)速度比正常人显著减慢。

该法是目前国内常用于筛查G-6-PD活性试验之一。

微量组织化学洗脱法适合于杂合子的检测,其可信度为75%。

此法的缺点是如果存在HbH、不稳定血红蛋白、高脂血症、巨球蛋白血症等均造成假阳性结果。

2.抗坏血酸(维生素C)氰化物试验(ascorbate-cyanidetest)如果G-6-PD缺乏,H202破坏血红蛋白,形成一个棕色斑点。

3.硝基四氮唑蓝试验该试验可用来检测NADPH生成量。

4.荧光点试验(fluorescentspottest)该试验是最简单、最可信和最敏感的过筛试验。

5.G-6-PD活性测定通过单位时间生成NADPH的量来反映红细胞G-6-PD活性。

其常用方法有世界卫生组织(WHO)推荐的ZinkJam法和国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的Glock与Mclean法。

在检测红细胞G-6-PD活性时,应注意试验时患者的临床状况。

在溶血发作期,老化的、酶缺乏红细胞在外周血中被选择性地清除掉,年轻红细胞因酶水平较高得以保护,用这些细胞来进行试验分析不能真实地反映红细胞的G-6-PD活性。

为了解决这一问题,可以于急性溶血2~4个月后复查外,或用离心沉淀技术剔除年轻红细胞后再检测红细胞G-6-PD活性,但试验系统中用沉淀红细胞是不标准的。

如果在溶血发作期间接受了红细胞输注亦会影响G-6-PD活性测定结果。

慢性非球形红细胞溶血性贫血,无特异性血液学改变。

血红蛋白一般为80~100g/L,网织红细胞计数增高至4%~35%,由于网织红细胞数比例增高,因而平均红细胞体积增高。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症血红蛋白电泳结果的检测分析

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症血红蛋白电泳结果的检测分析
Guan gdon 5 03 0。 g 1 3 Chi a) n
[ src] Ob et e Toe po ed tcino e go i 1cr p o e i i h P d fce c . t o s 3 Ab ta t jci v x lr ee t fh mo lbneeto h rss nt eG6 D eiin y Meh d 8 o
行 正 确 的 读 取 ( 给 予相 关 的 记 录 , 别 记 作 s 并 分 1与 s ) 6 2 。( )
计算 G P / P 6 D 6 GD对 应 的酶 活 性 比值 时 , 用 变 化 , 高 铁 血 红 蛋 白 首 先 予 以 了 还 原 试 对 验 , 后借 助 于 G P / P D 酶 活 性 比值 法 确 定 相关 患 者 是 不 然 6D6G
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葡 萄 糖 一一 酸 脱 氢 酶 ( l c s— h s h t D h d o g ~ 6磷 G u o eP o p ae e y r— e
的 水 浴 箱 内进 行 2 n 的 保 温 。 ( ) 试 管 取 出 , 加 2 0 0 mi 4将 添 . mI 的终 止 液 进 行 稀 释 , 应 终 止 之 后 。 ( ) 择 蒸 馏 水 进 行 反 5选 空 白对 照 , 6 0n 波 长 的 情 况 下 , R1 R 在 5 m 对 、 2的 吸 光 度 值 进
采 用 S S 3 0统 计 软 件 进 行 分 析 处 理 。 P S 1.
吸 痰 器 、 动混 旋 器 、 2 S分 光 光 度 计 、 E I 电 泳 诊 断 系 统 、 电 72 S BA
C o 0生 化 仪 、 P 诊 断 试 剂 盒 。做 电 泳 的 血 是 新 鲜 血 , 8o G6 D 不

对红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶活性的几种筛选方法的评价

对红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶活性的几种筛选方法的评价

对红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶活性的几种筛选方法的评价许延康;吴秋玲;芮琳;杜传书【期刊名称】《中山大学学报:医学科学版》【年(卷),期】1980(000)002【摘要】红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶(G-6PD)缺乏是多种溶血性疾患的重要病因之一。

对人群进行G-6PD活性普查或对临床溶血病人进行过筛,都需要选择比较准确、快速、简便易行的方法。

为此目的,目前已有多种方法。

但这些方法又都必须与酶活性直接测定结果加以比较后,才能进行正确评价。

对此,文献中尚未见有报道。

我们用改良四氮唑蓝法、荧光斑点法、美蓝吸收法和高铁血红蛋白还原试验法检查了一批健康人和G-6PD缺乏者,并分别与同时进行的酶活性直接测定法(分光光度法)进行了比较。

现将结果报道如下。

【总页数】5页(P177-181)【作者】许延康;吴秋玲;芮琳;杜传书【作者单位】中山医学院病理生理教研组医学遗传组;中山医学院第一附属医院小儿科新生儿研究组;中山医学院病理生理教研组医学遗传组;中山医学院第一附属医院小儿科新生儿研究组;中山医学院病理生理教研组医学遗传组;中山医学院第一附属医院小儿科新生儿研究组;中山医学院病理生理教研组医学遗传组;中山医学院第一附属医院小儿科新生儿研究组【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.热应激对猪卵母细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性及染色质构型的影响 [J], 刘勇;张领;吴晓庆;卫朝辉;王艳红;王启磾;高迪;丁彪;吴风瑞2.人红细胞6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性对红细胞还原型谷胱甘肽含量及红细胞脆性的影响 [J], 肖曼;杜冠魁;喻芳;蔡望伟3.两种红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性直接定量法测定结果的评价 [J], 刘景衍4.全自动直接定量法与定量比值法检测红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶活性的比较 [J], 李林海;石玉玲;胡志恒;詹铀超5.血液回收对红细胞ATP含量及葡萄糖6-磷酸脱氢酶活性的影响 [J], 赵砚丽;杜彦茹;赵鹤龄;张凤霞;曲振华;杨宾侠因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

两种红细胞G6PD酶检测系统的方法学比较

两种红细胞G6PD酶检测系统的方法学比较

两种红细胞G6PD酶检测系统的方法学比较【摘要】目的比较紫外速率定量法与改良G6PD比值法测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)酶活性的结果,评价不同检测系统的可比性,为临床提供准确的实验数据。

方法本院就诊送检G6PD酶人群共1240例,分别采用日立7180紫外速率定量法和改良G6PD比值法检测红细胞内G6PD酶,两法结果不一致时采用基因检测法确证,最后统计分别算出两法的阳性预示值,阴性预示值,特异性和灵敏度。

结果系统一:紫外速率法共检出阳性标本79例,真阳性78例,真阴性1159例,阳性预示值、阴性预示值、特异性和灵敏度分别为98.7%、99.8%、99.9%、97.5%;系统二:改良G6PD比值法共检出阳性标本75例,其中真阳性73例,真阴性1158例,阳性预示值、阴性预示值、特异性和灵敏度分别为97.3%、99.4%、99.8%、91.3%。

两法的结果经比较,一致性为99.4%。

结论紫外速率定量法和改良G6PD 比值法有较高的灵敏度、特异度及一致性,可同时应用于临床,但紫外速率定量法灵敏度高于改良G6PD比值法,而且操作简便,检测时间短,更适合大批量标本的检测,但所需仪器贵重且成本较改良G6PD比值法高。

【关键词】葡萄糖-6-磷酸脱氢酶;紫外速率定量法;改良G6PD比值法;比较G6PD缺乏症是一种常见的遗传性疾病,尤其在广东、广西一带,其缺乏是引起新生儿溶血和高胆红素血症及成人溶血性贫血的主要病因,在临床上G6PD的检测有多种方法,不同仪器,采用不同检测原理,使用不同来源的试剂,造成不同检测系统间灵敏度、特异度的差异,如何进行比较,判断检测结果间的一致性,是目前检验医学界关注的一个热点。

为此,本文对本实验室存在的两种G6PD检测方法进行了比较。

1 材料与方法1.1 检测系统系统一:紫外速率定量法,仪器为日立7180,试剂由利德曼生化公司提供,配套校准品及质控品;系统二:改良G6PD比值法,仪器为752分光光度计,水浴箱,试剂由广州米基医疗公司提供。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶两种测定方法的比较

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶两种测定方法的比较
但各有优缺点 。
【 键 词 】 葡 萄糖 一一 酸 脱 氢酶 ; 相 关性 ; 生 化 分 析 仪 关 6磷
DOI 1 : 9 9 jis . 6 29 5 . 0 0 2 . 4 : 0 a 6 /.sn 1 7 — 4 5 2 1 . 4 0 1
中图分类号 :461 R 4 .
异 常 ; 药 前 仅 有 7 ( . ) 常 , 药 后 血 液 检 查 肾功 能 异 用 例 38 异 用
测 数 据 比较 用 配 对 资 料 卡 方 检 验 , 0 0 差 异 有 统 计 学 意 P< . 5为 义 。统 计 软 件 用 临 床 医 师 统 计 学 助 手 V . 。 3 0
文 献 标 志码 : B
文 章 编 号 : 6 2 9 5 ( 0 0 2 — 7 70 1 7—4 5 2 1 ) 42 5—2
近 些 年来 , 由于 原 来 检 测 G P 6 D活 性 的 手工 定 量 比值 法 配
的 临 床 意 义 [] 中 国 民 康 医 学 , 0 9 7 1 : 4 1 . J. 2 0 ,( ) 1—5
( 收稿 日期 :0 00 —2 2 1—62 )
者 , 微 量 清 蛋 白均 显 著 异 常 ; 3例 血 液 检 测 肾 功 能 正 常 而 尿 有
尿 液 肾 功 能 已 显 著 异 常 ; 有 4 例 ( 7 9 ) 液 检 测 肾 功 能 另 9 2 . 血
正 常 者 尿 微 量 清 蛋 白异 常 。
葡 萄 糖一一 酸脱 氢 酶 两 种 测 定 方 法 的 比较 6磷
梁委 军, 雨明 , 秋玲 ( 西 医科 大学 第四 附属 医院/ 州市 工人 医 院检 验科 5 5 0 ) 蒙 黄 广 柳 4 0 5

浅谈红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶检测结果分析

浅谈红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶检测结果分析

浅谈红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶检测结果分析目的探讨开展G6PD检测的临床意义。

方法对近2年内笔者所在医院出生的3809例新生儿进行细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶检测。

结果男性新生儿G6PD 缺乏率为12.04%,女性新生儿为7.75%,比较有统计学意义(χ2=6.107,P=0.026),总缺乏率为10.11%;G6PD具体数值为57~2452 U/L,轻度缺乏242例(62.86%),中度缺乏49例(12.73%),明显缺乏63例(16.36%),重度缺乏31例(8.05%)。

结论开展红新生儿细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶检测可帮助临床及早采取预防措施,控制诱因,预防溶血性贫血的发生,对G6PD缺乏患儿健康成长具有重要意义。

Abstract:Objective Discussion on developing the clinical significance of detecting G6PD. Methods For cell glucose -6- phosphate dehydrogenase detected in 3809 cases of newborns in the recent 2 years in our hospital was born. Results Male neonatal G6PD deficiency rate is 12.04%,the female newborns was 7.75%,compared with statistical significance (χ2=6.107,P=0.026),the total lack of rate was 10.11%;the G6PD value for the 57~2452 U/L concrete,242 cases of mild deficiency (62.86%),moderate deficiency in 49 cases (12.73%),significant lack of 63 cases (16.36%),severe deficiency in 31 cases (8.05%). Conclusion The development of red cell glucose -6- phosphate dehydrogenase of neonatal clinical early detection can help to take preventive measures,control incentives,prevent the happening of hemolytic anemia,and it has important significance to the healthy growth of children with G6PD deficiency.Key words:Cell glucose-6-phosphate dehydrogenase;Inspection;Newborn;G6PD deficiency葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症为临床常见的遗传性代谢疾病,多发病于新生儿时期,发病时的主要临床症状多表现为新生儿黄疸与溶血性疾病等,且病情普遍比较凶险,故被临床界定为新生儿重要急症之一,且尽早对G6PD缺乏新生儿做出准确诊断具重要临床意义[1]。

新生儿红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏筛查结果分析

新生儿红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏筛查结果分析常剑锋;孔官妹;刘楚芹【期刊名称】《中国妇幼保健》【年(卷),期】2006(21)21【摘要】目的:了解广东省肇庆市端州区新生儿脐血红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏的发生率。

方法:2 236例活产新生儿出生后即取脐血,采用定量法测定红细胞G-6-PD/6-PGD的比值,低于1.0者为G-6-PD缺乏。

结果:G-6-PD缺乏的患儿152例,总发生率为6.79%。

其中男129例,发生率为10.34%;女23例,发生率为2.32%,男性发生率明显高于女性(2χ=90.03,P<0.001)。

结论:脐血G-6-PD 活性筛查,能比较准确地检测出G-6-PD缺乏患儿,指导临床对其并发症进行早期干预,避免智力低下等后遗症的发生,提高人口素质。

【总页数】2页(P2959-2960)【关键词】葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏;新生儿筛查;脐血【作者】常剑锋;孔官妹;刘楚芹【作者单位】广东省肇庆市妇幼保健院【正文语种】中文【中图分类】R722【相关文献】1.2847例新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的筛查与分析 [J], 何卫东;杨宝圩;廖冬妹;吴鸿仁;陈秋月2.客家新生儿红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷症筛查和听力筛查分析 [J], 杨雪;李梅;聂梅3.全自动荧光免疫分析仪在新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查中的应用 [J], 缪海霞;张玉;方可欣;施叶珍;张婷;陈荣庆;吴鼎文;杨茹莱;黄新文4.江门市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏筛查方法的切值分析及基因突变发生情况 [J], 杨应松;钟志来;杨梅;谭杰亮;刘颖妍;曾钦龙;李智明;唐佳5.广东省佛山市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查与基因突变分析 [J], 袁伟曦;邵巧仪;张澎怡;刘丽雅;刘海平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

两种方法联合检测红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性的比较

6 6 。 9.
1 1 菌 株 20 . 0 7年 卫 生 部 临 床 检 验 中心 和 四川 省 临 床 检 验 中 心发 放 的 、 合 上 述 3种 系 统 鉴 定 的 细 菌 学 检 验 室 问 质 评 标 适
本 2 3例 。 1 2 仪 器 德 灵 Mi o c n WaK . c S a — | Awa 4 S r Y 0 I自动 微 生 物 鉴
在 实 际 工 作 中体 会 到 , 里 埃 A I 统 将 革 兰 阳性 球 菌 、 梅 P 系
肠 杆 菌 、 菌 、 发 酵 菌 及 酵 母 样 真 菌 等 鉴 定 到 种 的 正 确 度 很 弧 非 高 , 作 简 便 , 合 不 具 备 自动 微 生 物 鉴 定 及 药 敏 测 试 系 统 的 操 适 基 层 实 验 室 使 用 , 点 是 价 位 相 对 较 高 ; 灵 Mi o cw 缺 德 c Sa r Wa l KAw y 0 I 统 操 作 方 便 , a4S 系 尚可 借 肉 眼观 察 测试 板 以 协 助 结 果 判 定 , 临 床 上 常见 的葡 萄球 菌 和 革 兰 阴 性 杆 菌 的鉴 定 准 对 确性较好 , 基本满足临床 细菌 学检验 的需求 ; I- 能 B O KON 康 T 泰 鉴 定 系统 操 作 方 面 与 梅 立 埃 AP 系 统 相 似 , 是 将 细 菌 鉴 I 只
2
结
果
生 物 酶 里 埃 AP I系 统 检 测 样 本 2 3例 , Байду номын сангаас 数 2 符 1例 ( 1 3 )德 灵 Mi o cnWaKAw y 0 I系 统 检 测 样 本 l 9 . ; c S a- l r a4S 9 例 , 合数 1 符 6例 (4 2 ; 泰 BO KO 8 . %) 康 I - NT 鉴 定 系 统 检 测 样 本 2 例 , 合数 l 3 符 6例 ( 9 6 ) 6 . 。

g6pd实验室检查项目 -回复

g6pd实验室检查项目-回复实验室检查项目,对于疾病的诊断和治疗起着非常重要的作用。

其中,G6PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)是一种酶,负责维持红细胞内的氧化还原平衡,特别是在氧化应激时。

G6PD缺乏会导致溶血性贫血等临床疾病的发生。

本文将围绕G6PD实验室检查项目展开,详细介绍其意义、步骤和结果解读。

一、意义:G6PD实验室检查项目对于确诊G6PD缺乏或者其他与之相关的疾病至关重要。

例如,在溶血性贫血的鉴别诊断中,G6PD检查可以帮助与其他原因引起的溶血性贫血相鉴别。

此外,一些药物、食物甚至感染等因素也能引起G6PD缺乏的急性溶血危机,因此,在使用某些药物前或者罹患感染时,进行G6PD检查具有重要的参考价值。

二、步骤:1.患者准备:在进行G6PD检查前,患者应禁止用负性影响检查结果的一些因素,例如:抗生素、某些药物如抗疟药物、维生素C、某些食物等的使用,特别是在近期。

此外,如体温异常升高、感染等情况都可能影响检查结果,因此,应在患者健康状况稳定时进行检查。

2.样本采集:通常情况下,G6PD检查的样本采集为全血样本,一般通过周围静脉采集。

此外,在婴儿或者患者无法进行静脉采血时,可以通过脚后腱或脐带血进行采集。

采血后,应注意避免氧化剂或低温暴露。

3.实验室分析:样本采集后,应尽快送达实验室进行分析。

目前,常用的G6PD检查方法有定性试剂片法、定量方法和基因检测法等。

在定性试剂片法中,常用的试剂有万氏试剂和胺结晶试剂,通过它们与红细胞内的G6PD发生反应,从而判断G6PD活性是否正常。

定量方法则可以更精准地测定G6PD活性值,一般以酶活单位/克血红蛋白(IU/g Hb)表示。

基因检测法可以检测G6PD基因的突变或缺陷,从而明确患者的基因型。

三、结果解读:G6PD检查结果的解读需要结合临床症状进行综合分析。

在定性试剂片法中,如果试剂片颜色变化明显,可以判断为G6PD正常;如果试剂片颜色变化不明显或者无变化,则为G6PD缺乏。

6-磷酸-葡萄糖脱氢酶(G6PDH)、苹果酸酶(ME)两种酶酶活测定方法

6-磷酸-葡萄糖脱氢酶(G6PDH)、苹果酸酶(ME)两种酶酶活测定方法(1)6-磷酸-葡萄糖脱氢酶(G6PDH)活力测定6-磷酸-葡萄糖脱氢酶(G6PDH)活力测定方法根据文献略有改动6979。

测定反应体系(5ml)为:0.1mI浓度为1M的Tris-HCl缓冲液、0.1ml 浓度为25mM的底物G-6-P溶液、0.1ml浓度为2mM的NADP+、0.1ml 浓度为0. 2 M的氯化镁溶液及2.5ml ddH20,混合均匀后,在340 nm 下测定吸光度值A0,作为空白值。

再加入0.1 ml粗酶液,摇匀后,与25℃条件下保温,每30S于340 nm下测定吸光度值A,连续测定4 min。

以A对时间作图,取反应最初线性部分计算△A值。

根据公式计算酶活力。

酶活力单位(U)定义为:25℃条件下,每分钟G6PDH催化生成1μmol NADH的酶量为一个单位。

式中:△A/min为340 nm处每分钟吸光度的变化值;V为酶促反应体积(mL);为NADH的摩尔消光系数(6.22×103L/mol·cm-1);b 为比色皿光程(cm)。

(2)苹果酸酶(ME)活力测定测定反应体系(3ml)为:0.5 mI浓度为0.4 M的Tris-HCl缓冲液、0.1 ml 浓度为30 mM的底物苹果酸溶液、0.2ml浓度为3.4 mM的NADP+、0.1ml浓度为0.12 M的氯化镁溶液及2 ml ddH20,混合均匀后,在340 nm下测定吸光度值A0,作为空白值。

再加入0.1 ml粗酶液,摇匀后,与250C条件下保温,每30s于340 nm下测定吸光度值A,连续测定4 min。

以A对时间作图,取反应最初线性部分计算△A值。

根据公式2-1计算酶活力。

酶活力单位(U)定义为:25℃条件下,每分钟ME催化生成1μmol NADH的酶量为一个单位。

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