示差分光光度法
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二、吸光系数和吸收光谱
1．吸光系数的物理意义： 单位浓度、单位厚度的吸光度
A a bc
讨论：
1）a=f（组分性质，温度，溶剂，λ） 当组分性质、温度和溶剂一定，a=f（λ） 2）不同物质在同一波长下a可能不同（选择性吸收） 同一物质在不同波长下a一定不同 3）a↑，物质对光吸收能力↑, 定量测定灵敏度↑
3）参比溶液(空白溶液)的选择：
空白溶液 参比池 调节光路 A参 0 ，T 100% 样品溶液 样品池 A样
注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、 光的散射和界面反射等因素对透光率的干扰
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三、偏离Beer定律的因素
A bc
依据Beer定律，A 与C关系应为经过 原点的直线 偏离Beer定律的 主要因素表现为 以下两个方面 （一）光学因素 （二）化学因素
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可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范
围400800nm ，主要用于有色物质的定量分析。
二、吸光光度法的特点：
（1）灵敏度高； （2）准确度高； （3）操作简便 快速；
（4）应用广泛。
3
§7-2
物质对光的选择性吸收
一、物质的颜色
物质的颜色是由于物质对不同波长的光具 有选择性吸收而产生的。
ï Ö Î Ê Ñ Õ É « » Â Æ Ì Æ » È ³ ì º Ï º × ì × Ï ¶ À Ì À  ¶ ¶  À Ì Î ü Ê Õ ¹ â Õ « Ñ É × Ï ¶ À Ì À  ¶ ¶  À Ì Ì Â Æ Â » Ì Æ » È ³ ì º ² ¨¤ ³ /nm 400« ¡ 450 450« ¡ 480 480¡ « 490 490« ¡ 500 500« ¡ 560 560« ¡ 580 580« ¡ 600 600« ¡ 650 650« ¡ 750
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（4）从吸收曲线形状可以解释物质的颜色。 物质的颜色与吸收光颜色互为补色。
光的互补：蓝 黄
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§7-3
光吸收的基本定律
一、Lamber-Beer定律 二、吸光系数和吸收光谱 三、偏离Beer定律的因素 四、透光率的测量误差
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一、Lamber-Beer定律—吸收光谱法基本定律
描述物质对单色光吸收强弱与 液层厚度和待测物浓度的关系
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4．吸光度测量的条件选择： 1）测量波长的选择: 左右 max
max Amax 测定灵敏度高
较小的A A 须在 max 下测定 bc
2）吸光度读数范围的选择：
空白溶液 配制样品的溶剂
光学性质和厚度相同 参比池 样品池
选A=0.15~1.00
Lamber定律： A l Beer定律： A C
假设一束平行单色光通过一个均匀的、非散射 的吸光物体
入射光强为 I 0 透过光强为 I 物体截面为 S 厚度为 l 吸光质点数为 n
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取物体中一极薄层 设入射光强为 I x
薄层的吸光质点数为 dn 不让光子通过的面积为 dS k dn dS k dn 光子通过薄层被吸收的 几率 S S 透过薄层减弱的光强为 dI x
→ 定性、定量依据
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2．吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数：
在一定λ下，c=1mol/L，b=1cm时的吸光度
2）百分含量吸光系数 / 比吸光系数a：
在一定λ下，c=1g/100mBaidu Nhomakorabea，b=1cm时的吸光度
3）两者关系
M 1% a1cm 10
3．吸收光谱（吸收曲线）：λ~A 最大吸收 最小吸收 肩峰 特征值→定性依据
dI x k dn Ix S
n k dS dI x I0 I 0 S x I
I k n I n ln lg k I0 S I0 S
I V n 由S 和n V C l C lg klC abc I0 l S 12
17
（一）光学因素
1．非单色光的影响： Beer定律应用的重要前提——入射光为单色光 照射物质的光经单色 器分光后并非真正单 色光 其波长宽度由入射狭 缝的宽度和棱镜或光 栅的分辨率决定 为了保证透过光对检 测器的响应，必须保 证一定的狭缝宽度 这就使分离出来的光 具一定的谱带宽度
第七章
§7-1 §7-2 收 §7-3 §7-4 §7-5 §7-6 思考题
可见分光光度法
概 述 物质对光的选择性吸 光吸收的基本定律 分光光度计简介 分光光度法的建立 分光光度法的应用
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§7-1
概
述
一、吸光光度法
在光谱分析中，依据物质对光的选择性 吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法。 主要有: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长 范围800nm50m 。 主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长 范围200400 nm（近紫外区）。 可用于结构鉴定和定量分析。
I Lamber Beer定律表达式 lg a b c I0
I 透光率 T I0 吸光度 A lg T a b c
讨论：
或 T 10 A 10abc
a：吸光系数
1．Lamber-Beer定律的适用条件（前提） 入射光为单色光，均匀非散射的稀溶液 2 ．该定律适用于均匀非散射固体、液体和气体 样品 3．在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 A=A1+A2++An
表7-1 物质的颜色与吸收光颜色的互补关系
4
5
二、光吸收曲线
用不同波长的单色光照射某一吸光物质测 定其吸光度，以波长为横坐标，以吸光度为 纵坐标，绘制曲线。描述物质对不同波长光 的吸收能力。
6
吸收曲线
图为1,10-邻二氮杂菲亚铁溶液的吸收曲线， 在波长510nm处有最大吸收。
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吸收曲线的讨论： （1）一种吸光物质对不同波长的光吸收程度 不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸 收波长λmax 。 吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重 要依据。 （2）同一种物质浓度不同，其吸收曲线形状 相似λmax不变。 在λmax处，吸光度A正比于浓度C。测定测定 最灵敏 （3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并 作为物质定性分析的依据之一。
二、吸光系数和吸收光谱
1．吸光系数的物理意义： 单位浓度、单位厚度的吸光度
A a bc
讨论：
1）a=f（组分性质，温度，溶剂，λ） 当组分性质、温度和溶剂一定，a=f（λ） 2）不同物质在同一波长下a可能不同（选择性吸收） 同一物质在不同波长下a一定不同 3）a↑，物质对光吸收能力↑, 定量测定灵敏度↑
3）参比溶液(空白溶液)的选择：
空白溶液 参比池 调节光路 A参 0 ，T 100% 样品溶液 样品池 A样
注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、 光的散射和界面反射等因素对透光率的干扰
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三、偏离Beer定律的因素
A bc
依据Beer定律，A 与C关系应为经过 原点的直线 偏离Beer定律的 主要因素表现为 以下两个方面 （一）光学因素 （二）化学因素
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可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范
围400800nm ，主要用于有色物质的定量分析。
二、吸光光度法的特点：
（1）灵敏度高； （2）准确度高； （3）操作简便 快速；
（4）应用广泛。
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§7-2
物质对光的选择性吸收
一、物质的颜色
物质的颜色是由于物质对不同波长的光具 有选择性吸收而产生的。
ï Ö Î Ê Ñ Õ É « » Â Æ Ì Æ » È ³ ì º Ï º × ì × Ï ¶ À Ì À  ¶ ¶  À Ì Î ü Ê Õ ¹ â Õ « Ñ É × Ï ¶ À Ì À  ¶ ¶  À Ì Ì Â Æ Â » Ì Æ » È ³ ì º ² ¨¤ ³ /nm 400« ¡ 450 450« ¡ 480 480¡ « 490 490« ¡ 500 500« ¡ 560 560« ¡ 580 580« ¡ 600 600« ¡ 650 650« ¡ 750
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（4）从吸收曲线形状可以解释物质的颜色。 物质的颜色与吸收光颜色互为补色。
光的互补：蓝 黄
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§7-3
光吸收的基本定律
一、Lamber-Beer定律 二、吸光系数和吸收光谱 三、偏离Beer定律的因素 四、透光率的测量误差
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一、Lamber-Beer定律—吸收光谱法基本定律
描述物质对单色光吸收强弱与 液层厚度和待测物浓度的关系
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4．吸光度测量的条件选择： 1）测量波长的选择: 左右 max
max Amax 测定灵敏度高
较小的A A 须在 max 下测定 bc
2）吸光度读数范围的选择：
空白溶液 配制样品的溶剂
光学性质和厚度相同 参比池 样品池
选A=0.15~1.00
Lamber定律： A l Beer定律： A C
假设一束平行单色光通过一个均匀的、非散射 的吸光物体
入射光强为 I 0 透过光强为 I 物体截面为 S 厚度为 l 吸光质点数为 n
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取物体中一极薄层 设入射光强为 I x
薄层的吸光质点数为 dn 不让光子通过的面积为 dS k dn dS k dn 光子通过薄层被吸收的 几率 S S 透过薄层减弱的光强为 dI x
→ 定性、定量依据
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2．吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数：
在一定λ下，c=1mol/L，b=1cm时的吸光度
2）百分含量吸光系数 / 比吸光系数a：
在一定λ下，c=1g/100mBaidu Nhomakorabea，b=1cm时的吸光度
3）两者关系
M 1% a1cm 10
3．吸收光谱（吸收曲线）：λ~A 最大吸收 最小吸收 肩峰 特征值→定性依据
dI x k dn Ix S
n k dS dI x I0 I 0 S x I
I k n I n ln lg k I0 S I0 S
I V n 由S 和n V C l C lg klC abc I0 l S 12
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（一）光学因素
1．非单色光的影响： Beer定律应用的重要前提——入射光为单色光 照射物质的光经单色 器分光后并非真正单 色光 其波长宽度由入射狭 缝的宽度和棱镜或光 栅的分辨率决定 为了保证透过光对检 测器的响应，必须保 证一定的狭缝宽度 这就使分离出来的光 具一定的谱带宽度
第七章
§7-1 §7-2 收 §7-3 §7-4 §7-5 §7-6 思考题
可见分光光度法
概 述 物质对光的选择性吸 光吸收的基本定律 分光光度计简介 分光光度法的建立 分光光度法的应用
1
§7-1
概
述
一、吸光光度法
在光谱分析中，依据物质对光的选择性 吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法。 主要有: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长 范围800nm50m 。 主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长 范围200400 nm（近紫外区）。 可用于结构鉴定和定量分析。
I Lamber Beer定律表达式 lg a b c I0
I 透光率 T I0 吸光度 A lg T a b c
讨论：
或 T 10 A 10abc
a：吸光系数
1．Lamber-Beer定律的适用条件（前提） 入射光为单色光，均匀非散射的稀溶液 2 ．该定律适用于均匀非散射固体、液体和气体 样品 3．在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 A=A1+A2++An
表7-1 物质的颜色与吸收光颜色的互补关系
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二、光吸收曲线
用不同波长的单色光照射某一吸光物质测 定其吸光度，以波长为横坐标，以吸光度为 纵坐标，绘制曲线。描述物质对不同波长光 的吸收能力。
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吸收曲线
图为1,10-邻二氮杂菲亚铁溶液的吸收曲线， 在波长510nm处有最大吸收。
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吸收曲线的讨论： （1）一种吸光物质对不同波长的光吸收程度 不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸 收波长λmax 。 吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重 要依据。 （2）同一种物质浓度不同，其吸收曲线形状 相似λmax不变。 在λmax处，吸光度A正比于浓度C。测定测定 最灵敏 （3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并 作为物质定性分析的依据之一。