临床病原体检查
• 上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结 果分析时应予考虑。
-
8
痰标本的采集
• 采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复 漱口。
• 方法： （1）自然咳痰法 （2）气管镜下采集法 （3）气管穿刺法
-
9
尿标本的采集
• 无菌采集中段尿
• 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集 标本。
• 排尿困难者考虑导尿采集标本。
• 采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、 立即送检。
• 标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。
-
5
拒收标本
• 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不 符合。
• 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。 • 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过
长。 • 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 • 5.样本的检验项目申请不适合进行。 • 6.当日重复送样本（除血液培养外）。 • 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 • 8.被正常厌养菌污染的标本,要求检测。
• 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检 测、病原体分离培养鉴定、药敏实验—— 报告结果。
• 医生：明确诊断、合理用药。
-
3
一、标本采集和运送
-
4
标本采集的基本原则
• 无菌、及时、按照要求、标注清晰
• 根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位， 尽量采集病变明显部位标本。
• 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素使 用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。
临床病原体检查
-
1
临床病原体检查目的
• 明确感染是否发生以及病原体的类型。 • 提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。 • 密切监视烈性传染病与新的传病的发生，
及时向行政主管部门报告。 • 配合相关机构进行流行病学调查。
-
2
临床病原体检查的基本程序
• 医生、护士、病人、检验师：正确采集运 送标本。
• 用无菌注射器抽取可疑标本，分别置于抗 凝与不抗凝无菌容器中立即送检。
• 怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。
-
14
脓液及创伤感染分泌物标本
• 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采 取脓液或病灶深部分泌物，置于无菌试管 中送检。
• 封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取， 怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。
-
10
粪便标本采集
• 自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁 容器中送检。
• 排便困难者，采用直肠拭子采集。 • 怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻，立即接种
或将标本置于碱性蛋白胨或卡-布运送培养 液送检。 • 传染性腹泻应连续送检3次。
-
11
生殖道标本
• 男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 • 女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。
-
29
胃肠道
• 幽门螺杆菌 、霍乱弧菌、沙门菌属的细菌、 志贺菌属的细菌
-
30
脓肿、创伤分泌物及穿刺液
• 化脓性感染中最常见的病原菌是金黄色葡 萄球菌和化脓性链球菌，创伤感染病中多 由厌氧菌引起。
-
31
眼、耳部
• 球菌、杆菌均可
-
32
四、医院感染
• 概念：医院感染（nosocomial infection）又 称医院获得性感染（hospital acquired infection），指患者在入院时不存在，也不 处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包 括医院内获得的而在出院后发病的感染。 广义的医院感染对象不仅指住院患者，还 包括门诊病人、医院职工、探视人员与陪 护人员等。
不合格、培养不恰当等因素。 直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有L细
菌、厌氧菌或苛氧菌感染
-
23
三、临床常见病原体检查
• 临床常见病原体为：细菌、病毒、支 原体、衣原体、立克次体 以及寄生虫 等
-
24
不同部位感染的细菌学
• 血液 • 中枢神经系统 • 呼吸系统 • 泌尿生殖道 • 胃肠道 • 脓肿、创伤分泌物及穿刺液 • 眼、耳部
-
25
血液标本常见病原菌
种类 G+球菌
G+杆菌
病原菌
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、 化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌 结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌
G-球菌 脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布兰汉菌
G-杆菌
真菌 厌氧菌
大肠埃希菌、铜绿假单胞苗、克雷伯杆菌、肠杆菌、 变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、 嗜血杆菌
• 大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤多 点采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送 检。
-
15
检查方法
• 直接显微镜检查 • 病原体抗原与抗体的检测 • 病原体核酸的检测 • 病原体的分离培养与鉴定
-
16
显微镜直接涂片检测
• 不染色标本： • 染色标本：革兰氏染色
抗酸染色 墨汁染色
-
17
-
18
-
-
6
血液标本的采集
• 适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症 的病人。
• 一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰 期采血。
• 24小时内采血2~3次可提高阳性率。 • 血液与培养基的比例为1：10，一般成人血
量10~20ml，婴儿1~5ml。
-
7
呼吸道标本采集
• 类型：鼻咽拭子、痰和经气管采集的标本。
念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌
拟杆菌、产气荚膜梭菌
-
26
中枢神经系统常见病原菌
• 脑膜炎奈瑟菌多见，其次为流感嗜血杆菌、 肺炎链球菌、大肠埃希菌、B群溶血性链球 菌、脑膜败血黄杆菌
-
27
呼吸系统
• 肺炎链球菌 、金黄色葡萄球菌、流感嗜血 杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体
-
28
泌尿生殖道
• 淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌、肺 炎克雷伯菌、产气肠杆菌、沙门菌、铜绿 假单胞菌和沙雷菌、肠球菌
19
-
20
-
21
病原体分离培养与鉴定
• 目的： 明确感染病原体。 为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结果。
-
22
• 结果评价： 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为
感染的病原体。 存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量
考虑是否为致病菌。 如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本
怀疑厌氧菌感染，应采用阴道后穹隆穿刺 法，并立即接种于厌氧平板。 • 疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬 下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立即送 检。
-
12
脑脊液
• 由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置 于无菌容器中立即送检，不能暂时保存于 冰箱中。
-
13
胸腹水等穿刺液标本
• 标本采集应在用药前或停止用药后1~2天进 行。
-
8
痰标本的采集
• 采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复 漱口。
• 方法： （1）自然咳痰法 （2）气管镜下采集法 （3）气管穿刺法
-
9
尿标本的采集
• 无菌采集中段尿
• 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集 标本。
• 排尿困难者考虑导尿采集标本。
• 采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、 立即送检。
• 标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。
-
5
拒收标本
• 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不 符合。
• 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。 • 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过
长。 • 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 • 5.样本的检验项目申请不适合进行。 • 6.当日重复送样本（除血液培养外）。 • 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 • 8.被正常厌养菌污染的标本,要求检测。
• 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检 测、病原体分离培养鉴定、药敏实验—— 报告结果。
• 医生：明确诊断、合理用药。
-
3
一、标本采集和运送
-
4
标本采集的基本原则
• 无菌、及时、按照要求、标注清晰
• 根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位， 尽量采集病变明显部位标本。
• 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素使 用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。
临床病原体检查
-
1
临床病原体检查目的
• 明确感染是否发生以及病原体的类型。 • 提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。 • 密切监视烈性传染病与新的传病的发生，
及时向行政主管部门报告。 • 配合相关机构进行流行病学调查。
-
2
临床病原体检查的基本程序
• 医生、护士、病人、检验师：正确采集运 送标本。
• 用无菌注射器抽取可疑标本，分别置于抗 凝与不抗凝无菌容器中立即送检。
• 怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。
-
14
脓液及创伤感染分泌物标本
• 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采 取脓液或病灶深部分泌物，置于无菌试管 中送检。
• 封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取， 怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。
-
10
粪便标本采集
• 自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁 容器中送检。
• 排便困难者，采用直肠拭子采集。 • 怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻，立即接种
或将标本置于碱性蛋白胨或卡-布运送培养 液送检。 • 传染性腹泻应连续送检3次。
-
11
生殖道标本
• 男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 • 女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。
-
29
胃肠道
• 幽门螺杆菌 、霍乱弧菌、沙门菌属的细菌、 志贺菌属的细菌
-
30
脓肿、创伤分泌物及穿刺液
• 化脓性感染中最常见的病原菌是金黄色葡 萄球菌和化脓性链球菌，创伤感染病中多 由厌氧菌引起。
-
31
眼、耳部
• 球菌、杆菌均可
-
32
四、医院感染
• 概念：医院感染（nosocomial infection）又 称医院获得性感染（hospital acquired infection），指患者在入院时不存在，也不 处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包 括医院内获得的而在出院后发病的感染。 广义的医院感染对象不仅指住院患者，还 包括门诊病人、医院职工、探视人员与陪 护人员等。
不合格、培养不恰当等因素。 直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有L细
菌、厌氧菌或苛氧菌感染
-
23
三、临床常见病原体检查
• 临床常见病原体为：细菌、病毒、支 原体、衣原体、立克次体 以及寄生虫 等
-
24
不同部位感染的细菌学
• 血液 • 中枢神经系统 • 呼吸系统 • 泌尿生殖道 • 胃肠道 • 脓肿、创伤分泌物及穿刺液 • 眼、耳部
-
25
血液标本常见病原菌
种类 G+球菌
G+杆菌
病原菌
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、 化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌 结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌
G-球菌 脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布兰汉菌
G-杆菌
真菌 厌氧菌
大肠埃希菌、铜绿假单胞苗、克雷伯杆菌、肠杆菌、 变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、 嗜血杆菌
• 大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤多 点采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送 检。
-
15
检查方法
• 直接显微镜检查 • 病原体抗原与抗体的检测 • 病原体核酸的检测 • 病原体的分离培养与鉴定
-
16
显微镜直接涂片检测
• 不染色标本： • 染色标本：革兰氏染色
抗酸染色 墨汁染色
-
17
-
18
-
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6
血液标本的采集
• 适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症 的病人。
• 一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰 期采血。
• 24小时内采血2~3次可提高阳性率。 • 血液与培养基的比例为1：10，一般成人血
量10~20ml，婴儿1~5ml。
-
7
呼吸道标本采集
• 类型：鼻咽拭子、痰和经气管采集的标本。
念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌
拟杆菌、产气荚膜梭菌
-
26
中枢神经系统常见病原菌
• 脑膜炎奈瑟菌多见，其次为流感嗜血杆菌、 肺炎链球菌、大肠埃希菌、B群溶血性链球 菌、脑膜败血黄杆菌
-
27
呼吸系统
• 肺炎链球菌 、金黄色葡萄球菌、流感嗜血 杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体
-
28
泌尿生殖道
• 淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌、肺 炎克雷伯菌、产气肠杆菌、沙门菌、铜绿 假单胞菌和沙雷菌、肠球菌
19
-
20
-
21
病原体分离培养与鉴定
• 目的： 明确感染病原体。 为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结果。
-
22
• 结果评价： 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为
感染的病原体。 存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量
考虑是否为致病菌。 如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本
怀疑厌氧菌感染，应采用阴道后穹隆穿刺 法，并立即接种于厌氧平板。 • 疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬 下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立即送 检。
-
12
脑脊液
• 由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置 于无菌容器中立即送检，不能暂时保存于 冰箱中。
-
13
胸腹水等穿刺液标本
• 标本采集应在用药前或停止用药后1~2天进 行。
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临床病原学检查
精品课件
一.抗微生物药物敏感性试验（AST）
2.常用敏感性试验方法 ⑴手工试验:①K-B纸片琼脂扩散法
结果表示:S-Susceptible I-Intermediate R-Resistant
②稀释法（MIC） ③Etest ④联合药敏试验
精品课件
一.抗微生物药物敏感性试验 （AST）
⑵自动化仪器 Vitek，Microscan ⑶分子试验 PCR直接检测mecA基因 ⑷补充试验 Nitrocefin
精品课件
二.耐药机制及耐药性监测试验
2.耐药机制： ⑴药物渗入细菌减少 ⑵产生灭火酶和钝化酶(-内酰胺酶) ⑶细菌抗生素结合蛋白发生改变（PBP） ⑷代谢拮抗剂产生
精品课件
二.耐药机制及耐药性监测试验
3.耐药性监测的特殊试验 ⑴ -内酰胺酶检测
方法:头孢哨噻吩滤纸片法(nitrocefin) 意义: -内酰胺酶检测阳性,即对青霉素、
精品课件
பைடு நூலகம் ㈡尿 液
• 无菌采集清洁中段尿 • 导尿或膀胱穿刺获得
精品课件
㈢粪 便
• 取含脓、血或粘液粪便置于清洁容 器内
• 排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子 • 对传染性腹泻须三次送检
精品课件
㈣呼吸道标本
1.痰：⑴自然咳痰法 ⑵气管镜采集法
2.鼻咽拭标本：同痰标本用清水漱口 后采集
精品课件
㈤脑脊液与其他无菌体液
2.病原体诊断的基本方法
➢病原体分离培养(isolation and culture)和 鉴定(identification)
• 培养基选择 • 生长条件：一般大气条件
厌氧条件 微需氧条件
精品课件
2.病原体诊断的基本方法
➢鉴定技术： • 生化鉴定 • 血清学鉴定 • 数码鉴定 • 自动化鉴定
一.抗微生物药物敏感性试验（AST）
2.常用敏感性试验方法 ⑴手工试验:①K-B纸片琼脂扩散法
结果表示:S-Susceptible I-Intermediate R-Resistant
②稀释法（MIC） ③Etest ④联合药敏试验
精品课件
一.抗微生物药物敏感性试验 （AST）
⑵自动化仪器 Vitek，Microscan ⑶分子试验 PCR直接检测mecA基因 ⑷补充试验 Nitrocefin
精品课件
二.耐药机制及耐药性监测试验
2.耐药机制： ⑴药物渗入细菌减少 ⑵产生灭火酶和钝化酶(-内酰胺酶) ⑶细菌抗生素结合蛋白发生改变（PBP） ⑷代谢拮抗剂产生
精品课件
二.耐药机制及耐药性监测试验
3.耐药性监测的特殊试验 ⑴ -内酰胺酶检测
方法:头孢哨噻吩滤纸片法(nitrocefin) 意义: -内酰胺酶检测阳性,即对青霉素、
精品课件
பைடு நூலகம் ㈡尿 液
• 无菌采集清洁中段尿 • 导尿或膀胱穿刺获得
精品课件
㈢粪 便
• 取含脓、血或粘液粪便置于清洁容 器内
• 排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子 • 对传染性腹泻须三次送检
精品课件
㈣呼吸道标本
1.痰：⑴自然咳痰法 ⑵气管镜采集法
2.鼻咽拭标本：同痰标本用清水漱口 后采集
精品课件
㈤脑脊液与其他无菌体液
2.病原体诊断的基本方法
➢病原体分离培养(isolation and culture)和 鉴定(identification)
• 培养基选择 • 生长条件：一般大气条件
厌氧条件 微需氧条件
精品课件
2.病原体诊断的基本方法
➢鉴定技术： • 生化鉴定 • 血清学鉴定 • 数码鉴定 • 自动化鉴定
最新山医临床病原学检查PPT课件
无菌注射器穿刺抽取，置于抗凝与不抗凝无 菌容器中立即送检（或直接注入血培养瓶）。
脓性标本应考虑同时做厌氧培养.
尿液标本的采集
应在用药前或停药3天后留取标本, 并使尿液在膀胱内停留6~8h以上,起床后 第一次尿样阳性率较高.
无菌采集中段尿 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采
集标本。 排尿困难者考虑导尿采集标本。
革兰阴性菌主要耐药类型：
ESBLs（+）的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及 奇异变形杆菌
持续高产染色体Ⅰ型ß-内酰胺酶(AmpC酶)的 阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、 吲哚阳性变形杆菌、铜绿假单胞菌等
多重耐药的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜 麦芽窄食单胞菌等
产NDM-1泛耐药肠杆菌科细菌
直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有 L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。
病毒分离培养与鉴定的结果评价
必须结合流行病学资料、临床表现、标本来源 及病毒种类加以分析。
从组织、血液以及脑脊液中分离到病毒可明确 诊断。
从呼吸道、肠道等分离到病毒，如该病毒人体 不能长期携带，有诊断价值，如麻疹病毒、流 感病毒等。反之需相应的临床表现，才有病原 学意义，如巨细胞病毒，肠道病毒等。
（一）MRS（耐甲氧西林葡萄球菌）
(methecillin resistance staphylococcus)
MRS的特点是它们都具有一外来基因 mecA，负责编码PBP2a，当PBP2a占 优势时，由于ß-内酰胺类药对其亲和力 低，使得MRS对青霉素类、头孢菌素类、 碳青霉烯、单环内酰胺类、 ß-内酰胺/ ß-内酰胺酶抑制剂类抗生素均耐药。并 提示对氨基糖甙类、大环内酯类、克林 霉素和四环素等多种抗生素耐药。
感染性疾病:
脓性标本应考虑同时做厌氧培养.
尿液标本的采集
应在用药前或停药3天后留取标本, 并使尿液在膀胱内停留6~8h以上,起床后 第一次尿样阳性率较高.
无菌采集中段尿 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采
集标本。 排尿困难者考虑导尿采集标本。
革兰阴性菌主要耐药类型：
ESBLs（+）的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及 奇异变形杆菌
持续高产染色体Ⅰ型ß-内酰胺酶(AmpC酶)的 阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、 吲哚阳性变形杆菌、铜绿假单胞菌等
多重耐药的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜 麦芽窄食单胞菌等
产NDM-1泛耐药肠杆菌科细菌
直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有 L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。
病毒分离培养与鉴定的结果评价
必须结合流行病学资料、临床表现、标本来源 及病毒种类加以分析。
从组织、血液以及脑脊液中分离到病毒可明确 诊断。
从呼吸道、肠道等分离到病毒，如该病毒人体 不能长期携带，有诊断价值，如麻疹病毒、流 感病毒等。反之需相应的临床表现，才有病原 学意义，如巨细胞病毒，肠道病毒等。
（一）MRS（耐甲氧西林葡萄球菌）
(methecillin resistance staphylococcus)
MRS的特点是它们都具有一外来基因 mecA，负责编码PBP2a，当PBP2a占 优势时，由于ß-内酰胺类药对其亲和力 低，使得MRS对青霉素类、头孢菌素类、 碳青霉烯、单环内酰胺类、 ß-内酰胺/ ß-内酰胺酶抑制剂类抗生素均耐药。并 提示对氨基糖甙类、大环内酯类、克林 霉素和四环素等多种抗生素耐药。
感染性疾病:
临床病原学检查
第一节 标本采集、运送和检查方法
一.标本采集和运送
• 采集标本注意点： 1.标本容器必须无菌或清洁容器 2.选择最佳时间采集标本，在抗菌药物使 用前 3.获取标本时，须严格无菌操作 4.标本采集后，应尽快送实验室
㈠血 液
• • • • • 发热初期和高峰期采集 抗菌药物治疗前 成人每次10-20ml，婴幼儿1-2ml 标本不用抗凝剂 24小时内，可在不同部位采血3次
2.病原体诊断的基本方法
examination） 直接显微镜检测（microscopic examination） 染色标本检查法： ⑴染色标本检查法：革兰染色和抗酸染色 不染色标本检查法： ⑵不染色标本检查法：悬滴法和压滴法
2.病原体诊断的基本方法
病原体分离培养(isolation and culture)和鉴定(identification) • 培养基选择 • 生长条件：一般大气条件 生长条件： 厌氧条件 微需氧条件
医院感染检查
7.医院感染常见病原菌监测 血培养： 病原菌：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄 球菌等 单次血培养不易区分污染菌或感染菌。 两次培养均为同种皮肤正常菌群可认 为感染菌。
医院感染检查
8.医院环境监测和消毒灭菌监测 空气培养：沉降法采样 物体表面监测：压印法 医务人员手部细菌监测 消毒灭菌效果监测
二.耐药机制及耐药性监测试验
⑵超广谱β-内酰胺酶检测（ESBL） 超广谱β 内酰胺酶检测（ESBL） 方法： 方法：纸片扩散法和稀释法 意义： 阳性预示对头孢泊肟、 意义：ESBL阳性预示对头孢泊肟、头孢他 阳性预示对头孢泊肟 头孢噻肟、 啶、头孢噻肟、头孢曲松和氨曲南等抗 菌药物无效。 菌药物无效。
耐药性统计和分析
100
WHONET
呼吸道病原体检测金标准
呼吸道病原体检测金标准呼吸道病原体检测是临床诊断和治疗呼吸道感染的重要步骤。
以下是呼吸道病原体检测的几种金标准：1. 病原学检测病原学检测是呼吸道病原体检测的金标准之一。
它通过细菌培养、病毒分离、支原体和衣原体检测等方法，直接检测呼吸道样本中的病原体。
病原学检测具有较高的特异性，但需要一定的时间，通常需要2-3天才能得到结果。
2. 血清学检测血清学检测是另一种呼吸道病原体检测的金标准。
它通过检测血清中的特异性抗体，如IgM和IgG抗体，来诊断呼吸道疾病。
血清学检测具有较高的灵敏度和特异性，能够提供病原体的感染史和免疫状态等信息。
但需要注意的是，血清学检测需要在疾病发生后一段时间内才能检测到抗体，因此不能用于早期诊断。
3. 分子生物学检测分子生物学检测是近年来发展起来的呼吸道病原体检测方法。
它通过检测病原体核酸，如PCR（聚合酶链式反应）和基因测序等方法，快速、准确地检测呼吸道样本中的病原体。
分子生物学检测具有高灵敏度和特异性，能够早期诊断疾病，但需要昂贵的设备和专业的技术人员。
4. 免疫学检测免疫学检测是通过检测人体免疫系统对病原体产生的特异性免疫反应来诊断呼吸道疾病。
免疫学检测包括免疫荧光、免疫印迹和酶联免疫吸附试验等方法。
免疫学检测具有高特异性和灵敏度，能够提供病原体的感染史和免疫状态等信息。
但需要注意的是，免疫学检测可能会受到其他因素的影响，如交叉反应和自身免疫等。
综上所述，呼吸道病原体检测的金标准包括病原学检测、血清学检测、分子生物学检测和免疫学检测。
具体使用哪种方法取决于病情、实验条件和技术人员的水平。
在选择检测方法时，应考虑其灵敏度、特异性和可操作性等方面的因素。
临床病原学检查
酸杂交技术、技术、芯片技术等）
细菌感染检查检验特点
•通过对标本直接显微镜检，病原菌的分离培养鉴定， 病原菌的抗原检测，核酸检测和细菌感染后机体免 疫应答产物的测定及药物的测定及药物敏感性试验， 对细菌感染性疾病可作出及时、准确的病原学诊断。
7
革兰染色法（ ）
由丹麦医生 于1884年创立。 1.步骤
诊断学
临床病原学检查
2
临床病原体检查目的
• 临床病原体检查目的: • 是确定感染的发生和性质，在疾病早期提
供恰当的治疗方案，并采取有效的预防措 施，防止感染传播造成的危害。
各种不同病原体的实验诊断方法遵 循以下基本原则
1.正确、规范采集和运送标本。 2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原，借助分子 生物学的方法检测病原体核酸，结合病人的病史、症状 或体征，快速作出初步诊断。 3.初步诊断同时，对病原体进行分离与鉴定。 4.检测机体对病原体的免疫产物。 5.参与临床选择抗菌药物，指导和监控微生物的治疗方 案，避免 耐药菌株的产生。
母婴垂直传播 宫内传播 分娩时微小皮损处传播 产后母婴密切接触 性传播
• 高 (>8%): 占45% • 一生感染的危险 >60% • 婴幼儿感染常见 • 中等 (2%～7%): 占43% • 一生感染的危险是 20%～60% • 感染存在于所有年龄组 • 低 (<2%): 占12% • 一生感染的危险 <20% • 许多感染发生在成人危险组
涂片 结晶紫 碘液 酒精 染色 媒染 脱色
革兰阳性菌
(Gram positive bacteria)
革兰阴性菌
(Gram negative bacteria)
复红 复染
9
临床病原学检查
• 主要的试剂
– 固相抗原或抗体
– 酶标记的抗原或抗体
– 酶的底物
ELISA的主要方法
• • • • • 间接法: 测定抗-HBs 夹心法：测定HBsAg和HBeAg 竞争法：测定抗-HBc 中和法：测定抗-HBe 捕捉法：测定抗-HBc IgM
病原学诊断(二)---核酸检测
• 核酸杂交
– 探针
诊断学
临床病原学检查
2
临床病原体检查目的
临床病原体检查目的: 是确定感染的发生和性质，在疾病早期提供 恰当的治疗方案，并采取有效的预防措施， 防止感染传播造成的危害。
各种不同病原体的实验诊断方法遵 循以下基本原则
1.正确、规范采集和运送标本。 2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原，借助分子 生物学的方法检测病原体核酸，结合病人的病史、症状
• PCR
– 引物
• HBsAg – 感染的标志 • Anti-HBs – 既往感染/接种疫苗 • Anti-HBc IgM – 急性感染标志 • Anti-HBc IgG – 既往或慢性感染 • HBeAg – 急性病毒复制，有传染性
• Anti-HBe –病毒不再复制
• HBV-DNA – 急性病毒复制，比HBeAg更准确；
原理：已知抗体测未知抗原进行病原菌的鉴定或用 ③血清学诊断 已知抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其 效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。
标本：双份血清标本，恢复期血清抗体效价比急性
期升高≥4倍者方有意义。单份血清效价超过一定 标准才有诊断意义。 种类：凝集试验、沉淀试验、中和试验、补体结合 试验。
病原学诊断---抗原抗体检测
项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及 抗-HBc IgM 方法
– 固相抗原或抗体
– 酶标记的抗原或抗体
– 酶的底物
ELISA的主要方法
• • • • • 间接法: 测定抗-HBs 夹心法：测定HBsAg和HBeAg 竞争法：测定抗-HBc 中和法：测定抗-HBe 捕捉法：测定抗-HBc IgM
病原学诊断(二)---核酸检测
• 核酸杂交
– 探针
诊断学
临床病原学检查
2
临床病原体检查目的
临床病原体检查目的: 是确定感染的发生和性质，在疾病早期提供 恰当的治疗方案，并采取有效的预防措施， 防止感染传播造成的危害。
各种不同病原体的实验诊断方法遵 循以下基本原则
1.正确、规范采集和运送标本。 2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原，借助分子 生物学的方法检测病原体核酸，结合病人的病史、症状
• PCR
– 引物
• HBsAg – 感染的标志 • Anti-HBs – 既往感染/接种疫苗 • Anti-HBc IgM – 急性感染标志 • Anti-HBc IgG – 既往或慢性感染 • HBeAg – 急性病毒复制，有传染性
• Anti-HBe –病毒不再复制
• HBV-DNA – 急性病毒复制，比HBeAg更准确；
原理：已知抗体测未知抗原进行病原菌的鉴定或用 ③血清学诊断 已知抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其 效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。
标本：双份血清标本，恢复期血清抗体效价比急性
期升高≥4倍者方有意义。单份血清效价超过一定 标准才有诊断意义。 种类：凝集试验、沉淀试验、中和试验、补体结合 试验。
病原学诊断---抗原抗体检测
项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及 抗-HBc IgM 方法
实验诊断-临床病原体检测
戊型肝炎病毒
萼状病毒（Calicivirus）科 特异性IgM和IgG抗体
近期感染和早期诊断
• 传染源 急性感染病人 亚临床感染者
• 传播途径 粪口途径 密切接触传播
第五节 性传播疾病病原体检测
• 性传播性疾病（sexually transmitted disease，STD）：是 指通过各种性接触而传播的侵犯皮肤、 性器官及全身多脏器的疾病，简称性 病（venereal disease）
慢性迁延性肝炎，慢性活动性肝炎， 肝硬化，肝癌。
慢性HBsAg携带者。 • Anti-HBs或抗HBs：中和抗体
乙型肝炎病毒血清标记物检测
• HBeAg：有乙型肝炎，是病毒复制活跃， 传染性强的指标；持续阳性易转变为慢性 肝炎； HBeAg+和 HBsAg+可垂直传播。
• Anti-HBe或抗Hbe：出现于急性感染的恢 复期，持续时间较长。意味着HBV部分被 清除或抑制，复制减少，传染性降低。
• 怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。
脓液及创伤感染分泌物标本
• 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取 脓液或病灶深部分泌物，置于斯氏运送培养 基送检。
• 封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取， 怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。
• 大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤多点 采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检。
2、特点
（1）感染源
病原体来源于住院病人、 医务人员、探视者、陪护人员， 来自于医院环境及未彻底消毒 灭菌的医疗器械、血液制品的 污染菌等，大多为条件性致病 菌，且有程度不同的耐药性。
（1）感染源
细菌为最常见的病原体， 以革兰阴性杆菌为主。近十余 年来常见耐甲氧西林葡萄球菌 医院感染，留置导尿等的凝固 酶阴性葡萄球菌感染率上升， 手术切口和尿路肠球菌感染也 不少见。厌氧菌和深部真菌作 为机体正常菌群常引起内源性 感染。
萼状病毒（Calicivirus）科 特异性IgM和IgG抗体
近期感染和早期诊断
• 传染源 急性感染病人 亚临床感染者
• 传播途径 粪口途径 密切接触传播
第五节 性传播疾病病原体检测
• 性传播性疾病（sexually transmitted disease，STD）：是 指通过各种性接触而传播的侵犯皮肤、 性器官及全身多脏器的疾病，简称性 病（venereal disease）
慢性迁延性肝炎，慢性活动性肝炎， 肝硬化，肝癌。
慢性HBsAg携带者。 • Anti-HBs或抗HBs：中和抗体
乙型肝炎病毒血清标记物检测
• HBeAg：有乙型肝炎，是病毒复制活跃， 传染性强的指标；持续阳性易转变为慢性 肝炎； HBeAg+和 HBsAg+可垂直传播。
• Anti-HBe或抗Hbe：出现于急性感染的恢 复期，持续时间较长。意味着HBV部分被 清除或抑制，复制减少，传染性降低。
• 怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。
脓液及创伤感染分泌物标本
• 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取 脓液或病灶深部分泌物，置于斯氏运送培养 基送检。
• 封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取， 怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。
• 大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤多点 采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检。
2、特点
（1）感染源
病原体来源于住院病人、 医务人员、探视者、陪护人员， 来自于医院环境及未彻底消毒 灭菌的医疗器械、血液制品的 污染菌等，大多为条件性致病 菌，且有程度不同的耐药性。
（1）感染源
细菌为最常见的病原体， 以革兰阴性杆菌为主。近十余 年来常见耐甲氧西林葡萄球菌 医院感染，留置导尿等的凝固 酶阴性葡萄球菌感染率上升， 手术切口和尿路肠球菌感染也 不少见。厌氧菌和深部真菌作 为机体正常菌群常引起内源性 感染。
临床病原学检查
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36
医院感染检查
3.感染源: 外源或内源性病原体
外源性：其他住院患者、医务人员、探望 者（多为条件致病菌）
内源性：患者自身皮肤、口腔、咽部和胃 肠道固有的正常菌群等（免疫力低下患 者）
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37
医院感染检查
4.常见临床类型
下呼吸道感染 尿路感染 手术切口感染 胃肠道感染 血液感染 皮肤和组织感染
氨卞西林等抗生素耐药
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28
二.耐药机制及耐药性监测试验
⑵超广谱-内酰胺酶检测（ESBL） 定义：是水解青霉素，一代、二代和三代 头孢菌及单酰胺类药物的酶，产生ESBL 的细菌对上述抗生素耐药。 ESBL主要存在于大肠杆菌和肺炎克雷伯 菌等革兰阴性菌中。
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Байду номын сангаас
29
二.耐药机制及耐药性监测试验
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17
2.病原体诊断的基本方法
➢血清学诊断：查特异性抗体——肥达氏 试验
➢病原体特异性抗原检测 ➢病原体核酸检测：查特异基因片段
DNA/RNA——PCR、DNA探针杂交技术
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18
第二节 细菌耐药性检查
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19
一.抗微生物药物敏感性试验（AST）
1.定义：对敏感性不能预测的临床分 离菌株进行药敏试验，以指导临床 选择治疗药物和了解区域或医院内 常见病原菌耐药性变迁，有助于临 床经验性治疗选药。
意义 5.什么是药敏试验及基本检验方法
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48
• 参考书： 《现代病原学检验与临床实践》 上海科学技术文献出版社 倪语星 主编
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临床病原学检查02230页PPT
病例分析
以性传播性疾病为例
【病史摘要】 （一）入院病历 未婚。2019年3月8日入院。住院号 32334。 主诉：龟头部长“疱疮”，反复不愈。
1
现病史：阴茎、包皮两侧、龟头部出现小 水疱，疼痛难忍。患者2年前曾与一酒店服务 员热恋，有过性接触。此后约10天左右，龟头 部感到灼热，不久即感疼痛，并出现几个小水 疱。很快破溃渗水。经某医院诊治，按“性病” 治疗，注射“利福平”、“淋必治”等药物， 未见好转，反而创面扩大，水疱溃破相连成片， 20余天后相继消退。约1～2月后，外生殖器又 出现小水疱，症状比前更为严重，故来院就诊。
19
In principle,the pathogen should be identified by culture in any acute infection that requires treatment.This,however,is only possible if the pathogen is still detectable in excretions,secretions,blood or tissue at the time when the clinical symptoms occur,e.g. salmonellae in feces in the case of diarrhea or gonococci from endocervical canal in genital tract infection.
- on the detection of the antibody
response to the pathogen. The concentration
of infection-sepcific antibodies
以性传播性疾病为例
【病史摘要】 （一）入院病历 未婚。2019年3月8日入院。住院号 32334。 主诉：龟头部长“疱疮”，反复不愈。
1
现病史：阴茎、包皮两侧、龟头部出现小 水疱，疼痛难忍。患者2年前曾与一酒店服务 员热恋，有过性接触。此后约10天左右，龟头 部感到灼热，不久即感疼痛，并出现几个小水 疱。很快破溃渗水。经某医院诊治，按“性病” 治疗，注射“利福平”、“淋必治”等药物， 未见好转，反而创面扩大，水疱溃破相连成片， 20余天后相继消退。约1～2月后，外生殖器又 出现小水疱，症状比前更为严重，故来院就诊。
19
In principle,the pathogen should be identified by culture in any acute infection that requires treatment.This,however,is only possible if the pathogen is still detectable in excretions,secretions,blood or tissue at the time when the clinical symptoms occur,e.g. salmonellae in feces in the case of diarrhea or gonococci from endocervical canal in genital tract infection.
- on the detection of the antibody
response to the pathogen. The concentration
of infection-sepcific antibodies
呼吸道病原体检测在临床中的应用
检测方法：常见的呼吸道病原体检测方法包括核酸检测、 抗原检测和抗体检测等。核酸检测可以快速准确地检测出 病原体，抗原检测可以检测病原体本身，而抗体检测则可 以检测患者体内是否产生了免疫反应。
医院获得性呼吸道感染
医院获得性呼吸道感染是指在医院环 境中，由于患者免疫力低下或接触病 原体而引起的呼吸道炎症。这种感染 往往比较严重，需要及时诊断和治疗 。呼吸道病原体检测可以为医生提供 及时的病原学证据，指导医生选择合 适的抗生素进行治疗。
监测疾病流行趋势与防控措施
呼吸道病原体检测可以监测不同病原体引起的呼吸道感染的流行趋势，为防控措 施的制定提供科学依据。
通过呼吸道病原体检测数据的分析，可以评估防控措施的实施效果，及时调整防 控策略，有效控制疾病的传播和流行。
03
呼吸道病原体检测的应用场景
社区获得性呼吸道感染
社区获得性呼吸道感染是指在社区环境中，由于各种病原 体引起的呼吸道炎症，如感冒、喉炎、支气管炎等。呼吸 道病原体检测可以快速准确地检测出病原体，为临床医生 提供诊断依据，有助于及时治疗和预防并发症。
VS
预防措施：为了预防医院获得性呼吸 道感染，需要加强医院感染控制措施 ，如定期消毒病房、加强手卫生等。 同时，对于免疫力低下的患者，应加 强呼吸道保护措施，如佩戴口罩等。
免疫缺陷患者感染
免疫缺陷患者是指由于免疫系统功能 不全而容易感染各种疾病的患者。呼 吸道病原体检测可以帮助医生快速诊 断免疫缺陷患者的呼吸道感染，并提 供针对性的治疗方案。
THANKS
谢谢您的观看
针对不同病原体，开发特异性更强的检测方 法，减少假阳性或假阴性的情况，提高诊断
准确性。
简化检测流程，降低成本
优化呼吸道病原体检测的流程，降低操作复杂度，提高检测效率。
医院获得性呼吸道感染
医院获得性呼吸道感染是指在医院环 境中，由于患者免疫力低下或接触病 原体而引起的呼吸道炎症。这种感染 往往比较严重，需要及时诊断和治疗 。呼吸道病原体检测可以为医生提供 及时的病原学证据，指导医生选择合 适的抗生素进行治疗。
监测疾病流行趋势与防控措施
呼吸道病原体检测可以监测不同病原体引起的呼吸道感染的流行趋势，为防控措 施的制定提供科学依据。
通过呼吸道病原体检测数据的分析，可以评估防控措施的实施效果，及时调整防 控策略，有效控制疾病的传播和流行。
03
呼吸道病原体检测的应用场景
社区获得性呼吸道感染
社区获得性呼吸道感染是指在社区环境中，由于各种病原 体引起的呼吸道炎症，如感冒、喉炎、支气管炎等。呼吸 道病原体检测可以快速准确地检测出病原体，为临床医生 提供诊断依据，有助于及时治疗和预防并发症。
VS
预防措施：为了预防医院获得性呼吸 道感染，需要加强医院感染控制措施 ，如定期消毒病房、加强手卫生等。 同时，对于免疫力低下的患者，应加 强呼吸道保护措施，如佩戴口罩等。
免疫缺陷患者感染
免疫缺陷患者是指由于免疫系统功能 不全而容易感染各种疾病的患者。呼 吸道病原体检测可以帮助医生快速诊 断免疫缺陷患者的呼吸道感染，并提 供针对性的治疗方案。
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针对不同病原体，开发特异性更强的检测方 法，减少假阳性或假阴性的情况，提高诊断
准确性。
简化检测流程，降低成本
优化呼吸道病原体检测的流程，降低操作复杂度，提高检测效率。