安体舒通对心衰大鼠心肌组织TGF_Smads信号通路相关分子表达的影响
替米沙坦、安体舒通及其合用对防治大鼠急性心肌梗死左室重构的作用
替米沙坦、安体舒通及其合用对防治大鼠急性心肌梗死左室重构的作用陈国忠;傅国胜;赵志宏;于路【期刊名称】《浙江临床医学》【年(卷),期】2006(008)007【摘要】目的评价选择性血管紧张素ⅡⅠ型受体拮抗剂替米沙坦和醛固酮受体拮抗剂安体舒通对大鼠急性心肌梗死(AMI)后左室重构的影响.方法SD大鼠AMI模型建立24h后,随机分为AMI组、替米沙坦组、安体舒通组和两药合用组并以假手术组为对照.6周后,行血流动力学测定、形态学检测心脏重构过程.结果各组平均心肌梗死面积差异无显著性(P＞0.05).替米沙坦组和合用组显著降低左心室舒张末压(LVEDP)、左心室重量、室间隔厚度及左室截面内周长,安体舒通组仅仅减少了LVEDP.各组的非梗死区室间隔的非血管区胶原容积分数(CVF)均显著减少(P＜0.001),合用组的CVF没有进一步减少.结论替米沙坦干预能有效改善心室重构,与安体舒通合用没有叠加作用,但安体舒通可减少非梗死区心肌胶原的沉积,有一定的临床意义.【总页数】2页(P679-680)【作者】陈国忠;傅国胜;赵志宏;于路【作者单位】315040,浙江省宁波市鄞州人民医院;310009,浙江大学医学院附属第二医院;310009,浙江大学医学院附属第二医院;310009,浙江大学医学院附属第二医院【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.卡维地洛、西拉普利及其合用防治大鼠急性心肌梗死左室重塑的作用 [J], 唐熠达;杨跃进;阮英茆;李永利;周燕文;田毅;高润霖;陈纪林;陈在嘉2.AT1受体阻断剂络萨坦对大鼠急性心肌梗死左室重构的防治作用 [J], 张沛;杨跃进;阮英茆;宋来凤;徐新林;李永利;周燕文;田毅;陈纪林;陈在嘉;徐义枢3.微小剂量卡维地洛防治大鼠急性心肌梗死左室重构的实验研究 [J], 唐熠达;杨跃进;张沛;阮英茆;孙瑞成;李永利;田毅;周燕文;高润霖4.强力霉素、氯沙坦及其合用防治大鼠急性心肌梗死后左室重构的作用 [J], 杨跃进;张沛;阮英茆;陈曦;周燕文;田毅;高润霖;陈在嘉5.替米沙坦、安体舒通及两者合用对心肌梗死后非心力衰竭大鼠作用的对比研究[J], 傅国胜;赵志宏;陈国忠;于路;鲍晓峰;单江因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
咪达普利和安体舒通干预心肌纤维化大鼠血管紧张素Ⅱ的产生
咪达普利和安体舒通干预心肌纤维化大鼠血管紧张素Ⅱ的产生邓玮;卢利群;陈庆伟【期刊名称】《心血管康复医学杂志》【年(卷),期】2006(15)2【摘要】目的:探讨慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化进程中肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的变化及血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和安体舒通(SPI)干预对心肌纤维化大鼠AngⅡ产生途径的影响.方法:制作腹主动脉缩窄大鼠心肌纤维化模型,随机分为①模型判断组,②ACEI组,③SPI组,④两药合用组,⑤不用药组,另设⑥假手术组.术后4周以心重/体重、心肌胶原含量判断模型成功,然后灌胃予以ACEI(0.9 mg/kg·d)、SPI(1.8 mg/kg·d)及二药合用(ACEI 0.45 mg/kg·d+SPI 0.9mg/kg·d)8周,对比各组间心重指数、心肌胶原含量、血浆及心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(ALD)含量及心肌血管紧张素转化酶(ACE)和糜酶样活力.结果:腹主动脉缩窄4周后,心肌纤维化大鼠模型心重/体重、心肌胶原含量与血浆、心肌AngⅡ和ALD水平升高.予以ACEI和SPI治疗后,上述指标有所改善(P＜0.05～＜0.01),且联合用药,心肌ACE和糜酶样活力降低(P＜0.05).结论:咪达普利和安体舒通均能减轻心肌纤维化,但二者联用优于单独应用.【总页数】4页(P132-135)【作者】邓玮;卢利群;陈庆伟【作者单位】重庆医科大学附属第二医院老年病科,重庆市,400010;富顺县人民医院药剂科;重庆医科大学附属第二医院老年病科,重庆市,400010【正文语种】中文【中图分类】R542.23【相关文献】1.安体舒通改善自发性高血压大鼠心肌纤维化 [J], 许明;杨汉东;闵新文;李东峰2.小剂量安体舒通抗左旋硝基精氨酸诱导持续性高血压大鼠心肌纤维化 [J], 谢晓华3.安体舒通对自发性高血压大鼠心肌中的血管紧张素转换酶表达的影响 [J], 程丽;杨震;蒋文平;缪丽燕4.PPARγ/NF-κB信号通路参与替米沙坦抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌纤维化及改善心功能作用 [J], 李博涛;项羽;崔倩卫;王军奎;赵娜5.参芪利心汤对心力衰竭大鼠血浆N端B型利钠肽原、血管紧张素Ⅱ水平及心肌纤维化的影响 [J], 庄金龙;陈华;刘莉;郭以河;林惠萍;范伟伟;朱健因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
安体舒通对慢性充血性心力衰竭患者QT离散度的影响
安体舒通对慢性充血性心力衰竭患者QT离散度的影响朱晋坤;方颖;毛华;董文;王东锋;李树法【期刊名称】《临床心电学杂志》【年(卷),期】2006(15)4【摘要】目的观察安体舒通对慢性充血性心力衰竭患者QT离散度(QTd)的影响,探讨其临床应用价值。
方法采用随机、对照方法,设立安体舒通干预组及常规治疗组,测定两组用药前及用药1月后的QTd、校正QT离散度(QTcd)、血钾、血镁、血钠和肌酐。
同时测定正常对照者的QTd及QTcd。
结果心力衰竭组QTd、QTcd较对照组明显延长,差异有显著性(p<0.01);安体舒通干预组治疗后QTd、QTcd较治疗前显著下降(p<0.01):安体舒通干预组血清钾、镁治疗后较治疗前明显升高(p<0.01),肌酐轻度减低但差异无显著性(p>0.05)。
结论安体舒通可降低心衰患者的QTd、QTcd。
【总页数】3页(P278-280)【关键词】安体舒通;心力衰竭;QT离散度【作者】朱晋坤;方颖;毛华;董文;王东锋;李树法【作者单位】贵阳市第一人民医院;贵阳医学院附属医院;山东省济钢集团明水耐火材料厂职工医院【正文语种】中文【中图分类】R540.61【相关文献】1.倍他乐克对慢性充血性心力衰竭患者QT间期离散度的影响 [J], 高奋2.依那普利与美托洛尔对慢性充血性心力衰竭患者疗效及QT离散度的影响 [J], 刘海红3.稳心颗粒对慢性充血性心力衰竭患者心率变异性和QT离散度的影响 [J], 石刚;贺铿;叶君明4.P波离散度和QT离散度对慢性充血性\r心力衰竭患者病情评估的作用 [J], 李容5.P波离散度和QT离散度对慢性充血性心力衰竭患者病情评估的作用 [J], 李容因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
p53信号通路在心力衰竭中的作用机制
p53信号通路在心力衰竭中的作用机制常宏;田立茹;李佳凝;吴晨曦;张海霞;梁斯同【期刊名称】《河北联合大学学报（医学版）》【年(卷),期】2019(021)001【总页数】6页(P76-80,84)【关键词】p53;心力衰竭【作者】常宏;田立茹;李佳凝;吴晨曦;张海霞;梁斯同【作者单位】华北理工大学中医学院河北唐山 063000;华北理工大学中医学院河北唐山 063000;华北理工大学中医学院河北唐山 063000;华北理工大学中医学院河北唐山 063000;华北理工大学中医学院河北唐山 063000;华北理工大学中医学院河北唐山 063000【正文语种】中文【中图分类】R541.6心力衰竭是各种原因导致的心脏收缩和/或舒张功能失常，心脏泵血功能障碍，同时也是多种心血管疾病的终末阶段，具有非常高的患病率和病死率[1]，成为引起死亡的主要原因之一。
据临床调查显示，有临床症状的心力衰竭患者其5年生存率与恶性肿瘤基本相似。
心室重构是心力衰竭发生、发展的基本机制之一。
在重构的过程中，p53信号通路被激活，能够诱导心肌细胞凋亡，是心力衰竭从代偿走向失代偿的转折点。
p53基因可以在心肌细胞中表达。
研究体外细胞实验和整体动物实验时发现，缺氧、缺血和缺血再灌注损伤过程中p53基因的表达都会增加[2～4]。
其他研究也提示p53在高血压、动脉粥样硬化、心肌梗死等心血管疾病的进展中发挥着重要作用[5,6]。
研究发现p53在不同疾病中发挥作用的机制之一是调控细胞凋亡，其可作为上游调控者影响凋亡途径中Bcl-2家族和Caspase家族间的平衡性[7]。
p53作为转录因子，既能上调Bax，也能下调Bcl-2，同时还可以激活Fas的转录和其他一些死亡受体基因[8]，正是这些调控因子的共同作用诱导细胞凋亡。
鉴于p53对循环系统中的多种疾病有重要调控作用，本文将从能发展为心力衰竭的多种疾病，如心肌肥厚、心肌梗死、炎症、心肌纤维化等方面阐述p53信号通路在心力衰竭进展中的调控作用。
坎地沙坦联用安体舒通治疗充血性心力衰竭66例的临床观察
亲和性最强 ， 结合 时间也更长 ， 因此它 可以在 ２ 时给药 间 ４小 隔内发挥平衡 的降压效 果 。醛 固酮 拮抗 剂安 体舒 通是 传统
的 保 钾 利 尿 剂 ， 年 来 在 抗 心 衰 治 疗 中 具 有 的抗 醛 固 酮 作 用 近 受 到 重 视 ， 研 究 主 要 观 察 在 常 规 抗 心 力 衰 竭 药 物 应 用 下 联 本 用 坎 地 沙 坦 和 安 体 舒 通 治 疗 效 果 及 对 心 衰 死 亡 的影 响 。
发 生情 况 。
１ １ 临 床 资 料 及 分组 ．
选 择 ２０ ０ ８年 １月 至 ２ １ ０ ０年 １月 在
１４ 统 计 学 处 理 ．
２ 结 果
所 测 数 据 计 量 资 料 用 ｔ 验 作 显 著 性 分 检
我 院 就 诊 的充 血 性 心 力 衰 竭 患 者 １ ３例 ， 机 分 为 治 疗 组 ６ ３ 随 ６ 例 ， 中男 ３ 其 ６例 ， ３ 女 ０例 。 年 龄 ４ ８～６ ５岁 ， 均 ５ ． 平 ６ ７岁 。 对照组 ６ ７例 ， ３ 男 ８例 ， ２ 女 ９例 ， 龄 ４ 年 ６～６ ６岁 ， 均 ５ ． 平 ６４ 岁 。入 选 标 准 ： Ｖ Ｆ≤ ４ ％ 和 （ ）左 室 舒 张 末 内 径 ＬＥ ０ 或 （ Ｖ Ｄ ／６ Ｙ； Ｙ Ａ分 级 Ｉ～Ｉ 级 。 病 因 主要 为 风 湿 Ｌ Ｅ Ｄ） ０ｍｌ Ｎ Ｈ ＞ ｌ Ｉ Ｉ Ｉ
析 ； 数 资 料 用 检 验 。 计 心 功 能 的 变 化 ： 者 的 血 浆 Ｂ Ｐ水 平 与 Ｎ ＨＡ分 级 （ 患 Ｎ Ｙ Ｐ ＜ ． １和 Ｌ Ｅ （ ０Ｏ ） Ｖ Ｆ Ｐ＜０ ０ ） 显 相 关 。 治 疗 ６个 月 时 ， 地 ．１ 明 坎
TGF—β／Smads信号通路对心肌纤维化进展的临床意义
TGF—β／Smads信号通路对心肌纤维化进展的临床意义心肌纤维化（MF）又称为心肌钙化，与心律失常、心功能障碍甚至心源性猝死密切相关，是目前多种常见心脏疾病发展到一定阶段的病理转归，也是心室重构的一种重要表现。
心肌纤维化是一个多因素相互制约与促进的过程。
其中，转化生长因子-β（TGF-β）在MF的发展进程中有着至关重要的作用，TGF-β/Smads 信号通路是转化生长因子-β发挥生物学作用的主要通路，现将在MF的发展进程中TGF-β的临床意义作如下综述。
标签：心肌纤维化；慢性心力衰竭；TGF-β/Sm ads信号通路；转化生长因子-β高血压病、心脏瓣膜病、风湿性心脏病、心肌梗死、心肌炎等均可致心肌收缩能力下降、心室重构、心肌细胞凋亡等病理生理改变，进而发展为慢性心力衰竭。
心肌纤维化是心力衰竭的病理基础。
大量研究表明，心肌纤维化是多种致病因子长期作用于心脏，引起细胞外基质（extracellu-lar matrix，ECM）异常增多及过度沉积，导致ECM合成和降解失衡、各类胶原比例失调、排列紊乱及心肌成纤维细胞大量增生，导致心室顺应性下降，影响心脏的正常舒缩功能，是一种慢性炎症逐渐病变的过程[1]。
Komamura K等提出，根据有无细胞缺失和坏死，心肌纤维化可分为反应性纤维化（reactive interstitial fibrosis）和修复性纤维化（reparative fibrosis）[2]。
反应性心肌纤维化发生在炎症的反应过程，是指心肌胶原纤维过度沉积在细胞间和心内血管周围，没有明显的心肌细胞缺失和坏死，并且通过一定的干预手段，反应性心肌纤维化可以得到有效改善甚至消除，是可逆的。
而修复性心肌纤维化一般由于心肌组织损伤而引发，是指心肌细胞死亡后，分泌的胶原纤维填充在其空腔内，替代心肌细胞的位置，这一病理过程是无法逆转的。
MF是胶原合成和降解代谢失衡的结果，是多种心脏疾病的终末期表现，它是心血管领域研究的重点、难点之一，是决定心血管疾病预后的关键性因素。
老药安体舒通在心血管应用的新进展
老药安体舒通在心血管应用的新进展
苏哲坦
【期刊名称】《中国医师进修杂志》
【年(卷),期】2000(023)009
【摘要】@@ 1957年,药物化学家开发了与醛固酮结构极为相似的螺内酯-安体舒通.此药在细胞水平上,和醛固酮(ALD)竞争性地与醛固酮特异性受体结合,因此减弱了ALD的生物学作用;它在远端肾小管与ALD竞争性的与受体结合,从而抑制钠与钾的交换,具有弱利尿作用.30年前,安体舒通被用于治疗慢性心衰;但因其利尿作用较弱,故至今临床应用很少.rn近来的研究表明ALD受体几乎分布于整个机体的钠转运部位,包括心肌和血管.本文介绍此药在心血管应用的新进展.
【总页数】2页(P59-60)
【作者】苏哲坦
【作者单位】海南省人民医院,海南,海口,570311
【正文语种】中文
【中图分类】R972;R54
【相关文献】
1.聚羟基脂肪酸脂膜的介绍及在心血管方面的应用新进展 [J], 许士俊
2.联合应用血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体阻断剂在心室重构防治中的新进展 [J], 苗冬梅;杨庭树
3.老药新用-黄连素的临床应用新进展 [J], 胡婷婷;吴雪钗
4.安体舒通在皮肤科的老药新用 [J], 包佐义
5.中外音乐治疗在心血管疾病康复治疗中的应用新进展 [J], 张璇;耿敖;王彦辉;姜红岩
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沙库巴曲缬沙坦通过调控心力衰竭大鼠TGF-β1Smad3和NF-κB信号通路抑制心肌损伤
2021年4月第31卷㊀第4期中国比较医学杂志CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINEApril,2021Vol.31㊀No.4宋建敏,陈灿,宋波.沙库巴曲缬沙坦通过调控心力衰竭大鼠TGF-β1/Smad3和NF-κB 信号通路抑制心肌损伤[J].中国比较医学杂志,2021,31(4):115-122.Song JM,Chen C,Song B.TGF-β1/Smad3and NF-κB signaling pathways in rats with heart failure [J].Chin J Comp Med,2021,31(4):115-122.doi:10.3969/j.issn.1671-7856.2021.04.017[作者简介]宋建敏(1980 ),女,硕士,主治医师,主要从事急性冠脉综合征及心力衰竭的临床研究㊂E-mail:6302016@ [通信作者]陈灿(1980 ),男,硕士,副主任医师,主要从事常见心血管疾病及胸外科疾病的微创化治疗㊂E-mail:16233751@沙库巴曲缬沙坦通过调控心力衰竭大鼠TGF-β1/Smad3和NF-κB 信号通路抑制心肌损伤宋建敏1,陈㊀灿2∗,宋㊀波1(1.湖北医药学院附属随州医院心血管内科,湖北随州㊀441300;2.湖北医药学院附属随州医院心胸血管外科,湖北随州㊀441300)㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀研究沙库巴曲缬沙坦对心力衰竭大鼠心肌损伤和心脏重构的影响,并探讨其对TGF-β1/Smad3和NF-κB 信号通路的调控作用㊂方法㊀通过结扎大鼠左前降支冠状动脉(LAD)诱发心力衰竭动物模型㊂建模后每天用10mg /kg 的沙库巴曲缬沙坦治疗大鼠(沙库巴曲缬沙坦组,n =15)㊂假手术组(n =15)和模型组(n =15)大鼠用等体积的生理盐水处理㊂共治疗4周㊂通过超声心动图和组织学检查分别评估大鼠心脏功能和纤维化㊂转化生长因子-β1(TGF-β1)㊁磷酸化Smad3(p-Smad3)㊁磷酸化Smad7(p-Smad7)㊁胶原蛋白I(Collagen I)㊁α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)㊁肿瘤坏死因子-α(TNF-α)㊁白介素-6(IL-6)㊁核因子κB(NF-κB)和磷酸化的κBα(p-IκBα)的蛋白水平用Western blot 分析法测定㊂结果㊀与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组的左心室射血分数(EF)和左心室缩短分数(FS)显著升高,而LVIDs 和LVIDd 显著降低(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组Collagen I 的表达显著降低(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组TGF-β1的蛋白表达以及Smad3的磷酸化水平显著降低,而Smad7的磷酸化水平显著升高(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组TNF-α和IL-6的蛋白表达显著降低(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组NF-κBp65和p-IκBα的蛋白表达显著降低(P <0.05)㊂结论沙库巴曲缬沙坦通过抑制心力衰竭大鼠TGF-β1/smad3和NF-κB 信号通路来抑制心肌纤维化和炎症反应㊂ʌ关键词ɔ㊀沙库巴曲缬沙;心力衰竭;心肌纤维化;炎症ʌ中图分类号ɔR-33㊀㊀ʌ文献标识码ɔA㊀㊀ʌ文章编号ɔ1671-7856(2021)04-0115-08Sacubitril /valsartan inhibits myocardial injury by regulatingTGF-β1/Smad 3and NF-κB signaling pathways in rats with heart failureSONG Jianmin 1,CHEN Can 2∗,SONG Bo 1(1.Department of Cardiovascular Medicine,Suizhou Hospital Affiliated to Hubei Medical College,Suizhou 441300,China.2.Department of Cardiothoracic and Vascular Surgery,Suizhou Hospital Affiliated to Hubei Medical College,Suizhou 441300)㊀㊀ʌAbstract ɔ㊀Objective ㊀To investigate the effect of sacubitril /valsartan on myocardial injury and cardiacremodeling in rats with heart failure,and to investigate its regulatory effect on transforming growth factor -β1(TGF-β1)/Smad3and nuclear factor -κB (NF-κB)signaling pathways.Methods ㊀An animal model of heart failure was induced byligation of the left anterior descending coronary artery in rats.After modelling,rats were treated daily with sacubitril/ valsartan at10mg/kg(sacubitril/valsartan group,n=15).Rats in the sham group(n=15)and the model group(n=15) were treated with an equal volume of normal saline.Rats were treated for4weeks.Echocardiography and histology were used to assess heart function and fibrosis,respectively.Protein levels of TGF-β1,phosphorylated Smad3,phosphorylated Smad7,collagen I,alpha smooth muscle actin,tumor necrosis factor-α,interleukiN-6,NF-κB,and phosphorylatedκBαwere determined by western blot analysis.Results㊀Left ventricular ejection fraction(EF)and left ventricular fraction shortening(FS)in the sacubitril/valsartan group were significantly higher,while LVIDs and LVIDd in the sacubitril/ valsartan group were significantly lower compared with those in the model group(P<0.05).Collagen I expression was significantly reduced in the sacubitril/valsartan group compared with the model group(P<0.05).TGF-β1protein expression and Smad3phosphorylation levels in the sacubitril/valsartan group were significantly lower,while Smad7 phosphorylation levels were significantly higher compared with the model group(all P<0.05).Tumor necrosis factor-αand interleukiN-6protein expression was significantly reduced in the sacubitril/valsartan group compared with the model group (both P<0.05).NF-κBp65and phosphorylatedκBαprotein expression was significantly reduced in the sacubitril/valsartan group compared with the model group(both P<0.05).Conclusions㊀Sacubitril/valsartan inhibits myocardial fibrosis and the inflammatory response by inhibiting TGF-β1/Smad3and NF-κB signaling pathways in rats with heart failure.ʌKeywordsɔ㊀sacubitril/valsartan;heart failure;myocardial fibrosis;inflammation㊀㊀心肌梗死在全世界范围内具有较高的致残率和死亡率㊂尽管由于早期溶栓㊁经皮冠状动脉介入治疗或冠状动脉搭桥术明显降低了急性心肌梗死的死亡率,但幸存患者中仍会发生左心室(LV)重塑[1]㊂心肌梗死后这种不良的心脏重塑可导致心室功能障碍和心力衰竭,从而导致预后不良和死亡率升高[2]㊂心力衰竭是心肌梗死的主要并发症,其在心肌梗死患者死亡原因中位于第二位[3]㊂因此,抑制心脏重塑是治疗心肌梗死后心力衰竭的主要策略㊂心肌梗死后左心室间质纤维化和炎性细胞浸润是心脏重塑的常见病理特征㊂转化生长因子-β1 (TGF-β1)已被确认为心脏纤维化的关键调节剂,其可影响细胞生长㊁凋亡和分化㊁增加胶原蛋白和基质蛋白的产生㊁保持成纤维细胞的活力㊂心肌梗死动物模型的结果表明,心肌梗死中TGF-β1的高表达以及使用TGF-β受体抑制剂阻断TGF-β途径可以减轻心肌梗死动物模型中的心脏纤维化[4]㊂此外,核因子κB(NF-κB)是心肌梗死后心脏重塑和心力衰竭发展的关键因素,并且在炎症和先天免疫中起着至关重要的作用[5]㊂NF-κB家族成员p65形成同二聚体或异二聚体,这些同二聚体或异二聚体与细胞质中的κB(IκB)蛋白抑制剂结合㊂IκB的降解会释放NF-κB二聚体,并使NF-κB易位进入细胞核,从而可以启动靶基因的转录㊂NF-κB的激活可诱导趋化因子(MCP-1)㊁细胞因子(TNF-α㊁IL-6)和基质金属蛋白酶(MMPs)的转录,并进一步促进炎症和纤维化[6]㊂多项研究表明抑制NF-κB可抑制炎症反应和心脏纤维化[6]㊂因此,研究TGF-β1和NF-κB信号通路对于抑制心肌梗死后心力衰竭患者的心脏重塑具有巨大的潜在治疗价值㊂沙库巴曲缬沙坦(sacubitril/valsartan)的商品名叫诺欣妥(entresto),是一种血管紧张素II受体及脑啡肽酶的双重抑制剂类药物,由血管紧张素II受体拮抗剂的缬沙坦及脑啡肽酶抑制剂前体AHU377组成[7]㊂沙库巴曲缬沙坦于2015年获美国FDA批准上市,2016年被推荐为心力衰竭指南的I类药物,并且取得了较好的疗效㊂然而,沙库巴曲缬沙坦对心脏重塑的作用机制尚不明确㊂因此,本研究建立了心肌梗死后心力衰竭模型,评估了沙库巴曲缬沙坦对心脏功能㊁心脏纤维化以及TGF-β1㊁p-Smads㊁collagen I㊁TNF-α和IL-6的影响㊂并进一步探讨TGF-β1和NF-κB通路是否参与心脏重塑过程中沙库巴曲缬沙坦的保护作用㊂1㊀材料和方法1.1㊀实验动物60只SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠(7周龄,体重220~250g)由湖北省实验动物中心提供[SCXK(鄂)2019-0008],饲养于湖北医药学院屏障环境中[SYXK(鄂)2019-0031]㊂给动物饲喂标准饲料和水,并饲养在12h光照和12h黑暗㊁(20ʃ2)ħ温度和(50ʃ2)%湿度的环境中㊂所有动物实验方案均已获得湖北医药学院附属随州医院伦理审查委员会的批准(20180211),并符合实验室动物管理和使用规定,实验设计符合3R原则㊂1.2㊀主要试剂与仪器沙库巴曲缬沙坦(诺新妥,国药准字J20171054,Novatis Pharma Stein AG);Masson三色染色剂染色(货号:G1340,北京索莱宝科技有限公司);α-SMA一抗(免疫组化)(ab119952,英国Abcam公司);HRP-聚合物标记的抗兔IgG二抗(ab6721,英国Abcam公司);RIPA裂解缓冲液(产品编号:P0013K,碧云天生物技术研究所);TGF-β1一抗(ab215715,英国Abcam公司);p-Smad3和Smad3一抗(ab52903和ab40854,英国Abcam公司);p-Smad7和Smad7一抗(ab227309和ab226872,英国Abcam公司);TNF-α一抗(ab215188,英国Abcam公司);IL-6一抗(1ʒ1000, ab233706,英国Abcam公司);Collagen I一抗(ab138492,英国Abcam公司);α-SMA一抗(ab265588,英国Abcam公司);NF-κBp65一抗(ab183559,英国Abcam公司);p-IκBα一抗(sc-8404,美国Santa Cruz Biotechnology公司);GAPDH 一抗(ab8245,英国Abcam公司);辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG(ab205718,英国Abcam公司)㊂1.3㊀实验方法1.3.1㊀心肌梗死后心力衰竭动物模型结扎左前降支冠状动脉(LAD)后由心肌梗死诱发心力衰竭㊂腹膜内注射1%戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉大鼠,然后进行气管插管并连接呼吸机正压通气,术前记录12导联心电图㊂皮肤消毒后于胸腔开口,于左心耳根部下方2mm结扎LAD㊂假手术组的大鼠在不结扎LAD的情况下进行相同的手术操作㊂实验后记录十二导联心电图㊂将大鼠正常喂养1周㊂根据经胸超声心动图检查结果,当LVEF降低45%时表示心力衰竭模型建模成功㊂1.3.2㊀动物分组及给药将存活大鼠随机分为以下组:假手术组(n= 15)㊁模型组(n=15)和沙库巴曲缬沙坦组(n=15)㊂沙库巴曲缬沙坦组大鼠每天一次通过管饲法给予沙库巴曲缬沙坦10mg/kg㊂共治疗4周㊂模型组和假手术组给予等体积的生理盐水㊂1.3.3㊀经胸超声心动图检查采用无创经胸超声心动图方法评估左心室的形态和功能㊂在麻醉动物中进行超声心动图检查㊂记录左心室收缩末期内径(LVIDs)和左心室舒张末期内径(LVIDd)以及左心室射血分数(EF)和左心室缩短分数(FS)㊂1.3.4㊀心肌纤维化的测量给药4周后,收集大鼠心脏,并在磷酸盐缓冲液中洗涤,在4%多聚甲醛中固定过夜,然后包埋在石蜡中㊂将每个石蜡包埋的心脏切成4μm厚的切片,并用MASSON三色染色剂染色㊂每个切片在尼康显微镜下成像,通过Image J软件计算纤维化程度㊂1.3.5㊀免疫组织化学染色通过免疫组织化学染色检测α-SMA蛋白的表达㊂将心脏组织切片放在烤箱中烤片20min,然后二甲苯脱蜡,梯度乙醇水化㊂使用PH9.0的Tris/ EDTA缓冲液进行抗原修复㊂在3%H2O2中孵育10min来封闭内源性过氧化物酶㊂将切片在1% PBS中洗涤3次,每次6min,并在4ħ下与1%牛血清白蛋白中的一抗(1ʒ500稀释)一起孵育过夜㊂将切片用1%PBS洗涤3次,每次6min㊂然后将切片与HRP-聚合物标记的抗兔IgG二抗(1ʒ500稀释)室温孵育1h㊂将切片再次用1%PBS洗涤3次,每次6min,然后用苏木精复染30s㊂使用OLYMPUS BX50数字显微镜㊂在ˑ400放大倍数下观察图像㊂随机选择5个视野进行阳性染色评分,阳性染色评分=阳性细胞计数评分ˑ染色强度评分㊂阳性细胞计数评分如下:<5%为0分,5~25%为1分,5~25%为1分,26~50%为2分,51~75%为3分,>75%为4分㊂染色强度评分如下:未染色为0分,浅黄色为1分,棕黄色为2分,深棕色为3分㊂1.3.6㊀蛋白质印迹分析给药4周后,对所有动物实施安乐死,立即收获心脏并保存在液氮中㊂使用RIPA裂解缓冲液裂解组织㊂通过BCA法测定蛋白质浓度㊂蛋白质通过10%SDS-PAGE分离并转移到硝酸纤维素膜上,然后与以下一抗在4ħ下过夜孵育:TGF-β1(1ʒ500)㊁p-Smad3和Smad3(1ʒ500)㊁p-Smad7和Smad7(1ʒ500)㊁TNF-α(1ʒ1000)㊁IL-6(1ʒ1000)㊁Collagen I(1ʒ1000)㊁αSMA(1ʒ500)㊁NF-κBp65(1ʒ1000)㊁p-IκBα(1ʒ1000)和GAPDH(1ʒ1000)㊂将膜与辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG(1ʒ2000)在室温下孵育2 h㊂GAPDH作为内部对照㊂通过ECL法显影并使用Gene Gnome凝胶成像系统捕获生成的图像㊂1.4㊀统计学方法所有实验数据均表示为平均数ʃ标准差( xʃs)㊂使用统计软件SPSS17.0进行单因素方差分析(ANOVA),并通过LSD 事后检验进行多重比较,P <0.05表示差异具有统计学意义㊂2㊀结果2.1㊀沙库巴曲缬沙坦改善心力衰竭大鼠心脏结构和功能注:A-D:依次为EF㊁FS㊁LVIDs 和LVIDd;与假手术组比较,∗P <0.05;与模型组比较,#P <0.05㊂图1㊀各组大鼠的EF㊁FS㊁LVIDs 和LVIDdNote.A-D,EF,FS,LVIDs and LVIDd in pared with sham group,∗P <pared with model group,#P <0.05.Figure 1㊀EF,FS,LVIDs and LVIDd of each group of rats通过超声心动图评估心力衰竭大鼠治疗后的心脏功能㊂研究显示(图1),与假手术组相比,模型组大鼠的EF 和FS 显著降低,而LVIDs 和LVIDd 显著升高(P <0.05)㊂此外,与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组的EF 和FS 显著升高,而LVIDs 和LVIDd 显著降低(P <0.05)㊂2.2㊀沙库巴曲缬沙坦减轻心力衰竭大鼠心肌纤维化间质纤维化是心梗后心脏重塑的主要特征㊂通过Masson 对间质纤维化进行的三色染色显示(图2),与假手术组相比,心肌梗死组的左室壁结扎部分梗死区域边界出现明显的间质纤维化,胶原蛋白染色区域显著增加(P <0.05)㊂此外,与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组的胶原蛋白染色区域显著降低(P <0.05)㊂图3和图4显示,与假手术组相比,模型组大鼠心脏组织中肌成纤维细胞标志物α-SMA 的表达显著升高(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组α-SMA 的表达显著降低(P <0.05)㊂α-SMA 阳性的肌成纤维细胞可促进细胞外基质(ECM)的合成㊂本研究检测了Collagen I 的表达,这是心脏成纤维细胞产生的主要胶原蛋白亚型㊂研究显示(图3),与假手术组相比,模型组的Collagen I 表达显著升高(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组Collagen I 的表达显著降低(P <0.05)㊂2.3㊀沙库巴曲缬沙坦抑制心力衰竭大鼠心肌TGF-β1/Smad3信号通路TGF-β1/Smad3信号通过参与调控心肌梗死后心肌纤维化的原因,本研究显示(图5),与假手术组相比,模型组大鼠心脏组织中TGF-β1的蛋白表达以及Smad3的磷酸化水平显著升高,而Smad7的磷酸化水平显著降低(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组TGF-β1的蛋白表达以及Smad3的磷酸化水平显著降低,而Smad7的磷酸化水平显著升高(P <0.05)㊂2.4㊀沙库巴曲缬沙坦抑制心力衰竭大鼠细胞因子的表达细胞因子(TNF-α和IL-6)的表达在心脏重塑和心力衰竭中起着关键作用㊂本研究显示(图6),与假手术组相比,模型组TNF-α和IL-6的蛋白表达显著升高(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组TNF-α和IL-6的蛋白表达显著降低(P <0.05)㊂2.5㊀沙库巴曲缬沙坦抑制心力衰竭大鼠心肌NF-κB 信号通路先前的研究表明,促炎细胞因子诱导IκB 的磷酸化和降解,然后诱导NF-κB 从抑制性信号小体中释放出来,转移到细胞核并诱导许多基因的转录,从而导致炎性因子如TNF-α和IL-6的表达㊂本研究显示(图7),与假手术组相比,模型组NF-κBp65和p-IκBα的蛋白表达显著升高(P <0.05)㊂与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组NF-κBp65和p-IκBα的蛋白表达显著降低(P <0.05)㊂3㊀讨论心脏重塑是一个复杂的过程,有许多连续和重注:A:Masson 三色染色图像;B:胶原染色区域百分比;与假手术组比较,∗P <0.05;与模型组比较,#P <0.05㊂图2㊀大鼠心脏组织的Masson 三色染色Note,A,Masson three-color staining image.B,Percentage of collagen staining pared with sham group,∗P <0.05.Compared with model group,#P <0.05.Figure 2㊀Masson trichrome staining of rat hearttissue注:A:Collagen I 的蛋白相对表达量;B:α-SMA 的蛋白相对表达量;C:Western blot 代表性条带;与假手术组比较,∗P <0.05;与模型组比较,#P <0.05㊂图3㊀Western blot 检测大鼠心脏组织Collagen I 和α-SMA 的蛋白表达Note.A,Relative protein expression of Collagen I.B,Relative protein expression of α-SMA.C,Representative Western blot pared with sham group,∗P <pared with model group,#P <0.05.Figure 3㊀Western blot detection of collagen I and α-SMA protein expression in rat heart tissues叠的生物过程[8]㊂在早期阶段,心脏重塑是坏死区域纤维化修复并形成疤痕的结果㊂接下来,重塑过程由存活心肌的结构重排所驱动,包括心肌细胞肥大㊁心肌纤维化以及进行性左心室扩张㊂心肌梗死后的心室扩张是心脏衰竭的代偿反应之一㊂但是,过度扩张会引起心室收缩和舒张功能障碍,从而导致心力衰竭㊂预防不良的心室重塑对于降低心肌梗死后心力衰竭的发病率和死亡率非常重要㊂已经证实,间质纤维化是心力衰竭后心脏重塑的典型特征,其特征在于细胞外基质(ECM)的过度积累[9]㊂Collagen I 和Collagen III 是最丰富的ECM 成分㊂在心脏纤维化模型中,Collagen I 比Collagen III 表现出更强烈和更长时间的上调㊂活化的成纤维细胞是纤维化心脏中胶原蛋白的主要细胞来源㊂α-SMA 表达已被广泛用作成纤维细胞分化成活化状态的肌成纤维细胞的标记物[10]㊂在本研究中,我们观察到心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏中Collagen I 和α-SMA 蛋白被上调,这两者均通过沙库巴曲缬沙坦治疗得以抑制,这表明沙库巴曲缬沙坦可能通过抑制成纤维细胞活化和胶原生成而具有抗纤维化作用㊂TGF-β1是一种局部产生的细胞因子,也是组织注:A:α-SMA的免疫组化染色图像;B:α-SMA的阳性染色评分;与假手术组比较,∗P<0.05;与模型组比较,#P<0.05㊂图4㊀大鼠心脏组织α-SMA的免疫组化染色Note.A,immunohistochemical staining image ofα-SMA.B,positive staining score ofαpared with shamgroup,∗P<pared with model group,#P<0.05.Figure4㊀Immunohistochemical staining ofα-SMA in rat heart tissue注:A:TGF-β1的蛋白相对表达量;B:Smad3的磷酸化水平;C:Smad7的磷酸化水平;D:Western blot代表性条带;与假手术组比较,∗P<0.05;与模型组比较,#P<0.05㊂图5㊀Western blot检测大鼠心脏组织TGF-β1的蛋白表达以及Smad3和Smad7的磷酸化Note.A,Relative protein expression of TGF-β1.B,hosphorylation levels of Smad3.C,Phosphorylation levels of Smad7.D,Representative Western blot pared with sham group,∗P<pared with model group,#P<0.05.Figure5㊀Western blot detection of TGF-β1protein expression and phosphorylation of Smad3and Smad7in rat heart tissues注:A:TNF-α的蛋白相对表达量;B:IL-6的蛋白相对表达量;C:Western blot代表性条带;与假手术组比较,∗P<0.05;与模型组比较,#P<0.05㊂图6㊀Western blot检测大鼠心脏组织TNF-α和IL-6的蛋白表达Note.A,Relative protein expression of TNF-α.B,Relative protein expression of IL-6.C,Representative Western blotpared with sham group,∗P<pared with model group,#P<0.05.Figure6㊀Western blot detection of TNF-αand IL-6protein expression in rat heart tissues注:A:NF-κBp65的蛋白相对表达量;B:p-IκBα的蛋白相对表达量;C:Western blot代表性条带;与假手术组比较,∗P<0.05;与模型组比较,#P<0.05㊂图7㊀Western blot检测大鼠心脏组织NF-κBp65和p-IκBα的蛋白表达Note.A,Relative protein expression of NF-κBp65.B,Relative protein expression of p-IκBα.C,Representative Western blot pared with sham group,∗P<pared with model group,#P<0.05.Figure7㊀Western blot detection of NF-κBp65and p-IκBαprotein expression in rat heart tissues纤维炎性变化的主要刺激因子㊂在心肌梗死后的大鼠心脏中观察到TGF-β1明显高表达,它与成纤维细胞向成肌纤维细胞的转化以及典型的Smad信号通路的激活有关[11]㊂作为TGF-β1的主要下游信号转导子,Smad3可被激活的TGF-β1的I型受体磷酸化,然后与Smad4形成复合物并易位进入细胞核,在其中它作为转录因子并促进靶基因的表达,包括Collagen I和Collagen III㊂有研究表明,TGF-β的大多数促纤维化活性是由Smad3介导的[12-13]㊂Smad7是一种抑制性Smad蛋白,能够与Smad3和TGF-β受体复合物TGF-βRI结合竞争,从而阻止随后的信号传导过程㊂外源性Smad7的高表达可以抑制Smad3的磷酸化[14]㊂在本研究中,沙库巴曲缬沙坦均抑制了心力衰竭大鼠心脏中的TGF-β1/p-smad3信号通路和下游Collagen I的表达㊂同时,在经沙库巴曲缬沙坦治疗的心力衰竭大鼠中,α-SMA 表达水平受到抑制㊂而p-smad7表达上调㊂这些结果表明,沙库巴曲缬沙坦通过上调Smad7的蛋白表达来抑制TGF-β1/Smad3的信号通路,并进一步抑制成肌纤维细胞的增殖和Collagen I的上调㊂尽管促炎性细胞因子的表达可能与心肌梗死后的伤口愈合有关,但即使在非梗死的心肌中,细胞因子的过表达也会损害心脏组织并引起纤维化成分的过量沉积㊂NF-κB信号通路是炎症的 主要调控者 ㊂它主要存在于与其抑制剂IκB蛋白结合的胞质溶胶中㊂受细胞因子或其他诱导物刺激后, IκB蛋白被IκB激酶降解㊂IκB降解后,NF-κB易位至细胞核,并与促炎基因调控区域κB位点的DNA 结合并促进其转录[15-16]㊂活化的NF-κB会增加TGF-β1㊁TNF-α㊁IL-6和IL-1β的表达,从而激活胶原蛋白沉积和心肌纤维化,导致心肌重塑[17-20]㊂NF-κB在细胞因子和纤维化因子的协同反式激活中起着关键作用,这些因子与心力衰竭后法心肌损伤有关㊂在本研究中,沙库巴曲缬沙坦抑制了心力衰竭大鼠心脏中的NF-κBp65㊁p-IκB和下游TGF-β1㊁TNF-α和IL-6的表达㊂这些结果表明,沙库巴曲缬沙坦至少部分通过抑制IκB磷酸化来抑制NF-κB 的信号通路并进一步抑制促炎细胞因子的表达㊂总之,本研究发现沙库巴曲缬沙坦可预防心力衰竭过程总的心脏重塑㊂潜在的机制可能与沙库巴曲缬沙坦对心肌的抗纤维化和抗炎作用有关㊂沙库巴曲缬沙坦通过抑制胶原蛋白的产生㊁心脏成纤维细胞的活化和成纤维细胞的形成有效地减轻了心肌纤维化㊂沙库巴曲缬沙坦主要通过抑制TGF-β1/Smad3信号传导途径来发挥其抗纤维化作用㊂另外,沙库巴曲缬沙坦可通过抑制NF-κB信号传导从而抑制促炎性细胞因子的过度表达㊂参考文献:[1]㊀Farah E,Cogni AL,Minicucci MF,et al.Prevalence andpredictors of ventricular remodeling after anterior myocardialinfarction in the era of modern medical therapy[J].Med SciMonit,2012,18(5):CR276-CR281.[2]㊀赵磊,张鹏飞,张鹏翔,等.血浆B型脑钠肽在不同病因及类型心力衰竭中的变化及意义[J].中国医科大学学报,2013,42(12):1079-1082.[3]㊀Horiuchi Y,Tanimoto S,Aoki J,et al.Effects ofβ-blockers onleft ventricular remodeling in patients with preserved ejectionfraction after acute myocardial infarction[J].Int J Cardiol,2016,221:765-769.[4]㊀石斌豪,徐宗佩,樊官伟.基于TGF-β1/Smads信号通路治疗心肌梗死后心肌纤维化的研究进展[J].中国药理学通报,2018,34(1):5-8.[5]㊀Christia P,Frangogiannis NG.Targeting inflammatory pathwaysin myocardial infarction[J].Eur J Clin Invest,2013,43(9):986-995.㊀[6]㊀Timmers L,van Keulen JK,Hoefer IE,et al.Targeted deletionof nuclear factorκB 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安体舒通改善自发性高血压大鼠心肌纤维化
安体舒通改善自发性高血压大鼠心肌纤维化许明;杨汉东;闵新文;李东峰【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2008(024)007【摘要】目的:观察安体舒通对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)心肌纤维化的影响及可能机制.方法:将16只14周龄雄性SHR随机分为安体舒通组和对照组,每组8只,分别以安体舒通30 mg·kg-1·d-1及等量生理盐水灌胃12周,同时取8只同龄雄性SD大鼠作为正常对照组,用免疫组化的方法对结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、转化生长因子β1(transforming growth factors beta-1,TGFβ1)、胶原Ⅰ和Ⅲ(collagen Ⅰ andⅢ)在大鼠左室心肌的分布及表达进行半定量分析;用RT-PCR的方法检测TGFβ1、CTGF mRNA在心肌表达水平;用Masson染色法观察左室心肌胶原形态,图像分析测量胶原容积分数(colla-gen volume fraction,CVF);用碱水解法测定左室心肌羟脯氨酸(hydroxyproline,Hypm)含量.结果:(1)SHR对照组左室重量指数(left ventricular index,LVI)、CVF、Hypro、collagen Ⅰ和Ⅲ、CTGF、TGFβ1蛋白及mRNA表达明显高于SD大鼠组(P<0.01);相对于SHR对照组,安体舒通组则显著降低(P<0.05);(2)相关分析表明:CTGF与TGFβ1、CVF、Hypm和LVI呈高度正相关(P<0.01).结论:安体舒通能明显改善SHR心肌纤维化,其作用可能是通过阻断盐皮质激素受体和抑制CTGF的表达而实现的.【总页数】5页(P1281-1285)【作者】许明;杨汉东;闵新文;李东峰【作者单位】郧阳医学院附属东风医院心内科,湖北,十堰,442008;郧阳医学院附属东风医院心内科,湖北,十堰,442008;郧阳医学院附属东风医院心内科,湖北,十堰,442008;郧阳医学院附属东风医院心内科,湖北,十堰,442008【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.花生四烯酸环氧化酶-2途径参与丹参改善老年自发性高血压大鼠的心肌纤维化[J], 王建军;刘杰2.小剂量安体舒通抗左旋硝基精氨酸诱导持续性高血压大鼠心肌纤维化 [J], 谢晓华3.天麻钩藤膏改善自发性高血压大鼠心肌纤维化的作用及其机制研究 [J], 田梦影;宋雪云;李晓屏;蔡嘉洛;徐则林;蔡虎志4.电针太冲、足三里对自发性高血压大鼠心肌纤维化的改善作用 [J], 蔚鹏程;薛艳君;吴娇娟;吕桃桃;张旭东;杨可桢;刘清国5.电针太冲、足三里对自发性高血压大鼠心肌纤维化的改善作用 [J], 蔚鹏程;薛艳君;吴娇娟;吕桃桃;张旭东;杨可桢;刘清国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
安体舒通治疗充血性心力衰竭的临床观察
安体舒通治疗充血性心力衰竭的临床观察
徐振羽;默军彩;张亚玲;吕奇志;刘丽宏
【期刊名称】《健康必读·新医学导刊》
【年(卷),期】2003(20)1
【摘要】@@ 1 资料与方法rn1.1 一般资料分析1995年～2005年在我院诊断为充血性心力衰竭患者387例,其中男175例,女212例,平均年龄67岁,病史最长5年,最短1个多月;其中扩张型心肌病76例,风湿性瓣膜病102例,冠心病148例,高血压性心脏病32例,肺心病29例.所有患者入院后常规检查血压、心率、心电图、电解质、肾功能及心脏彩超.心功能分级以纽约心脏病学会(NY-HA)方法为标准,其中IV级127例,III级186例,II级74例.
【总页数】1页(P28-28)
【作者】徐振羽;默军彩;张亚玲;吕奇志;刘丽宏
【作者单位】鞍山钢铁集团公司矿业公司东鞍山医院内科;鞍山钢铁集团公司铁东医院内科
【正文语种】中文
【中图分类】R541.61
【相关文献】
1.安体舒通治疗严重慢性充血性心力衰竭的临床观察 [J], 刘东岳;王尚中;操斌全;周世琴
2.坎地沙坦联用安体舒通治疗充血性心力衰竭66例的临床观察 [J], 王臻;孙云富;
常鲁华
3.依那普利和安体舒通联合用药治疗充血性心力衰竭临床观察 [J], 杨静;崔爱英;张庭辉
4.安体舒通联合坎地沙坦治疗慢性充血性心力衰竭临床观察 [J], 安永青
5.依那普利和安体舒通联合用药治疗充血性心力衰竭临床观察 [J], 乙永林;杨静因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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·基础研究·安体舒通对心衰大鼠心肌组织TGF-β/Smads 信号通路相关分子表达的影响罗经宏，李玲(惠州市中心人民医院，广东惠州516001)摘要：目的观察醛固酮受体阻滞剂安体舒通对心肌梗死后心力衰竭（心衰）大鼠心肌组织中TGF-β/Smads信号通路相关分子表达的影响，并探讨其意义。
方法健康雄性SD 大鼠32只，分为心衰对照组和安体舒通组各11只，假手术组10只，通过结扎冠状动脉构建心肌梗死后心衰模型，假手术组不结扎冠脉。
术后2周，假手术组和心衰对照组采用生理盐水、安体舒通组采用安体舒通20mg /kg 灌胃8周。
分别于术后2周（灌胃前）、灌胃后8周采用超声心电图监测大鼠左室收缩末期容积（LVESD ）、左室舒张末期容积（LVEDD ）、左室射血分数（LVEF ）和短轴缩短率（FS ）。
其后处死大鼠并取心脏组织，采用Masson 染色测定心肌胶原容积分数（CVF ）。
采用Ｒeal-time PCＲ法检测三组心肌组织中的TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7mＲNA ，Western blot 法检测TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7蛋白及胶原纤维Ⅲ蛋白。
结果灌胃前安体舒通组、心衰对照组LVEDD 、LVESD 较假手术组增加，而EF 及FS 下降（P 均＜0．05）。
灌胃后8周，安体舒通组EF 、FS 高于心衰对照组（P 均＜0．05）。
心肌CVF 心衰对照组＞安体舒通组＞假手术组（P 均＜0．05）。
大鼠心肌组织中TGF-β1、Smad2、Smad3及Smad7mＲNA 及其蛋白和胶原纤维Ⅲ蛋白的表达心衰对照组＞安体舒通组＞假手术组（P 均＜0．05）。
结论安体舒通可抑制心肌梗死后心衰大鼠TGF-β/Smads 信号通路相关分子的表达，改善心肌纤维化。
关键词：心肌梗死；心力衰竭；醛固酮受体阻滞剂；TGF-β/Smads 信号通路doi ：10．3969/j．issn．1002-266X．2014．02．008中图分类号：Ｒ541．6文献标志码：A文章编号：1002-266X （2014）02-0023-03通信作者：李玲Effect of aldosterone receptor blocker on expression of TGF-β/Smads signaling pathway related molecules in myocardial tissues of rats with chronic heart failure LUO Jing-hong ，LI Ling（Huizhou Municipal Central Hospital ，Huizhou 516001，China ）Abstract ：Objective To observe the effect of aldosterone receptor blocker （spironolactone ）on the expression of TGF-β/Smads signaling pathway related molecules in rats with myocardial infarction-induced heart failure ，and to explore its sig-nificance．MethodsHeart failure was produced by ligation of the left anterior descending coronary artery in adult maleSprague-Dawley rats ，and then twenty-two heart failure rats were randomly divided into heart failure group （n =11）and spi-ronolactone group （n =11），while the sham operation group was not ligated （n =10）．Two weeks after operation ，the sham operation group （nromal saline ），heart failure group （normal saline ）and spironolactone group （spironolactone ，20mg /kg ）were intervened by gavage for 8weeks．The left ventricular end systolic volume （LVESD ），left ventricular end diastolic vol-ume （LVEDD ），left ventricular ejection fraction （LVEF ）and fractional shortening （FS ）were measured by echocardiography 2weeks and 8weeks after artery ligation ，respectively．The rats were killed to obtain the heart tissues and the collagen vol-ume fraction （CVF ）was detected by Masson staining．The mＲNA of TGF-β1，Smad2，Smad3and Smad7was detected by re-al-time PCＲ，and the proteins of TGF-β1，Smad2，Smad3，Smad7and Collagen Ⅲwere detected by Western blotting．Ｒe-sultsTwo weeks after operation ，compared with the sham operation group ，the LVESD and LVEDD in the heart failure and spironolactone group were significant elevated ，but LVEF and FS were significant reduced （all P ＜0．05）．But 8weeks after operation ，compared with the heart failure group ，the LVEF and FS of spironolactone group were significant elevated （all P ＜0．05）．The CVF of sham operation group ，heart failure group and spironolactone group were respectively 4．32ʃ1．12，21．7732山东医药2014年第54卷第2期ʃ2．25，and10．24ʃ1．78．The mＲNA and protein expression trend of TGF-β1，Smad2，Smad3and Smad7：heart failure group＞spironolactone group＞sham operation group（all P＜0．05）．Conclusion Spironolactone could inhibit the ex-pression of TGF-β/Smad signaling pathway in the myocardial infarction-induced heart failure and improve myocardial fibrosis．Key words：myocardial infarction；heart failure；aldosterone receptor blockers；TGF-β/Smads signaling pathway研究表明，醛固酮受体阻滞剂具有抑制和逆转醛固酮导致的心肌纤维化、减轻左心室肥厚、改善心室重构及左室舒张功能、改善心力衰竭（心衰）患者预后等作用［1 5］。
心室重构是心衰发生发展的主要病理生理基础。
转化生长因子β（TGF-β）/Smads信号通路在心肌纤维化重构发展中起重要作用［6］。
2012年8月 2013年8月，本研究观察了醛固酮受体阻滞剂安体舒通对心衰大鼠心肌组织中TGF/ Smads信号通路相关分子表达的影响，并探讨其相关机制。
现报告如下。
1材料与方法1．1实验动物分组与模型构建健康雄性SD大鼠32只，鼠龄45d，体质量（220ʃ30）g，随机分为心衰对照组、安体舒通组各11只，假手术组10只。
参考文献［9］方法制作心肌梗死后心衰大鼠模型，假手术组不结扎冠脉。
术后2周（灌胃前）假手术组、心衰对照组采用生理盐水、安体舒通组采用安体舒通20mg/kg灌胃，干预8周。
1．2检测指标1．2．1心功能评估分别于术后2周及药物干预8周后行超声心动图检测评估心功能。
在胸骨旁用二维超声测量或计算如下指标：左室收缩末期容积（LVESD）、左室舒张末期容积（LVEDD）、左室射血分数（LVEF）和短轴缩短率（FS）。
所有参数均在3个连续心动周期中测量并取均值。
1．2．2心肌胶原容积分数（CVF）测定完成超声心动图检测后，将大鼠开胸留取心脏标本，分离左右心室，用滤纸吸干后称重左室并记录；然后在左心室中部横向切开，切取约1mm厚的心脏标本留待病理切片Masson染色，余左室标本保存于－76ħ冰箱。
经显微摄像系统，在放大200倍下，随机选取Masson染色切片中非梗死区域的5个视野，用Im-age-Pro Plus4．1软件定量分析心肌CVF。
心肌CVF =非梗死心肌胶原面积/全视野面积。
1．2．3心肌组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 mＲNA的检测灌胃8周后处死大鼠取材心脏，采用Ｒeal-time PCＲ法。
PCＲ产物于2%琼脂糖凝胶电泳，采用Image Tools凝胶分析系统对PCＲ产物定量分析，以GAPDH相对值记录结果。
表1TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7mＲNA及内参引物序列mＲNA上游序列下游序列TGF-β5'-GCTGCTGACCCCCACTGAT-3'5'-TGCCGGACA ACTCCAGTGA-3' Smad25'-GTGTTTGCCGAGTGCCTAAGT-3'5'-TTACAGCCTGGTGGGATTTTG-3' Smad35'-GGACGCAGGCTCTCCAAAC-3'5'-AGGAGATGGAGCACCAAAAGG-3' Smad75'-TGTGGCATCCAGCTGACAAG-3'5'-GAGTCCGGGTTGTCCAGTGT-3' GAPDH5'-TGGTCTACATGTTCCAGTATGACT-3'5'-CCATTTGATGTTAGCGGG ATCTC-3' 1．2．4心肌组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7及胶原纤维Ⅲ蛋白的检测灌胃8周后处死大鼠取材心脏，采用Western blot法检测。