表皮葡萄球菌生物被膜内细菌对红霉素敏感性的检测
中级临床医学检验技术微生物学及检验(革兰阳性球菌、革兰阴性球
中级临床医学检验技术微生物学及检验（革兰阳性球菌、革兰阴性球菌）模拟试卷1(题后含答案及解析)题型有：1. A1型题 2. A2型题 3. B1型题1．在半固体培养基内可出现倒伞形生长的是A．蜡样芽孢杆菌B．伤寒沙门菌C．红斑丹毒丝菌D．产单核细胞李斯特菌E．鲍曼不动杆菌正确答案：D解析：本题要点为产单核细胞李斯特菌微生物特性，产单核细胞李新特菌在半固体培养基内可出现倒伞形生长。
知识模块：革兰阳性球菌、革兰阴性球菌2．下列细菌对外界理化因素抵抗力最强的是A．铜绿假单胞菌B．金黄色葡萄球菌C．大肠埃希菌D．流感嗜血杆菌E．肺炎克雷伯菌正确答案：B解析：葡萄球菌对理化因素抵抗力强，耐热、耐干燥、耐高盐，是抵抗力最强的无芽孢菌。
知识模块：革兰阳性球菌、革兰阴性球菌3．杆菌肽敏感试验阳性为A．A群链球菌B．B群链球菌C．C群链球菌D．D群链球菌E．F群链球菌正确答案：A解析：A群链球菌对杆菌肽敏感，B群cAMP试验阳性，七叶苷试验用于鉴定D群。
知识模块：革兰阳性球菌、革兰阴性球菌4．链球菌分类的依据是A．能否产生血浆凝固酶B．产生色素颜色的不同C．鞭毛抗原的不同D．在血琼脂培养基中溶血现象的不同E．传播途径的不同正确答案：D解析：通常根据在血琼脂培养基中溶血现象的不同可以将链球菌分为α溶血性链球菌，β溶血性链球菌，γ溶血性链球菌。
知识模块：革兰阳性球菌、革兰阴性球菌5．淋病奈瑟菌的唯一宿主是A．人B．猫C．黑猩猩D．豚鼠E．狗正确答案：A解析：人类是淋病奈瑟菌唯一的天然宿主和传染源。
知识模块：革兰阳性球菌、革兰阴性球菌6．治疗链球菌引起的感染应首选的抗生素是A．链霉素B．青霉素C．灭滴灵D．红霉素E．克林霉素正确答案：B解析：青霉素为防治化脓性链球菌感染的首选药物，用青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定的效果。
知识模块：革兰阳性球菌、革兰阴性球菌7．判定致病性葡萄球菌的主要试验是A．甘露醇发酵B．耐热DNA酶测定C．明胶液化D．触酶试验E．蔗糖发酵试验正确答案：B解析：金黄色葡萄球菌产生分解DNA的酶，能耐受煮沸而不被破坏。
鉴定葡萄球菌的方法
鉴定葡萄球菌的方法葡萄球菌是一种常见的细菌，常常引起各种感染。
因此，准确鉴定葡萄球菌对于临床治疗和疾病控制至关重要。
本文介绍了几种常见的鉴定葡萄球菌的方法。
下面是本店铺为大家精心编写的5篇《鉴定葡萄球菌的方法》，供大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
《鉴定葡萄球菌的方法》篇1一、生化试验生化试验是鉴定葡萄球菌的一种常用方法。
通过检测葡萄球菌的生化反应，可以初步鉴定其种类。
常见的生化试验包括:1. 葡萄糖发酵试验：葡萄球菌可以发酵葡萄糖，产生酸和气体。
将葡萄球菌接种到含有葡萄糖的培养基上，观察是否产生酸和气体，可以初步鉴定其是否为葡萄球菌。
2. 乳糖发酵试验：葡萄球菌不能发酵乳糖。
将葡萄球菌接种到含有乳糖的培养基上，观察是否产生酸和气体，可以进一步确认其是否为葡萄球菌。
3. 尿酸酶试验：葡萄球菌可以产生尿酸酶，将尿酸分解为尿酸盐和氨。
将葡萄球菌接种到含有尿酸的培养基上，观察是否产生尿酸盐和氨，可以进一步鉴定其种类。
二、药敏试验药敏试验是鉴定葡萄球菌的另一种常用方法。
通过检测葡萄球菌对不同抗生素的敏感性，可以初步鉴定其种类。
常见的药敏试验包括: 1. 盘状药敏试验：将葡萄球菌接种到含有不同抗生素的培养基上，观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
2. 纸片药敏试验：将含有不同抗生素的纸片贴在含有葡萄球菌的培养基上，观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
三、分子生物学方法近年来，分子生物学方法也被广泛应用于鉴定葡萄球菌。
常见的分子生物学方法包括:1. PCR 法：利用 PCR 技术，检测葡萄球菌的特异性基因，可以快速、准确地鉴定葡萄球菌。
2. 质谱法：利用质谱技术，检测葡萄球菌的蛋白质指纹，可以鉴定其种类。
鉴定葡萄球菌的方法有多种，包括生化试验、药敏试验和分子生物学方法等。
《鉴定葡萄球菌的方法》篇2鉴定葡萄球菌的方法包括直接镜检、分离培养、PCR 方法等。
直接镜检可通过革兰染色镜检，观察菌体形态和排列方式，判断是否为葡萄球菌。
红霉素与细胞被膜的临床关系及应用情况分析
红霉素与细胞被膜的临床关系及应用情况分析【摘要】目的探讨红霉素在多种感染中的应用,同时对其与细菌细胞被膜之间的关系和临床疗效分析。
方法将我院100例感染患者在临床应用红霉素抗菌治疗后,对其临床转归情况进行分析总结。
结果我院100例不同病菌感染患者,口服红霉素肠溶片39例,静滴乳糖酸红霉素61例。
不同给药途径应用红霉素后:显效58例占58%,有效35例占35%,无效7例占7%。
结论霉素为抑菌剂,但在高浓度时对某些细菌也具杀菌作用,可透过细菌细胞膜抑制细菌蛋白质合成。
【关键词】红霉素;细胞被膜;临床转归红霉素为大环内酯类药物,能快效抑菌的抗生素,其迅速阻断细菌蛋白质的合成,致使细菌合成细胞壁的过程停止,生长代谢处于静止状态[1]。
主要应用于革兰氏阳性菌感染,对某些革兰氏阴性菌、支原体、衣原体、军团菌及螺杆菌也有较强的抑制作用。
细菌生物细胞被膜(BBF)是细菌为适应自然环境而产生的一种保护性物质,通过调节细菌代谢状态降低细菌对抗菌药物的敏感性,并能有效阻止药物透过被膜使直接与菌体接触的抗菌药物浓度降低,是细菌在生长过程中附着于固体表面而形成的膜状物,其组成为细菌分泌多糖蛋白复合物(GLX),将自身克隆包绕其中。
现将我院100例感染患者在临床应用红霉素抗菌治疗后转归情况分析,如下。
1 资料与方法1.1 一般资料我院收治100例感染患者,其中男63例,女37例,男女之比约为1.7:1,年龄在8~64岁之间,平均年龄为38.2岁。
1.2 疾病分类耐药青霉素金葡菌所致的多种严重感染16例,溶血性链球菌、肺炎链球菌等所致的急性扁桃体炎28例,军团菌肺炎11例、支原体肺炎30例、其他15例等疾病,红霉素是首选药。
1.3 用药途径红霉素肠溶片,口服,一般感染患者,成人1~2 g/d,分3~4次服用。
军团菌病患者,2~4 g/d,分4次服用。
小儿按体重30~50 mg/(kg•d),分3~4次服用。
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试实验报告：细菌感染与抗生素敏感性测试一、引言细菌感染是临床上常见的疾病之一，严重威胁着人类的健康。
为了有效地治疗细菌感染，选择合适的抗生素至关重要。
抗生素敏感性测试则是帮助医生确定哪种抗生素对感染细菌最有效的重要手段。
本实验旨在研究常见细菌感染的类型以及对多种抗生素的敏感性，为临床治疗提供科学依据。
二、实验材料与方法（一）实验材料1、临床样本：采集自不同患者的感染部位，包括痰液、尿液、血液等。
2、培养基：选用营养琼脂培养基、麦康凯培养基等。
3、抗生素药敏纸片：包括青霉素、头孢菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类等多种常用抗生素。
（二）实验方法1、细菌培养：将采集的临床样本接种于相应的培养基上，置于37℃恒温培养箱中培养 18 24 小时，观察细菌的生长情况。
2、细菌鉴定：通过菌落形态、革兰氏染色、生化反应等方法对培养出的细菌进行鉴定。
3、抗生素敏感性测试：采用纸片扩散法（KB 法）进行。
将鉴定后的细菌均匀涂布于培养基表面，贴上抗生素药敏纸片，然后置于37℃恒温培养箱中培养 18 24 小时，测量药敏纸片周围的抑菌圈直径，根据标准判断细菌对各种抗生素的敏感性。
三、实验结果（一）细菌感染类型在本次实验中，共鉴定出以下几种常见的细菌感染类型：1、金黄色葡萄球菌感染：主要来源于皮肤和软组织感染。
2、大肠埃希菌感染：多见于泌尿系统感染。
3、肺炎克雷伯菌感染：常引起肺部感染。
4、链球菌感染：与呼吸道感染密切相关。
（二）抗生素敏感性结果1、金黄色葡萄球菌对万古霉素高度敏感，抑菌圈直径均大于 20mm。
对青霉素的耐药率较高，超过 80%。
对头孢菌素类抗生素的敏感性存在差异，部分菌株敏感，部分耐药。
2、大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素（如美罗培南）敏感率较高。
对喹诺酮类抗生素（如环丙沙星）的耐药率逐渐上升。
3、肺炎克雷伯菌对头孢他啶等第三代头孢菌素的敏感性有所下降。
对氨基糖苷类抗生素（如庆大霉素）仍保持一定的敏感性。
红霉素软膏微生物限度试验方法的验证
红霉素软膏微生物限度试验方法的验证作者：刘玲薛建国来源：《上海医药》2021年第07期摘要目的：建立红霉素软膏的微生物限度检查方法。
方法：用3个批号的红霉素软膏进行微生物限度试验的验证，确定适合红霉素软膏的微生物限度检查方法。
结果：所采用的方法能有效消除红霉素的抑菌成分，使实验结果能真实反映产品微生物污染的情况。
结论：可采用薄膜过滤法对红霉素软膏进行微生物限度试验。
关键词红霉素软膏微生物限度薄膜过滤法中图分类号：R986； R927.1 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2021）07-0078-03Verification of microbial limit test method for erythromycin ointmentLIU Ling1*， XUE Jianguo2（1. Xinyang Institute for Food and Drug Control，He’nan Xinyang 464000， China； 2. Xinyang Food Supervision Office，He’nan Xinyang 464000， China）ABSTRACT Objective： To establish a method for microbial limit test in erythromycin ointment. Methods： According to the microbial limit standard of the test product， the verification test was conducted with three batches of erythromycin ointment to investigate the test method for determining microbial limit of erythromycin ointment. Results： The method used could effectively remove the bacteriostatic components in erythromycin ointment， so that the experimental results could truly reflect the situation of contaminated bacteria. Conclusion： The microbial limit of erythromycin ointment can be examined by membrane filtration.KEy WORDS erythromycin ointment； microbial limit； membrane filtration红霉素软膏为白色至黄色软膏，为皮肤科用药类非处方药。
亚抑菌浓度鱼腥草素钠及与红霉素联合对表皮葡萄球菌生物被膜的作用
亚抑菌浓度鱼腥草素钠及与红霉素联合对表皮葡萄球菌生物被膜的作用目的：观察亚抑菌浓度（亚-MIC）的鱼腥草素钠及与红霉素联用对表皮葡萄球菌生物被膜的影响。
方法：连续稀释法测定鱼腥草素钠和红霉素对表皮葡萄球菌的MIC；棋盘格法测定鱼腥草素钠和红霉素联用对表皮葡萄球菌悬浮菌的作用；体外构建表皮葡萄球菌生物被膜，XTT递减法评价亚抑菌浓度的鱼腥草素钠及与红霉素联用对表皮葡萄球菌黏附及对生物被膜内细菌代谢的影响；扫描电镜观察亚抑菌浓度下2药单独及联合用药后对表皮葡萄球菌生物被膜形态的影响情况。
结果：鱼腥草素钠、红霉素对表皮葡萄球菌的MIC分别为62.5，7. 812 5 mg·L-1；1/8MIC鱼腥草素钠、1/2MIC红霉素联用对表皮葡萄球菌悬浮菌的作用为协同，亚抑菌浓度的鱼腥草素钠、红霉素以及二者联用对表皮葡萄球菌生物被膜菌黏附和代谢均有抑制作用，对表皮葡萄球菌生物被膜的形态有影响。
结论：亚抑菌浓度的鱼腥草素钠、红霉素对表皮葡萄球菌生物被膜有抑制作用；鱼腥草素钠和红霉素联合用药对表皮葡萄球菌悬浮菌和生物被膜的抑制具有协同作用，在对生物被膜菌代谢的抑制和对生物被膜形态的影响方面效果尤为显著。
标签：表皮葡萄球菌；生物被膜；鱼腥草素钠；红霉素；亚抑菌浓度；药物协同表皮葡萄球菌是寄居在人体皮肤和黏膜的正常菌群，但随着各种侵入性操作、人工假体使用的增多，其引发的生物被膜的相关感染在不断的增加，成为引起医院内感染菌血症的主要致病菌之一，其致病机制主要是附着于植入体内的人工材料表面产生生物被膜（biofilm）。
细菌生物被膜（bacterial biofilm）是附着于隋性或活性实体表面的细菌以及由细菌分泌的含水聚合性基质组成的结构性细菌群落。
细菌形成生物被膜后不仅难以去除，而且其引发的感染常常难以治疗；因此近些年对生物被膜的研究已成为热点[1]。
包被有生物被膜的细菌称为被膜菌，被膜菌无论其形态结构、生理生化特性、致病性还是对环境因子的敏感性等都与浮游细菌有显著的不同，其对抗生素的耐药性比浮游菌增加10～1 000倍[2]，从而导致严重的临床问题，引起许多慢性和难治性感染疾病的反复发作。
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试实验报告：细菌感染与抗生素敏感性测试一、实验背景在医疗领域中，细菌感染是导致疾病的常见原因之一。
为了有效地治疗细菌感染，了解感染细菌的种类以及其对抗生素的敏感性至关重要。
抗生素敏感性测试能够帮助医生选择最有效的治疗药物，提高治疗效果，减少耐药菌的产生。
本次实验旨在对临床样本中分离出的细菌进行感染鉴定，并检测其对抗生素的敏感性。
二、实验目的1、鉴定临床样本中的细菌感染类型。
2、测定细菌对不同抗生素的敏感性。
3、为临床合理使用抗生素提供依据。
三、实验材料与方法（一）实验材料1、临床样本：包括血液、尿液、痰液等。
2、培养基：营养琼脂、血琼脂平板等。
3、抗生素药敏纸片：包括青霉素、头孢菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类等多种常见抗生素。
4、生化鉴定试剂。
（二）实验方法1、细菌培养将临床样本接种于合适的培养基上，置于 37℃恒温培养箱中培养18 24 小时，观察菌落形态。
2、细菌鉴定通过革兰氏染色、生化反应等方法对培养出的细菌进行鉴定。
3、抗生素敏感性测试采用纸片扩散法（KB 法）进行抗生素敏感性测试。
将培养好的细菌均匀涂布于琼脂平板上，贴上抗生素药敏纸片，37℃培养 18 24 小时后，测量抑菌圈直径，根据标准判断细菌对抗生素的敏感性。
四、实验结果（一）细菌鉴定结果从临床样本中共分离出以下几种细菌：1、金黄色葡萄球菌：在血琼脂平板上呈现金黄色、圆形、表面光滑的菌落，革兰氏染色阳性，呈葡萄串状排列。
2、大肠埃希菌：在营养琼脂平板上呈现灰白色、圆形、湿润的菌落，革兰氏染色阴性，短杆菌。
3、肺炎链球菌：在血琼脂平板上呈现灰白色、扁平、周围有草绿色溶血环的菌落，革兰氏染色阳性，呈矛头状排列。
（二）抗生素敏感性测试结果1、金黄色葡萄球菌对苯唑西林、万古霉素敏感，对青霉素耐药。
2、大肠埃希菌对头孢曲松、左氧氟沙星敏感，对氨苄西林耐药。
3、肺炎链球菌对青霉素、头孢噻肟敏感，对红霉素耐药。
五、结果分析与讨论（一）细菌感染类型本次实验从临床样本中分离出的细菌包括革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌）和革兰氏阴性菌（大肠埃希菌）。
表皮葡萄球菌生物被膜内细菌对红霉素敏感性的检测
表皮葡萄球菌生物被膜内细菌对红霉素敏感性的检测中华医院感染学杂志2007年第17卷第8期?923?论着?表皮葡萄球菌生物被膜内细菌对红霉素敏感性的检测贾宁,林茂虎.,徐志凯.,袁云娥,索继江,邢玉斌(1.解放军总医院,北京100853;2.解放军总医院第一附属医院,北京100051;3.第四军医大学,陕西西安710032)摘要:目的为进一步研究表皮葡萄球菌生物被膜的耐药机制提供实验基础,对表皮葡萄球菌浮游菌,膜内重悬浮菌和膜内菌对红霉素的敏感性进行探讨.方法检测表皮葡萄球菌1457和野生株S68浮游菌在100倍MIC红霉素(分别为25~g/ml和320~g/m1)作用下,浮游菌,生物被膜内菌和膜内重悬浮菌的细菌对数减少值,并在透射电镜下观察膜内细菌的变化.结果表皮葡萄球菌1457在100倍MIC红霉素作用4h后,浮游菌和重悬浮菌细菌数对数减少值分别为 5.56士0.11和 5.28士0.08,明显高于膜内菌 1.21士0.13(P<O.05),当作用时间延长到6Oh,膜内菌细菌数对数减少值为1.51士0.1;细菌形成生物被膜后重新悬浮的细菌对抗菌药物的敏感性与浮游菌相似(P>O.05);$68的细菌数对数减少趋势与1457类似;透射电镜结果显示,红霉素作用前被膜内细菌呈圆形,分布较均匀;红霉素作用12h后,被膜内细菌含有膨胀,液化的细胞和细胞碎片,细菌排列较对照组疏松.结论膜内菌对红霉素的耐药性较高,生物被膜能保护细菌逃逸抗菌药物的杀菌作用.关键词:生物被膜;表皮葡萄球菌;抗菌药物敏感性中图分类号:R378.11文献标识码:A文章编号:1005—4529(2007)080923—03 ErythromycinSusceptibility0tstnphytococcnsepidermidisinBiofilmJIANing,LINMao-hu,XUZhi-kai,YUANY un—e,SU0Ji—jiang,XINGY u—bin(*GeneralHospitalofPLA,Beijing100853,China)Abstract:OBJECTIVETogiveexperimentalbasisforfurtherinvestigationonSt口p,lZ0c0cc”sepidermidisbiofilmresistance,weinvestigatedtheerythromycinrepressionoftheplanktonic,resuspendedandbiofilmcells. METHODSlogReductionoftheplanktonic,resuspendedandbiofilmcellsofS.epidermidisstrain1457 andwildisolateS68wastestedunder100MICerythromycin.Thecellsinsidebiofilmwereobservedbytransmissionelectronmicroscope.RESULTSlogReductionoftheplanktonicandresuspendedcellsofS.epidermidis 1457were5.56士0.11and5.28士0.08,respectively,after4hunder100MICerythromycin,whichwashigherthanthatofbiofilmcells(P<O.05).Evenafter60h,thelogreductionofthebiofilmcellswas1.21士0.13(P<0.05).The erythromycinsusceptibilityoftheresuspendedcellwassimilartothatoftheplanktonicones(P>0.05) .ThetendencyofthelogreductionofisolateS68wasthesameasthatofstrain1457.Thecellsofbiofilmwithout erythromycinweresphericalandofevendistributed,buttheswelling,liquefiedcellsandcelldebriswere observedinthebiofilmwitherythromycinafter12h.Thearrangementofcellsinsidebiofilmwitherythromycinwa slooserthanthatwithouterythromycin.CONCLUSIONSTheerythromycinresistanceofbiofilmcellsishigher .Biofilm cangiveprotectionforthebacteriatoavoidthekillingofactionbyantibiotics.Keywords:Biofilm~St口p,lZ0c0cc”sepidermidis;Antibioticsusceptibility表皮葡萄球菌是寄居在人体皮肤和黏膜的正常菌群之一,近年来已成为引发菌血症,术后心肌炎和心内膜炎,骨髓炎,透析性腹膜炎等医院感染的主要致病菌之一[1].生物被膜(biofilm)的形成是表皮葡萄球菌致病性增加的主要原因,抗菌药物治疗常常难以达到预期效果,其引发的感染常常只有移走植人物才能控制.为了进一步研究表皮葡萄球菌生物被膜对红霉素的耐药机制,我们对表皮葡萄球菌浮游菌,膜内重悬浮菌和膜内菌对红霉素的敏感性进行研究.报道如下.1材料与方法收稿日期:2006—10—16;修回日期:2007—01—20基金项目:国家自然科学基金资助(3o3OO296)1.1茵株表皮葡萄球菌1457(产膜,ica+);产膜ChinJNosocomiolV o1.17No.82007表皮葡萄球菌野生株S68.1.2细菌生物被膜的准备表皮葡萄球菌过夜摇动增菌并稀释至光密度为0.2(600nm);取5l接种于已置于B培养基(含蛋白胨1,酵母提取物0.5,葡萄糖0.1,氯化钠0.59/6,磷酸氢二钾0.1)平板上的0.2m聚碳酸酯微孔滤膜上(直径约25mm),35℃孵育48h,滤膜及所生成的生物被膜每隔12h转移到新的平板上.1.3浮游茵抗茵药物敏感实验取表皮葡萄球菌在B培养基中增菌18h,取15ml菌液,加入5mlB培养基新鲜无菌培养液后混匀,分成两份(各10m1),一份加入红霉素(100倍MIC),另一份加入等量无菌蒸馏水,35.C摇动培养,4h内每隔1h取样1.5ml,高速离心,弃上清,PBS(pH7.2)重悬浮洗涤2次后,按比例用PBS系列稀释,并取50肚l进行活菌记数,实验重复3次.计算每个时间点细菌数的对数减少值(记为浮游组).1.4生物被膜内细菌抗茵药物敏感性L3](1)将用上述方法形成的细菌生物被膜,转移至含红霉素的B培养基平板上,4h内每隔1h取样,然后12,24,48h及60h分别取样.将生物被膜样本放入9ml PBS中,高速旋涡震荡5min使细菌分散,按比例稀释,活菌计数,实验重复3次(记为生物被膜组). (2)取培养48h后形成的生物被膜,放入10mlPBS 中,高速旋涡震荡5min,离心重悬浮后,按浮游菌抗菌药物敏感实验方法,比例稀释后活菌记数,实验重复3次(记为悬浮组).(3)绘制浮游,悬浮,生物被膜组抗菌药物作用后(1～4h)细菌对数减少曲线,未加抗菌药物的浮游菌和膜内菌为对照组.1.5透射电镜生物被膜标本用5戊二醛固定12h,用1的四氧化锇染色并洗脱,经过乙醇系列脱水,1乙酸双氧铀一1磷钨酸染色,包埋于Spurr双氧树脂,70℃聚合14h,切片后用醋酸铅染色,用透射电镜(JEM一1200EX,Japan)观察.标本: 48h培养形成生物被膜(零对照,zerocontro1);48h培养形成生物被膜后转至含抗菌药物的B培养基平板上继续培养24h.1.6统计分析采用CHISS(奇思)2004统计软件t检验对相关数据进行统计分析.2结果2.1不同状态下表皮葡萄球菌对红霉素的敏感性2.1.1细菌在滤膜上培养细菌在滤膜上培养48h后形成生物被膜,每个膜单位细菌计数约为(10.1±0.2)logoCFU(=10),由于每个膜单位的最大面积为1cm2,因而细菌密度约为10CFU/cm2.2.1.2对数减少值表皮葡萄球菌1457对红霉素的MIC为0.25ml,在100倍MIC红霉素(25m1)的作用4h后,浮游菌和重悬浮菌细菌数对数减少值分别为5.56±0.1l和5.28±0.08,明显高于膜内菌1.21±0.13(Pd0.05),当作用时间延长到6Oh,膜内菌细菌数对数减少值为1.51±0.1.细菌形成生物被膜后重新悬浮的细菌对抗菌药物的敏感性与浮游菌相似(P>O.05).S68细菌数对数减少趋势与1457类似.2.2透射电镜结果红霉素作用前被膜内细菌呈圆形(葡萄球菌属的形态),在被膜琼脂面,中间层和空气面变化不明显,分布较均匀;红霉素作用12h 后,被膜内细菌含有膨胀,液化的细胞和细胞碎片, 细菌排列较对照组疏松,空气面细菌数较琼脂面少; 红霉素作用24h后,被膜内细菌膨胀,液化和破碎更加严重,排列更为疏松,见图1.无红霉素作用红霉素作用24h后■■上部为被膜空气面}下部为被膜透射电镜结果. 图1表皮葡萄球菌1457生物被膜透射电镜结果3讨论表皮葡萄球菌引发感染难治性除了抗菌药物的选择压力下耐药性增加以外,还在于其吸附于机体黏膜或插管,人工关节等生物医学材料表面,分泌多糖基质,纤维蛋白,脂多糖等多糖复合物,相互粘连并克隆产生的生物被膜.产生生物被膜的表皮葡萄球菌对生物医学材料表面的黏附需要很多因子参与,如表皮葡萄球菌荚膜多糖黏附素,自溶素AtlE,纤维蛋白原结合蛋白和葡萄球菌属表面蛋白等;接下来细菌聚集和生物被膜的形成与染色体~ca 操纵元合成的多糖细胞间黏附因子[4],sarA[5和群体感应系统agr[]的表达有关.细菌黏附,聚集后形成的胞外多糖基质是生物被膜的主要成分.表皮葡萄球菌生物被膜引发的感染呈现慢性,持续性,反复性和难治性的特点.本实验中表皮葡萄球菌1457的最低抑菌浓度为0.25~g/ml,表皮葡萄球菌1457的浮游菌,重悬浮菌及膜内菌与红霉素(100倍MIC=25g/m1)作用4h后,浮游菌和重悬浮菌细菌数对数减少值高中华医院感染学杂志2007年第17卷第8期?925? 于膜内菌,即使作用时间延长到60h,膜内菌细菌数对数减少值仅为1.51±0.1,证实膜内菌对红霉素的耐药性较高,但当膜内菌脱离被膜后(重新悬浮),其对红霉素的敏感性与浮游菌相似(P>O.05),是可恢复的;表皮葡萄球菌1457膜内菌的这种特性与野生株$68相似,类似的趋势在铜绿假单胞菌中也有报道[7].透射电镜结果显示,红霉素作用前被膜内细菌呈圆形,在被膜琼脂面,中间层和空气面变化不明显,分布较均匀;在100倍MIC红霉素的作用下,生物被膜内细菌排列较对照组疏松,数量有明显地减少,提示红霉素可渗透人生物被膜且对细菌有一定的杀伤作用,但不能完全杀死膜内细菌,可见生物被膜能保护细菌逃逸抗菌药物的杀菌作用,同时也说明所使用的生物被膜培养模型可捕捉到膜内耐药细菌,其特点是可同时大量制作,易于转移和收获.参考文献:[1]V uongC,OttoM.Constructionandcharacterizationofanagr deletionmutantofs￡口声0c0cc”sepidermidis[J].InfectImmun,2002,68(3):1048—1053.[2]RodneyMD,CostertonJW.Biofilms:survivalmechanisms ofclinicallyrelevantmicroorganismsEJ].ClinMicrobiolRev,2002,15(2):167-193.[3]AnderlJN,FranklinMJ,StewartPS.Roleofantibioticpen—etrationlimitationinKlebsiellapneumonlaebiofilmresistance toampicillinandcipronoxacin[J].AntimicrobAgentsChe—mother,2000,44(7):1818-1824.[4]张青,雷呈祥,赵旭.表皮葡萄球菌生物膜形成分子机制的研究进展EJ].微生物学报,2003,43(5):681—685.[5]TormoMA,MartiM,V alleJ,eta1.SarAIsanessentialpositiveregulatorofS￡口声Z0c0ccsepidermidisbiofilmde—velopmentEJ].JBacteriol,2005,187(7){2348—2356.[6]V uongC,GerkeC,OttoM.eta1.Quorum—sensingcontrol ofbiofilmfactorsinSt口ph,tococcHsepidermidisEJ3.InfectDis,2003,188(7):706—718.[7]WaltersMCⅢ,RoeF,BugnicourtA,eta1.Contributionsof antibioticpenetration,oxygenlimitationandlowmetabolic activitytotoleranceofPseudomonasaeruglnosabiofilmsto ciprofloxacinandtobramyein[J].AntimicrobAgentsChe—mother,2003,47(1):317—323.口腔综合治疗台水路的清洁与消毒邢军,刘旭,李丽(哈尔滨医科大学附属第二医院,黑龙江哈尔滨150086)关键词:综合治疗台;水路感染;清洁;消毒中图分类号:R187.3文献标识码:B文章编号:1005—4529(2007)08—0925—01 目前医院感染已引起临床工作者的普遍注意,口腔科疾病的诊疗操作在医院感染的预防与控制中占有重要地位自卫生部《口腔诊疗器械消毒技术操作规范》颁布实施后,各级口腔机构及医务工作者加强了感染控制工作.但也存在着潜在的感染因素,如综合治疗台的水路感染等,报道如下.1导致水路感染的因素口腔手机属于具有空腔的精密器械,内部有精密的复杂机械结构,并且装备了直径<11Tim的细长管路.在工作中,口腔手机高速旋转并不断喷水冷却,在停机过程中,机头内风轮的余转产生局部负压,将四周的污染液体和气体回吸进机头及内部管路.高,低速手机管路的冷却水在停机过程中也会产生回吸现象,使冷却水路发生污染.同时超声头,水/气枪在停止转动时也产生负压导致回吸,同样会出现上述问题.而水路管理狭窄,水的滞留,水回吸瓣膜等因素无法避免生物细菌膜在管道产生.2对策收稿日期:2007—05—202.1水路的清洁与消毒(独立水源式)上班前:容器注蒸馏水,分别冲洗各连接水管≥30S;治疗前,后及时冲洗各连接水管30S.每日班后:摘下手机等,分别冲洗各连接水管≥2min,除净余水,排空水管内水分,保持水路干燥待用.2.2水路的周消毒程序(独立水源式)消毒前摘下所有的手机,马达,三用枪等;完成每日班后操作,用500mg/L含氯消毒液消毒容器及各连接水管冲洗30S,关电源,保持10~30min后,除净剩余的消毒液,排空水管内的水分;用蒸馏水反复冲洗容器及各连接水管,直至排空水管内的水分, 保持水路干燥待用.2.3下水管道的清洁与消毒每日班前及患者使用之间,抽吸过滤水冲吸唾管道及水池下水道,保持清洁无异味,遇传染病污染时,用”班后清洁消毒”方法.每日严格执行班后清洁并冲洗水池下水道,抽吸式冲洗吸唾管道,抽吸含氯消毒液消毒吸唾管道及水池下水道,关闭电源,保持30min,再打开电源,过滤水冲洗吸唾管道,水池下水道,空吸吸唾管道30S,保持管道干燥.。
检验科抗生素敏感性常见检测与分析方法
检验科抗生素敏感性常见检测与分析方法抗生素在医学领域中起着至关重要的作用，它可以有效地抑制和杀灭细菌，从而治疗各种感染性疾病。
然而，随着抗生素的广泛应用，细菌对抗生素的耐药性也在不断增加，因此对抗生素敏感性的检测变得至关重要。
本文将介绍检验科抗生素敏感性的常见检测与分析方法。
一、药敏试验药敏试验是最常用的抗生素敏感性检测方法之一，通过对病原菌在不同抗生素浓度下的生长情况进行观察，来判断该菌株对抗生素的敏感性。
常见的药敏试验包括纸片扩散法、微量稀释法和E测试等。
纸片扩散法是一种简单、快速的药敏试验方法，通过将含有不同抗生素的纸片覆盖在含有病原菌的琼脂平板上，观察形成的抑菌圈直径大小来判断病原菌对抗生素的敏感性。
微量稀释法则是通过在微孔板中逐渐稀释抗生素和病原菌悬液，观察最低抑菌浓度来判断病原菌对抗生素的敏感性。
而E测试则是一种半定量的药敏试验方法，通过在琼脂培养基上贴有梯度浓度的试纸，根据试纸上最低抑菌浓度来确定病原菌对抗生素的敏感性。
二、分子生物学方法除了传统的药敏试验方法外，分子生物学方法也被广泛应用于抗生素敏感性的检测与分析。
其中，聚合酶链式反应（PCR）和测序技术是常见的分子生物学方法。
PCR技术可以快速检测病原菌中存在的抗生素耐药基因，从而帮助诊断医生选择更合适的抗生素治疗。
通过PCR扩增相关基因片段，可以快速、准确地判断病原菌对某种抗生素的敏感性。
而测序技术则可以对PCR扩增的基因片段进行测序分析，从而确定病原菌的抗生素敏感性和耐药性基因型。
三、流式细胞术流式细胞术是一种高通量、高灵敏度的细胞检测技术，也被应用于抗生素敏感性的检测与分析。
通过在流式细胞仪上检测病原菌的细胞膜完整性、细胞形态和代谢活性等指标，可以快速、准确地判断病原菌对抗生素的敏感性。
总结起来，药敏试验、分子生物学方法和流式细胞术是检验科抗生素敏感性常见的检测与分析方法。
这些方法不仅可以帮助医生选择更合适的抗生素治疗方案，还可以指导临床合理使用抗生素，减少耐药菌株的产生，为抗生素治疗提供重要参考依据。
葡萄球菌属红霉素诱导克林霉素的耐药性检测
霉素纸片 的抑菌环在靠近红霉素纸 片一侧 出现平截 现象 ， 即克 林霉素纸片的抑菌环看似一个 大写 的 Ｄ字形 ， 或克林霉素抑 菌 圈内有雾 状生长时 ， 即为 Ｄ试验 阳性 ， 提示存在诱 导克林霉 素
■ 回越国嘧国
葡萄球菌属红霉素诱导克林霉素的耐药性检 测
曹二 龙
（ 邵阳医学高等 专科学校 ， 湖南 邵 阳 ４ ２ ２ ０ ０ ０ ）
【 摘要 】目的
检测 葡萄球菌临床 分 离株红霉素诱导克林
１ － ４ 药敏试验
将 待测 菌液浓度调为 ０ ． ５麦氏单位 ， 均匀
霉素耐药的发 生率。方法 收集我院 ２ ０ １ １ 年 ６月一１ ２月临床 标本 分 离的 １ ７ ９株 葡萄球 菌， 采 用 Ｍ— Ｈ 琼脂稀释 法进行 药敏
涂布于 ４ ｍ ｍ厚度的 Ｍ — Ｈ平皿上 ， 距离红霉素纸片边缘 １ ５ ｍ ｍ～ ２ ６ ｍｍ处放 置克林霉素纸片 ， ３ ５℃孵 育过夜判读结果 。当克林
试验 ，检测 葡萄球 茵属 红霉素诱 导克林霉 素的耐药性 。结果 对红霉素和 克林霉 素 同时敏 感（ ２ ６ ． ８ ％） ， 同时耐 药（ ２ ６ ． ８ ％） ， 红 霉素耐 药克 林霉素敏 感 （ ３ ４ ． ６ ％） ，红霉 素敏 感克 林霉素 耐 药
２ 结 果
葡萄球菌广泛分布在 自然界 ，感染也呈现上升 的趋势 ， 己
经成为医院感染和社区获得性感染的重要 病原 菌。 根据有无凝
２ ． １ 葡萄球菌对红霉素和克林霉素不同的耐药表型见表 １ 。
表 １ 葡萄球菌对红霉素和克林霉素不 同的耐药表型
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论 著 ・
表 皮 葡 萄 球 菌 生 物 被 膜 内细 菌 对 红霉 素 敏感 性 的检测
贾 宁 ，林 茂虎。 徐 志 凯。 ， ，袁 云娥 ，索继 江 ，邢 玉斌
（ ． 放 军 总 医 院 ， 京 １ ０ ５ ； ． 放 军 总 医 院第 一 附 属 医 院 ， 京 １ ０ ５ ；３第 四军 医大 学 ，陕 西 西 安 ７ ０ ３ ） １解 北 ０８３ ２解 北 ００ １ ． １０ ２
１ 材 料 与原 因 ， 菌 药 物治 疗 常常 抗
收 稿 日期 ：２ ０—０１ ０ ６１—６； 修 回 日期 ： ０ ７０ —０ ２ ０ —１２
基金项 目： 国家自然科学基金资助（ｏＯ２６ ３３Ｏ９）
１ １ 茵株 ．
表皮 葡 萄球菌 １ ５ （ ４ ７ 产膜 ， ａ ； ｉ ＋） 产膜 ｃ
ｒ ｓｓａ ｃ ，ｗｅ ｎ ｅ ｔ ａ ｅ ｔ ｅ ｒ ｔ ｒ ｍｙ ｉ ｒ ｐ ｅ ｓｏ ｏ ｔ ｅ ｌ ｎ ｔ ｎ ｃ ｒ ｓ ｓ ｅ ｄ ｄ ｎ ｂ ｏ ｉ ｅ ｉｔ ｎ ｅ ｉ ｖ ｓ ｉ ｔ ｄ ｈ ｅ ｙ ｈ ｏ ｃｎ ｅ ｒ ｓ ｉｎ ｆ ｈ ｐ ａ ｋ ｏ ｉ ， ｅ ｕ ｐ ｎ ｅ ａ ｄ ｉｆｌ ｇ ｍ ｃ ｌ ． ｅｌ ｓ ＭＥ ＴＨＯＤＳ ｌｇ Ｒｅ ｕ ｔ ｎ ｏ ｈ ｌｎ ｔ ｎ ｃ ｅ ｕ ｐ ｎ ｅ ｎ ｉ ｆ ｍ ｅ ｌ ｏ ． ｅ ｄ ｒ ｄ ｓ ｓ ｒ ｉ ４ ７ ａ ｄ ｗｉ ｏ ｄ ｃ ｉ ｆｔ ｅ ｐ ａ ｋ ｏ ｉ ，ｒ ｓ ｓ ｅ ｄ ｄ ａ ｄ ｂ ｏ ｉ ｃ ｌ ｆＳ ｐｉ ｅ ｍｉ ｉ ｔ ａｎ １ ５ ｎ ｌ ｏ ｌ ｓ ｄ
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表 皮葡 萄球 菌是 寄居 在人 体皮肤 和 黏膜 的正 常 菌群 之一 ， 近年来 已成 为 引发菌 血症 、 术后 心肌 炎 和 心 内膜 炎 、 髓炎 、 析性腹 膜 炎等 医院感 染 的主要 骨 透
致 病 菌之一 ［ 。生 物被 膜 （ ｉｆ ｍ） １ ］ ｂｏｉ 的形成 是表皮 葡 ｌ
摘 要 ：目的
为 进 一 步 研 究 表 皮 葡 萄 球 菌 生 物 被 膜 的耐 药 机 制 提 供 实 验基 础 ， 表 皮 葡 萄 球 菌 浮 游 菌 、 内重 悬 对 膜
浮菌 和 膜 内菌 对 红 霉 素 的敏 感 性 进 行 探 讨 。方 法 检测 表皮 葡 萄 球 菌 １ ５ 和 野 生 株 Ｓ６ ４７ ８浮游 菌 在 １ ０ Ｍ Ｉ ０倍 Ｃ 红霉素 （ 分别 为 ２ ｇ ｍｌ ３ ０￣ ／ ） 用 下 ， 游 菌 、 物 被 膜 内 菌 和 膜 内重 悬 浮 菌 的 细 菌 对 数 减 少 值 ， 在 ５￣ ／ 和 ２ ｇ ｍ１作 浮 生 并 透 射 电镜 下 观 察 膜 内细 菌 的变 化 。 结 果 表 皮 葡萄 球 菌 １ ５ ４ ７在 １ ０ ＭＩ 红 霉 素作 用 ４ｈ后 ， 游 菌 和 重 悬 浮 ０倍 Ｃ 浮 菌 细 菌 数 对 数 减 少 值 分 别 为 ５ ５ 士０ １ 和 ５２ 士０ ０ ， 显 高 于 膜 内菌 １ ２ 士０ １ （ Ｏ ０ ） 当作 用 时 间 延 ．６ ．１ ．８ ．８明 ． １ ． ３ Ｐ＜ ． ５ ， 长 到 ６ ， 内菌 细 菌 数 对 数 减 少 值 为 １ ５ 士０ １细 菌形 成 生 物 被 膜 后 重 新 悬 浮 的 细 菌 对 抗 菌 药 物 的敏 感 性 与 Ｏｈ 膜 ．１ ． ； 浮游菌相似（ Ｐ＞Ｏ ０ ）￥ ８的细 菌数 对 数 减 少 趋 势 与 １ ５ 类 似 ； 射 电镜 结 果 显 示 ， 霉 素作 用 前 被 膜 内 细 菌 ． ５ ；６ ４７ 透 红 呈 圆 形 ， 布 较 均 匀 ； 霉 素 作 用 １ 分 红 ２ｈ后 ， 膜 内 细 菌 含 有 膨 胀 、 化 的 细 胞 和 细 胞 碎 片 ， 菌 排 列 较 对 照 组 疏 被 液 细 松 。 结论 膜 内 菌对 红 霉 素 的耐 药 性 较 高 ， 物被 膜 能保 护 细 菌 逃逸 抗 菌 药 物 的 杀 菌作 用 。 生
难 以达到 预期 效果 ， 引发 的 感染 常 常 只有 移 走植 其
人物 才能 控制 。为 了进 一步研 究表 皮葡 萄球 菌 生 物被 膜对 红霉 素 的耐 药 机制 ， 我们 对 表 皮 葡 萄 球 菌 浮游 菌 、 内重 悬 浮菌 和膜 内菌对 红霉 素 的 敏 感性 膜
进 行研 究 。报道 如 下 。
文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ５４ ２ （０ ７ ０ ９ ３０ １ ０ —５ ９２ ０ ）８０ ２ —３
关 键 词 ： 物 被 膜 ； 皮 葡 萄球 菌 ；抗 菌 药 物 敏 感 性 生 表
中 图 分类 号 ：Ｒ ７． １ ３８１
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