高效液相色谱法测定门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量(精)
超高效液相色谱法测定门冬胰岛素含量
梅 丽，栗凤娟，杨 桦
（江苏万邦医药科技有限公司，江苏 徐州 ２２１００４）
摘要：目的 建立测定门冬胰岛素含量的超高效液相色谱法。方法 色谱柱为 Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＧＩＳＳＣ１８柱（１００ｍｍ×２．１ｍｍ，１．９μｍ）；流动 相 Ａ为 ０．２ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＳＯ４溶液 牗加 ８５％磷酸溶液 ２．７ｍＬ，用乙醇胺调 ｐＨ至 ３．６牘－乙腈（７２∶１８，Ｖ／Ｖ），流动相 Ｂ为 ５０％乙腈，梯度
ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅｆｌｏｗ ｒａｔｅｗａｓ０．２５ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ２１４ｎｍ，ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ４０℃，
ａｎｄｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｉｚｅｗａｓ２μＬ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅｉｎｓｕｌｉｎａｓｐａｒｔｓｈｏｗｅｄａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０．０５－１．３０ｇ／Ｌ．ＲＳＤｓｏｆ
关键词：超高效液相色谱法；门冬胰岛素；含量测定
中图分类号：Ｒ９２７．２；Ｒ９７７．１＋２
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６－４９３１牗２０１９牘０４－００３１－０２
ＣｏｎｔｅｎｔＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆＩｎｓｕｌｉｎ ＡｓｐａｒｔｂｙＵＰＬＣ
ＭＥＩＬｉ，ＬＩＦｅｎｇｊｕａｎ，ＹＡＮＧ Ｈｕａ
（ＪｉａｎｇｓｕＷａｎｂａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｘｕｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ ２２１００４）
取门冬胰岛素对照品约 １０ｍｇ，精密称定，置 １０ｍＬ 容量瓶中，加 ０．０１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶解并定容，制成质量浓 度为 １．０ｇ／Ｌ的溶液，室温放置，使 Ｂ３Ａｓｐ门冬胰岛素和 Ａ２１Ａｓｐ门冬胰岛素的含量不低于 １％，作为系统适用性 溶液。取门冬胰岛素对照品 １０ｍｇ，精密称定，置 １０ｍＬ容 量瓶中，用 ０．０１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶解并定容，制成每 １ｍＬ 含 １．０ｍｇ（约 １０Ｕ）的对照品溶液。取样品约 １０ｍｇ，精密 称定，置 １０ｍＬ容量瓶中，用 ０．０１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶解并定 容，摇匀，即得供试品溶液。以 ０．０１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液作 为阴性对照品溶液。 ２．３ 方法学考察
高效液相色谱法测定盐酸精氨酸注射液的含量
高效液相色谱法测定盐酸精氨酸注射液的含量
王荣梅
【期刊名称】《中国生化药物杂志》
【年(卷),期】2003(024)006
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定盐酸精氨酸注射液含量的方法.方法采用氨基键合硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(60∶40,用磷酸调pH 3.5)为流动相,流速1.0 ml/min;检测波长205 nm.结果盐酸精氨酸的线性范围为32～320 μg/ml,r=0.999 8;平均回收率为99.72%,RSD为0.51%.结论此法简便、快速、准确,适用于盐酸精氨酸注射液的含量测定.
【总页数】2页(P296-297)
【作者】王荣梅
【作者单位】山东大学,第二医院,山东,济南,250033
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定盐酸精氨酸葡萄糖注射液中盐酸精氨酸的含量 [J], 屈爱存;于盛茂;袁继民
2.高效液相色谱法测定盐酸精氨酸葡萄糖注射液中盐酸精氨酸的含量 [J], 屈爱存;于盛茂;袁继民
3.高效液相色谱法测定注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸含量 [J], 王启光
4.高效液相色谱法测定人纤维蛋白原中甘氨酸、盐酸精氨酸含量 [J], 陈通威;高红
琴;崔素梅;张惠兰;王宗刚
5.柱前衍生反相高效液相色谱法测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量 [J], 尉小平;冉铁成;王坚;赵家宏
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定复方半胱氨酸注射液中半胱氨酸的含量
97. 54
060722
98. 62
060808
100. 61
3 讨论 311 半胱氨酸的测定 ,国内外药典有采用碘滴定法 , 但由于本复方制剂中另一主药容易被氧化而干扰测 定 ,且该方法操作烦琐 ,准确性低 。而文献报道的柱前 衍生法 、流动注射荧光法 、单扫描极谱法等也存在局限 而无法实现 。经查阅国内外文献 ,作者并未发现采用 高效液相色谱法对其直接测定 。本实验组进行了很好 的尝试 ,结果发现 :半胱氨酸在 220 nm 处有末端吸收 。 312 验发现在 220 nm 波长下 ,空白溶液中的很多辅 料均有吸收 ,特别是本制剂中的抗氧剂 - 亚硫酸氢钠 , 严重干扰了半胱氨酸的准确测定 ,通过调整流动相条 件 ,并加入离子对试剂 (四丁基溴化铵 )后 ,得到了很 好的结果 。经过方法学考察表明 ,本方法快速 ,简便 , 重复性高 ,可用于复方半胱氨酸注射液中半胱氨酸的 含量测定 。
关键词 半胱氨酸 ,高效液相色谱法 ,含量测定 中图分类号 : R927. 2 文献标识码 : A 文章编号 : 100625687 (2008) 0220013203
D eterm ina tion of cyste ine in com plex prescr iption in jection by HPLC J in W enxian1 , Yan Hui2 , L iu Heng2 ,W ang Chunlong1, 2 , Zhao Guangrong1 (1. School of Chem ical Engineering and technology, Tianjin University, Tianjin 300072; 2. Tianjin Institute of Pharmaceutical Re2 search, Tianjin 300193)
左旋门冬氨酸_鸟氨酸治疗肝功能损害降低胆红素的临床研究_周雨峡
VOL.1.No.12.200810222000。
检测波长：210nm 流速：1.0ml/min 。
柱温：20℃2 测定方法取装量差异项下的内容物，混匀，精密称定，研细，精密称取本品细粉适量(约相当于阿奇霉素150mg)置100m l 量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液，量取供试品溶液20μl 注入液相色谱仪。
另取阿奇霉素对照品约75mg ，精密称定，置50ml 量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，同法测定。
按外标法以峰面积计算，即得。
参考文献[1] 周永娣,陈琪.高效液相色谱法测定阿奇霉素的含量. 海峡药学,2005,17(2):69-71.[2] 钱桂英.阿奇霉素片的HPLC 测定.中国医药工业杂志,2005,36(4):234-235.[3] 黄健浩.高效液相色谱法测定阿奇霉素颗粒的含量.海峡药学,2006,18(2 ):73-74.[4] 高燕霞,张菁,张哲峰,等.阿奇霉素的两种含量测定方法比较.中国抗生素杂志,2000,25(5):388-389.[5] 叶兰凤.高效液相色谱法分析阿奇霉素的含量.海峡药学,2004,16 (4 ):64-66.[6] 李战.HPLC 测定盐酸阿奇霉素及其有关物质.中国药科大学学报,2006,37 (1):91-92.[7] 纪标等.HPLC 法测定注射用门冬氨酸阿奇霉素的含量和有关物质.中国抗生素杂志,2005年6月第30卷第6期:347页.[8] 黄蓓琳,吴涓,王国平.高效液相色谱法测定阿奇霉素普通片和分散片含量.中国医院药学杂志,2005,25(3 ):249-251.[9] 容永欢.高效液相色谱法测定阿奇霉素在其分散片中的含量.中南药学,2005,3(2 ):92-95.【摘要】目的：探讨左旋门冬氨酸-鸟氨酸在原发及继发性肝功能损害性疾病中的作用及其意义。
方法：将120例存在肝功能损害性疾病的患者作为研究对象，其中肝炎后肝硬化病例28例；胆管炎(或)和胆石症/胆管炎32例，重症胰腺炎18例，多器官功能衰竭4例，恶性肿瘤放化疗中38例，随机分成两组，治疗组在常规综合治疗的基础上将左旋门冬氨酸-鸟氨酸40ml 加入10%葡萄糖液250ml 中静脉滴注，1次/d ，14d 为1疗程；对照组，仅行常规护肝治疗。
HPLC-RID法测定门冬氨酸洛美沙星葡萄糖注射液中葡萄糖
2020年第8期分析测试门冬氨酸洛美沙星主要用于治疗敏感细菌引起的呼吸道、泌尿生殖道、肠道等组织感染以及中耳炎和鼻窦炎等疾病的治疗[1]。
相应的制剂有门冬氨酸洛美沙星注射液(小针剂)和门冬氨酸洛美沙星葡萄糖注射液(大输液),大输液的执行标准有A公司的国家食品药品监督管理局标准YBH30102005和B公司的国家食品药品监督管理局标准YBH15122004[2,3]。
门冬氨酸洛美沙星葡萄糖注射液含有5%的葡萄糖和一定量的门冬氨酸洛美沙星。
目前,注射液中葡萄糖含量的测定方法主要有3种:滴定法、旋光法和示差折光检测法等[4-11],上述两个标准均采用滴定法测定大输液中葡萄糖的含量,前期研究发现滴定法测定门冬氨酸洛美沙星葡萄糖中葡萄糖含量比企业实际投料计算结果偏高1%~2%———按法定标准采用滴定法测定葡萄糖含量,空白试验和阴性样品试验分别消耗Na2S2O3滴定液25.05mL和24.91mL,相差0.14mL,说明门冬氨酸洛美沙星也会消耗碘滴定液,方法专属性不高。
另外,因葡萄糖具有旋光性,其含量测定还可以采用旋光法;但门冬氨酸洛美沙星原料也具有旋光性,即采用旋光法测定葡萄糖含量同样会存在干扰,专属性也差。
高效液相色谱示差折光检测法(HPLC-RID)采陈希,鄢雷娜,吴燕红,刘绪平,段和祥,刘卫德(江西省药品检验检测研究院,江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心,江西南昌330029)摘要:目的建立门冬氨酸洛美沙星葡萄糖注射液中葡萄糖含量的高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RID)。
方法采用高效液相-示差折光检测法(HPLC-RID),色谱柱:C a r b o mix H-NP10:8%(7.8mm×300mm,10μm),以水为流动相,流速:0.5m L·min-1,示差折光检测器检测池温度50℃,柱温55℃,进样量10μL。
结果葡萄糖在5~250μg的线性范围内,回归方程为y=16810.99749x+3021.25310,r2=0.9999。
门冬氨酸鸟氨酸针持续微量泵注入治疗肝性脑病疗效观察
１ ６ ６ ０・
现代 中西 医 结 合 杂 志 Ｍ ｏ ｄ ｅ ｒ ｎ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｉ ｎ ｔ ｅ ｇ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ Ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ａ ｎ ｄ Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ２ ０ １ ３ Ｍ ａ ｙ ， ２ ２ （ １ ５ ）
Hale Waihona Puke 氯化钠注射 液 ４ ０ ｍＬ微 量 泵 注 入 ， ６ ｈ １次 ； 对 照 组 应 用 门 冬
氨酸鸟氨酸针 １ ０ ｇ ＋５ ％ 葡萄糖 注射 液 ２ ５ ０ ｍ Ｌ静 脉 滴 注 ， 每
天 ２次 。
１ ． ３ 观察指标
患者 在治疗 前 、 治疗 后 １ 周 分别 检测血 氨 、
１ 临床 资 料
注： ① 与 治疗 前 比较 ， Ｐ＜ ０ ． ０ ５； ② 与对 照组 比较 ， Ｐ＜ ０ ． ０ ５ 。
复正常时间较对照组短（ ｔ ＝１ ． ９ ， Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。
３ 讨 论
１ ． １ 一 般 资料 选 择 ２ ０ １ １年 ３月 一 ２ ０ ｌ ２年 １ １月 在 我 院 肝 科 住 院肝 性 脑 病 患 者 ７ １例 ， 随 机 分 为 ２组 ： 治 疗组 ３ ６例 ， 男 ３ ０例 ， 女 ６例 ； 年龄 （ ４ ３ ． ２± ２ ． ６ ） 岁； 乙肝 肝 硬 化 ３ ２例 ， 酒 精
入治疗肝性脑病疗效较好 ， 值 得 临床 推 广 应 用 。
［ 关键词 ］ 肝性脑病 ； 门冬 氨 酸 鸟氨 酸针 ； 血 氨 ［ 中 图分 类 号 】 Ｒ ７ ４ ７ ． ９ ［ 文献标识码 ］ Ｂ ［ 文章 编 号 ］ １ ０ ０ ８— ８ ８ ４ ９ （ ２ ０ １ ３ ） １ ５—１ ６ ６ ０一 Ｏ ２ 表 １ ２组 治 疗 前 后 血 氨 值 、 生化 指 标 比较 （ ± ｓ ）
复方氨基酸注射液20AA
复方氨基酸注射液（20AA）Fufang Anjisuan Zhusheye（20AA）Compound Amino Acid Injection（20AA）本品为20种氨基酸配制而成的灭菌水溶液，含各种氨基酸均应为标示量的90.0%～110.0%。
【处方】异亮氨酸(C6H13NO2) 8.80g亮氨酸(C6H13NO2) 13.60g醋酸赖氨酸(C6H14N2O2·C2H4O2) 10.60g甲硫氨酸(C5H11NO2S) 1.20g苯丙氨酸(C9H11NO2) 1.60g苏氨酸(C4H9NO3) 4.60g色氨酸(C11H12N2O2) 1.50g缬氨酸(C5H11NO2) 10.60g精氨酸(C6H14N4O2) 8.80g组氨酸（C6H9N3O2） 4.70g丙氨酸（C3H7NO2）8.30g甘氨酸(C2H5NO2) 6.30g门冬酰胺（C4H8N2O3·H2O）0.55g门冬氨酸（C4H7NO4） 2.50g谷氨酸（C5H9NO4） 5.70g盐酸鸟氨酸（C5H12N2O2·HCl） 1.66g脯氨酸(C5H9NO2) 7.10g丝氨酸(C3H7NO3) 3.70g乙酰酪氨酸(C11H13NO4) 0.86g乙酰半胱氨酸(C5H9NO3S) 0.80g依地酸二钠（C10H14Na2O8·2H2O）0.05g注射用水适量总量1000ml 【性状】本品为无色至微黄色的澄明液体。
【鉴别】（1）取本品1ml,加水2ml,摇匀，加茚三酮约3mg,溶液显蓝紫色。
（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液中各种氨基酸峰的保留时间应与对照品溶液中各相应的对照品峰的保留时间一致。
【检查】pH值应为5.5～6.5（中国药典2010年二部附录ⅥH）。
渗透压摩尔浓度取本品，依法检查（中国药典2010年二部附录ⅨC），渗透压摩尔浓度应为750～1050mOsmol/kg。
高效液相色谱法检测门冬氨酸钾镁葡萄糖注射液中5-羟甲糠醛的含量
高效液相色谱法检测门冬氨酸钾镁葡萄糖注射液中5-羟甲糠
醛的含量
周晖;王东凯;邢俊家
【期刊名称】《中国医科大学学报》
【年(卷),期】2006(035)001
【摘要】目的:检测门冬氨酸钾镁葡萄糖注射液中5-羟甲糠醛的含量,并对其色谱条件进行筛选.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱采用C18不锈钢柱(4.6
mm×200mm),柱温45℃,检测波长为284 nm,流动相为甲醇:0.2%磷酸溶液(25:75).结果:5-羟甲糠醛的线性范围为1～25μg/ml,平均回收率为97.89%,相对标准偏差(RSD)为0.52%.结论:此方法简便准确,系统适用性、稳定性、线性均好.【总页数】3页(P82-83,86)
【作者】周晖;王东凯;邢俊家
【作者单位】中国医科大学附属第一医院药剂科,辽宁,沈阳,110001;沈阳药科大学药学院;中国医科大学附属第一医院药剂科,辽宁,沈阳,110001
【正文语种】中文
【中图分类】R917
【相关文献】
1.两种方法测定奥拉西坦葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量的比较 [J], 苏彦文;张凤荣;苏彦斌
2.高效液相色谱法测定莪术油葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量 [J], 陈勇;蒋慧莲;
唐登峰;陈碧莲;郑成
3.高效液相色谱法测定替硝唑葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量 [J], 曾令高
4.灭菌后处理对葡萄糖注射液中5—羟甲基呋喃糠醛含量的影响 [J], 马良
5.高效液相色谱法测定注射用奥沙利铂5％葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量[J], 陈学文; 王宁; 徐立伽
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
高效液相色谱法测定门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量 缪宁梅1 ,马 婕 2 (1.江苏省药品检验所,江苏南京210008;2.中国药科大学,江苏南京210009 摘 要:目的建立高效液相色谱法测定门冬氨酸鸟氨酸注射液含量的方法。方法采用氨基键合硅胶色谱柱(4.6mm 250mm,5 m;以乙腈 0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液(50 50为流动相,流速为1.0mL/min;检测波长为200nm 。结果门冬氨酸与鸟氨酸都在125~2500 g/mL 浓度范围内有良好的线性关系(r =0.9999,两者的平均回收率分别为99.92%与100.25%,R SD 分别为0.34%与0.70%。结论此法简便、快速、准确,适用于门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量测定。
关键词:门冬氨酸;鸟氨酸;含量测定;高效液相色谱法 中图分类号:R977.4;R927.2 文献标识码:A 文章编号:1005 1678(200701 0052 02 Assay of ornitbinaspaetant injection by HPLC MIAO Ning mei 1,MA Jie 2 (1.Jiangsu Institute f o r Drug Control,Nanjing 210008,China;2.China Pharmaceutical University ,Nan jing 210009,China
Abstract:Purpose To establish an HPLC method for the assay of ornitbinaspaetant injection.Methods The assay was performed on a Kromasil NH 2column (4.6mm 250mm,5 m.The mobile phase was composed of acetonitrile 0.05mol/L KH 2PO 4(50 50.The flow rate was 1.0mL/min.The detection wavelength was 200nm.Results Both aspartate and ornithine showed good linear (r =0.9999in the range of 125 2500 g/mL.The average recovery was 99.92%and 100.25%respecttively.Conclusion The method might be simple,rapid and accurate.It is suitable for the assay of ornitbinaspaetant injection.
Key words:aspartate;ornithine;assay;HPLC 收稿日期:2006 04 12;修回日期:2006 05 29 作者简介:缪宁梅(1973 ,女,江苏南京人,主管药师,主要从事药品检验工作。 门冬氨酸鸟氨酸注射液是我国首个用于临床的具有护肝、解毒、能量三效合一的新药,其主要治疗成分是门冬氨酸和鸟氨酸,临床用于急、慢性肝病的治疗,包括肝硬化、脂肪肝及肝炎所引起的血氨升高,对肝性脑病尤其有效[1]。本文参照有关文献[2 3]采用高效液相色谱(HPLC法,直接测定门冬氨酸鸟氨酸注射液中门冬氨酸与鸟氨酸的含量,方法简便、快速、灵敏度高、重现性好。
1 材 料 门冬氨酸对照品,中国药品生物制品检定所,批号:140691 200401;盐酸鸟氨酸对照品,Merck 公司,批号:K29829706141;门冬氨酸鸟氨酸注射液,规格:10mL 5g,南京某制药有限公司,批号:050801、
050802、050803。 HP1100HPLC 仪(包括二元输液泵、自动进样 器、柱温箱、DAD 检测器,美国惠普公司。2 方法与结果 2.1 色谱条件的选择 2.1.1 检测波长的确定 取门冬氨酸与盐酸鸟氨酸对照品适量,加50%磷酸溶液1滴,加50%乙腈溶液溶解并稀释分别制成每1mL 中约含门冬氨酸1mg 和鸟氨酸1mg 的溶液,DAD 检测器全波长范围内进行扫描,门冬氨酸与鸟氨酸均在 200~210nm 波长范围内有吸收,属末端吸收。同时用200,204,210nm 进行检测,基线噪音基本相同,但200nm 的响应值最大,故选择200nm 作为测定波长。
2.1.2 色谱柱和流动相的选择 经反复试验,用氨基键合硅胶色谱柱(4.6mm 250mm,5 m;以乙腈 0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液(50 50为流动相;流速为1.0mL/min 。理论塔板数按鸟氨酸峰计算应不
52 中国生化药物杂志Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2007年第28卷第1期
低于5000。在此色谱条件下,供试品及对照品的HPLC 色谱图见图1。鸟氨酸与门冬氨酸及氯离子峰的分离度均大于9.0
。 1.辅料; 2.氯离子; 3.鸟氨酸; 4.门冬氨酸1.Stuff; 2.Chl oride ion;3.As partate; 4.Orni thine 图1 供试品与对照品的HPLC 色谱图 Fig 1 HPLC chromatogram of sample and reference substance 2.2 线性关系 精密称取门冬氨酸与盐酸鸟氨酸对照品适量,加50%磷酸溶液1滴,加50%乙腈溶液溶解并稀释制成每1mL 含门冬氨酸与鸟氨酸均为12.5mg 的溶液。精密量取0.1,0.3,0.5,0.7,0.8,1.0,2.0mL,分别置10mL 量瓶中,加50%乙腈溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取20 L,分别注入HPLC 仪,记录色谱图,以峰面积(A 对浓度(C 作线性回归,得直线方程为:门冬氨酸A =3668.3C +58.823,r =0.9999;鸟氨酸A =1162.3C +3.100,r =0.9999。结果表明,在125~2500 g/mL 范围内,A 与C 均呈良好的线性关系。
2.3 回收率试验 精密量取门冬氨酸鸟氨酸注射液适量,加50%乙腈溶液稀释制成每1mL 约含门冬氨酸与鸟氨酸均为25mg 的贮备溶液。分别精密称取相当于门冬氨酸与鸟氨酸对照品各20,25,30mg,分置3个50mL 量瓶中,加50%磷酸溶液1滴,用50%乙腈溶液适量使溶解,精密量取贮备溶液1mL,分置上述3个50mL 量瓶中,用50%乙腈溶液稀释至刻度,摇匀,即得相对标示量浓度为80%,100%,120%的加样回收溶液。另精密称取门冬氨酸与盐酸鸟氨酸对照品适量,加50%磷酸溶液1滴,加50%乙腈溶液溶解并稀释制成每1mL 约含门冬氨酸与鸟氨酸均为1mg 的溶液,作为对照品溶液。按2.1项色谱条件测定,结果门冬氨酸的平均回收率为99.92%,RSD 为0.34%(n =9;鸟氨酸的平均回收率为100.25%,RSD 为0.70%(n =9,方法的回收率良好,其他成分及辅料对测定无干扰。 2.4 溶液的稳定性 精密量取门冬氨酸鸟氨酸注射液适量,加50%乙腈溶液稀释制成每1mL 约含门冬氨酸与鸟氨酸均为1mg 的溶液,作为供试品溶液。分别于0,2,4,6,8,10h 测定,结果表明供试品溶液在室温条件下,10h 内稳定,门冬氨酸的R SD 为0.26%(n =6;鸟氨酸的R SD 为0.44%(n =6。2.5 重复性试验
按2.4项方法配制6份供试品溶液,重复测定,结果门冬氨酸的RSD 为0.63%(n =6;鸟氨酸的R SD 为0.60%(n =6,重复性良好。
2.6 供试品测定 精密量取2.4项供试品溶液20 L 注入HPLC 仪,记录色谱图;按2.3项方法配制对照品溶液同法测定,按外标法分别以峰面积计算,即得门冬氨酸和鸟氨酸的含量。同时与二甲醛为衍生剂进行测定的方法[7]相比较,测定门冬氨酸与鸟氨酸的结果见表1。
表1 不同方法测定门冬氨酸与鸟氨酸含量的比较T ab 1 Determination result of different methods of aspartate and or nithine 批号门冬氨酸含量/%本文方法衍生化法鸟氨酸含量/%
本文方法衍生化法050801104.8103.692.092.0050802104.7104.292.192.4050803 104.5104.2 92.792.4 3 讨 论 选择氨基键合硅胶色谱柱,以乙腈 0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液(50 50为流动相测定门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量,不需进行衍生化,供试品保留时间适宜,全分析过程仅15min,色谱峰型对称性良好。实验结果还表明分别采用流动相和50%乙腈溶液 作溶剂,色谱行为基本相同,故选用后者。门冬氨酸在50%乙腈溶液中的溶解度小,加1滴50%磷酸溶液后其溶解性大为改观,且对测定结果无影响。
由于测定波长为200nm,盐酸鸟氨酸中的氯离子出峰,辅料也出峰,但与相邻被测成分鸟氨酸主峰分离良好,不干扰含量测定。参考文献:
[1] 陈孝治.瑞甘[J].中南药学,2004,2(4:254 255. [2] 王荣梅.高效液相色谱法测定盐酸精氨酸注射液的含量[J].中 国生化药物杂志,2003,24(6:296 297. [3] 高春,戴红.门冬氨酸钾镁葡萄糖注射液中L 门冬氨酸的 HPLC 测定[J].中国医药工业杂志,2003,34(5:244 245.[4] 苏广海.HPLC 柱前衍生化法测定阿波莫斯注射液的含量[J ].
广东药学院学报,2000,12(2:100 104. 53 中国生化药物杂志Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2007年第28卷第1期