血型血清学常用试剂介绍
血型鉴定与交叉配血
根据红细胞膜上有无A抗原或B抗原， 将血型分为A型、B型、AB型及O型四 种。通常利用红细胞凝集试验，通过 正定型和反定型鉴定ABO血型。
正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测 定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原； 反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血 清中有无相应的抗A或抗B。
血型抗原
抗B A型RBC B型RBC O型RBC
-
-+
+
-
结果 O
+
--
+
-
A
-
++
--B来自++-
-
-
AB
Rh血型鉴定
一、试剂 1、IgM抗-D试剂血清 2、待检红细胞悬液
二、操作 1、取12×75mm干净小试管1支 2、滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 3、滴入红细胞悬液 4、混匀后3400转/分离心15秒 5、轻轻摇动试管，观察结果 6、凝集为阳性，不凝集为阴性
红细胞血型抗原： 已确定的有29个系统、200多种抗原
其中必查血型抗原： ABO抗原和RhD抗原
血型抗体
常见的血型抗体分子大多属于IgM或IgG两类
*五类免疫球蛋白具有相似的单体结构 *两条轻链(L链)和两条重链(H链)组成的四肽 链 (H2L2)---单体结构
1、 IgG 抗体
分子较小，通常以单体形式存在。多经妊娠 或输血后免疫产生。在盐水介质中只能致敏相应 抗原的红细胞，而不能使之凝集，所以又称为不 完全抗体。必须通过特定的方法（如抗人球蛋白） 使致敏红细胞发生凝集。
2. 各加LIM溶液0.7m1 ，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟。
3．普通离心机1000g离心15秒，然后把上清液 倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
血型SOP
1 .AB0血型鉴定根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及。
型4种。
可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。
所谓正定型，是用已知抗一A和抗一B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原;所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗一A或/和抗一B。
［试剂和材料］1.抗一A（B型血）、抗一B（A型血）及抗一A十B（0型血）分型血清，制备方法见本节附注意
2 .5%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3.受检者血清；
4.受检者5%红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。
［方法］1.试管法
⑴取洁净小试管（内径10mm×60mm）3支,分别标明抗一A、抗一B和抗一A十B,用滴管分别加抗一A、抗一B和抗一A十B o分型血清各I 滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混和。
（2）另取洁净小试管（内径IommX60mm）3支，分别标明A、B和O细胞。
用滴管分别加入受检者血清I滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和。
型5%试剂红细胞悬液I滴，混和。
⑶立即以100Or/min离心Imin。
（4）将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集（或溶血）现象。
如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。
⑸观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或CisAB的发现。
⑹凝集强度判断标准.。
什么是a型标准血清
什么是a型标准血清A型标准血清是指在实验室中用于血型鉴定的一种特殊试剂。
在血液学和免疫学领域，血型鉴定是非常重要的一项工作，它不仅可以用于临床输血、器官移植等医疗领域，还可以用于犯罪学的DNA鉴定等领域。
而A型标准血清作为血型鉴定的重要试剂，在这个过程中起着至关重要的作用。
首先，我们来了解一下A型标准血清的成分和作用。
A型标准血清主要是由抗A抗体组成的，这些抗体能够与A型血细胞表面的抗原结合，从而发生凝集反应。
通过观察血液样本在A型标准血清作用下的凝集情况，就可以确定被检测者的血型是否为A型。
这种凝集反应是血型鉴定中的经典方法，也是最为可靠的一种方法之一。
其次，A型标准血清在实验室中的使用非常广泛。
无论是医疗机构还是科研单位，都会用到A型标准血清进行血型鉴定工作。
在临床输血中，及时准确地确定受血者的血型，可以避免输血不合适引起的不良反应，保障患者的生命安全。
在器官移植中，供体和受体的血型匹配也是至关重要的，A型标准血清的使用可以确保移植手术的成功率。
此外，A型标准血清还可以用于犯罪学的DNA鉴定中，通过血型鉴定可以缩小嫌疑人范围，为案件的侦破提供重要的线索。
除了以上提到的作用外，A型标准血清还可以用于一些实验室研究中。
比如在细胞培养实验中，有时需要对细胞进行血型鉴定，以确定细胞的来源和特性。
A型标准血清的使用可以帮助研究人员更好地进行实验，确保实验结果的可靠性。
总的来说，A型标准血清在血型鉴定中起着非常重要的作用，它不仅在临床医学中发挥着巨大的作用，也在科研领域中有着广泛的应用。
随着科学技术的不断发展，相信A型标准血清在未来会有更广阔的应用前景，为人类健康事业做出更大的贡献。
血型的鉴定方法及操作全解
血型的鉴定方法及操作全解血型是指人体血液中红细胞表面的抗原特征，主要分为A、B、AB和O四种血型。
了解一个人的血型对献血、输血和婚姻等方面都有重要意义。
下面将详细介绍血型的鉴定方法及操作步骤。
一、血型鉴定的试剂1.抗A血清：含有抗A抗体，加入A型血液会凝集。
2.抗B血清：含有抗B抗体，加入B型血液会凝集。
3.抗AB血清：含有抗A和抗B抗体，加入A型、B型和AB型血液会凝集。
4.抗Rh血清（抗D血清）：含有抗Rh抗体，加入Rh阳性的血液会凝集。
二、操作步骤2.涂血滴定法鉴定血型：步骤一：取一根牙签，将其浸入患者或供血者的新鲜封闭伤口、创口或皮肤直至有微量血液，然后将牙签上的血涂于三个试管中的三个凹槽中。
步骤二：加入抗A、抗B和抗Rh血清。
步骤三：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗A血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有A抗原，血型为A型；如无凝集反应，则表示人的血液中无A抗原，进入下一步鉴定。
步骤四：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗B血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有B抗原，血型为B型；如无凝集反应，则表示人的血液中无B抗原，进入下一步鉴定。
步骤五：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗AB血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有A和B抗原，血型为AB型；如无凝集反应，则表示人的血液中无A和B抗原，进入下一步鉴定。
步骤六：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗Rh血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有Rh抗原，血型为阳性（+）；如无凝集反应，则表示人的血液中无Rh抗原，血型为阴性（-）。
3.精确测定法鉴定血型：步骤一：利用滴管取适量血液加入试管中。
步骤二：加入抗A血清滴定至血液凝结。
步骤三：记录滴定的比率，若比率超过1∶3，即滴入的抗A血清多于血液凝集，则表示为A型血液。
步骤四：继续加入抗B血清滴定至血液凝结。
步骤五：记录滴定的比率，若比率超过1∶3，即滴入的抗B血清多于血液凝集，则表示为B型血液。
人ABORHD血型抗原检定试剂使用说明书
人ABO、RHD血型抗原检定试剂使用说明书（微柱凝胶免疫检测法）[试剂名称]通用名：人ABO、RHD血型抗原检定试剂卡（微柱凝胶免疫检测法）英文名：HUMAN ABO、RHD BLOOD GROUPING `S CARDS （MIAOODUMN GEI IMMUNOASSAY）汉语拼：REN ABO、RHD XUEXING KANGYUAN JIANDING SHIJI KA（WEIZHUNINGJIAO MIANYI JIANCE FA）[原理、用途、特点]：本品将分子排阻层析原理应用于血型血清学检测，专供鉴定人ABO血型、RHD血型抗原，操作简单、快速，所需样本量少，使得临床检测规范化、标准化。
[本品成分]：本品系由聚丙烯塑料透明卡片，卡片上并排六支微柱型管中充填凝胶，从左向右顺序第1支至第3支和第4支至第6支微管凝胶中均分别充以抗A、抗B、抗D单克隆抗体试剂，称之为特异性胶，检测人红细胞ABO、RHD抗原。
[性状]：胶质均匀，胶面整齐，无气泡；液体透明，无杂质。
[适应症]：本品专供鉴定人ABO、RHD血型抗原的微柱凝胶免疫检测。
[用法用量]：标本采集：采集被检对象静脉血，将该血液制备成红细胞标本。
红细胞标本的制备：配制0.5%红细胞生理盐水悬液.[实验步骤]:(1)、将微柱凝胶试剂卡的6个凝胶管标号；（2）、将待检者0.5%红细胞悬液分别加入第1至第3管或第4至第6管中,每管50UL;(3)、即刻使用专用离心机离心，900r/min，2分钟、1500r/min，3分钟取出肉眼判定结果。
结果判定：阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。
输血前血型血清学检查疑难标本的实验操作及试剂的使用
血型鉴定（受血者、献血者的ABO和RhD血型） 抗体筛选（受血者意外抗体筛查） 交叉配血
一 ABO血型
ABO 正反定型相符：正反定型相符且正定型反应强度4+； 反定型反应强度≥ 2+。
ABO 正反定型不符的定义和范围 ABO 正反定型不符（多或少抗原、抗体）。 ABO 正反定型相符，但弱反应，正定型反应强度＜ 4+，反定型反应强度＜2+。 正定型为O型，反定型非O型或Ac、Bc凝集强度差别 ＞2+以上。
可以将细胞配成0.8%的悬液，加50ul到LISS/Coombs卡中， 直接离心判读结果。 特别注意：抗人球蛋白试剂
凝聚胺
试管中加入2滴血清（血浆）和1滴2%-4%红细胞悬液，混匀。 以1000g离心15秒，观察结果。如果阴性则继续试验；如果阳性，需 分析原因排除干扰后继续后续试验（此处发现并处理冷凝集素）。 加0.6-1mlLIM试剂，混匀后室温放置1分钟。 加入2滴Polybrene试剂，混匀后立即以1000g离心15秒，弃去试管中 液体，轻摇试管，肉眼判断红细胞凝集情况。如果有凝集出现则继续 操作，如果没有凝集出现则该试验无效。 加入2滴重悬液，轻摇试管，肉眼观察结果。 结果判定：1分钟内凝集消失为聚凝胺试验阴性，1分钟内凝集不消失 为聚凝胺试验阳性。 对于可疑的弱阳性结果，可用生理盐水洗涤3遍后，加2滴抗人球蛋白 试剂，离心后判读结果。
吸收放散试验 唾液型物质检测 毛细管离心分离自身和输入红细胞 DTT处理自身凝集红细胞 分子生物学检测（血型基因）
询问、查阅病历 试管法正反定型 血型鉴定特殊技术 观察 ↓ 假设 ↓ 验证 ↓ 解决
试管法
试管法：血型定型金标准，常用于疑难血型鉴定。
抗A、抗B血型定型试剂(人血清)说明书
抗A、抗B血型定型试剂（人血清）抗A、抗B血型定型试剂（人血清）使用说明书•【药品名称】通用名称：抗A、抗B血型定型试剂（人血清）汉语拼音：Kang-A、Kang-B Xuexingdingxingshiji(Renxueqing)•【成份】本品主要成份为：合格的人抗A、抗B血型血清•【性状】抗A：浅蓝色澄明液体。
抗B：浅黄色澄明液体。
•【适应症】专用于鉴定人ABO血型。
•【规格】10ml/支•【用法用量】（1）平板法（玻片法）：本品与受检者全血或10%红细胞生理氯化钠悬液按1：1使用，不必再稀释，按照有无凝集判定结果。
（2）试管法：本品与受检者5%红细胞生理氯化钠悬液按1：1使用，不必再稀释，摇匀，1000r/min离心1分钟或室温静置1小时，按照有无凝集判定结果。
血型抗A试剂抗B试剂A+-B-+O--AB++•【注意事项】（1）对含有较多自身冷凝集素的受检者，在鉴定血型时往往被误定为AB血型，遇到此种情况，需用37?C生理氯化钠溶液洗涤受检者红细胞2～3次，以去除吸附在红细胞上的冷凝集素，然后再鉴定血型。
（2）在做配型试验时，如发现有不配合现象，则取受检者血清，用已知A或B血型红血胞进行反定型试验，以核实原鉴定的血型是否正确。
（3）用立即试管法不能测出亚型（如Ax），需延长作用时间。
（4）凡抗球蛋白试验（CoombsTest）阳性、新生儿溶血病或获得性溶血性贫血患者红细胞，因其红细胞表面吸附有抗体球蛋白，故干扰血型的鉴定，遇到此种情况需进行吸收释放试验。
（5）本品如出现浑浊或变色则不能使用。
（6）在有效期内使用。
•【孕妇及哺乳期妇女用药】不影响人体•【儿童用药】不影响人体•【贮藏】2～8?C避光保存•【包装】抗A、抗B各1支/盒塑料瓶•【有效期】12个月【注意】药物说明书里面有三种标识，一般要注意一下：1.第一种就是禁用，就是绝对禁止使用。
2.第二种就是慎用，就是药物可以使用，但是要密切关注患者口服药以后的情况，一旦有不良反应发生，需要马上停止使用。
血型鉴定实验步骤
血型鉴定实验步骤血型鉴定是一项常见的实验，用于确定一个人的血型类型。
通过这个实验，可以了解血液中存在的抗原和抗体，从而做出正确的血型鉴定。
下面将介绍血型鉴定的实验步骤。
实验所需材料：1. 血液样本：可以采用新鲜的全血或血清样本。
2. 血型试剂：包括抗A血清、抗B血清和抗Rh(D)血清。
3. 平板化玻片：用于糖胺聚糖凝集试验。
4. 微量移液器和移液管：用于加取试剂和样本。
5. 定量移液器和移液管：用于加取试剂和样本。
实验步骤：1. 用干净的平板化玻片，在玻片上标记样本来源（如A、B、C 等）。
2. 使用微量移液器，分别将要鉴定的血液样本滴在相应的标记区域上。
3. 加入相应的血型试剂。
将抗A血清滴在一个样本的标记区域上，将抗B血清滴在另一个样本的标记区域上。
4. 使用定量移液器，将抗Rh(D)血清分别滴在相应样本的标记区域上。
5. 使用棉签或棉花片，轻轻搅拌每个滴在玻片上的血液样本和试剂，使其充分混合。
6. 观察样本与试剂的反应。
根据出现的凝集情况，可以确定血型类型。
如果发生凝集，表示血液中有相应血型的抗原。
7. 结果的判断：- 若抗A血清与某个样本发生凝集，表明该样本为A型血。
- 若抗B血清与某个样本发生凝集，表明该样本为B型血。
- 若抗A血清和抗B血清与某个样本同时发生凝集，表明该样本为AB型血。
- 若抗Rh(D)血清与某个样本发生凝集，表明该样本为Rh(D)阳性（即Rh+）。
- 若抗Rh(D)血清与某个样本未发生凝集，表明该样本为Rh(D)阴性（即Rh-）。
8. 记录实验结果。
根据凝集反应的情况，可以确定血型类型，并记录在实验记录表中。
需要注意的是，在进行血型鉴定实验时，应严格遵循实验室操作规范和安全操作流程。
保持试剂和样本的洁净，避免交叉污染。
使用移液器时，应注意正确的使用方法，避免出现误差。
实验结束后，将使用过的实验器材进行妥善清洁和消毒处理。
血型鉴定实验是一项简单而重要的实验，可以为医学诊断和输血提供重要的参考依据。
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研制优质高效的血型红细胞保存液。有效期可达2个月。
标准化血型反定型试剂的制备方法，准确调节血型红细胞试剂
的浓度，保证试剂稳定。
7
人ABO反定型用红细胞试剂盒
红细胞保存液的特点
• 优质高效的血型红细胞保存液
– 缓冲体系（调节并维持适合的pH值）； – 营养体系（保持红细胞活力、颜色鲜红、调节红细胞沉降及 悬浮难易程度等）； – 渗透压调节体系（防止红细胞溶血、稳定红细胞膜的完整、
• 以上项目均要求特异性、、抗原性（灵 敏度）、亲和力、红细胞浓度等 • 获得SFDA许可的红细胞有两家，分别是 金豪制药和上海医药，磁珠的是博德
ABO血型检定的法规规定： 《中国输血技术操作规程（血站部分）（征求意见稿）》
4.3.7.22 ABO正反定型检测 4.3.7.22.2 试剂要求 • 正定型试剂必须使用国家药品监管部门颁发生产许可证和批准文号的厂家 生产的；或者取得国家药品监督部门相关注册证的并由中国药品生物制品 检定所批批检定合格且贴有防伪标签的诊断试剂。 • 反定型试剂必须使用国家药品监督部门颁发的生产许可证和批准文号的厂 家生产的，或者获取国家药品监督部门相关注册证的诊断试剂。
保持抗原活性）；
– 防腐体系（防止试剂红细胞滋生细菌而变质）；
• 有效期达2个月以上。
8
人ABO反定型用红细胞试剂盒
每批试剂常规检测及37℃放置24小时后检测，试剂的外观、溶血
率、特异性、抗原性和亲和力均符合《人ABO反定型用红细胞试 剂制造及检定规程》要求。
连续生产的三批试剂在2-8℃贮存条件下保存3个月，试剂的各项性 能指标均达到《制造及检定规程》要求。
5
人ABO反定型用红细胞试剂盒
采用三人份同型混合的A1型、B型和O型合格人红细胞
经洗涤后悬浮在红细胞保存液中配制而成。 采用凝集试验原理。
用于ABO血型的反定型检测。
本试剂适用人血浆或血清。
试管法、微量板法、凝胶卡法。
6
人ABO反定型用红细胞试剂盒
•
• •
严格按照国家相关规定对血型红细胞进行筛选和处理。
血型 A型 B型 AB型 O型
A1红细胞 + +
B红细胞 + +
O红细胞 9
血型定型试剂
• 抗D试剂
• • • • • IgM抗D IgG抗D IgM+IgG抗D SFDA的要求： IgM与DVI反应阴性（盐水法），适合临床对患者 检测 • IgG与DVI反应阳性（IAT），适合采供血中心进 行RhD确认，检测出弱D。
4
最高人民法院、最高人民检察院 关于办理非法采供血液等刑事案件具体应用法律若干问题的解释：
法释〔2008〕12号
第五条 对经国家主管部门批准采集、供应血液或者制作、供应血液制 品的部门，具有下列情形之一的，应认定为刑法第三百三十四条第 二款规定的“不依照规定进行检测或者违背其他操作规定”： (四)血站、单采血浆站和血液制品生产企业使用的诊断试剂没有生产 单位名称、生产批准文号或者经检定不合格的； ——亦即，ABO反 定型试剂不能自配！
抗人球蛋白试剂
• • • • 广谱抗人球蛋白：抗IgG+C3d 单特异性抗人球蛋白： 抗IgG： 抗C3d：
其他试剂
• • • • • • • • 微柱凝集卡 抗人球蛋白卡：抗IgG+C3d卡 抗IgG卡 直接抗人球蛋白卡：抗IgG、抗C3d、质控 ABO正反定型卡 ABO/RhD正反定型卡 Rh分型卡 新生儿溶血检测卡
其他试剂
• • • • • IgM抗体灭活试剂：巯基类试剂 抗人球蛋白增强试剂： LISS PEG BSA
抗体筛选、鉴定试剂
• 筛选红细胞：2组、3组 • 筛选红细胞抗原要求：针对我国国情， 特殊抗原要求 • 抗体鉴定红细胞：10组、16组细胞
ABO定型中的吸收放散试剂
用人血清来源的试剂，如抗A、抗B、抗 AB等 可以自己制备
血型血清学常用试剂介绍
血型定型试剂
• ABO定型试剂 • ABO正定型试剂 • 抗A：要求含有抗A1、抗A2组分，效价、 特异性、灵敏度、亲和力、非特异性冷 凝集素等要求 • 抗B：效价、特异性、灵敏度、亲和力、 非特异性冷凝集素等要求。 • SFDA未有批准：抗AB、抗HBO反定型试剂 A1：必须具有A1抗原 B O