牙髓间充质干细胞生产
牙髓干细胞治疗中枢神经系统损伤机制的研究进展
牙髓干细胞治疗中枢神经系统损伤机制的研究进展刘洪涛【摘要】The central nervous system damage is common in clinical , with the in-depth study on the treatment,dental pulp stem cells(DPSCs) have drawn attention of many researchers.DPSCs can secrete vari-ous neurotrophic factors,regulate the inflammatory response of injury,inhibit the release of myelin inhibition factor,thus protec neurons survive at injury site;DPSCs can also promote injury neurons axon regeneration , reduce the nerve fiber scarring,form myelin nerve fibers and functional neural connections,and improve the prognosis.%中枢神经系统损伤在临床上较为常见,随着对中枢神经系统损伤后治疗的深入研究,众多学者将目光聚焦于牙髓干细胞( DPSCs). DPSCs能够分泌多种神经营养因子,调控损伤部位的炎症反应,抑制髓鞘抑制因子释放,从而保护损伤部位神经元细胞存活;DPSCs还可促进损伤神经元细胞轴突再生,降低损伤部位神经纤维瘢痕化,形成有髓鞘神经纤维,建立功能性神经连接,进而改善预后.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2016(022)002【总页数】4页(P220-223)【关键词】牙髓干细胞;神经损伤;轴突再生【作者】刘洪涛【作者单位】哈尔滨医科大学附属第一医院眼科二病房,哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】R774在日常生活中，经常发生因外力而导致的中枢神经系统损伤，中枢神经系统损伤无法治愈，只能尽量减少并发症及最大限度地恢复残存的功能[1]。
牙髓间充质干细胞生产
牙髓间充质干细胞生产 Prepared on 22 November 2020牙髓间充质干细胞生产I．目的：建立牙髓间充质干细胞制品生产规程。
II．范围：适用于牙髓间充质干细胞的生产；适用于技术部和各中心技术组的所有技术人员。
III．职责：1.生产主管负责本制度的执行和监督；2.技术组的所有技术人员要严格按照本流程的要求进行操作；3.监督员负责全程监督，并即时按要求填写《牙髓间充质干细胞生产记录》和《生产试剂耗材记录表》。
附表1牙髓/骨髓/脂肪/胎盘/脐带间充质干细胞生产记录附表2生产试剂耗材记录表IV．规程：一、牙髓间充质干细胞原代操作消化法：1.仪器耗材1）10ml移液管2）培养皿3）50ml离心管4）100μm筛网5）T75培养瓶6）15ml离心管2.试剂1）生理盐水2）培养基3）胶原酶3.酶消化法操作流程将浸在含1%双抗的生理盐水中的牙齿取出，吸取运输液4ml交给质检，并填写《样本取样单》，牙齿置于75%酒精中浸泡30min；取出牙齿在含10ml生理盐水的培养皿中清洗2-3遍，用止血钳固定牙冠，持骨钳夹碎牙根部，暴露出牙髓，用镊子取出牙髓并放入含有适量生理盐水的培养皿中；用剪刀将牙髓组织块剪碎成1mm3，转移到50ml离心管中，加入生理盐水至30ml,再加入%胶原酶；置于37℃恒温摇床，180rmp消化30min；用100μm滤网过滤；离心10min，吸取洗涤液4ml交给质检，并填写《样本取样单》；附表3样本取样单培养弃剩余上清，调整细胞浓度为107/ml,置于75cm2培养瓶中,放入37℃，CO2箱中进行培养。
4.组织块法操作流程：将浸在含1%双抗的生理盐水中的牙齿取出，吸取运输液4ml交给质检，并填写《样本取样单》，牙齿置于75%酒精中浸泡30min；取出牙齿在含10ml生理盐水的培养皿中清洗2-3遍，用止血钳固定牙冠，持骨钳夹碎牙根部，暴露出牙髓，用镊子取出牙髓并放入含有适量生理盐水的培养皿中；用剪刀将牙髓组织块剪碎成1mm3，将组织块均匀铺到T25培养瓶（用适量FBS 润湿瓶底）瓶底；倒置培养瓶，并加入5ml培养基，放入培养箱中培养；后，将培养瓶轻轻翻转，将牙髓组织块浸入工作液中。
牙髓干细胞提取制备
牙髓干细胞提取制备
牙髓干细胞提取制备是一种将牙齿中的牙髓组织经过一系列的处理步骤，从中提取出含有干细胞的细胞群的过程。
下面是一般的牙髓干细胞提取制备的步骤：
1. 麻醉：在提取牙髓之前，需要给患者进行局部麻醉，以减轻可能的不适感。
2. 牙齿准备：使用牙科钻或其他工具，将牙齿表面的硬组织（牙釉质和牙本质）去除，暴露出牙髓组织。
3. 牙髓提取：使用特殊的针具将牙髓组织抽取出来。
常见的方法是通过牙齿的根尖进行穿刺，将针具插入牙髓腔，然后将牙髓组织吸取出来。
4. 细胞分离：将提取到的牙髓组织进行分离，将其中的干细胞与其他细胞分开。
这可以通过离心、胶原酶消化等方法来完成。
5. 细胞培养：将分离得到的牙髓干细胞进行培养，提供适当的培养基和生长条件，使其继续增殖和分化。
6. 细胞扩增：在培养过程中，可以对牙髓干细胞进行多次传代，以扩大细胞数量。
7. 细胞存储：可以将扩增后的牙髓干细胞进行冻存，以备将来使用。
牙髓干细胞可以用于多种临床治疗和研究应用，例如牙髓再生、组织工程、再生医学等领域。
人血小板裂解液在人牙髓间充质细胞体外增殖与分化中的应用
人血小板裂解液在人牙髓间充质细胞体外增殖与分化中的应用
谢贤哲ꎬ徐 燕ꎬ何家林ꎬ王腾飞ꎬ霍冬梅
摘要 目的 探索人血小板裂解液( ＨＰＬ) 在人牙髓间充质
细胞体 外 培 养 使 用 胎 牛 血 清 ( ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍꎬ
胎牛血清( ＦＢＳ) 提供依据ꎮ 方法 分别使用不同浓度 ＨＰＬ
光倒置显微镜 ( ＤＭＩ３０００Ｂꎬ德国 Ｌｅｉｃａ 公司) ꎻ茜素
红 Ｓ 法染色试剂盒、ＣＣＫ￣８ 试剂盒( 北京 Ｓｏｌａｒｂｉｏ 公
司) ꎻＴＲＩｚｏｌ( 美国 Ｉｎｔｒｏｖｉｇｅｎ 公司) ꎻ实时荧光定量聚
合 酶 链 反 应 ( Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔｉｖｅ￣ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ
ｔｏｓｉｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙꎬ ４ ５５８％ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ３１ ５０％ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ. Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
用受 到 了 极 大 的 限 制 [１] ꎮ 血 小 板 裂 解 液 ( ｈｕｍａｎ
ｐｌａｔｅｌｅｔ ｌｙｓａｔｅꎬＨＰＬ) 作为可能的 ＦＢＳ 替代物受到广
泛的关注 [２ － ３] ꎮ 很多学者尝试使用 ＨＰＬ 对细胞进
行体外扩 增ꎬ 但 对 于 最 适 使 用 浓 度 的 观 点 仍 未 统
一 [４] ꎮ
蛋白网分离ꎬ上清液于 － ８０ ℃ 与 ３７ ℃ 下反复冻融 ３
ｔｈｅ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｗａｓ ｉｎｔａｃｔ ａｎｄ ｔｈｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｅｘ ｗａｓ ３ ６１％ . Ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐꎬ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｃａｂｌｅ ｓｔｒｕｃ￣
牙髓干细胞提取制备
牙髓干细胞提取制备1. 引言牙髓干细胞是一种来源于牙髓组织的多能干细胞，具有自我更新和多向分化的潜力。
牙髓干细胞的提取和制备是一项重要的研究领域，它可以应用于组织工程学、再生医学和干细胞治疗等领域。
本文将介绍牙髓干细胞提取制备的方法和步骤，并探讨其应用前景。
2. 牙髓干细胞提取方法2.1 牙髓组织的获取牙髓组织的获取是牙髓干细胞提取的第一步。
常用的方法包括牙齿拔除后直接取出牙髓组织、牙齿根尖切除术后取出牙髓组织等。
在获取牙髓组织时，应注意保持组织的完整性和无菌状态，以确保后续步骤的成功进行。
2.2 牙髓干细胞的分离和培养牙髓组织获取后，需要进行牙髓干细胞的分离和培养。
常用的方法包括酶消化法和机械分离法。
酶消化法是将牙髓组织用胰蛋白酶等消化酶进行酶解，以分离出牙髓干细胞。
机械分离法是通过机械切割和挤压的方式将牙髓组织分离成单个细胞。
分离后的牙髓干细胞可以通过培养基中的适当条件进行培养和扩增。
2.3 牙髓干细胞的鉴定和筛选在牙髓干细胞的提取过程中，需要对分离得到的细胞进行鉴定和筛选。
常用的鉴定方法包括流式细胞术和免疫荧光染色法。
流式细胞术可以通过检测特定标记物（如CD34、CD44等）来确认细胞的干细胞特性。
免疫荧光染色法则可以通过染色特定的标记物（如Oct4、Nanog等）来观察细胞的表达情况。
3. 牙髓干细胞的应用前景牙髓干细胞具有广泛的应用前景，主要包括以下几个方面：3.1 组织工程学牙髓干细胞可以应用于组织工程学领域，用于修复和再生受损组织。
例如，牙髓干细胞可以用于牙齿再生，通过种植牙髓干细胞到受损的牙齿中，促进牙齿的再生和修复。
3.2 再生医学牙髓干细胞在再生医学领域也有很大的潜力。
它们可以应用于骨骼再生，通过种植牙髓干细胞到骨折或骨缺损部位，促进骨组织的再生和修复。
3.3 干细胞治疗牙髓干细胞还可以应用于干细胞治疗。
干细胞治疗是一种将干细胞应用于治疗疾病的方法，通过种植牙髓干细胞到患者体内，可以促进组织的再生和修复，治疗一些难以治愈的疾病。
成脂细胞分化实验步骤(1)
人牙髓间充质干细胞成脂分化实验操作方法
一. 试剂配制：
1.吲哚美辛（消炎痛）(357.79)：母液50mM,应用液100μM
1.地塞米松(39
2.46): 用无水乙醇配制10mM,-20℃避光保存，工作液用PBS稀释成1mM,4℃保存，应用液1μM 地塞米松
2.胰岛素：用冰醋酸生理盐水配制母液1mg/ml，应用液浓度10μg/ml。
3.IBMX（3-异丁基-1-甲基黄嘌呤）(222.7)母液50mM，-20℃避光，应用液0.5mM.
5.诱导液1：1μM 地塞米松，100μM吲哚美辛，0.5mMIBMX
6.诱导液2：1μM 地塞米松，100μM吲哚美辛，
0.5mMIBMX，10μg/ml胰岛素
二．实验分组：
1.10%FBS+H-DMEM
2.10%FBS+H-DMEM+诱导液1
3.10%FBS+H-DMEM+诱导液2
4.MSC无血清培养基
5.MSC无血清培养基+诱导液1
6.MSC无血清培养基+诱导液2
7.Gbico 诱导液
三．操作步骤
1. 细胞接种24孔板（15000/孔），细胞融合达80％以上后，弃去原培养基，添加不同成脂诱导液，3天换液一次，培养14天。
2. 待脂滴形成后进行油红O染色，PBS缓冲液清洗3次，10％中性甲醛固定20min，再用PBS缓冲液清洗2次，油红O染液浸染30min，PBS缓冲液清洗2次，苏木素染液浸染1min，弃去染液，倒置显微镜下观察拍照。
3. 成脂诱导分化过程中发现在诱导5d时，细胞形态开始变圆并大量脱落，部分细胞中出现细小脂滴。
牙髓干细胞提取制备
牙髓干细胞提取制备摘要：I.牙髓干细胞简介- 牙髓干细胞的发现- 牙髓干细胞的特性II.牙髓干细胞提取制备- 牙髓组织来源- 提取过程- 制备流程III.牙髓干细胞的应用- 牙齿再生- 牙周疾病治疗- 其他潜在应用IV.牙髓干细胞研究现状与展望- 国内外研究进展- 存在问题与挑战- 未来发展趋势正文：牙髓干细胞提取制备及其应用研究进展牙髓干细胞（Dental Pulp Stem Cells，DPSCs）是一种来源于牙髓组织的间充质干细胞，具有自我更新和多向分化的潜能。
自2000年人类发现牙髓干细胞以来，科学家们已经成功地从儿童乳牙和成人智齿中提取并培养了牙髓干细胞。
这种干细胞在牙齿再生、牙周疾病治疗以及潜在的神经、血管等软组织修复领域具有广泛的应用前景。
一、牙髓干细胞简介牙髓干细胞的发现可以追溯到2000年，Gronthos等科学家通过对人牙髓细胞的研究，发现了一种与骨髓间充质干细胞有着极其相似的免疫表型及形成矿化结节能力的细胞。
这种细胞中形态呈梭形，可自我更新和多向分化，有着较强的克隆能力。
这些由牙髓组织中分离出的成纤维状细胞就称为牙髓干细胞。
牙髓干细胞具有以下特点：1.具有较强的克隆能力，可以大量增殖并分化为不同类型的细胞。
2.具有多向分化潜能，可以分化为脂肪、骨骼、软骨、肌肉、血管内皮、肝脏、神经等细胞类型。
3.免疫原性低，移植后不易被宿主免疫系统排斥。
二、牙髓干细胞提取制备1.牙髓组织来源牙髓干细胞主要来源于儿童乳牙和成人智齿。
乳牙在6-12岁儿童天然脱落过程中，牙髓组织中的干细胞数量较多，且易于提取。
成人智齿在拔除过程中，也可以提取到牙髓干细胞。
2.提取过程牙髓干细胞的提取过程主要包括以下几个步骤：- 牙髓组织的获取：通过拔除或者脱落的牙齿，或者手术切除的智齿，取出牙髓组织。
- 牙髓组织的处理：将牙髓组织进行酶消化，分离出成纤维状的牙髓干细胞。
- 牙髓干细胞的纯化：通过密度梯度离心、免疫磁珠筛选等方法，纯化出牙髓干细胞。
牙髓干细胞制备作业指导书
牙髓干细胞培养操作SOP一、样本取材1.取材对象：选取6～l0岁健康儿童无牙体牙髓疾病的滞留乳牙。
在充分消毒牙体周围组织后拔牙，于预冷含高倍双抗仅一MEM培养基中保存备用，4h内原代取材。
2.牙齿样本接收，给予唯一识别编码和制备、检测档案记录。
3.采样本提供者血液做传染病筛查（乙肝、丙肝、艾滋、梅毒、巨细胞五项）。
二、样本接收1.观察运输箱的温度是否符合要求，采集瓶有无渗漏。
2.查看客户信息是否与交接表一致。
3.样本采集瓶外表面喷酒精擦拭消毒，填写样本接收记录，传入洁净区准备制备。
三、牙髓干细胞分离及接种1.准备耗材试剂：10cm培养皿、15ml离心管、50ml离心管、离心管架、10ml移液管、T75培养瓶、离心管架、无尘布、50ml注射器针头、封口膜、灭菌止血钳、灭菌镊子、手术刀、牙科钻、废液缸、无血清干细胞培养基（常温复温）、生理盐水、75%酒精。
2.仪器设备准备及预热：电动移液枪、生物安全柜、离心机3.将75%酒精喷到台面，用无尘布擦拭台面，包括侧面及玻璃。
4.在生物安全柜中用PBS液反复冲洗乳牙，充分清洁牙齿表面，用消毒液消毒，然后再用PBS充分清洗。
5.用连接牙科钻的牙科碳化转头，沿骨质和釉质的结合处切开牙齿，然后暴露髓腔。
间歇地将牙齿在用冰预冷的PBS中浸泡避免切割过程中过热。
6.用小号精细镊或牙挖器，轻轻从牙髓腔中分离牙髓组织，并将牙髓组织放人培养皿中的少量MSC培养液中。
注意不要使组织变干。
7.用手术刀片将牙髓组织切成小碎片，将剪碎的组织放入0.3%胶原酶和0.4%中性蛋白酶混合溶液中（1:1)，37℃孵育30〜60min，间歇地摇匀组织/消化酶混合物。
8.消化后，加人足够的MSC培养基，终止酶的活性，轻轻吹打离散单细胞团块，将形成的单细胞悬液通过孔径为70μm的细胞筛网过滤。
9.细胞悬液经1000r/min，离心5min，结束后，用MSC培养基重悬沉淀，定容并计数。
再次离心，根据前面计数结果，调整接种密度，将细胞接种到T75培养瓶中。
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牙髓间充质干细胞生产 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
牙髓间充质干细胞生产
I．目的：建立牙髓间充质干细胞制品生产规程。
II．范围：适用于牙髓间充质干细胞的生产；适用于技术部和各中心技术组的所有技术人员。
III．职责：
1.生产主管负责本制度的执行和监督；
2.技术组的所有技术人员要严格按照本流程的要求进行操作；
3.监督员负责全程监督，并即时按要求填写《牙髓间充质干细胞生产记录》和《生产试剂耗材记录表》。
附表1牙髓/骨髓/脂肪/胎盘/脐带间充质干细胞生产记录
附表2生产试剂耗材记录表
IV．规程：
一、牙髓间充质干细胞原代操作
消化法：
1.仪器耗材
1）10ml移液管
2）培养皿
3）50ml离心管
4）100μm筛网
5）T75培养瓶
6）15ml离心管
2.试剂
1）生理盐水
2）培养基
3）胶原酶
3.酶消化法操作流程
将浸在含1%双抗的生理盐水中的牙齿取出，吸取运输液4ml交给质检，并填写《样本取样单》，牙齿置于75%酒精中浸泡30min；
取出牙齿在含10ml生理盐水的培养皿中清洗2-3遍，用止血钳固定牙冠，持骨钳夹碎牙根部，暴露出牙髓，用镊子取出牙髓并放入含有适量生理盐水的培养皿中；
用剪刀将牙髓组织块剪碎成1mm3，转移到50ml离心管中，加入生理盐水至
30ml,再加入%胶原酶；
置于37℃恒温摇床，180rmp消化30min；
用100μm滤网过滤；
离心10min，吸取洗涤液4ml交给质检，并填写《样本取样单》；
附表3样本取样单
培养弃剩余上清，调整细胞浓度为107/ml,置于75cm2培养瓶中,放入37℃，CO
2
箱中进行培养。
4.组织块法操作流程：
将浸在含1%双抗的生理盐水中的牙齿取出，吸取运输液4ml交给质检，并填写《样本取样单》，牙齿置于75%酒精中浸泡30min；
取出牙齿在含10ml生理盐水的培养皿中清洗2-3遍，用止血钳固定牙冠，持骨钳夹碎牙根部，暴露出牙髓，用镊子取出牙髓并放入含有适量生理盐水的培养皿中；
用剪刀将牙髓组织块剪碎成1mm3，将组织块均匀铺到T25培养瓶（用适量FBS 润湿瓶底）瓶底；
倒置培养瓶，并加入5ml培养基，放入培养箱中培养；
后，将培养瓶轻轻翻转，将牙髓组织块浸入工作液中。
二、牙髓间充质干细胞换液
1.耗材
1）10ml移液管
2）15ml离心管
2.试剂
培养基
3.操作流程
镜下观察状态细胞；
吸取上清液4ml交给质检，并填写《样本取样单》；
吸取上清液于50ml离心管中留作精华液（原代培养上清不留），并补充新的培养基；
孵箱中培养。
观察细胞并将其置于37℃，5%CO
2
三、牙髓间充质干细胞传代培养
1.耗材
1）10ml移液管
2）50ml离心管
3）培养瓶
4）15ml离心管
2.试剂
1）生理盐水
2）胰酶
3）血清
4）培养基
3.操作流程
显微镜观察，观察培养瓶中的细胞密度到达80%—90%，可进行传代培养；
吸取上清液于50ml离心管中留作精华液（原代培养上清不留），T75培养瓶中加入10ml生理盐水洗涤贴壁细胞；
吸取洗涤液4ml交给质检，并填写《样本取样单》；
倒出剩余洗涤液（生理盐水），再加入10ml生理盐水+%胰酶，进行细胞消化，消化的第一瓶镜下观察，细胞收缩即可加入等体积血清终止消化；
将细胞收集到50ml离心管中，1200rpm，6min，弃上清，重悬，加入培养基，然后按照1:2或1:3进行传代。
四、牙髓间充质干细胞成品制备
1.耗材
1）10ml移液管
2）50ml离心管
3）15ml离心管
4）西林瓶/输血袋
2.试剂
1）生理盐水
2）胰酶
3）血清
4）干细胞保存液
3.操作流程
待细胞扩增总数达所需细胞数量后，吸取上清液于50ml离心管中留作精华液（原代培养上清不留），T75培养瓶中加入10ml生理盐水洗涤一遍；
加入10ml生理盐水+%胰酶，进行细胞消化，消化的第一瓶镜下观察，细胞收缩即可加入等体积血清终止消化；
将细胞收集到50ml离心管中，1200rpm，10min；
弃上清，细胞沉淀用30ml生理盐水洗涤二次，1200rpm，室温离心10min。
取第二次洗涤离心后的上清20ml交给给质检部分，并填写《样本取样单》；用干细胞保存液/生理盐水重悬细胞，转入专用的无菌西林瓶/生理盐水中，封口，贴标签，放置4℃保存。
完成初包装后，操作员立即将成品送交包装部门。
五、牙髓间充质干细胞的冻存
1.耗材
1）10ml移液管
2）50ml离心管
3）15ml离心管
4）冻存管
2.试剂
1）生理盐水
2）胰酶
3）血清
4）冻存液
3.操作流程
将制备好的MSC于1200rpm室温，离心10min。
弃去上清，将细胞悬浮于适量冻存液中，使细胞浓度在107个细胞/毫升，置于低温无菌冻存管中。
将细胞交给库管员经过程控降温后于液氮中冷冻保存，并填写《冻存样品交接单》。
附表4冻存样品交接单
六、牙髓干细胞的复苏
1.耗材
1）10ml移液管
2）50ml离心管
3）15ml离心管
4）培养瓶
2.试剂
1）生理盐水
2）培养液
3.操作流程
将液氮中的细胞取出于37℃水浴中迅速融化；
将细胞置于装有10~15倍ml生理盐水无菌离心管中，1200rpm离心10min；弃上清，加入30ml生理盐水洗涤细胞两次；
取第一次洗涤离心后的上清20ml交给给质检部分，并填写《样本取样单》；弃上清，重悬细胞，在细胞悬液中加入培养液，吹匀；
将单细胞悬液种植于细胞培养瓶，继续培养。
备注：
1.每次进行操作前，需将万级车间和百级实验台照射紫外线30min，风机开启后10-15min后方可进入实验场所进行操作；
2.进入GMP车间后，实验人员先进入物品存放间取已经表面消毒过的垃圾桶、废液缸、实验耗材等进入相应操作间，并从配液间取出相关使用试剂放于实验操作台；
3.细胞的取出与放回：开启培养箱前，需75%擦拭手掌后方可取放细胞；
4.操作细胞过程，手臂尽量在实验台进行操作，不要将手臂反复拿出实验台，如拿出手臂再进入需重新喷洒酒精，方可进入；
5.镜下观察，看是否有杂菌的感染，若有杂菌感染，立即封口后进行清理，不做留用。
6.清场：擦拭操作台，用酒精棉球擦拭每一个有操作接触到过的地方；将废液缸和垃圾桶喷洒75%酒精后放置于污物出口；实验台内未用完的耗材需全部放置于不锈钢推车上，台内不留任何实验耗材；所有试剂归放配液间冰箱。
7.生产各部分均应填写《牙髓间充质干细胞生产记录》和《生产试剂耗材记录表》；
8.细胞培养结束以后，监督员需将《牙髓间充质干细胞生产记录》和《生产试剂耗材记录表》及时交给总检人员，确认材料齐备无误后，由总检人员负责提档案员整理归档。
《样本取样单》为质检部门内部保管。