不同产地续断中总皂苷的含量测定

不同产地续断中总皂苷的含量测定

作者：刘永，卫莹芳，闫婕，郭山山，王化东，谢达温

【摘要】目的测定全国不同产地续断药材中总皂苷的含量，为全面评价续断药材质量提供依据。方法以齐墩果酸为对照品，用紫外-可见分光光度法测定。结果9个省、市37个药材样品中总皂苷含量在2.20%～19.91%，平均加样回收率为100.32%，RSD为1.78%。不同产地续断药材中总皂苷的含量存在差异，其中湖北鹤峰县野生续断总皂苷含量最高。结论此方法准确、可行，可作为续断药材的质量评价方法。

【关键词】续断；总皂苷；紫外-可见分光光度法

续断为川产道地药材之一，来源于川续断科川续断属植物川续断Dipsacus asperoides C．Y．Cheng et T．M．Ai的干燥根［1］。具有补肝肾、强筋骨、续折伤、止崩漏的功效，临床上主要用于腰膝酸软，风湿痹痛，跌扑损伤等［1］。据报道［2～4］，续断补肝肾、强筋骨、续折伤的主要活性成分是三萜皂苷类成分，现已分离鉴定出22种三萜皂苷。随着对续断研究的不断深入，特别是在软组织损伤、腰膝酸软、腰椎骨质增生等方面的广泛应用，使其需求量大增。为了评价续断质量的优劣，本实验以齐墩果酸为指标，采用紫外分光光度法测定续断中总皂苷的含量，从而为全面评价续断药材质量提供依据，

为合理开发利用续断药材资源提供科学依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器UV-1100紫外-可见分光光度仪(上海天美科学仪器有限公司)，KQ-3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），万分之一电子天平(德国赛多利斯BP-121S)，十万分之一电子天平(日本岛津LIBROR AEG-45S)。

1.2 样品与试剂续断采自和购自全国9个省、市37个药材样品（见表2），均经成都中医药大学鉴定教研室卫莹芳教授鉴定为川续断Dipsacus asperoides C．Y．Cheng et T．M．Ai的干燥根；齐墩果酸对照品(批号：110709-200505，购自中国药品生物制品检定所)；甲醇、乙醇、冰乙酸、高氯酸、香草醛等试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 测定方法依据本文以齐墩果酸为对照品测定续断药材中总皂苷的含量,通过总皂苷和齐墩果酸皂苷元与香草醛-高氯酸反应在可见区都能获得稳定的特征吸收峰。

2.2 对照品溶液的配制称取齐墩果酸对照品适量，精密称定，

加甲醇制成每毫升含0.141 mg的溶液，即得。

2.3 显色方法及测定波长的选择精密吸取齐墩果酸对照品溶液0.5 ml至具塞试管中,水浴挥干溶剂, 以空白试剂为对照，加入新配制的5%香草醛－冰醋酸0.2 ml，高氯酸0.8 ml, 密塞摇匀,于60℃水浴中加热20 min，立即取出，冰水浴冷却后加入冰醋酸5 ml，摇匀。于200～800 nm 波长范围内进行扫描,选取最大吸收波长548 nm为测定波长。

2.4 标准曲线的制备分别精密吸取上述对照品溶液0.1，0.2，0.3，0.5，0.7，0.9,1.2 ml至具塞试管中，随行试剂做空白对照，参照“2.3”项下自“水浴挥干溶剂”起依法操作，在548 nm处测定吸光度，以吸光度(Y)为纵坐标,对照品含量(mg)(X)为横坐标，绘制标准曲线(见图1)，并计算回归方程得:Y=5.726 2X+0.004 5，r＝0.999 8。

2.5 样品溶液的制备取续断样品粉末(过3号筛）约1.0 g，精密称定，加入20倍量50%乙醇，超声提取2次，30 min/次，滤过，滤液置50 ml容量瓶中，加入50％乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.6 精密度实验精密吸取齐墩果酸对照品溶液适量于具塞试管中，平行6份，参照“2.3”项下自“水浴挥干溶剂”起依法操作，