基因工程常见几种酶比较
生物基因工程酶知识点总结
生物基因工程酶知识点总结酶是生物体内的一类特殊蛋白质，它能够在生物体内催化化学反应，而不参与其中。
酶在生物基因工程中起着重要的作用，可以用于基因重组、DNA合成、蛋白质表达等方面。
本文将介绍一些关于生物基因工程酶的知识点。
一、酶的分类 1. 氧化还原酶：如过氧化氢酶、过氧化物酶等，能够参与氧化还原反应。
2. 水解酶：如淀粉酶、脂肪酶等，能够将底物分解成较小的分子。
3. 缩合酶：如DNA连接酶、RNA聚合酶等，能够将小分子合并成较大的分子。
4. 转移酶：如转移酶、糖基转移酶等，能够将官能团转移到其他底物上。
5. 氨基酸酶：如氨基转移酶、脱氨酶等，能够催化氨基酸间的转移反应。
二、酶的活性调节 1. 温度：酶的活性随温度的变化而变化，通常在适宜的温度范围内活性最高。
2. pH值：不同的酶对pH值有不同的适应范围，酶的活性随pH值的变化而变化。
3. 金属离子：某些酶的活性需要特定的金属离子的参与，如锌、铁、铜等。
4. 辅因子：有些酶需要辅因子的参与才能发挥活性，如维生素B12等。
5. 底物浓度：酶的活性随底物浓度的增加而增加，但达到一定浓度后活性趋于饱和。
三、酶在基因重组中的应用 1. 切割酶：如限制性内切酶，能够识别特定的DNA序列并切割DNA链，为基因重组提供切点。
2. 连接酶：如DNA连接酶，能够将DNA片段连接成完整的DNA分子，用于合成重组DNA。
3. 标记酶：如绿色荧光蛋白，能够将目标基因与标记序列融合，以便在转基因研究中进行检测。
四、酶在蛋白质表达中的应用 1. DNA聚合酶：能够在体外合成DNA分子，用于合成目的蛋白质的基因。
2. RNA聚合酶：能够将DNA转录成mRNA，为蛋白质合成提供模板。
3. 翻译酶：如核糖体，能够将mRNA翻译成蛋白质。
五、酶在药物研发中的应用 1. 酶的抑制剂：可以通过抑制特定酶的活性来治疗疾病，如抗癌药物中的酪氨酸激酶抑制剂。
2. 酶的活化剂：可以通过激活特定酶的活性来治疗疾病，如生物合成抗生素中的β-内酰胺酶活化剂。
基因工程常用的工具酶
2024/10/14
.
6
识别序列呈典型的旋转对称型回文结构
EcoR I的切割位点
EcoR I的识别序列
5‘ … G C T G A A T T C G A G … 3’ 3‘ … C G A C T T A A G C T C … 5’
回文结构:两条核苷酸链的核酸序列呈双重旋转对称排列的 DNA双螺旋结构
2024/10/14
.
14
第三节 DNA聚合酶
2024/10/14
.
15
DNA聚合酶：能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤 的一类酶
❖作用特点
能够把脱氧核苷酸分子连续的加到DNA分子引物链的3’-OH末端，催 化核苷酸的聚合
❖作用条件
➢ 脱氧核苷酸原料：四种脱氧核苷三磷酸dNTP（dATP、dTTP、 dCTP、dGTP）
属名
种名
株名
Haemophilus influenzae d
HindΙ、 HindⅡ、 Hind Ⅲ
不同限制修饰系统
2024/10/14
.
4
三、Ⅱ型限制酶的特性-识别序列
识别双链DNA分子中特定的4 - 8对核苷酸序列
EcoR I的切割位点
EcoR I的识别序列
5‘ … G C T G A A T T C G A G … 3’ 3‘ … C G A C T T A A G C T C … 5’
5‘ HO 3‘ HO
T4-PNP
5‘ p 3‘ HO
OH 3‘ OH 5‘
Mg2+ pppATP（g-32P-ATP）
OH 3‘
5‘ HO
BAP / CIP
基因工程的酶
基因工程的酶介绍基因工程是一种通过改变生物体基因组来获得特定性状的技术。
其中，酶在基因工程中发挥着重要的作用。
本文将探讨基因工程中常用的酶及其应用。
基因工程中常用酶的分类1. 切割酶切割酶，又称限制性核酸内切酶，能够识别DNA中特定的核酸序列，并在该序列的特定位置切割DNA链。
常用的切割酶包括EcoRI、BamHI等。
切割酶在基因工程中主要用于构建重组DNA。
2. 连接酶连接酶用于将不同来源的DNA片段连接在一起。
其中，最常用的连接酶是DNA连接酶，如T4 DNA连接酶，它能够在两条DNA末端之间形成磷酸二酯键，将DNA片段连接成一个整体。
3. 反转录酶反转录酶能够将RNA转录为相应的DNA，这一过程称为反转录。
在基因工程中，反转录酶常用于制备cDNA，即将RNA转录为相应的DNA模板，用于进一步的分析研究。
4. 聚合酶聚合酶是一类能够在DNA模板上合成新的DNA链的酶。
其中，最常用的聚合酶是DNA聚合酶，如Taq聚合酶。
DNA聚合酶在PCR（聚合酶链式反应）中起到至关重要的作用，实现了DNA的大规模扩增。
基因工程中酶的应用1. 重组DNA构建基因工程中的一个重要应用是构建重组DNA。
通过使用切割酶将目标基因从一种生物体中切割出来，再利用连接酶将其连接到载体DNA上，构建重组DNA。
重组DNA 可以用于基因克隆、基因转导等研究。
2. 基因突变酶在基因工程中也可以用于基因突变。
通过使用切割酶切割目标基因的特定位点，再利用连接酶连接具有不同序列的DNA片段，可以实现DNA序列的改变。
这一技术常用于研究基因功能、构建突变蛋白等。
3. 基因表达调控酶在基因工程中还可以用于基因表达调控。
例如，通过引入特定的启动子和调控元件，或利用反转录酶合成cDNA，可以实现对基因的调控。
这一技术在基因治疗、基因工程育种等领域有着广泛的应用。
4. 基因扩增聚合酶链式反应（PCR）是基因工程中的常用技术，它能够在短时间内扩增出目标基因的大量拷贝。
基因工程中常用的三种工具酶
一、限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）1．定义：凡能识别和切割双链DNA分子内特定核苷酸序列的酶，也称为限制酶（restriction enzyme，RE）。
2．类型：来自原核生物，有三种类型。
Ⅰ型：兼具甲基化修饰和ATP参与的核酸内切酶活性，随机切割。
Ⅱ型：大多能特异识别4～6个核苷酸序列（回文结构），最大识别序列为8个核苷酸，如SfiI、NotI；但有近10种Ⅱ型限制酶的识别序列为非回文结构，如SfaNI、MnlI等，Ⅱ型限制酶均可作为基因工程的工具酶。
另有一些来源不同的限制酶的识别位点是相同的核苷酸序列，将这类酶特称为同工异源酶（isoschizomers）或同裂酶。
同工异源酶切割产生相同的末端；有一些同工异源酶对于切割位点上的甲基化碱基的敏感性有所差别，故可用来研究DNA 甲基化作用，如SmaI和XmaI；HpaII和MspI；MboI和Sau3AI是成对的同工异源酶；其中HpaII和MspI是一对同工异源酶，其识别位点是CCGG。
与同工异源酶对应的一类限制酶，它们虽然来源各异，识别序列也各不相同，但都产生出相同的粘性末端，称为同尾酶（isocaudamers）。
常用的限制酶BamHI、BclI、BglII、Sau3AI和XhoII就是一组同尾酶，它们切割DNA之后都形成由GATC4个核苷酸组成的粘性末端。
显而易见，由同尾酶所产生的DNA片段，是能够通过其粘性末端之间的互补作用而彼此连接起来的，因此在基因克隆实验中很有用处。
但必须指出，由两种同尾酶消化产生的粘性末端，重组之后所形成的序列结构再不能被原来的任何一种同尾酶所识别。
Ⅲ型：功能基本同Ⅰ型，但为特定位点切割。
三种限制酶的区别如下表所示：Ⅰ型Ⅱ型Ⅲ型DNA底物dsDNA dsDNA dsDNA辅助因子Mg2+,A TP,SAM Mg2+ Mg2+,A TP识别序列特异特异特异切割位点非特定（于识别序列前后100~1000bp范围之内）特定（切割于识别序列之中或近处，固定位点）特定（切割点在识别序列后25~75bp处）与甲基化作用的关系内切酶蛋白同时具有甲基化酶的作用酶蛋白不具有甲基化作用内切酶蛋白同时具有甲基化酶的作用3．命名：第一个字母取自产生该酶的细菌属名，用大写；第二、第三个字母是该细菌的种名，用小写；第四个字母代表株。
基因工程基因工程工具酶
基因工程工具酶引言基因工程是一门利用重组DNA技术来改变生物体遗传性状的学科。
在基因工程的过程中，基因工程工具酶发挥着关键的作用。
本文将介绍几种常用的基因工程工具酶，包括限制性内切酶、连接酶和修饰酶。
一、限制性内切酶1.1 定义限制性内切酶（Restriction Enzyme）是一类具有特异性切割DNA双链的酶。
它可以识别并切割DNA的特定序列，通常这个序列是对称的，在切割后会产生特定的片段。
1.2 工作原理限制性内切酶能够通过识别和结合DNA的特定序列来进行切割。
它们通常识别的序列是4到8个碱基对长，具有一定的对称性。
一旦内切酶与特定序列结合，它会切断DNA的链，在特定的位置形成断裂，从而将DNA切割成特定的片段。
1.3 应用限制性内切酶在基因工程中有着广泛的应用。
它们可以用于构建基因工程载体、进行DNA片段的精确克隆等。
通过选择适当的限制性内切酶，可以对DNA进行特定的切割和连接，从而实现对目标基因的定向操作。
二、连接酶2.1 定义连接酶（Ligase）是一种酶类，能够将两条DNA片段连接起来。
在基因工程中，连接酶通常被用于连接目标基因和载体。
2.2 工作原理连接酶通过催化两条DNA片段之间的磷酸二酯键的形成来连接DNA。
它可以将两条具有互补末端的DNA片段连接在一起，形成一个新的DNA分子。
2.3 应用连接酶在基因工程中的应用非常广泛。
它们可以用于构建重组DNA分子、进行目标基因的插入等。
通过连接酶的作用，可以将多个DNA片段连接起来，构建出符合需要的重组DNA分子。
三、修饰酶3.1 定义修饰酶是指能够修饰DNA分子的酶类。
在基因工程中，修饰酶通常被用于添加或去除特定的DNA序列。
3.2 工作原理修饰酶可以通过催化酸解或碱解反应来改变DNA分子的结构。
它们可以添加或去除DNA上的甲基基团、酶解酶切位点等。
3.3 应用修饰酶在基因工程中起着重要的作用。
它们可以用于DNA甲基化的分析、目标基因的修饰等。
基因工程所需要的酶
基因工程所需要的酶引言基因工程是一项重要的生物技术，它利用酶的特殊功能来改变生物体的遗传信息。
酶在基因工程中起着关键作用，它们能够催化特定的化学反应，使得基因组中的DNA序列发生改变。
本文将介绍基因工程中常用的酶以及它们在不同的应用领域中的作用。
常用酶及其功能1. 限制性内切酶限制性内切酶是一类能够识别DNA序列并在特定位置切割DNA链的酶。
它们广泛应用于基因工程中的DNA重组、克隆和测序等领域。
限制性内切酶根据其识别位点和切割模式被分类为不同类型，如EcoRI、BamHI等。
这些酶可以将DNA分子切割成片段，并产生粘性或平滑末端，为后续操作提供方便。
2. DNA连接酶DNA连接酶是一种能够将两个单链DNA或RNA分子连接成一个完整双链分子的酶。
它们在基因工程中常被用于连接DNA片段，构建重组DNA分子。
T4 DNA连接酶是常用的DNA连接酶之一，它能够将DNA片段连接成环状或线性结构。
3. 核酸聚合酶核酸聚合酶是一类能够催化DNA或RNA的合成的酶。
在基因工程中，核酸聚合酶被广泛应用于PCR（聚合酶链式反应）和基因克隆等领域。
其中，Taq DNA聚合酶是PCR反应中最常用的核酸聚合酶之一，它能够耐高温，并具有高度特异性和高效率。
4. 核酸修复酶核酸修复酶是一类能够修复DNA损伤和错误的酶。
在基因工程中，核酸修复酶被用于修复突变的DNA序列，纠正基因组中的错误。
CRISPR-Cas9系统利用Cas9核酸修复酶来导向性地切割和编辑目标DNA序列。
5. 核苷三磷脂转移ase核苷三磷脂转移ase（NTPase）是一类能够催化核苷三磷酸与核苷二磷酸之间的磷酸酯键转移的酶。
在基因工程中，NTPase被广泛应用于DNA合成和修饰等领域。
DNA聚合酶的活性依赖于NTPase的催化作用。
酶在基因工程中的应用1. DNA重组和克隆在基因工程中，限制性内切酶被广泛应用于DNA重组和克隆。
通过选择适当的限制性内切酶，可以将目标DNA片段与载体DNA连接起来，构建重组DNA分子。
基因工程常用的工具酶
农作物的产量和质量。
医学领域
基因工程被用于治疗遗传性疾 病、癌症、感染性疾病等，以 及制备疫苗和单克隆抗体。
工业领域
基因工程被用于生产高价值的化 学品、生物燃料和生物材料等， 降低生产成本和提高产品质量。
基础研究
基因工程被用于研究基因的结构 和功能、蛋白质的表达和调控等
常见的限制性核酸内切酶包括EcoRI、BamHI、HindIII等。
DNA聚合酶
DNA聚合酶是催化DNA复制过程中 DNA聚合反应的酶。
常见的DNA聚合酶包括Taq酶和T7噬 菌体DNA聚合酶等。
DNA聚合酶具有合成DNA的功能，可以在 模板DNA的指导下，将脱氧单核苷酸逐个加 到引物RNA的3'-OH末端，形成新的互补链 。
，促进生命科学领域的发展。
02 基因工程常用的工具酶概 述
工具酶的定义与分类
定义
工具酶是指用于基因工程操作的一类 酶，能够催化DNA或RNA的切割、连 接、修饰等反应，是基因工程实验中 必不可少的工具。
分类
根据功能的不同，工具酶可以分为限 制性核酸内切酶、DNA聚合酶、反转 录酶、T4核酸连接酶等。
工具酶在生物制药和农业生产中应用广泛，如基因工程的抗体药物、疫
苗、农作物改良等领域，能够提高产品的产量和质量。
工具酶的来源与生产
来源
工具酶主要来源于微生物、植物和动 物等生物体，其中微生物来源的酶是 最常用的。
生产
工具酶的生产通常采用基因工程技术 ，通过克隆和表达酶的基因来获得相 应的酶蛋白，再经过纯化和复性等步 骤得到高活性的工具酶。
VS
转录激活因子
激活特定基因的表达，实现基因治疗。
基因工程进行同源重组所用的酶
基因工程进行同源重组所用的酶基因工程中的同源重组，说白了就是利用一种巧妙的方式把外来的DNA片段植入到目标基因组里。
为了让这一切顺利进行，得有一些“帮手”出场。
这些“帮手”就是各种酶。
哎，这些酶可不是随随便便就能搞定任务的，它们各有各的“拿手绝活”，各司其职，密切配合，才能把事情搞成。
你可以把它们想象成一群专业的“工匠”，每个都有独门的技术，专门为基因工程这种“建设项目”提供各种服务。
最重要的几个“好帮手”得是限制性内切酶、DNA连接酶、重组酶和同源重组酶。
这些名字听起来都高大上，但是其实每个酶的任务都超级简单明了。
比如，限制性内切酶，别看它名字挺吓人，它其实就是个“剪刀手”，专门在DNA上剪开特定的地方，把你要插入的基因片段从其他的DNA中剪出来。
你可以想象它像个非常挑剔的裁缝，专挑最合适的地方下剪刀，绝不会弄错。
剪出来的基因片段呢，怎么往新地方插进去呢？这就需要DNA连接酶来帮忙了。
DNA连接酶就像个巧妙的“粘合剂”，它能把DNA片段两端的缺口补上，确保新基因和目标基因组紧密结合。
说白了，它就是那种能把两块分开的拼图拼起来的人，拼得又快又稳，永远不出错。
你想啊，没它的帮忙，哪有基因重组的成功？然后，有些更复杂的重组过程，就得靠重组酶和同源重组酶了。
重组酶能帮助DNA片段在特定位置插入，而且这些酶能帮助DNA片段跟原本的DNA链发生交换，找准位置“安家”。
你可以把它理解成一个非常精明的搬运工，它帮你把新的基因片段搬到合适的地方，确保它不仅能插进去，还能在新家里“住”得稳稳当当的。
至于同源重组酶，嘿，它可是个大牛。
它能识别DNA片段和目标DNA序列的相似部分（就是那些相同或者类似的基因序列），并帮助这些片段准确对接。
你要知道，基因工程就像一场大规模的建筑工程，每个砖头都得放在正确的位置，这样才不容易倒塌。
同源重组酶就像是建筑师，它非常有眼光，知道哪些“砖头”最适合放在哪里，确保整个基因组的稳定性。
各种酶比较
常见几种酶的比较比较剖析：限制性核酸内切酶（简称限制酶）、DNA连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶、反转录酶、DNA水解酶、RNA水解酶、解旋酶1．限制性核酸内切酶（简称限制酶）（1）来源：主要从微生物中分离纯化。
限制性核酸内切酶在微生物细胞中能将外来的DNA分子切断，因而能够限制异源DNA分子的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA分子却无损害作用，这样可以保护细胞自身的遗传信息。
（2）作用：识别DNA分子中某种特定核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子，使磷酸二酯键断开。
（3）结果：产生黏性末端。
同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端之间正好能够互补配对，有利于DNA片段的连接，这类限制酶最常被使用。
2．DNA连接酶DNA连接酶通过形成磷酸二酯键，从而将两条DNA片段连接起来。
DNA连接酶能够将不同的DNA分子连接起来，是由于DNA分子具有相同的双链构成的双螺旋结构。
3．DNA聚合酶DNA聚合酶主要是连接单个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起作用。
DNA 聚合酶只能将单个的脱氧核苷酸分子加到已有的DNA片段上，而DNA连接酶是在两个DNA 片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。
DNA聚合酶是以DNA分子一条链为模板，将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链，而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，因此DNA连接酶不需要模板。
4．RNA聚合酶RNA聚合酶又称RNA复制酶、RNA合成酶、转录酶，转录时它是以双链DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对的原则，把一个个游离的核糖核苷酸聚合成核糖核苷酸链，形成磷酸二酯键，转录完成后仍然保持DNA双链的结构；复制时它是以单链RNA为模板，按照碱基互补配对的原则，把一个个游离的核糖核苷酸聚合成核糖核苷酸链，形成磷酸二酯键，复制完成后，两条核糖核苷酸链分离。
5．反转录酶反转录酶又称逆转录酶、依赖于RNA的DNA聚合酶，它能够以RNA为模板催化合成互补DNA。
基因工程操作的各种酶
基因工程操作的各种酶基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应。
已经知道有许多重要的核酸酶，如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等，在基因工程的操作中有着广泛的用途。
1．限制性内切核酸酶限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease)是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并在合适的条件下使每一条链一定位点上的磷酸二酯键断开，产生具有3／―OH基团和5／―P基团的DNA片段的内切脱氧核糖核酸酶(endo-deoxyribonuclease)。
至今发现的限制性内切核酸酶有I型酶、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶，它们各具特性。
基因工程中所说的限制性内切核酸酶都是指Ⅱ型酶。
限制性内切核酸酶把目的基因从只有四种碱基A、T、G、C组成的DNA长链(人类D NA长度为3X109个碱基对)中准确地剪切下来。
每一种限制性内切核酸酶的识别位点是固定的，如EcoRI的识别位点是GAATTC及其互补序列CTTAAG。
1968年，沃纳?阿尔伯博士、丹尼尔?内森斯博士和汉密尔?史密斯博士第一次从大肠杆菌中提取出限制性内切核酸酶。
该酶能够在DNA上寻找到特异的“切点”，认准后将DNA 分子的双链交错地切断。
至今人们已经分离提取出400多种限制性内切核酸酶。
目前，人们可以从复杂的生物有机体基因组中，经过限制性内切核酸酶酶切消化等步骤，分离出目的基因。
因其能够特异地切割DNA分子，人们常形象的将其比作“分子剪刀”。
2．DNA连接酶DNA连接酶能够催化具有3／―OH基团和5／―P基团的DNA片段之间形成磷酸二酯键。
在基因克隆中用来连接目的基因与载体。
3．DNA聚合酶DNA聚合酶可以使单核苷酸通过磷酸二酯键加在寡核苷酸的3／―OH端，在基因克隆中用来补平缺口。
尤其是具有耐热性质的DNA聚合酶的分离极大促进了基因等DNA片段的体外合成与扩增技术的发展。
4．反转录酶反转录酶以RNA为模板合成DNA，即cDNA (complementaryDNA，互补DNA)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
几种酶的比较
DNA聚合酶：
在DNA复制时起作用，将多个脱氧核苷酸催化聚合为脱氧核苷酸链（也就是DNA单链），
此时形成的化学键是磷酸二酯键。
DNA解旋酶：
在DNA复制或转录时起作用，将DNA的双链解开，作用对象是氢键，使氢键断裂
DNA水解酶：
在消化道或细胞内起作用，将DNA水解为脱氧核苷酸，作用对象是磷酸二酯键
DNA连接酶：
在DNA修饰过程或基因工程中起作用，将两个DNA片段连接起来，此时形成的化学键是
磷酸二酯键。
下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是
复习资料：几种酶的比较
限制性核酸内切酶（以下简称限制酶）：限制酶主要存在于微生物（细菌、霉菌等）中。
一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。
是特
异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶（“分子手术刀”）。
发现于原核生物体内，现已分
离出100多种，几乎所有的原核生物都含有这种酶。
是重组DNA技术和基因诊断中重要的
一类工具酶。
例如，从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列，并在G和A
之间将这段序列切开。
目前已经发现了200多种限制酶，它们的切点各不相同。
苏云金芽
孢杆菌中的抗虫基因，就能被某种限制酶切割下来。
在基因工程中起作用。
DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起
作用。
DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复
制中起做用。
DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯
键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA
片段之间形成磷酸二酯键。
DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链
互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。
因此DNA连
接酶不需要模板。
RNA聚合酶（又称RNA复制酶、RNA合成酶）的催化活性：RNA聚合酶以完整的双
链DNA为模板，转录时DNA的双链结构部分解开，转录后DNA仍然保持双链的结构。
真
核生物RNA聚合酶：真核生物的转录机制要复杂得多，有三种细胞核内的RNA聚合酶：RNA
聚合酶I转录rRNA，RNA聚合酶II转录mRNA，RNA聚合酶III转录tRNA和其它小分子
RNA。
在RNA复制和转录中起作用。
反转录酶：RNA指导的DNA聚合酶，具有三种酶活性，即RNA指导的DNA聚合酶，
RNA酶，DNA指导的DNA聚合酶。
在分子生物学技术中，作为重要的工具酶被广泛用于建
立基因文库、获得目的基因等工作。
在基因工程中起作用。
解旋酶：是一类解开氢键的酶，由水解ATP来供给能量它们常常依赖于单链的存在，并能识别复制叉的单链结构。
在细菌中类似的解旋酶很多，都具有ATP酶的活性。
大部分的移动方向是5'→3'，但也有3'→5'移到的情况，如n'蛋白在φχ174以正链为模板合成复制形的过程中，就是按3'→5'移动。
在DNA复制中起做用。
DNA限制酶作用于磷酸二酯键
DNA连接酶作用于磷酸二酯键
DNA聚合酶作用于磷酸二酯键
DNA解旋酶作用于氢键
DNA聚合酶：把一个个脱氧核糖核苷酸连接起来，合成了新的子链DNA。
连接的化学键是磷酸二酯键。
DNA连接酶：是把一个断裂的DNA连连接起来，他作用的化学键也是磷酸二酯键，这个酶主要是基因工程里用的。
他们的区别在于，聚合酶是把单个脱氧核糖核苷酸连起来。
也就是用于DNA复制。
连接酶是把断裂的DNA再缝合起来。
一般就是限制酶切开的它在连起来。
DNA解旋酶：作用氢键使他断裂，从而使双链DNA变成单链，以便DNA的复制。
限制性内切酶：使双链DNA中，两条单链上的3'5'磷酸二酯键断裂，也就是磷酸与核糖或羟基与核糖上的键。