常用的核酸染料有哪些

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

EB(溴化乙锭):

溴化乙锭是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂,为强致癌诱变剂,但价格便宜。它与DNA

的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个

溴化乙锭分子。EB的这种特性使其成为一种核酸染料,常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。溴化乙锭在紫外区302nm和366nm处有吸收峰,在紫外光的照射下,溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光(590nm)。结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染

料高出20-30倍,因此溴化乙锭可检测到少至10ng的DNA条带,非常灵敏。

Gel Green和Gel Red:

GelRed 和 GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定性于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色

试剂。

其特点有:

高灵敏度:GelRed 和 GelGreen 是目前市场中最灵敏的凝胶核酸染料之一;

稳定性极好:可以使用微波炉加热,可以在室温下保存;

更安全:艾姆斯氏试验结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB);

广泛的适应性:适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色;

染色过程简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程

也只需30分钟且无需脱色或冲洗;

对 DNA 和 RNA 的迁移影响小:对核酸迁移的影响小于 SYBR Green 。

与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:使用 312nm 激发的 UV 凝胶

成像系统时,GelRed 可以完美的替代EB;使用 254nm 激发的 UV 凝胶成像系统或可见光激

发的凝胶观察装置时,GelGreen 足以替代任意一种 SYB染料。但该染料会使小片段DNA迁

移慢一些(与EB相比).

Gold View I型/II型:

Goldview对于大片段DNA的染色效果良好,但是在对于500bp以下的片段效果不是很好,

还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭,一般5-10min条带就会消失。另外Goldview不适用于胶回收。Goldview其实就是AO(丫啶橙,一种剧毒产品)且荧

光效果远不如EB,灵敏度差,本底色严重,不利用于回收,不稳定,在紫外灯下其诱导突

变能力极高

SYBR Green 和SYBR Gold:

稳定性差,也有毒性。它属于花箐素类核酸染料,花箐类染料不是无毒的,而只是低毒的,

电泳级别的是经过修饰的,

修饰有三种:

1.加入卤素或氰基。

2.2.插入环羟基。

3.3.加入稳定剂。SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背

景信号低。SYBR Green和SYBR Gold相对于EB的稳定性要差很多。SYBR系列的染料也能进入细胞染色线粒体以及核内的DNA,从而产生危害。SYBR Green I已被证实在紫外光下

将会产生强诱变能力,使DNA或其他物质发生突变。

相关文档
最新文档