功能基因组学
基因组学与功能基因
基因组学与功能基因基因组学是研究生物体或物种所有基因组的科学。
它涵盖了对基因序列、基因组结构、基因组功能以及基因组在生物体中的表达和调控等方面的研究。
而功能基因则指那些与生物体正常功能相关的基因，它们编码出蛋白质或产生功能性RNA分子。
1. 基因组学的发展历程基因组学属于现代生物学的重要分支，其起源可以追溯到上世纪的遗传学研究。
随着DNA双螺旋结构的解析和测序技术的不断进步，人类基因组计划的启动标志着基因组学的发展进入了一个全新的阶段。
2. 基因组的结构和组织基因组是一个生物体的全部遗传信息的总和。
在人类基因组中，存在着一条条染色体，其中包含了数以亿计的碱基对。
这些碱基对组成了基因，而基因则是编码蛋白质的指令。
此外，基因组还包含了非编码RNA等其他功能基因。
3. 基因组功能研究方法为了揭示基因组的功能，研究者们使用了一系列的实验方法和技术手段。
例如，RNA测序技术可以帮助鉴定和量化转录产物，从而确定基因的表达水平和可变剪接情况。
基因敲除和基因过表达技术则可以揭示基因的功能和作用机制。
4. 基因组学在疾病研究中的应用基因组学的发展对于人类疾病的研究和治疗具有重要意义。
通过对某些疾病患者基因组的测序和分析，可以发现与疾病相关的突变位点和基因。
这些信息为疾病的早期诊断和个体化治疗提供了新的思路和途径。
5. 功能基因的分类和作用功能基因按照其作用可以分为编码基因和非编码基因两大类。
编码基因通过合成蛋白质来实现具体的功能，而非编码基因则通过产生功能性RNA调节基因表达和调控细胞过程。
6. 功能基因的调控机制功能基因的表达和调控具有高度复杂性。
这涉及到转录因子、DNA 甲基化、组蛋白修饰等多种调控因素和机制的参与。
通过深入了解这些调控机制，可以更好地理解功能基因的作用和功能。
7. 功能基因与进化功能基因在生物进化过程中起到了不可或缺的作用。
通过比较不同物种的基因组序列和功能基因的表达，可以揭示基因组在进化过程中的变化和适应性的形成。
功能性基因组学的原理和技术
功能性基因组学的原理和技术功能性基因组学是研究基因与其功能之间的关系的学科。
它不仅研究基因结构和序列，还研究基因表达以及基因间的相互作用。
在生物学研究中，功能性基因组学可以帮助人们更好地了解生命的本质，也可以用于解决医学问题。
功能性基因组学的原理在功能性基因组学中，我们可以利用各种技术以深入地了解基因的结构和功能。
其中，最常用的技术可能是基因芯片技术和转录组技术。
基因芯片是一种技术，可以快速同时检测成千上万个基因的活性状况。
这个技术可以帮助我们了解不同组织和条件下基因的表达量的变化。
使用基因芯片时，我们首先需要在芯片上固定的每个区域上加入DNA序列片段，而这些DNA序列片段与我们感兴趣的基因序列相对应。
然后我们用RNA提取物处理芯片，RNA序列会结合到芯片表面固定的相应的DNA序列上。
最后，我们可以通过分析所接受信号的强度来检测不同基因的表达量。
另外，转录组技术可以帮助我们了解基因表达水平以及基因在细胞和组织中的功能。
它是一种测定RNA表达方式的技术，可以用于了解样品RNA的细胞类型、状态，以及基因表达的变化。
功能性基因组学的技术功能性基因组学的技术包括：基因芯片技术、转录组技术、全基因组测序技术、表观遗传学技术以及蛋白质组学技术等。
全基因组测序技术是一种可以深入了解基因组序列的技术。
使用全基因组测序技术我们可以获取整个基因组的序列信息，并且可以研究基因突变、多态性和进化等问题。
表观遗传学技术是一种可以研究基因表达变化的技术，包括了了解基因组的修饰状态和DNA甲基化等。
表观遗传学技术可以用于研究遗传性疾病和环境因素对表观遗传修饰的影响。
蛋白质组学技术是一种研究基因表达所产生蛋白质的技术。
它可以快速鉴定蛋白质组成分、了解其功能及参与代谢和信号传导等方面的调节。
总之，功能性基因组学技术让我们能够深入了解基因组及其功能以及基因之间的相互作用，帮助人们更好地探究生命科学的本质，甚至可以为医学问题的解决提供支持。
功能基因组学在医学中的应用
功能基因组学在医学中的应用在医学领域中，随着时代的发展和技术的日新月异，功能基因组学这个新兴的技术手段逐渐成为医学领域中的重要一环。
作为现代医学中的一项新技术，功能基因组学在医学治疗和疾病预防方面具有重要意义。
而如何将其运用到医学实践中，需要进行充分的研究和探索。
一、功能基因组学的概念和原理功能基因组学是基因组学研究的一个分支，主要是对基因表达和功能进行分析，了解基因在生物体内的作用和功能。
而功能基因组学的技术手段主要包括基因芯片技术、基因组序列技术、质谱技术等。
通过这些技术手段，可以对细胞和组织中的基因表达进行全面的分析和系统的研究。
二、功能基因组学在医学领域中的应用随着功能基因组学技术的发展和完善，其在医学领域中的应用也变得越来越广泛。
下面我们就来看看功能基因组学在医学方面中的应用。
1、基于基因芯片的个性化医疗在基因芯片技术的支持下，我们可以获取更加全面和准确的基因信息。
这些信息可以帮助医生对各种疾病进行更加精准的治疗和预防。
比如，在癌症治疗方面，通过分析癌症细胞中的基因表达情况，可以找到指向性治疗方法，从而达到更好的癌症治疗效果。
2、基于基因组序列技术的预测和诊断通过对基因序列的研究和分析，可以预测某些疾病的风险，从而制定相应的预防和诊断措施。
比如，在肥胖症研究方面，可以通过检测基因序列中的特定基因，预测某些人患肥胖症的风险，从而指导人们进行健康生活方式的选择。
3、基于质谱技术的疾病诊治利用质谱技术，可以对蛋白质和代谢物进行分析，并获取它们的质量信息。
这些数据可以帮助医生对某些疾病进行更加准确的诊断。
比如，在心血管疾病方面，可以通过质谱技术检测心脏组织中特定的蛋白质，找到引起心脏疾病的因素，从而制定相应的治疗方法。
三、功能基因组学的未来发展及展望作为一个新兴的技术手段，功能基因组学在医学领域中的应用有着广阔的前景。
未来，我们可以通过不断的研究和探索，更好地开发和运用功能基因组学技术，为疾病治疗和预防提供更加精准的方法和手段。
基因组学和功能基因组学研究
基因组学的研究意义
基因组学研究有助于揭示生命的本质和规律 基因组学研究有助于人类疾病的预防、诊断和治疗 基因组学研究有助于推动生物技术的创新和发展 基因组学研究有助于促进医学、农业和工业等领域的发展
Part Three
基因组学研究方法
基因组测序技术
定义：基因组测序 技术是一种高通量 的技术，用于测定 生物体的全部基因 序列，从而发现基 因序列中的变异和 功能。
组学研究的可持续发展。
伦理、法律和社会影响
伦理问题：基 因编辑技术可 能引发道德争 议，如设计婴 儿等
0 1
法律监管：各 国对基因编辑 技术的法律监 管存在差异， 需加强国际合 作
0 2
社会影响：基 因编辑技术可 能加剧社会不 平等，需要关 注弱势群体的 权益
0 3
公众参与和透 明度：加强公 众参与和透明 度，促进科学 界与社会各界 的对话与合作
基因组学和功能基因组学还可以应用于个性化医疗领域，根据患者的基因组信息，为 患者量身定制最合适的治疗方案，提高治疗效果和患者的生存率。
随着基因组学和功能基因组学技术的不断发展，未来将会有更多的新药被发现和开发 出来，为人类的健康事业做出更大的贡献。
生物进化与物种改良
基因组学和功能基因组学在生 物进化研究中的应用，有助于 深入了解物种的起源和演化过
Part Five
基因组学与功能基 因组学的应用前景
精准医疗与个性化治疗
基因组学和功能基因组学在精准医疗中发挥关键作用，通过对基因变异和功能的深入研 究，实现个性化治疗和精准用药。
基因组学和功能基因组学有助于发现新的靶点和治疗手段，加速新药研发和临床试验进 程，提高治疗效果和降低副作用。
基因组学和功能基因组学的发展将推动个体化预防和预测医学的发展，通过对个体的基 因组测序和表型特征分析，预测疾病风险并提供针对性的预防措施。
基因组学与基因功能的解析
基因组学与基因功能的解析随着科技的不断发展，基因组学也越来越受到人们的关注。
基因组学是研究整个基因组序列，并解析其功能的科学。
在基因组的研究中，基因功能是一个至关重要的问题。
基因功能的解析能够帮助人们更好地理解基因对生命过程的影响，以及生物的遗传特征。
本文将探讨基因组学与基因功能的解析及其未来发展。
一、基因组学基因组学是一门研究整个基因组系列，包括DNA序列、RNA序列等的科学。
基因组学的研究范围非常广泛，从染色体、基因、序列到基因调控等各个方面都有涉及。
目前，基因组学已经成为研究生命科学领域的一个重要分支。
基因组学的研究有许多重要的应用，其中最重要的一个应用就是对基因功能的解析。
通过研究基因组，人们可以了解基因在形成特定生命现象中的作用。
比如，人类基因组计划通过对人类基因组的测序，发现了数以千计的基因，从而对人类的遗传特征和疾病的诊断与治疗提供了更全面、更深入的认识。
二、基因功能的解析基因功能是指基因对生物体内某个特定生命过程的影响。
目前，人们已经将基因功能的解析作为基因组学研究的一个重要方向，从而探究基因之间的相互作用和生物过程的机制。
基因功能的解析包括以下几个环节：1、基因定位基因定位就是找到基因在染色体上的位置。
通过基因定位，人们可以找到染色体上的各个区域，从而更好地了解该基因在生物体内的作用。
2、功能识别功能识别包括寻找基因参与的生物过程，以及基因在该过程中的作用。
这一步是基因功能解析的关键所在。
3、功能验证功能验证是将已识别的基因功能验证并进一步探究。
功能验证可以通过常规的生物学实验来进行，比如基因敲除、基因表达、基因蛋白的功能等等。
4、应用最后，基因功能解析的最终目的是帮助人们更好地认识基因对特定生命过程的作用，以便为人类提供更好的生物医学应用。
三、原理与方法基因功能的解析是一个复杂的过程，需要运用分子生物学、基因组学、生物信息学等多种技术方法，以下是其中一些常见的方法：1、RNAi转录后基因沉默技术（RNAi）可以有效地沉默基因表达，从而识别和验证基因功能。
基因组学、功能组学
8
转录图谱
–
端序列(表达序列标签 用cDNA的5‘或3’端序列 表达序列标签，EST) 的 或 端序列 表达序列标签， 作为探针与基因组DNA杂交， 杂交， 作为探针与基因组 杂交 标记转录基因， 标记转录基因，绘制可表达 基因的转录图 通过分析基因组序列 获得基因组结构的完整信息
9
序列图谱
–
人类基因组的全部核苷酸排列 序列，是最详细、 序列，是最详细、最准确的物理 图谱
15
目的
– – –
疾病相关基因的鉴定和克隆， 疾病相关基因的鉴定和克隆，用于疾病的诊断 寻找人类基因的共同变异型----个体差异 寻找人类基因的共同变异型 个体差异 基因组功能注释---- 生物学功能 基因组功能注释
16
所用技术
基因芯片 基因表达序列分析 差异显示PCR 差异显示 消减杂交法
17
4
5
遗传图谱------显示所知的基因 或遗传标记的相对 显示所知的基因/或遗传标记的相对 遗传图谱
位置
–
利用人类基因组中一些特殊位点作为 遗传标志， 遗传标志，进行基因组分区 遗传多态性-----同一位置上有两个以上 同一位置上有两个以上 遗传多态性 等位基因，且出现频率大于 等位基因，且出现频率大于1% RFLP、STR、、 、 、、SNP 、、
基因组学及相关组学
基因组学 后基因组学 蛋白质组学
组学 ---- 研究细胞、组织或整个生物体内某种分子（核酸、 研究细胞、组织或整个生物体内某种分子（核酸、 蛋白质、各种代谢物等） 蛋白质、各种代谢物等）的所有组成内容
1
2
基因组学
概念：研究整个基因组的结构、 概念：研究整个基因组的结构、结构与功能之间的 关系、 关系、基因间的相互作用的一门科学 内容: 基因的结构、组成、存在方式、表达调控模式、 内容 基因的结构、组成、存在方式、表达调控模式、 功能及相互作用等 方法：基因作图、测序、 方法：基因作图、测序、基因定位和整个基因组功能分 析
功能基因组学的研究方法
功能基因组学的研究方法
功能基因组学可有趣啦，那它都有啥研究方法呢？
一种是基因表达谱分析哦。
这就像是给基因们做个大普查，看看在不同的情况，比如说细胞在健康状态和生病状态下，哪些基因特别活跃，哪些又变得很安静。
科学家们可以用像微阵列技术这样的方法，就像是在一个小芯片上排满了基因的小探子，来检测基因的表达水平呢。
这就好比是给基因们做一个大型的社交活跃度调查，知道它们在不同场景下的表现。
还有基因敲除和基因敲入技术呀。
基因敲除就像是把某个调皮捣蛋或者可能有特殊作用的基因从细胞这个大家庭里赶出去，然后看看细胞会发生什么变化。
要是这个细胞突然变得不正常了，比如说不能正常分裂或者对某种药物特别敏感了，那就说明这个被敲除的基因可能有着很重要的功能哦。
而基因敲入呢，就是把一个新的基因或者改变后的基因放进细胞里，看看它会给细胞带来什么新的特性，这就像是给细胞这个小世界里引进了一个新居民，看看大家怎么相处。
RNA干扰技术也是很厉害的研究方法呢。
它就像是一个小小的基因干扰器，可以特异性地让某些基因的表达降低。
想象一下，这个技术就像一个调皮的小精灵，悄悄地跑到基因旁边，让基因不能好好地发挥作用，然后我们就能通过细胞或者生物体的变化，来推断这个基因本来的功能啦。
蛋白质 - 蛋白质相互作用的研究也不能少。
基因最终是要通过蛋白质来发挥功能的嘛。
科学家们就像侦探一样，去寻找哪些蛋白质之间是好朋友，它们之间互相合作或者互相调节。
可以用酵母双杂交系统这样的方法，就像是给蛋白质们创造一个特殊的社交场所，看看谁和谁会互相结合，这样就能知道基因在蛋白质这个层面上是怎么协同工作的啦。
基因组学中的基因注释及其功能研究
基因组学中的基因注释及其功能研究随着现代科技不断的发展，人类对于基因组学的研究也愈发深入。
基因组学是指一种研究思想，旨在探索生物体的基因组结构、功能、演化和调控等相关问题。
基因组学的发展给生物学、医学和农学等相关领域带来了许多重要的应用与发现，其中基因注释是基因组学研究中极为重要的一部分。
本篇文章将以基因注释及其功能研究为主题，探讨其在基因组学中的重要性以及其未来的发展方向。
一、基因注释的概念及其意义基因注释指的是对基因组中的基因（gene）进行识别、分类、标记和注释。
将基因组序列中的编码序列（coding sequence, CDS）与非编码序列（non-coding sequence, NCS）进行区别，并对编码序列进行结构和功能描述，这就是基因注释的主要内容。
基因注释的作用是，可以为我们了解基因组提供重要的信息。
基因组数据的获取通常比较容易，但是从海量的数据中分离出具有功能的基因和相关的调控元件，并对其进行解读，需要借助于基因注释这样的工具。
基因注释较为常用的方式有以下三种：1. 基于比对的注释这种方式是将基因组中的序列通过比对所确定的蛋白质数据库进行注释。
通过将已知的蛋白质序列与基因组序列进行比对，可以快速准确地预测出基因组中的候选基因和编码序列。
由于这种方法利用了已知的蛋白质信息，所以其注释结果可以较为精确。
2. 基于预测的注释这种方式是利用计算机算法和基于生物学的假设，对基因组序列进行基因或基因元件的预测。
例如，早期的基因预测计算机软件（如Genscan）就采用一些经验性规则和模型，通过统计计算出一些可能的编码序列和exon（外显子）边界。
虽然基于预测的注释不如基于比对的注释那样准确，但仍具有一定的可靠性。
当处理未知物种的基因组数据时，基于预测的注释往往是唯一的选择。
3. 基于实验的注释这种方式是通过各种实验手段来辅助对基因组进行注释，例如基于转录组的注释、基于蛋白质组的注释、基于CAGE（5’端全长RNA转录组测序技术）的注释以及基于启动子测序数据的注释等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
学检测不典型，根据相关检查，诊断为AML（acute
myeloid leukaemia, 急性骨髓白血病），治疗几个月后未见 好转。后来用DNA芯片与病人骨髓的mRNA杂交，结果显 示AML和ALL(acute lymphoblastic leukaemia 急性成淋巴细胞 白血病)基因都表达较低，而在数据分析中发现，编码原肌
球蛋白的基因表达极高，从而确诊为肺泡弹状肌肉瘤，改
变治疗方案，病情出现缓解。
RNAi（RNA interference，RNA干扰） 通过反义RNA与正链RNA形成双链RNA特 异性抑制靶基因的转录后表达的现象，存在于 从低等的线虫到人类培养细胞等多种有机体。 RNAi相关技术是研究转录后调控的有效工 具，可用于功能基因组学研究以及基因治疗等 临床用途。
DNA芯片的基本原理
基因芯片技术是建立在Southern blot基础之上的，可
以说它是Southern blot的改进和发展，它的原理是：
变性DNA加入探针后在一定温度下退火，同源片段之 间通过碱基互补形成双链杂交分子。
基因芯片基本操作流程
制备总RNA mRNA经RT-PCR用Cy3（正常对照组） 和Cy5（实验组）荧光标记目的基因，得到cDNA探针 混合标记探针 与表达谱芯片上核苷酸片 段（或基因）杂交 扫描 分析杂交结果 结论
库序列比较,可以提供内含子结构,可选择剪切方式,转录起
始和终止位点等信息。
EST的应用
分离和鉴定新基因
将所获得EST用生物信息学方法与公共数据库中的已 知序列比对,可以迅速准现有价 值的EST,可以找到对应的克隆,获得的全长cDNA可以直接 用于转基因等研究。利用EST方法进行发现、分离基因的
转录图的分析（Transcriptional map）
分离纯化mRNA或cDNA比较分析蛋白质
的编码能力，使人们有可能系统、全面地从 mRNA水平了解特定细胞、组织或器官的基因 表达模式，并解释其生理属性，深入认识细胞 生长、发育、分化、衰老和疾病发生的机制。
序列图分析（sequence map） 测定由30亿个核苷酸组成的全部序列。 人类基因组的核苷酸序列图其实是分子水平 上最高层次，最详尽的物理图。
通过简单的方法将这些标签串联在一起，形成大 量多联体（concatemer），对每个克隆到载体的多 联体进行测序，并应用SAGE软件分析，可确定表 达的基因种类，并可根据标签出现的频率确定基 因的表达丰度（abundance）。
SAGE 步骤
1. 将5μg含有oligo dT（引物）的磁珠与 RNA混合。 2. 合成双链cDNA。 3. 用NlaⅢ酶消化形成一条链末端有标签 的产物。
以SNPs为基础研究人类疾病
遗传学家寻找致病基因的基本策略是：连锁分析和关
联分析。
连锁分析是确定两个遗传标记或者更多遗传标记
之间的物理关系，以确定致病基因的位置。
关联分析是研究某种遗传标记与某一特定表型的之间
的关系
表达序列标签（Expressed sequence tags, EST）
功能基因组学
20世纪人类科技史上的三大创举
90年代人类基因组计划
60年代人类首次登上月球 40年代第一颗原子弹爆炸
一、基因组学概念及范畴
基因组(genome)
泛指一个有生命体、病毒或细胞器的全部
遗传物质；在真核生物，基因组是指一套染色
体（单倍体）DNA。 基因组学(genomics) 是指发展和应用DNA制图、测序新技术以 及计算机程序，分析生命体（包括人类）全部基
较基因组学研究的重要内容。
EST的应用
用于制备cDNA芯片
芯片技术,是目前高通量筛选EST的有效方法。随着更 多基因组计划的开展和更多已知功能基因的积累,将来无需 进行测序,只通过DNA芯片技术就可以研究基因的功能。 EST计划的实施不仅获得了关于表达基因的信息资源同时 也获得了大量已经经过功能鉴定了的cDNA克隆资源而这
RNAi 机制模式图
RNA干扰技术
核心技术： siRNA（ Small interfering RNA）的设 计与合成 siRNA的标记
siRNA的转染
RNAi的检测（核酸及蛋白水平）
siRNA的设计
因组结构及功能。
基因组学包括3个不同的亚领域 结构基因组学(structural genomics)
功能基因组学(functional genomics)
比较基因组学(comparative genomics) 基因组学概念
结构基因组学
• 结构基因组学(structural genomics)是通过人类 基因组计划HGP的实施来完成的。 • HGP的内容就是制作高分辨率的人类遗传图和 物理图，最终完成人类和其它重要模式生物全 部基因组DNA序列测定，因此HGP属于结构 基因组学范畴。
异。
EST的应用
基因的定位克隆
以EST为重要来源的染色体物理图谱进一步方便了对 抗病基因的连续分析,可将抗病基因定位在染色体中的狭小 区段,缩小抗病基因的筛选范围。同时,EST标记是功能序列 区的标记,处于目标基因的范围内,是目标基因的编码区,因 此EST标记是分离功能基因的有效标签,大大提高了克隆基
基因芯片
基因芯片的应用
特定基因检测 突变检测 多态性分析 基因表达谱
• • •
•
• •
•
• •
生物信息学的工具 基因相关性研究 基因功能 药物设计和开发 潜在反义试剂开发 个体化医疗 身份识别 基因诊断 其他与生物有关的领域
例：肿瘤诊断
国外有一临床病人表现出典型的白血病症状，但形态
二、后基因组学的研究（Postgenome era）
人类基因组计划完成之后，生物学被重新划分为前基
因组和后基因组两部分。
科学研究已开始进入“后基因组时代”。主要是开展
功能基因组学和蛋白质组学的研究。
有科学家形象地说道：即使基因测话簿。“后基因 组时代”的最终目标，是要把深奥的DNA语言变成一 本大基因百科全书。
ESTs是从已建好的cDNA中随机取出一个克隆， 从5’末端或3’末端对插入的cDNA片段进行一轮单向自 动测序，所获得的约60-500bp的一段cDNA序列。
EST的应用
构建遗传学图谱
遗传图谱、物理图谱和转录图谱,是基因组计划要获得 的3张遗传学图谱。构建染色体物理图谱需要大量的单拷贝 短序列作为界标,由于大多数基因是单拷贝的,所以可以用 EST序列充当序列标签位点(STS)。而且,由于EST序列是转 录基因的产物,可用来直接构建遗传连锁图,通过与基因组文
因的效率。
EST的应用
比较基因组学的研究
利用EST序列中古老保守序列来研究生物中间的进化 关系,可以避免选择家系、构建群体、大量的统计分析等周 期,长而繁琐的遗传图谱的制作过程。此外,利用基因组较小 的模式生物所获得的已知功能基因,用复杂基因组生物,如人 和动植物的EST比较,从而推测,待测EST的功能,已经成为比
SAGE实例
DNA芯片
DNA芯片（DNA chip）也叫基因芯片（Gene chip）
是指在固相载体（玻璃，硅等）上有序地，高密度地
（点间距小于500μm）排列固定了大量的靶基因或寡
核苷酸（也叫探针）。这些被固定的分子探针在基质 上形成高密度的DNA微阵列，因此DNA芯片又叫 DNA微矩阵（DNA Microarray）
功能基因组学
功能基因组学，后基因组学(Post genomics)： 利用结构基因组学提供的信息和产物 通过在基因组或系统水平上全面分析基因的 功能 生物学研究从对单一基因或蛋白质的研究转 向对多个基因或蛋白质同时进行系统的研究。 功能基因组学的目的 基因功能发现 基因表达分析及突变检测 从基因组整体水平上对基因的活动规律进行 阐述。
4. 将样品分成两份，连接成含有识别序 列的产物，以备用BsmF1消化。 5. 用Mme I切割每一个样品形成约60bp 的标签。
6. 延伸5秒，连接成约130bp的双链标 签。
7. PCR扩增。
8. 用Nla Ⅲ酶切130bp产物释放34bp双链 标签。
9. 连接片断形成串联体。
10. 克隆到pZErO-1+里，并测序。
些资源都是功能基因组研究所不可缺少的。
SAGE （serials analysis of gene expression） 基因表达系列分析 1995年，JohsHopkins大学的分子肿瘤 学家Kinzler和Vogelstein及其同事建立 了SAGE方法.
SAGE 技术的主要理论依据：
来自转录物内特定位置的一小段寡核苷酸序列 （9~11bp）含有鉴定一个转录物特异性的足够信 息，可作为区别转录物的标签（tag）；
人类基因组计划（HGP）的研究内容
遗传图的分析（Genetic
map）
确定基因或DNA标记在染色体上的相对
位置与遗传距离
物理图的分析（Physical map） 以已知核苷酸序列的DNA片段（序列 标签位点）为路标，以碱基对作为基本测量 单位（图距）的基因组图。将各种标记直接 定位在基因库中的某个位点上。
RNAi 研 究 史
十几年前，Rich Jorgensen 在 矮牵牛花中发现转基因沉默 七年前，researchers Guo 和Kemphues 注入 反义RNA及正义链RNA都能抑制线虫par-1 基因的表达；三年后，Fire等注入双链RNA 到线虫中发现比注入单链更有效，随后发展 了通过RNAi进行线虫基因敲除的策略。 近年来，显微注射，基因枪，基因工程手段诱 导RNAi也成为果蝇研究中的反向遗传学工具。 2001年Elbashir等《 Nature》上首次报道 通过21个核苷酸的siRNA成功地在哺乳动 物培养细胞中诱导特异性基因沉默。随 后，在小鼠等多种细胞中也取得了成功。