酶化学法测定糖化血红蛋白性能的验证
糖化血红蛋白ngsp认证流程
糖化血红蛋白ngsp认证流程English Answer:NGSP HbA1c Certification Process.The NGSP HbA1c Certification Program is a voluntary program that provides laboratories with the opportunity to demonstrate their ability to accurately measure HbA1c levels. The program is administered by the National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) and is open to all laboratories that perform HbA1c testing.To become NGSP certified, laboratories must meet the following requirements:Use an NGSP-certified HbA1c assay.Participate in the NGSP HbA1c External Quality Assessment Program (EQAP)。
Achieve and maintain acceptable performance in the EQAP.Comply with all NGSP policies and procedures.Laboratories that meet these requirements will be issued an NGSP HbA1c Certificate of Certification. This certificate is valid for two years and must be renewed biennially.The NGSP HbA1c Certification Program is an important tool for ensuring the accuracy of HbA1c testing. By participating in the program, laboratories can demonstrate their commitment to providing high-quality patient care.Additional Information.The NGSP HbA1c Certification Program is based on the following standards:The International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) Reference Method for HbA1c.The Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Guideline for HbA1c Testing.The NGSP HbA1c EQAP is a proficiency testing program that assesses the accuracy of HbA1c assays. The EQAP is conducted twice a year and consists of two rounds of testing. Laboratories that participate in the EQAP must achieve acceptable performance in both rounds of testing.The NGSP HbA1c Certification Program is a valuable resource for laboratories that perform HbA1c testing. By participating in the program, laboratories can ensure that they are providing accurate and reliable HbA1c results.中文回答：NGSP 糖化血红蛋白认证流程。
糖化血红蛋白检测试剂盒(酶法)产品技术要求中山标佳
2.性能指标
2. 1外观
试剂R1溶液应呈淡蓝色、无颗粒、无杂质、无沉淀和悬浮物；试剂R2溶液应淡黄色、无颗粒、无杂质、无沉淀和悬浮物；溶血剂应呈无色、无颗粒、无杂质；
校准品应为红棕色冻干粉末。
2. 2净含量
试剂盒各试剂装量应不小于标示值。
2. 3试剂空白吸光度
用蒸馅水作为样本加入试剂测试，试剂空白吸光度A66施应为W 0. 60 （1cm光径）。
2. 4分析灵敏度
测试5. 5%被测物时,吸光度差值（AA）范围为0.01〜0.20。
2. 5线性范围
试剂盒在（2.0〜15） %范围内其线性相关系数rN 0.99,浓度N4. 0%时，相
对偏差W20%；浓度＜4.0%时，绝对偏差W3.0%。
2. 6测量精密度
2. 6. 1重复性
变异系数CV应W10. 0%o
2. 6. 2批间差
变异系数CV应W 10. 0%o
2.7准确度
用产品配套的2个浓度的定值校准品作为样本进行检测，其相对偏差应W
10. 0%。
2. 8分析特异性
当样品中葡萄糖浓度W24g/L,抗坏血酸W40mg/L，胆红素W10mg/L,乳糜W2g/'L,尿酸W50mg/L时，测试结果的干扰偏差应在± 10%范围内。
2. 9校准品
2. 9. 1准确度
其相对偏差W10%。
2. 9. 2均一性
批内瓶间差（变异系数CV）应W10.0%。
糖化血红蛋白检测指南(WST 461—2024)
5 生物学特性和临床意义
《中国2型糖尿病防治指南(2020年版)》推荐在采用标准化检 测方法且有严格质量控制的医疗机构，可以将HbA1c ≥6. 5% (48mmol/mol)作为糖尿病的补充诊断标准。使用HbA1c诊断糖 尿病时，需考虑可能影响糖化血红蛋白检测的其他因素(见本 标准附录B)。
HbA1c的局限性是检测结果对调整治疗后的评估存在“延迟 效应”，不能精确反映患者低血糖的风险，也不能反映血糖 波动的特征。
7 检验过程
7.5质量控制与保证
7.5.1室内质量控制 7.5.1.1 质控品的选择 质控品应均一、稳定、与患者待测样本具有相似或相同的基质。
所选质控品的浓度应至少具有2个浓度水平(包括正常值和异常高值 水平)。通常使用商品化质控品。若实验室需使用自制质控品，宜 按照IS0 Guide 80：2014 的要求制备。 7.5.1.2 室内质控的频次和时机 应基于分析系统的性能、分析批长度以及错误结果对患者危害的 风险确定实验室室内质控的频次和时机。应保证每个工作日开始 检测标本前至少进行一次包含两个水平(正常和异常高值水平)的室 内质控；使用新开瓶、新复溶试剂或新色谱柱/层析柱进行标本检 测前，宜首先进行质控品的检测。
3 术语和定义
注2：本标准中定义的糖化血红蛋白特指糖化血红蛋白Alc， 简称HbA1c或A1C(见本标准第5章)。HbA1c的国际单位(又称 IFCC单位）为mmol/mol，常用单位（又称NGSP单位）为%。 两者可通过主方程在规定测量范围内进行转换(见本标准第 3.4条、本标准附录A)。
注3∶使用NGSP单位时，为避免与相对百分号（%）混淆， 可加注HbA1c以示区分，即以“%HbA1c ”的形式表达。
WS/T 225临床化学检验血液标本的采集与处理WS/T 408定量检验程序分 析性能验证指南
糖化血红蛋白液相色谱串联质谱ifcc法
糖化血红蛋白液相色谱串联质谱ifcc法糖化血红蛋白（HbA1c）是一种反映血糖控制情况的重要指标。
血糖长期高于正常水平时，血红蛋白分子将与葡萄糖发生共价连接，形成糖化血红蛋白。
因此，测量血中糖化血红蛋白的含量可以反映一个人近3个月的血糖平均水平。
随着糖尿病的流行率不断增加，HbA1c的测量也变得越来越重要。
目前，常用的测定方法有高效液相色谱和质谱联用法(IFCC法)。
IFCC法是测定糖化血红蛋白的国际标准方法之一，该方法结合了液相色谱和质谱两种技术，能够更精确地测定HbA1c的含量，对于评估糖尿病患者的血糖控制状况具有重要的临床意义。
本文将重点介绍糖化血红蛋白液相色谱串联质谱IFCC法的原理、操作流程、分析结果和临床应用。
一、糖化血红蛋白液相色谱串联质谱IFCC法的原理IFCC法主要包括三个步骤：血红蛋白的提取、酶解和检测。
首先是血样的预处理，血液中的红细胞被破坏，释放出血红蛋白。
其次是对血红蛋白进行酶解，将糖化血红蛋白中的多肽链切割成小肽链，使其更容易与色谱柱分离。
最后是利用液相色谱串联质谱技术对样品进行分离和检测，根据糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白的不同特性进行定量测定。
二、糖化血红蛋白液相色谱串联质谱IFCC法的操作流程1、血样处理：将患者采集的静脉全血标本置于抗凝管中，密封，轻轻颠倒数次混匀。
在4°C下离心10min，取上清离心液，转移到新管中，并储存于-80°C以下。
2、血红蛋白的提取：取充分混匀的血红蛋白样本，用甲醇进行沉淀后离心，弃上清，将样品再次溶解，并再次离心，取上清液备用。
3、酶解：用特定酶对血红蛋白样本进行酶解，将多肽链切割成小肽链。
4、色谱分离和检测：利用液相色谱串联质谱技术对样品进行分离和检测，根据糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白的不同特性进行定量测定。
三、糖化血红蛋白液相色谱串联质谱IFCC法的分析结果IFCC法测得的糖化血红蛋白含量以百分比（%）表示，正常人群的糖化血红蛋白含量在4%~6%之间，糖尿病患者的糖化血红蛋白含量明显高于正常水平。
糖化血红蛋白酶法与HPLC法检测方法学比对分析
［ ２ ］ 张建立 ， 石春雷 ， 汪英 ， 等． 应用 右旋糖酐应 注意 的几个 问题［ Ｊ ］ ．
中国社区医师 ， １ ９ ９ ３ ， ８ （ １ ） ： １ ２ — １ ３ ．
［ ３ ］ 张利军． 用甘油 消除右 旋糖 酐对 总蛋 白测定 的干扰 Ｅ Ｊ ］ ． 检 验 医
检 验 医 学 与 临床 ， ２ ０ ０ ９ ， ６ （ ４ ） ： ２ ８ ６ ．
约为 ３ ｈ ［ 。但 从 以上 的病 例来 看 在 使 用 右 旋 糖 酐 的 过 程 中 蛋 白测 定 均 有 异 常 升 高 ， 而停 药 后 有 复 查 的 ３例 病 例 来 看 ， 最 短 的是 ５ ｄ ， 因此 建 议 临 床 医 生 如 果 在 使 用 右 旋 糖 酐 过 程 中 发 现
学， １ ９ ９ １ ， ６ （ １ ） ： ９ ．
以上 再 复 查 ， 以 确 定 血 清 蛋 白的 准 确 值 。 ３ ． ４ 有文献报道 ， 在 双 缩 脲 试 剂 中添 加 １ ５ ｍＬ ／ Ｌ甘 油 ， 可 有
［ ４ ］ 高志亮． 防 止 右旋 糖 酐 对 血 清 总 蛋 白定 量 的 干 扰 ［ Ｊ ］ ． 检验 医学 ，
右 旋 糖 酐 之 前应 先进 行 蛋 白 的 测定 ， 消 除 由此 造 成 的总 蛋 白测
定影响。
（ 收稿 日期 ： ２ Ｏ １ ３ － ０ ４ — １ ８ ）
参 考 文 献 ［ １ ３ 宋新华． 右旋糖酐干 扰双缩脲法 检测血清 总蛋 白的实验研 究［ Ｊ ］
－
检 验技 术与 方法 ・
Ｄ ｏＩ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ Ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ ． ２ ０ １ ３ ． ２ ０ ． ０ ４ ４ 文献标识码 ： Ａ 文 章编 号 ： １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ２ Ｏ 一 ２ ７ ３ ０ — ０ ２
糖化血红蛋白检测方法学比对
糖化血红蛋白检测方法学比对引言：糖化血红蛋白是糖尿病患者血液中的一个重要指标，用于评估患者的血糖控制情况。
目前，有多种方法可以检测糖化血红蛋白，本文将对其中几种常用的方法进行比对和分析。
一、离子交换色谱法离子交换色谱法是目前最常用的糖化血红蛋白检测方法之一。
该方法利用离子交换树脂将血液中的糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白分离，通过测定两者的吸收峰面积比值来计算糖化血红蛋白的百分比。
该方法具有操作简单、结果准确可靠的优点，但需要专门的色谱仪器和耗材。
二、免疫测定法免疫测定法是另一种常用的糖化血红蛋白检测方法。
该方法利用特异性的抗体与糖化血红蛋白结合，形成抗原-抗体复合物，再通过测定复合物的光学性质或化学反应来定量糖化血红蛋白的含量。
免疫测定法具有高灵敏度、高特异性的特点，但需要特定的抗体和试剂盒，成本较高。
三、高效液相色谱法高效液相色谱法也是常见的糖化血红蛋白检测方法之一。
该方法利用高效液相色谱仪将血液中的糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白分离，并通过检测两者的峰面积比值来计算糖化血红蛋白的百分比。
与离子交换色谱法相比，高效液相色谱法具有操作简便、分离效果好的优点，但需要专门的仪器和耗材。
四、毛细管电泳法毛细管电泳法是一种新兴的糖化血红蛋白检测方法。
该方法利用毛细管电泳仪将血液中的糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白分离，并通过检测两者的迁移时间差来定量糖化血红蛋白的含量。
毛细管电泳法具有快速、高效、高分辨率的特点，但需要专门的仪器和耗材。
五、比对分析以上几种糖化血红蛋白检测方法各有优劣。
离子交换色谱法和高效液相色谱法操作相对简单，结果准确可靠，适用于大规模的临床检测。
免疫测定法具有高灵敏度和高特异性，可以检测血液中极低浓度的糖化血红蛋白，适用于特殊情况下的检测。
毛细管电泳法具有快速、高效、高分辨率的特点，适用于科研实验室中的研究。
因此，在选择糖化血红蛋白检测方法时，需要根据实际需求和条件进行选择。
结论：糖化血红蛋白检测是评估糖尿病患者血糖控制情况的重要手段。
影响糖化血红蛋白测定的因素及实验室检测注意事项
影响糖化血红蛋白测定的因素及实验室检测注意事项（张秀明，中山大学附属中山市人民医院检验医学中心主任）糖化血红蛋白A1c（hemoglobin A1c，HbA1c）是评价糖尿病血糖控制水平的首选指标，并且与糖尿病慢性并发症的发生和发展密切相关。
近年来，许多国家糖尿病学会和WHO推荐将其作为糖尿病的首选诊断标准，拓宽了HbA1c的应用范围。
然而在某些特定的情况下，尤其是当病人有血红蛋白变异体存在时常导致HbA1c测定结果的极度异常或与血糖水平不一致，甚至误导临床；而且多种因素可致HbA1c出现假性升高或降低，不能准确反映糖尿病病人血糖控制状况，影响临床诊断和治疗。
本文简要讨论糖化血红蛋白的生物化学特性，重点介绍糖化血红蛋白的测定方法、血红蛋白变异体对HbA1c测定的干扰，以及引起HbA1c 假性升高或降低的因素，并提出实验室检测注意事项。
一、HbA1c的生物化学：成人血红蛋白（hemoglobin，Hb）通常由HbA（97％）、HbA2（2.5%）和HbF（0.5%）组成。
在健康人，几乎94%的HbA是非糖化的血红蛋白即HbA0，而6%的是糖化血红蛋白（glycated hemoglobin,GHb）即HbA1。
HbA1又包括HbA1a、HbA1b 和HbA1c，前二者含量较少约占GHb的1%，HbA1c是主要的糖化血红蛋白，约占GHb的5%。
HbA1a又由HbA1a1和HbA1a2组成，两者分别是血红蛋白β链N-末端与1，6-二磷酸果糖和6-磷酸葡萄糖发生糖基化作用的产物，HbA1b是血红蛋白β链N-末端与丙酮酸的结合物，HbA1c由葡萄糖与血红蛋白β链N-末端的缬氨酸残基缩合而成。
HbA1c的形成主要依赖血糖浓度和红细胞寿命。
全部过程经历两个非酶促反应：第一步是快速反应期，葡萄糖粘附在血红蛋白N-末端的缬氨酸残基上，形成一个不稳定的醛亚胺中间产物即Schiffs碱；第二步是Schiffs碱经历漫长的葡糖胺（Amadori）重排反应形成稳定的酮胺化合物即HbA1c；或逆向转变成葡萄糖和血红蛋白。
糖化血红蛋白检测方法及原理
糖化血红蛋白检测方法及原理
解析：
糖化血红蛋白的检测方法及原理如下：
检测方法：糖化血红蛋白可以采用高压液相离子交换层析分离方法进行测
定，也可以采用便携式糖化血红蛋白测定仪进行测定，主要是以免疫分析为基
础的便携式仪器。
检测原理：糖化血红蛋白是机体内含糖物质与血红蛋白进行非酶糖基化过
程的结合产物，由于血红蛋白在机体内的存活时间是120天，所以糖化血红蛋
白可以反映机体过去2-3个月的平均血糖数值。
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酶化学法测定糖化血红蛋白性能的验证肖弘;王敏;李小盛【摘要】目的对酶化学法测定糖化血红蛋白进行方法学性能的验证.方法参考美国国家临床实验室标准化委员会系列文件和相关文献,结合工作实际对酶化学法测定糖化血红蛋白进行精密度、准确度的分析测量范围和生物参考区间等进行评价,并将实验结果与厂家提供的分析性能或公认的质量指标进行比较.结果批内变异系数(CV) 0.87%～1.29%,批间CV 1.74%～2.12%;在3.0%～16.0%范围内线性良好Y=1.010X-0.004,r=0.999 7,平均回收率101.37%;该方法与TOSOH G7离子交换高效液相层析法二组比较差异无统计学意义(Y=0.962 2X+0.045,r=0.9940,P>0.05);分析测量范围(AMR)验证和生物参考区间验证结果均符合质量要求.结论酶化学法测定糖化血红蛋白主要分析性能符合质量目标要求,适合临床检验科应用.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2011(008)012【总页数】3页(P1450-1451,1454)【关键词】糖化血红蛋白;酶化学法;性能验证【作者】肖弘;王敏;李小盛【作者单位】上海市长宁区天山中医医院检验科,200051;上海市长宁区天山中医医院检验科,200051;上海市长宁区天山中医医院检验科,200051【正文语种】中文糖化血红蛋白(HbA1c)的化学结构通常为具有一个特定六肽的血红蛋白分子，是葡萄糖和血红蛋白β链N末端缬氨酸(Val)(βN-1-去氧果糖基血红蛋白)的一个稳定加和物[1]。
在人体内，葡萄糖和血红蛋白β链N末端Val氨基之间进行非酶促反应，先形成不稳定的希夫碱，然后缓慢地重排，形成稳定、不可逆的氨基酮，其合成过程缓慢且不可逆，不受血糖浓度暂时波动的影响，可反映测定前4～8周血糖的平均水平。
HbA1c作为糖尿病筛选、诊断、血糖控制、疗效考核的有效监测指标，在临床中得到了广泛使用，2002年美国糖尿病协会已将其作为监测糖尿病血糖控制的金标准[2]，故对糖尿病诊断有特殊诊断意义。
本文依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准化文件对酶化学法测定糖化血红蛋白进行精密度、准确度、分析测量范围和生物参考区间等性能进行验证和评价，并将实验结果与厂家提供的分析性能或引用专业文献的相关方法学分析性能予以证实[3]。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 仪器罗氏公司MODULAR-P全自动生化分析仪。
日本TOSOH G7离子交换高效液相层析法(IE-HPLC)。
1.1.2 试剂酶化学法试剂由日本积水医疗株式会社提供，试剂盒的组成包括前处理液、液体型双试剂:试剂R1 N-(羧甲基氨羰基)-4，4′-二甲氨基、二苯胺化钠，试剂R2过氧化物酶、果糖基氨基酸氧化酶。
前处理液批号011RCF，试剂R1批号010RAF，试剂R2批号009RAF。
IE-HPLC法试剂采用仪器配套试剂。
试剂1批号E7-111M，试剂2批号 E7-201N，试剂3批号7-305M，试剂4批号HW-03M。
1.1.3 标本来源测定标本来均源于本院门诊、住院患者及体检中心送检标本，均为空腹采血2 mL，乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝。
验证人群纳入标准:均为健康体检者，年龄24～77岁。
经B超、心电图、临床各项检查及血糖、肝肾等检验排除肝病、肾病、冠心病、高血压、肿瘤、糖尿病等病史和疾病。
1.2 方法1.2.1 实验方法1.2.1.1 酶化学法原理在蛋白酶的作用下，切断源于血红蛋白A1c的β链N末端的糖化甘氨酰谷氨酰胺，同时通过测定600 nm与800 nm的吸光度差，求出血红蛋白(Hb)的浓度。
第2反应中，果糖基氨基酸氧化酶(FPOX)作用于糖化甘氨酰谷氨酰胺，在过氧化物酶的存在下，生成的过氧化氢与N-(羧甲基氨羰基)-4，4′-二甲氨基二苯胺化钠(显色剂)产生显色反应。
通过测定此吸光度求出HbA1c的浓度。
用先添加500 μ L的HbA1c前处理液于试管中然后离心分离标本(2 000rpm/min 5 min)进行标本的前处理，从血球层采取25 μ L加入前处理液中混合后，用前处理标本在罗氏公司MODULAR-P全自动生化分析仪上进行测定。
1.2.1.2 IE-HPLC原理应用TSK凝胶G7His柱，根据树脂表面阳离子交换基团和血红蛋白成分之间的离子反应不相同的原理，分离出HbA1c成分。
1.2.2 验证方法1.2.2.1 精密度验证参照NCCLS EP5-A2文件[4]，取高、低2个不同浓度的HbA1c血标本，经前处理后标本同1 d内进行20次检测计算批内精密度。
同样取这2个标本经前处理后，分装-18℃保存，每天取出置室温自然融化，温和混匀后，上下午各测1次，连续检测20 d计算批间精密度。
1.2.2.2 干扰试验验证参照NCCLS EP7-A2文件[5]，采用Sysmex A-PLUS干扰试剂盒，将溶解后标本(干扰物质含胆红素、溶血素、脂肪乳的浓缩液)1.0 mL和EDTA-K2抗凝血9.0 mL混合制成标本A，溶解后的标本(空白)1.0 mL和EDTAK2抗凝血9.0 mL混合制成标本B，标本A和标本B按以下表格配制稀释系列，然后对每管进行测定，见表1。
表1 干扰物配制稀释系列注:-表示无数据。
对照 1/10 2/10 3/10 4/10 5/10 6/10 7/10 8/10 9/10 1样本A - 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0样本B 1.0 0.90.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 -1.2.2.3 准确度验证参照NCCLS EP9-A2文件[6]，使用该方法与通过美国NGSP认证产品TOSOH G7 IE-HPLC法进行方法学比较，每天取8例标本，分别用2种方法按顺序1→8进行标本测定，再按相反顺序8→1重复测定，测定5 d，共40例标本(标本浓度3.0%～16.0%)，作相关分析。
1.2.2.4 回收实验验证取1例新鲜血液标本，经前处理液溶血后，分4例，每例500 μ L，其中1例加入50 μ L蒸馏水，另外3例分别加入等量的高、中、低3个浓度的试剂配套标准品。
记录平均回收率。
1.2.2.5 分析测量范围(AM R)验证参照NCCLS EP6-A2文件[7]，取测量范围内低高(H)、(L)2个浓度标本，经前处理后按10L、8L+2H、7L+3H、4L+6H、5L+5H、4H+6L、3H+ 7L、2H+8L、10H比例混合后，得到9个不同浓度的预期值标本，随机排列分别连续测定4次，记录结果，将预期值和实测值进行比较。
1.2.2.6 生物参考区间验证参考NCCLS C28-A2文件[8]，选择60例经健康体检无系统疾病参考标本，统计各参考个体检测值，与生产厂方说明书提供的参考区间比较。
1.3 统计学方法采用Microsoft Excel 2000软件和SPSS 11.5统计软件进行数据统计分析。
浓度用±s表示、显著性检验用成组t检验。
2 结果2.1 精密度验证结果按照2010年上海市临床检验中心临床化学质量控制允许偏倚范围，糖化血红蛋白的允许误差限值为T±15%，现该种方法批内CV(%)均小于1/4允许误差限值(3.75%)、批间CV(%)均小于1/3允许误差限值(5.00%)，均符合要求[9]。
结果见表2。
表2 精密度试验结果(n=20，%)标本均值批内CV 批间CV 1 5.43 0.87 1.74 2 8.91 1.29 2.122.2 干扰试验验证结果含较高浓度干扰物质(胆红素200 mg/dL、溶血素5 000 mg/dL、乳糜浊度30 000度的浓缩液)的测定值均在已知标本浓度6.80±1.96s(95%可信限)，可视为无显著性干扰。
2.3 准确度验证结果以酶化学法测定值为(Y)，TOSOH G7 IE-HPLC法测定值为(X)，直线回归方程为Y=0.962 2X +0.045，r=0.994 0，P＞0.05(n=40)，其中r ＞0.975，两者相关良好。
当HbA1c浓度为6.5%时，其偏倚为2.46%，符合临床要求。
2.4 回收试验验证结果取1例新鲜血液标本，经前处理液溶血后，分3例，每例500 μ L，分别加入等量的高(10.5%)、中(8.5%)、低(4.3%)浓度的试剂配套标准品。
平均回收率为101.37%。
回收率均在90%～110%以内，属可接受范围[3]。
结果见表3。
表3 回收试验(%)注:-表示无数据。
标本测定浓度加入浓度回收浓度回收率06.80 - - -17.20 0.39 0.40 102.56 2 7.59 0.77 0.79 102.60 3 7.74 0.95 0.94 98.952.5 分析测量范围(AMR)验证结果结果显示，将预期值和实测值进行比较，得到相关方程Y=1.010X-0.004，r= 0.999 7。
结果显示r≥0.975，b在0.95-1.05范围内，a近于0可直接判断该测定方法测量范围在3.0%和16 0%限值之间。
2.6 生物参考区间验证结果选择60例经健康体检无系统疾病参考标本，HbA1c(±s)为5.15±0.38，仅有2例标本超出范围，年龄、性别差异无统计学意义。
与生产厂方说明书提供的参考区间4.3～5.8%比较，r≥90%.验证结果可以接受，可以引用该参考区间。
3 讨论HbA1c是血红蛋白的成分之一，生成缓慢，和血液中葡萄糖浓度持续升高呈正比，而与采血当时的血糖浓度并不相关。
由于葡萄糖可自由透过红细胞膜，Hb的半衰期为60 d，故糖化HbA1c可反映测定前1～2个月内血糖的平均水平，故可作为糖尿病长期监测的良好指标[10]。
目前，HbA1c的测定方法主要有IE-HPLC法、亲和层析法、胶乳免疫测定、电泳法等，有些方法需要贵重的仪器，有些方法手工操作太不方便，有些方法有反应杯污染情况，本文采用的酶化学反应法测定，是基于比色法操作简单，仪器设备要求不高，能在实验室原有各种生化仪进行检测，经方法学性能验证均显示该实验是一种精密度高，重复性好，线性范围宽，与TOSOH G7 IE-HPLC法进行方法学比较相关性良好，且收费低廉，从降低患者医疗费用方面具有较高的社会效益，完全能满足临床对糖尿病患者的监测要求，可在使用自动生化分析仪的各级医院使用。
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