实验性肝硬化大鼠细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ的变化及意义
细胞因子的生物学活性
细胞因子的生物学活性什么是细胞因子细胞因子是由免疫细胞合成并能影响其他细胞生长、分化和功能的多种蛋白质或糖蛋白。
它们在人体免疫反应和炎症反应中起着不可或缺的作用，同时也参与着许多重要的生理过程，如造血、生长和发育、神经传递、代谢和修复等。
细胞因子主要分为类型1和类型2两种，其中类型1包括干扰素(IFN-α、IFN-β等)和白细胞介素(IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α等)，类型2包括调节细胞因子(IL-4、IL-10等)和生长因子。
细胞因子的生物学活性细胞因子的生物学活性主要表现在以下几个方面:细胞增殖和分化许多细胞因子可直接或间接促进细胞增殖和分化。
例如，IL-2、IL-3、IL-4和IL-7等可以刺激淋巴细胞增殖和分化；而胰岛素样生长因子(IGF)、成长因子及其受体、血小板衍生生长因子(PDGF)等能促进多种细胞的增殖和分化。
此外，不同类型细胞因子之间也常常相互作用发挥生物学活性，如IFN和IL-2联合使用可以增强抗肿瘤效应等。
免疫应答调节免疫系统中的一些细胞因子能够调节免疫细胞的活性，影响炎症反应和免疫应答。
例如，IL-1和TNF-α等可以刺激单核细胞和T细胞产生其他免疫因子；而IL-2、IL-4、IL-10等则可以抑制免疫细胞的活性，调节免疫应答。
这些细胞因子的作用对维持机体内环境的稳定性和免疫功能的发挥至关重要。
炎症反应多种炎症因子能够引起机体的炎症反应，通常表现为红肿、热痛等症状。
这些炎症因子包括所有免疫细胞合成的细胞因子，如IL-1、TNF-α等。
炎症反应在一定程度上有助于清除感染病原体和损伤组织，但过度的炎症反应会导致组织和细胞损伤，引发多种疾病。
细胞分化和功能许多细胞因子可以影响细胞分化和功能的表达。
例如，IL-3、IL-4、IL-5、IL-6等能够促进B细胞分化为浆细胞和产生抗体等；而胰岛素样生长因子(IGF)、成长因子及其受体、血小板衍生生长因子(PDGF)等则能够促进肌肉细胞、神经细胞和内皮细胞的分化和功能的表达。
体外巨噬细胞实验报告
实验名称：体外巨噬细胞极化及其影响因素研究实验目的：1. 了解巨噬细胞在体外培养中的基本生物学特性。
2. 探究细胞因子对巨噬细胞极化的影响。
3. 分析巨噬细胞极化在不同条件下的变化规律。
实验材料：1. 原代人外周血单核细胞2. RPMI-1640培养基3. FBS（胎牛血清）4. 抗生素-抗真菌混合物5. 刺激剂：LPS（脂多糖）、IFN-γ（干扰素-γ）6. 细胞因子：IL-4（白细胞介素-4）、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）7. 流式细胞仪8. 免疫荧光检测抗体9. 荧光显微镜10. 细胞计数仪实验方法：1. 原代人外周血单核细胞分离：采用密度梯度离心法分离人外周血中的单核细胞。
2. 巨噬细胞培养：将分离得到的单核细胞用RPMI-1640培养基和FBS进行培养，培养至细胞融合度为80%左右。
3. 巨噬细胞极化：分别加入LPS和IFN-γ作为促炎细胞因子，IL-4和TNF-α作为抗炎细胞因子，观察巨噬细胞的极化情况。
4. 细胞因子影响观察：通过流式细胞仪检测巨噬细胞表面的M1/M2标志物表达，分析细胞因子对巨噬细胞极化的影响。
5. 巨噬细胞功能检测：通过吞噬实验和细胞毒性实验检测巨噬细胞的吞噬能力和细胞毒性。
实验结果：1. 成功分离并培养出原代人外周血单核细胞，并进行巨噬细胞培养。
2. 加入LPS和IFN-γ后，巨噬细胞极化为M1型，表现为高水平的M1标志物表达和吞噬能力增强。
3. 加入IL-4和TNF-α后，巨噬细胞极化为M2型，表现为低水平的M1标志物表达和吞噬能力减弱。
4. 不同细胞因子对巨噬细胞极化的影响存在差异，LPS和IFN-γ诱导M1极化，而IL-4和TNF-α诱导M2极化。
5. 巨噬细胞的吞噬能力和细胞毒性在不同极化状态下存在显著差异。
讨论：1. 本实验成功分离并培养出原代人外周血单核细胞，为后续研究巨噬细胞极化提供了基础。
2. 细胞因子在巨噬细胞极化过程中起着关键作用，LPS和IFN-γ诱导M1极化，IL-4和TNF-α诱导M2极化。
黄芪对急性肾损伤大鼠EGF、IL—18的影响实验研究
黄芪对急性肾损伤大鼠EGF、IL—18的影响实验研究作者：程新向少伟赖申昌来源：《医学信息》2017年第05期摘要：目的探讨黄芪对急性肾损伤大鼠EGF、IL-18的影响。
方法雄性Wistar大鼠40只，除对照组10只外，其余用采用庆大霉素注射液100mg/（kg·d）腹腔注射，连续7 d，建立急性肾损伤动物模型，随机分为模型组，黄芪提取液高剂量组、低剂量组。
分次在灌胃前，第7和14 d通过大鼠内眦静脉取血，测定血清肌酐、血清尿素氮，表皮生长因子（EGF），白细胞介素质-18（IL-18），第14 d取血后处死大鼠。
结果药物灌胃第7 d，各治疗组所测EGF均较治疗前上升，IL-18均较治疗前下降，均高于对照组，但高剂量组更明显，第14 d，各治疗组EGF较第7 d进一步上升，而IL-18进一步下降，高剂量组更明显。
高剂量组肾功能及形态学损伤与模型组相比有较明显减轻。
结论黄芪对损伤大鼠肾脏有较明显的保护作用。
关键词：急性肾损伤；黄芪；炎症因子；中药急性肾损伤（acute kidney injury）是由各种原因引起的肾功能在短期内突然下降而出现的氮质废物滞留、体液潴留及电解质酸碱平衡紊乱等为主要表现的临床综合症。
而据相关资料报告示急性肾损伤的发病率呈逐年上升的趋势，急性肾小管坏死（acute tubular necrosis，ATN）是最常见的肾实质性急性肾损伤，本实验拟通过观察黄芪对急性肾小管坏死大鼠EGF、IL-18的影响，探讨黄芪对急性肾小管坏死大鼠肾脏的保护作用机制。
1 材料与方法1.1动物健康纯系雄性Wistar 大鼠，体重（160±20）g，由广西中医学院动物实验中心提供。
试剂：IL-18试剂盒购自生工生物工程（上海）股份有限公司，EGF试剂盒美国 Sigma 公司，检测采用放免分析法。
1.2实验 40只Wistar大鼠，适应性饲养7 d后，随机取10只为正常对照组外，其余用采用庆大霉素注射液100mg/（kg·d）腹腔注射，连续7 d，建立急性肾小管坏死动物模型。
新风胶囊对干燥综合征大鼠IL-10、TNF-α、IL-17表达的影响
【 ｓ ａｔ Ｏ ｊｃ ｖ Ｔ ｂｅ ｅｔ ｖｌｏ ｔ ｌ ｋｎ一１ （Ｌ一１ ） ｔｍ ｒ ｅｒｓ ｃｏ —ｏ Ａｂｔ ｃ】 ｂｅｔ ｅ ｏｏ ｓｒ ｅｌ ｅ ｆｎｅ ｅ ｉ ０ Ｉ ０ ， ｏ ｃｏｉ ｆ ｔ ｒ ｉ ｖ ｈ ｅ ｓ ｉ ｒｕ ｕ ｎ ｓａ ｒ ｔ
（ ＮＦ一 ） ｎ ｎｅｌｕ ｉ Ｔ ａ ｄ ｉｔｒ ｋｎ一１ Ｉ ｅ ７（ Ｌ一１ ７）ａ ｄ ｔｅ ｉ ａ ｔ ｏ ｉｆｎ ａ ｓ ｌｓ ｏ ｈ ｍ ｏ ｈ ａｓｗｉ ｎ ｈ ｍｐ ｃｓ ｆｘｎｅ ｇ ｃ ｐｕｅ ｎ ｔｅ ｆｒ ｔｅｒｔ ｔ ｈ ｓｏ ｒｎｓ ｎ ｒｍｅ Ｓ ． ｅｈ ｄ Ｓ ｎｍａ ｄ ｌｗ ｓｃ ｉｇｅ ｙ ｄｏ （ Ｓ） Ｍ ｔｏ ｓ Ｓａ ｉ ｌ ｍｏ ｅ ａ ｏ—ｉｄ ｃｄ ｂ ｒｕ ｄ ｄｕ ａ ｔ ｏ ｌｔ ｎ ｅ ｎ ｕ ｅ ｙＦｅ ｎ ｇａ ｉｖ ｎ ｍｐｅｅａ ｄｔ ｃ ｈ
干燥综 合 征 （ ｓ 是一 种 主要 累及 外 分 泌 腺 体 ｓ） 的慢性 炎症 性 自身 免疫 性 疾 病 ， 床 上 可有 多 系 统 临
的受 累 ， 引起 内脏损 害 ， 于弥 漫 性 结缔 组 织 病 ， 属 以
淋 巴细胞 介 导 的病 变 主要 侵 犯 唾 液腺 和 泪 腺 外 分
Ｎｏ Ａｆｉｉｔｄ ．１ ｆｌａｅ Ｈｏ ｐｉａ ｏ ｓ ｔｌ ｆＡｎｈ ｉ ｕ Ｃｏｌ ｇ ｏ ａ ｉｉｎ ｌ ｌｅ ｅ ｆ Ｔｒ ｄｔｏ ａ Ｃｈｉｅ ｅ ｅ ｃｎｅ． ｅｅ ｈｕ ０ ３．２ ９ ｎ ｓ Ｍ ｄｉｉ Ｈ ｆ ｉＡｎ ｉ２３ ０３ｌ： ００
Ｄｏｔｒｌ ｎ ｉａｅｏ ｂ ｉ ｉｅｓｔ ｆＴ ａ ｉｏ ａ Ｃ ｉｅｅＭｅ ｉｉｅ Ｗ ｕ ａ ｂ ｉ ３ ０ ５） ｃｏａ ｄｄ ｔ ｆＨｕ ｅ ｖ ｒｉ ｏ ｒｄｔ ｎ ｌ ｈｎ ｓ ｄｃｎ ． ｈ ｎＨｕ ｅ ０ ６ Ｃａ Ｕｎ ｙ ｉ ４
TNF-α、IL-18和IL-1O在溃疡性结肠炎患者外周血的表达及意义
TNF-α、IL-18和IL-1O在溃疡性结肠炎患者外周血的表达及意义陈霞;李聪华;张国尊;郑国启;梁育飞;王亮;魏新亮【期刊名称】《河南中医》【年(卷),期】2013(33)B04【摘要】目的：检测溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）患者血清中TNF—α、IL-18和IL-10的含量，探讨TNF—α、IL-18和IL-10在UC中的作用。
方法：利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测60例UC患者血清标本，与40例正常对照组比较。
结果：TNF—α和IL-18的含量随着病变严重程度的加重而逐渐增加，中、重度组与对照组比较差异有统计学意义（P〉0．05）；而在UC患者中IL-10含量随着病变严重程度的加重而逐渐降低，中、重度组与对照组比较的差异有统计学意义（P〈0．05）。
结论：UC患者的血清中IL-10含量明显降低，TNF—α和IL-18含量明显增加，促炎因子TNF—α和IL-18和抗炎因子IL-10水平与UC严重程度显著相关。
【总页数】1页(P440-440)【关键词】溃疡性结肠炎;肿瘤坏死因子-α;白介素-18;白介素-10【作者】陈霞;李聪华;张国尊;郑国启;梁育飞;王亮;魏新亮【作者单位】沧州市中心医院消化内科,河北沧州061001;沧州市妇幼医院生殖科,河北沧州061000【正文语种】中文【中图分类】R322.45【相关文献】1.溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞TLR4的表达及其与TNF-α和IL-6的相关性 [J], 李贞娟;张彩凤;夏永华;郭晓鹤;韩宇;秦咏梅2.中药连理汤加味治疗活动期溃疡性结肠炎疗效观察及对患者TNF-α、IL-1O表达的影响研究 [J], 聂清海;郑春根3.外周血及结肠黏膜TNF-α、IL-6和IL-2在溃疡性结肠炎患者中的表达 [J], 于仁芳; 孔晓4.老年慢性牙周炎合并冠心病患者龈沟液及血清中IL-1β、TNF-α、IL-18及IFN-γ的表达与临床意义 [J], 郑学彬; 龙淑会; 李富杰; 胡硕红5.乙型肝炎肝硬化患者血清sICAM-1、IL-6、IL-18及TNF-α水平的表达及临床意义 [J], 熊伟;费润欢;周克湘;张迁;李小燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中药对机体免疫功能的调节作用
ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ２０２１年１１月２０日第３０卷第２２期Ｖｏｌ．３０牞Ｎｏ．２２牞Ｎｏｖｅｍｂｅｒ２０牞２０２１
第一作者：杨菊，女，硕士研究生，副主任药师，研究方向为医院药学，牗电子信箱牘９０７４００６３１＠ｑｑ．ｃｏｍ。△通信作者：范治国，男，大学本科，主任药师，研究方向为医院药学，牗电子信箱牘１０２９２９７４５２＠ｑｑ．ｃｏｍ。
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６－４９３１．２０２１．２２．０３４中药对机体免疫功能的调节作用
杨菊１，范治国２△
（１．重庆市巴南区第二人民医院，重庆４０００５４；２．重庆两江新区第一人民医院，重庆４０１１２１）摘要：目的为临床合理应用中药调节机体免疫功能提供参考。方法查阅相关文献，总结中药中多糖、苷类、生物碱及其他成分对机体免疫功能调节的影响；分析中药防止高细胞介质症发生的机制。结果与结论中药中的多种免疫活性成分可调节机体的免疫功能，从而达到防治疾病的目的。通过免疫调节，可抑制炎症进展，防治高细胞介质症，降低感染性疾病的重症率。中药在治疗疾病、防治疫情和提高人体抵抗力方面有其优势。关键词：中药；活性成分；免疫调节中图分类号：Ｒ９３２；Ｒ２８５．６文献标志码：Ａ文章编号：１００６－４９３１牗２０２１牘２２－０１２５－０３
ＲｅｇｕｌａｔｉｎｇＥｆｆｅｃｔｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｏｎｔｈｅＢｏｄｙ′ｓＩｍｍｕｎｅＦｕｎｃｔｉｏｎ
ＹＡＮＧＪｕ１，ＦＡＮＺｈｉｇｕｏ２
（１．ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＢａｎａｎＤｉｓｔｒｉｃｔ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ４０００５４；２．ＴｈｅＦｉｒｓｔＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｏｎｇｑｉｎｇＬｉａｎｇＪｉａｎｇＮｅｗＡｒｅａ，
Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ４０１１２１）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｒａｔｉｏｎａｌｕｓｅｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｔｏｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｅｂｏｄｙ′ｓｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｒｏｕｇｈｒｅｖｉｅｗｉｎｇｔｈｅｒｅｌａｔｅｄｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，ａｌｋａｌｏｉｄｓａｎｄｏｔｈｅｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｏｎｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｗｅｒｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ．ＴｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｉｎｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇｈｙｐｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｍｅｄｉａｔｏｒｓｗａｓａｎａｌｙｚｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓａｎｄＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｃａｎｐｒｅｖｅｎｔａｎｄｃｕｒｅｄｉｓｅａｓｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｉｍｍｕｎｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｂｏｄｙ．Ｔｈｒｏｕｇｈｉｍｍｕｎｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ｐｒｅｖｅｎｔａｎｄｃｕｒｅｈｙｐｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｍｅｄｉａｔｏｒｓ，ａｎｄｒｅｄｕｃｅｔｈｅｒａｔｅｏｆｓｅｖｅｒｅｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｄｉｓｅａｓｅｓ．ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｈａｓａｄｖａｎｔａｇｅｓｉｎｄｉｓｅａｓｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｅｐｉｄｅｍｉｃｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，ａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｈｕｍａｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ；ａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ；ｉｍｍｕｎｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ
肝癌细胞中IL-18表达及其调控机制的研究
肝癌细胞中IL-18表达及其调控机制的研究杨贤子;程甜甜;骆志国;蒋飞;柴海霞【摘要】Objective This study aimed to investigate the expression of IL-18 and IL-18 regulatory genes in human hepatocellular carcmoma cells and normal liver cells , than illuminate the possible molecular mechanism of the regulation of IL-18 in human hepatocellular carcinoma cells. Methods The normal human liver cell line QSG-7701 surrounding tissue and the human hepatocellular carcinoma cell lines MHCC97-L and HCCLM3 were cultured till the exponential phase of growth. RT-PCR was used to detect mRNA expression of IL-18 and IL-18 regulatory genes in these three cell lines. Results Compare to two hepatocellular carcinoma cell lines,the normal human liver cells QSG-7701 expressed high levels of IL-18 and positive regulatory gene proteinase-3. But there were no significantly statistical differences in positive regulatory gene caspase-1 and negative regulatory gene caspase-3 hetween human normal liver cells and hepatocellular carcinoma cells. Conclusion Altered expression of positive regulatory gene proteinase-3 may he one of the mechanism of the regulation of IL-18 in human hepatocellular carcinoma cells.%目的探讨肝癌细胞调节IL-18生物学功能的主要分子机制.方法体外培养正常人类肝细胞株QSG-7701和原发性肝癌细胞株(MHCC97-L和HCCLM3),采用RT-PCR法,分别检测这3种细胞株中IL-18及其相关正负调节基因mRNA的表达变化.结果与2种原发性肝癌细胞株比较,正常人类肝细胞株中IL-18及其正调节基因粒细胞蛋白水解酶3(proteinase-3)mRNA表达量较高,但正调节基因caspase-1和负调节基因caspase-3 mRNA表达水平无统计学差异.结论原发性肝癌细胞中IL-18 mRNA表达减弱,可能与proteinase-3表达失衡有关.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2011(026)005【总页数】3页(P456-458)【关键词】肝癌;白介素18;IL-1β转化酶;粒细胞蛋白水解酶3【作者】杨贤子;程甜甜;骆志国;蒋飞;柴海霞【作者单位】442000,湖北省十堰市湖北医药学院附属太和医院;442000,湖北省十堰市湖北医药学院附属太和医院;442000,湖北省十堰市湖北医药学院附属太和医院;442000,湖北省十堰市湖北医药学院附属太和医院;442000,湖北省十堰市湖北医药学院附属太和医院【正文语种】中文【中图分类】R735.7白介素18(IL-18)具有强烈诱导IFN-γ的能力，能够促进Th1细胞的分化和Th1细胞因子的产生。
羧基肽酶-H抗体阳性成人隐匿性自身免疫糖尿病患者的TNF-α、IL-12,IL-18、IFN-γ水平观察
ｖｒｕ ｉｄｘ ｆ ＡＤ ｒ ｐ（Ｐ ＜ ．５ ，ａｄｌｖｌ ｏ Ｔ Ｆ—ｏａｄＩＮ～ ｉ ２ Ｍ ｇｏｐｗ ｒ ｉｃ ａｅ ｎｃｍ ａｉ ｎｗｔ ｔｏｅｏ ｃｎ ａｉ ｓｎ ｅｅ ｏ Ｌ Ａｇｏ ｏ ｓ ｕ ０ ０ ） ｎ ｅｅｓ ｆ Ｎ ｔ ｎ Ｆ ｎＴ Ｄ ｒｕ ｅｅｎ ｒ ｓｄｉ ｏ ｐ ｒｏ ｉ ｈ ｓ ｆ ｏ — ｅ ｓ ｈ ｔｌ ｒｕ ｒ ｏ ｐ（Ｐ ＜０ ０ ） ｈ ｒ ｗ ｇｎ ｆ ｒｎｅｉ ｖｌ ｏ ｏｇ ．５ ．Ｔ ｅｅ ａ ｏｄ ｅｅ ｃ ｌ ｅ ｆ Ｌ一１ ｄＩ ｉ ｎｅ ｓ Ｉ ２ａ Ｌ一１ ｅｗ ｅ ２ Ｍ ｇｏｐａｄｃｎｒ ｒｕ ｎ ８ｂｔｅｎＴ Ｄ ｒ ｏ ｔｌ ｏ ｐ（Ｐ ＞ ．５ ． ｏ ｄ ・ ｕ ｎ ｏｇ ０ ０ ） Ｃ ｎ ｕ
Ｌ ＡＤＡ ｄ ２ ａ ｉｎ ｔ ＤＭ ｒ ｎ ｅ ｔｇ ｔ ｄ ａ ｄ ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｗｉ ｏ ｅ ｏ ０ ｎ ｒ ｌｃ ｎ ｒ ｌ． ｓ ｌ Ｔ ｅ ｅｗａ ｉｎ ｆｃ ｎ ｍｐ ｏ ｅ ｎ ｎ ａ ０ ｐ ｔ ｔ ｗｉ Ｔ２ ｅｓ ｈ ｗｅ ｅ ｉ ｖ ｓｉ ａｅ ｏ ａｅ ｔ ｔ ｓ ｆ ｏ ｍａ ｏ ｔ ｓ Ｒｅ ｕ ｔ ｎ ｈｈ ２ ｏ ｓ ｈ ｒ ｓｓｇ ｉ ａ ｔｉ ｒｖ ｍｅ ｔ ｎ ｉ ｉ
Ｃｈ ｎ ， ｉａ
【 ｂｔ ｃ】 Ｏ ｊ ｔｅ ｏ ｂ ｒ ｅｅｅ Ｔ Ｆ ｄ Ｉ 一 ２Ｉ 一１ ａｄＩＮ一 ｉ ｅｓ ｌｅｔｕ ｉｍ ｎ ｉ ｅ ｓ ｎａｕｓ Ｌ — Ａ ｓ ａｔ ｒ ｂｅ ｉ Ｔ ｓｖ ｔ ｖｓ ｆ Ｎ — ， １ ， ｃｖ ｏ ｅ ｅｈ ｌ ｌｏ Ｌ Ｌ ８ ｎ Ｆ ｎ ａｅ ｏ ａ ｎ ａｔｍ ｕｅ ａ ｔ ｄｌ（Ａ ｓｆ ｔ ｏ ｄ ｂｅｉ ｔ
Ｄ Ａ）ｗｔ ｏｉｖ Ｐ ｉ ｐｓｉｅＣ Ｈ—Ａ ． ｅ ｏ ｓ Ｓ ｒｍ ｌｖｌ ｏ Ｎ ｄ，Ｌ—ｌ Ｉ ｈ ｔ ｂ Ｍ ｔ ｄ ｅ ｈ ｕ ｅｅ ｆＴ Ｆ— Ｉ ｓ ２，Ｌ—ｌ ｄＩＮ一 ｄ ｔ ｔ ｙｓｎ ｗｃ ＬＳ ｉ ３ｐｔ ｎ ｉ ８ａ Ｆ ｅｅ ｅ ｂ ａｄ ｉｈＥ ＩＡ ｎ １ ａｅ ｔ ｗｔ ｎ ｃｄ ｉ ｓ ｈ
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验性肝硬化大鼠细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ的变化及意义党双锁;高宁;程延安;边静;王顺达;孙明珠【摘要】目的探讨在四氯化碳(CCl4) 复合因素诱导实验性肝硬化大鼠的形成过程中,白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的变化及意义.方法将80只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照组和造模2周组、4周组、6周组,每组20只.予以CCl4复合因素诱导大鼠肝硬化,并在2、4、6周3个时间点分别处死6只大鼠.采用ELISA法检测大鼠血清IL-18、TNF-α、IFN-γ和肝脏组织匀浆上清液中的IL-18含量;HE染色观察肝脏的组织病理学变化.结果①CCl_4复合因素诱导的实验性大鼠,组织病理学观察发现,2周时大鼠肝脏组织细胞肿胀变性,6周时有大量纤维增生,部分肝组织有假小叶的形成;②随着造模时间的延长,实验大鼠血清IL-18、TNF-α、IFN-γ水平逐渐升高,造模6周组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);③造模组肝脏组织匀浆中IL-18随肝损害程度的加重而升高,造模6周组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论在CCl_4复合因素诱导大鼠肝硬化的形成过程中,IL-18、TNF-α、IFN-γ水平逐渐升高,提示该3种细胞因子与肝硬化的形成及发展有关.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(031)002【总页数】4页(P148-150,185)【关键词】大鼠;肝硬化;白介素18;肿瘤坏死因子α;γ干扰素【作者】党双锁;高宁;程延安;边静;王顺达;孙明珠【作者单位】西安交通大学医学院第二附属医院感染科,陕西西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院感染科,陕西西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院感染科,陕西西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院感染科,陕西西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院感染科,陕西西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院感染科,陕西西安,710004【正文语种】中文【中图分类】R512.6肝硬化是慢性肝损伤所共有的终末病理改变。
在肝硬化的形成中，有大量细胞因子通过参与调节组织细胞的损伤修复过程而发挥作用[1]。
新近发现，白介素18（interleukin-18，IL-18）是新的致炎因子。
研究发现，IL-18参与了免疫调控，其过度表达可能引起免疫系统紊乱和组织器官的免疫炎性损害。
本研究通过建立四氯化碳（CCl4）复合因素诱导的大鼠肝硬化模型，动态检测造模组大鼠IL-18及相关细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素（IFN-γ）水平的变化，初步探讨细胞因子在肝硬化形成中的作用及意义。
1 材料与方法1.1 主要试剂及仪器 CCl4（分析纯）购自西安化学试剂厂；橄榄油（化学纯）、胆固醇（分析纯）购自上海化学试剂公司；大鼠IL-18定量ELISA试剂盒为美国Biosource公司生产，上海森雄科技有限公司进口分装；大鼠TNF-α、IFN-γ定量ELISA试剂盒购自上海西唐生物有限公司；RIPA裂解液购自北京索莱宝科技有限公司；DG3021型酶联免疫检测仪为华东电子管厂产品。
1.2 实验动物与分组清洁级雄性SD大鼠80只，3～ 4个月龄，体重 360～ 380 g，平均（367±14.12）g，购于西安交通大学医学院实验动物中心。
据肝硬化造模时间长短将SD大鼠随机分成4组:正常对照组、造模2周组、造模4周组、造模6周组，每组20只。
所有大鼠分笼饲养于西安交通大学医学院实验动物房。
正常对照组，自由取食且不做任何处理；造模2、4、6周组，每周2次皮下注射400 mL/L CCl4橄榄油溶液3 mL/kg，首次剂量为5 mL/kg；同时给予高脂饲料（80%单纯玉米粉+20%猪油+0.5%胆固醇）作为唯一饮食，并以300 mL/L乙醇作为饮水饲养动物。
每周一、四注射，且注射前称体重。
于造摸2、4、6周时各组分别随机选取动物6只，水合氯醛腹腔内麻醉，腹主动脉插管取血，并留取肝脏做组织匀浆及40g/L甲醛溶液固定，常规石蜡切片，HE染色。
1.3 方法1.3.1 ELISA 法测定血清 IL-18、TNF-α、IFN-γ水平血液3 000 r/min离心20 min，吸取血清，采用双抗体夹心ELISA法测定，严格按照说明书操作。
1.3.2 ELISA法测定肝组织匀浆中IL-18水平取大鼠部分肝脏组织，冰冷等渗盐水漂洗数次后，除去血液，滤纸吸干，称取1g肝组织，用手动匀浆器将肝组织在磷酸盐缓冲溶液（PBS）和0.1 mmol/L苯甲基磺酰氟化物（PMSF）中充分研磨匀浆，100 000 r/min 4℃离心15 min，取上清液，采用双抗体夹心ELISA法测定，严格按照说明书操作。
1.4 统计学方法采用SPSS 13.0统计软件处理。
计量资料数据以¯x±s表示，进行单因素方差分析，各组间比较采用LSD-t检验。
P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 大鼠肝脏的组织病理学改变正常大鼠肝组织细胞大小一致，细胞排列呈条索状，以中央静脉为中心呈放射状，肝窦无狭窄，小叶及汇管区无炎细胞浸润（图1A）。
CCl4复合因素诱导2周后，大鼠肝脏充血、肿胀，包膜紧张，镜下肝细胞肿胀，呈气球样变，以汇管区周围较明显（图1B）；4周后大鼠肝脏充血、肿胀进一步加重，镜下见大面积肝细胞变性和坏死，坏死以小叶周围显著，汇管区少量炎症细胞浸润及纤维组织增生（图1C）；6周后大鼠肝脏充血、肿胀消退，肝脏轻度萎缩，镜下汇管区纤维增生，并向小叶内伸展，见不完整假小叶形成（图1D）。
2.2 大鼠血清 IL-18、TNF-α、IFN-γ水平的动态变化与正常对照组相比，造模2周组大鼠血清IL-18、TNF-α的差异有统计学意义（P＜0.01），而IFN-γ差异无统计学意义（P＞0.05）；4周、6周造模组大鼠血清 IL-18、TNF-α、IFN-γ明显增高，与正常对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）。
各造模组间比较，6 周组 IL-18、TNF-α、IFN-γ水平较 2、4 周组明显升高，差异均有统计学意义（P ＜0.01，表1）。
图1 各组大鼠肝脏的组织病理学观察Fig.1 Histopathological changes of liver in each group（HE×100）A:正常对照组；B:造模 2周组；C:造模 4周组；D:造模 6周组。
表1 各组大鼠血清 IL-18、TNF-α、IFN-γ水平的比较Tab.1 Serum levels of IL-18，TNF-αand IFN-γin each group（n=6，¯x ±s）与正常对照组相比，*P＜0.01；与造模2周组相比，△P＜0.01；与造模4周组比较，#P＜0.01。
组别 IL-18（pg/mL） TNF-α（pg/mL） IFN-γ（pg/mL）正常对照组47.48±4.51 -163.22±29.23 148.27±12.66造模2周组427.10±165.23* 27.38±19.08* 2 238.23±2 428.68造模4周组673.64±168.61*△ 54.27±27.50* 5152.83±956.84*△造模6周组1 101.66±355.42*△ 109.78±39.19*△# 8 234.67±3 473.52*△#2.3 大鼠肝组织匀浆中IL-18水平的变化与正常对照组相比，4、6周造模组大鼠肝组织匀浆中IL-18增高，差异有统计学意义（P＜0.01），且6周组肝组织匀浆中IL-18较2、4周组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01，表2）。
表2 各组大鼠肝组织匀浆中IL-18水平的比较Tab.2 Content of IL-18 ofhepatic homogenate supernatant in each group （n=6 ，¯x ±s）与正常对照组相比，#P＜0.01；与造模2、4周组相比，△P＜0.01。
组别IL-18（pg/mL）正常对照组138.63±194.41造模2周组106.50±111.66造模4周组305.27±173.15#造模6周组502.34±310.04#△3 讨论1995年OKAMURA等[2对感染疮疱棒状杆菌（P.acnes）的小鼠肝脏提取物用脂多糖（LPS）加强刺激，可诱导出使IFN-γ高水平表达的因子，最初把该因子称作 IFN-γ诱导因子（IGIF）。
进一步研究发现，这是一种新的炎性细胞因子，有亲多种组织的免疫活性，命名为白介素18[3]。
目前研究发现，IL-18是由活化的巨噬细胞产生的一种强有力的免疫调节细胞因子，具有多种生物学活性:诱导Th1细胞、NK细胞等多种免疫细胞产生IFN-γ、TNF-α、Fas配体及穿孔素；促进T细胞增殖[4]；增强FasL介导的T h1细胞、自然杀伤细胞（NK）的细胞毒活性作用，导致肝实质细胞的免疫性损伤[5]。
本研究结果表明，在CCl4复合因素诱导大鼠肝硬化形成的6周中，血清细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ水平均高于正常对照组；同时在诱导的不同时间点收集大鼠肝脏组织，测定肝组织匀浆中IL-18的含量，结果发现随着肝硬化程度的加重IL-18含量逐渐升高。
提示IL-18参与了肝脏炎症、肝硬化的发生发展过程，且IL-18、IFN-γ、TNF-α等细胞因子呈网络调控，相互诱生，共同发挥作用。
国外学者研究报道，在原发性胆汁性肝硬化时，体内炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-8等）也同样升高，并认为其在原发性胆汁性肝硬化的形成中起重要作用[6-8]。
也有学者报道，酒精性肝硬化的形成是由于致炎因子与抗炎因子（IL-2、IL-10、TGF-β等）相互制衡失调而发生的。
我们的研究结果也证实，在CCl4复合因素引起的肝硬化形成中，IL-18、IFN-γ、TNF-α发挥了协同作用。
至于其作用机制，结合现有学者的研究结果分析，可能是细胞因子之间通过自分泌或旁分泌机制的网络调节而致肝硬化的形成[9]:①IL-18可通过诱生IFN-γ和其他细胞因子（IL-2、GM-CSF、TNF-α等）的产生而形成IL-18/Th1细胞因子组成的细胞因子级联而发挥作用[10]；②作为炎性细胞因子的IL-18还可刺激免疫细胞（Th1细胞、NK细胞等）释放更多的细胞因子，如IFN-γ、TNF-α等，形成正反馈的放大作用，产生更多的ECM，从而导致肝纤维化乃致肝硬化的形成[11]。