苏云金芽孢杆菌综述

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内容
BT发展史 BT的形态特征及杀虫机理
BT的生产工艺 存在的问题与可能的解决途径
BT发展史
BT起源
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1901年由日本细菌学家石渡首先在受病害的蚕蛾中发现BT, 但是当时没有保存下来。
1911年,德国人贝尔奈从德国苏云金省这个地方的一家面粉 厂里的地中海粉螟上又重新分离到一种有很强杀虫力的细菌, 并正式定名为苏云金芽胞杆菌。(Bacillusthuringiensis,B.t.)
培养基组分
碳源:构成菌体成分的重要物质,为生命活动提供 所需的能量。 氮源:氮源是构成微生物细胞蛋白质、核酸等重要 物质的主要营养物质。 碳氮比:碳氮比(C/N)是指培养料中碳源与氮源 含量的比值。糖氮比0.44—20.0的范围内都能生 长的很好。通常为2-7。
无机盐: KH2PO4 是E-M-P 途径中磷酸化过程不可缺少的 物质;KH2PO4 的缓冲作用有利于芽孢和晶体的 形成.。钾的主要作用是维持渗透压和离子平衡。 Ca2+在芽孢皮层形成时与DPA 结合形成DPA-Ca 复合物,促使形成芽孢。 镁是核糖体和膜结构的稳定剂,能激活酶反应, 对重金属引起的细胞毒害还有一定的拮抗作用 微量元素: 锰是多种酶的激活剂
Thank you!
1、选择性质粒改造。 2、通过接合构建新菌株。 3、利用基因工程技术将cry基因向其它生 物体转移。
机遇与挑战
市场:BT年产量4万吨,应用5000-6000万亩次。
现状:厂家多、规模小、质量难保证,2000-3000万产值 只有3-4家。
有机食品论证:Bt已通过,阿维菌素不行。
政策:“十二五”末,全国蔬菜、水果、茶叶病 虫害绿色防控覆盖面达到播种面积的50%以上, 绿色防控实施区域内化学农药使用量消减20%以 上。
革兰氏染色阳 性反应、能形 成内生芽胞的 细菌。其营养 体具有周生鞭 毛或无鞭毛
与BT亲源性相近的菌种比较
炭疽杆菌(Bacillus anthraci)
蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus
B.t.杀虫毒素
主要有三种
welcome to use these PowerPoint templates, New C1、on伴te孢nt晶d体es(igInC,P1s0)y即eaσr-s内e毒xp素e。rience
BT杀虫谱
主要防治对象 按昆虫类型分类 ▪ 直翅目、鞘翅目 ▪ 双翅目、膜翅目 ▪ 鳞翅目
按应用途径分类
林业上
防治松毛虫、舞毒蛾、 刺蛾等食叶性害虫
作物上
主要防治稻螟虫、黏虫 、菜粉蝶、菜青虫、棉 铃虫、玉米螟、线虫、 茶尺蠖等
BT的生产工艺
液体深层发酵
优点:条件可控,适合大规模生产,且生长速度快。 缺点:一次性投入高。
3
抗药性
可能的解决途径
①不同BT亚种的轮换、混合使用。 ②T杀虫剂与少量化学药混合使用。
持效性
在制剂时添加防紫外线破坏的保护剂
作用方式
加入蔗糖提高昆虫嗜食性,添加几丁质酶加强昆 虫肠壁破坏,加入K2CO3、CaCl3等阳离子加速 伴孢晶体降解,增加杀虫剂的效力
前沿技术
随着对其作用的分子机理的大量研究以及 近年来基因工程技术的发展,通过遗传学方 法对苏云金杆菌进行改良,获得了有价值的 苏云金杆菌新菌株。
2、苏云金素即β-外毒素。 3、芽孢。
Content
新的命名方法
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晶体蛋白的杀虫机制
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固体发酵
优点:成本低,操作简单。
缺点:条件不易控制,一般发酵周期较长。
发酵条件
温度:一方面随着温度的上升,细胞中生物化学反 应速率加快;另一方面,组成细胞的物质如蛋白质、 核酸等都对温度较敏感,随着温度的升高,这些物 质的立体结构受到破坏,从而引起微生物生长的抑 制,甚至死亡。BT生长最佳温度28-32度。 溶氧:苏云金杆菌在对数生长期要消耗大量的氧气 ,并相应释放出大量的热量. 如果中断供氧,细 胞停止生长,不能形成芽孢和晶体,最终导致细胞 自溶. PH:影响氧的溶解度、营养物质的物理化学状态、 氧化还原电位等。pH影响酶的形成、酶的活力、代 谢途径或细胞膜的透性等重要生理生化活动。
登记的剂型有:悬浮剂,可湿性粉剂 水分散粒剂 颗粒剂 大粒剂 油悬剂
BT的形态及杀虫机理
BT的形态
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Content design, 10 years experience s :一种杆状、
BT的发展
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1958年,世界第一个bt杀虫剂由美国一家公司投入市场。
中国从上世纪60 年代也开始了规模化生产. 同苏云金杆菌有 关的研究,特别是有关分子生物学方面的研究正在持续展开。
BT在我国的应用情况
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在我国苏云金芽孢杆菌共登记了两个亚种:苏云金亚种和苏 云金以色列亚种。原药生产厂家8家(一家国外公司)。制 剂生产厂家几十家。以登记含BT药品184个。
前人设计出的BT培养基
检测方法
测孢子数
电泳法
生物检测法
后处理工艺
膜过滤浓缩 喷雾干燥 制成剂型 成品包装
存在的问题与可能的解决途径
产生抗药性:在我国的 许多地方也已经发现大 田小菜蛾对BT制剂的 抗性成倍增加。
2
作用方式单一:只能通过胃毒的方式起作用
1
在环境中不稳定:紫外线照射毒力蛋白钝化,丧失 活性。
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